生物波调控因子对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6表达的影响

目的:探讨生物波调控因子(BRF)对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6表达的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠90只随机分为BRF组、生理盐水组和假手术组。制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型,术后1h以1ml/100g的剂量分别腹腔注射1.25%BRF溶液和生理盐水,此后1次/d。进行行为学评分、测定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法测定脑组织IL-6的动态变化。结果:生理盐水组及BRF治疗组脑梗死组织周围组织含水量于24h开始明显升高,48h达高峰,持续至72h,7d时明显下降,在各个时间点与假手术组比较均有统计学意义。除假手术组外,其余各组梗死区炎细胞浸润和IL-6阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,并持续至7d;假手术组未见明显炎细胞浸润,可见少量IL-6阳性细胞。BRF治疗组大鼠行为学评分降低,脑组织水肿程度减轻,术后48h最显著,病理损伤减轻,脑组织IL-6阳性细胞减少,术后48h、72h最显著。结论:生物波调控因子可以通过减轻梗死后脑水肿,降低脑内IL-6的表达,从而对大鼠缺血性脑组织损伤产生保护作用。     

生物波调控因子对脑梗死大鼠脑组织 TNF-α表达的影响

目的 探讨生物波调控因子（Bio-wave regulation factor，BRF）对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及 脑组织内肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor－α，TNF-α）表达的影响。 方法 成年健康雄性SD大鼠90只随机分为3组，即假手术组、生理盐水组、BRF治疗组，每组分为6、24、 48、72 h、7 d，5个亚组，每亚组6只大鼠。参照Longa等的线栓法制成大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，术后1 h以1 ml/100 g体重的剂量分别腹腔注射1.25% BRF溶液和生理盐 水，此后1次/d重复注射，至相应时间点处死动物。采用Longa等4种方法进行行为学评分、干湿重法测 定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法观察脑组织TNF-α的动态变化。 结果 1.行为学评分：MCAO大鼠对侧肢体存在不同程度瘫痪，在术后48 h和72 h神经功能缺损最为 明显，7 d基本恢复正常；2.脑组织含水量测定：脑梗死组脑组织含水量在各时间段均增加，其中术后 48 h BRF组低于同期的生理盐水组(P <0.05)；3.脑组织HE染色观察：除假手术组外，其余各组在脑梗死 后6 h局部可见炎性细胞浸润，48 h明显增多，并持续到7 d；4.脑组织TNF-α的表达：与假手术组相比， 脑梗死组TNF-α阳性细胞在各时间段均增加，术后48 h、72 h BRF组低于同期的生理盐水组(P <0.05)。 结论 BRF通过减轻脑水肿，降低脑内肿瘤坏死因子-α的表达，对大鼠缺血脑组织产生保护作用。     

BRF对局灶性脑梗死大鼠脑组织IGF-1表达的影响

目的:探讨生物波调控因子BRF(Bio-wave regulationfactor)对实验性脑梗死大鼠脑组织中IGF-1表达水平的影响。方法:健康雄性SD大鼠90只,制成大脑中动脉梗死(MCAO)模型,随机分为3组,即BRF组、生理盐水和假手术组,各组又分为6,24,48,72h,7d5个亚组。BRF组为腹腔注射给药,生理盐水组给同体积的生理盐水,于相应时间点进行行为学评分、脑含水量及脑组织中IGF-1的表达。结果:①组织含水量:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加。其中术后48hBRF组低于同期的生理盐水组,P<0.05。②IGF-1阳性细胞表达:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加,梗死后6h开始增多,72h达高峰。术后72hBRF组高于同期的生理盐水组,P<0.05。结论:BRF可促进IGF-1表达,升高脑组织IGF-1含量,减轻局灶性脑梗死引起的缺血性损伤。     

实验性脑出血后脑组织核因子-κB表达和含水量的变化及其相关性

目的 研究实验性脑出血(ICH)后血肿周围脑组织核因子-κB(NF-κB)表达和脑组织含水量的改变及其相关性.方法 采用自体不凝血注人大鼠尾状核制备ICH模型;用免疫组化法检测血肿周围脑组织NF-κB表达;用干湿重法测脑组织含水量.结果 与对照组相比,ICH 6h组血肿周围脑组织NF-κB表达开始明显增加,ICH 48h组达高峰,并持续到ICH 1周(P＜0.01～0.05);脑组织含水量ICH 12h组开始增多,24h组显著增高,72h组达高峰;NF-κB表达和脑组织含水量ICH 24h～1周组与假手术组之间差异有统计学意义(均P＜0.01);ICH后NF-κB阳性细胞数与脑组织含水量呈正相关(r=0.644,P＜0.01),NF-κB表达从开始到高峰均早于脑组织含水量的变化.结论 ICH后脑组织NF-κB表达增加,NF-κB可能通过炎性机制参与了ICH后继发脑水肿的形成.     

脑心通对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6的影响

目的:探讨脑心通对实验性脑梗死大鼠脑组织中IL一6水平的影响。方法:参照Longa等方法制成大脑中动脉梗死(MCAO)模型,应用干一湿重法观察脑含水量变化、HE染色观察梗死周围炎性细胞浸润、免疫组化方法观察脑组织中lL一6的表达。研究不同剂量脑心通对脑梗死后大鼠行为学评分.脑含水量及脑组织中炎性细胞因子lL一6表达的影响。结果:脑梗死组织周围炎细胞浸润和IL一6阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,并持续到7d。脑心通治疗组大鼠脑梗死后脑水肿减轻,行为学评分降低,脑组织中IL一6阳性细胞减少,大、中剂量脑心通治疗组效果较为显著。结论:脑心通有抑制炎性细胞因子IL_6的过度表达,保护神经元,减轻脑水肿的作用。     

Celecoxib对糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κB和COX-2表达的影响

目的 探讨celecoxib对糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑组织中NF-κB和COX-2表达的影响.方法 采用SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)和线栓法制作糖尿病大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.大鼠分为假手术组(S组)、脑缺血再灌注生理盐水组(NS组)、celecoxib低剂量组(LCIR组)和高剂量组(HCIR组),分别于缺血后30min给予生理盐水或celecoxib溶液灌胃,再灌注后6、12、24、48h将大鼠断头取脑,免疫组化法检测脑组织中NF-κB和COX-2的表达.并对大鼠进行神经功能缺损评分.结果 NS组、LCIR组、HCIR组大鼠神经功能缺损评分有显著差异(P＜0.05);NS组、LCIR组、HCIR组阳性细胞主要表达于缺血周边区神经元中,较S组表达明显增强(P＜0.05),LCIR组、HCIR组阳性细胞表达率较NS组减少(P＜0.05),LCIR组、HCIR组之间未见明显差异(P＞0.05),每组不同时间点之间阳性细胞表达率有明显差异(P＜0.05).结论 celeeoxib可能通过抑制糖尿病大鼠脑缺血-再灌注后脑组织中NF-κB和COX-2的表达,减轻神经功能缺损,从而发挥脑保护作用.     

双环醇对实验性脑梗死大鼠脑保护作用及机制

目的观察双环醇对大鼠缺血性脑组织中PPAR-γ和NF-κB表达的影响,探讨其脑保护作用及可能的机制。方法采用成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组,溶剂对照组,双环醇小剂量组和大剂量组。应用改良Longa线栓法建立大鼠右侧MCAO模型。术后24 h对大鼠进行神经功能评分,用TTC染色法测定脑梗死体积,干湿重法测定脑组织含水量,Western blot法、实时荧光定量PCR法测定PPAR-γ和NF-κB在脑组织中的表达。结果与Vehicle组相比,双环醇大剂量组神经功能评分有所改善,病变侧脑组织含水量减少,脑梗死体积减小(P<0.05);PPAR-γ蛋白和基因表达明显上调,而NF-κB蛋白和基因表达明显下降(P<0.05)。结论在脑缺血的损伤过程中PPAR-γ表达下降而NF-κB表达上调,给予双环醇干预后可以有效减轻脑损伤。其作用可能与上调PPAR-γ,下调NF-κB,减轻炎症损伤有关。     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠脑水肿及星型胶质细胞的影响

目的 研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿和星型胶质细胞可塑性的影响及神经保护作用.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1h后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 60 μg/kg.3组大鼠于术后6h、24h、48h、72h、7d、10d处死,干湿重法测定脑组织含水量、免疫组化检测血肿周围MMP-9、GFAP的动态变化.结果 模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P＜0.05),造模后48h、72h最明显,与组内6h、24h、7d、10d相比差异显著(P＜0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P＜0.05).模型组各时点MMP-9表达明显高于假手术组(P＜0.05),48h、72h表达最明显,与组内6h、24h、7d、1Od比较差异显著(P＜0.05);治疗组各时点MMP-9表达显著低于模型组(P＜0.05).假手术组脑组织含水量与MMP-9表达无相关性(r＝0.429,P＞0.05),模型组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r ＝0.922,P＜0.05),治疗组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r＝0.844,P＜0.05).假手术组未见GFAP阳性细胞表达;模型组6h出现少量GFAP阳性细胞表达,48h增多,72h大量表达,7d达高峰,10d表达减弱;治疗组GFAP阳性细胞表达6h与模型组相似,24h、48h、72h、7d、10d较模型组明显减少(P＜0.05).结论 ICH后G-CSF可抑制MMP-9表达减轻脑水肿程度,抑制星形胶质细胞过度活化,对出血后脑组织具有保护作用.     

脑心通对缺血性大鼠脑组织核转录因子-κB、基质金属蛋白酶-9和肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨脑心通对缺血性大鼠脑组织核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和TNF-α的影响。方法将110只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(30只),模型对照组(40只),脑心通治疗组(40只),每组再分为缺血再灌注后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d五个时间点进行处理。采用Zea Longa法制备大脑中动脉闭塞缺血再灌注模型,利用MRI检查和Bederson评分筛选成功模型;每组五个时间点分别选取6只大鼠行MRI检查,动态观察使用脑心通胶囊后缺血脑组织变化过程,采用western blot、实时定量PCR分别检测梗死区脑组织NF-κB、MMP-9和TNF-α的蛋白和mRNA表达水平。结果脑心通治疗组脑梗死区域体积较模型对照组减少。脑心通治疗组NF-κB、MMP-9、TNF-α蛋白及其mRNA水平均明显低于模型对照组(均P0.05);假手术组MMP-9、TNF-α和NF-κB蛋白及其mRNA水平与脑心通治疗组差异无统计学意义。结论脑心通通过改变脑梗死区周围炎症因子表达水平来降低炎症反应,发挥神经保护作用。     

实验性脑出血后脑组织核因子-κB表达和含水量的变化及其相关性

目的研究实验性脑出血（ICH）后血肿周围脑组织核因子-кB（NF-кB）表达和脑组织含水量的改变及其相关性。方法采用自体不凝血注入大鼠尾状核制备ICH模型;用免疫组化法检测血肿周围脑组织NF-кB表达;用干湿重法测脑组织含水量。结果与对照组相比,ICH6h组血肿周围脑组织NF-кB表达开始明显增加,ICH48h组达高峰,并持续到ICH1周（P〈0.01~0.05）;脑组织含水量ICH12h组开始增多,24h组显著增高,72h组达高峰;NF-кB表达和脑组织含水量ICH24h~1周组与假手术组之间差异有统计学意义（均P〈0.01）;ICH后NF-кB阳性细胞数与脑组织含水量呈正相关（r=0.644,P〈0.01）,NF-кB表达从开始到高峰均早于脑组织含水量的变化。结论ICH后脑组织NF-кB表达增加,NF-кB可能通过炎性机制参与了ICH后继发脑水肿的形成。     

姜黄素对大脑中动脉缺血模型大鼠的神经保护作用及机制研究

目的 通过观察姜黄素（curcumin）对Notch 1及NF-κB表达的影响及脑含水量和梗死体积的变化,探 讨其对大脑中动脉梗死（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠的神经保护作用及机制。 方法 采用成年健康雄性Sprague-Dawl ey大鼠93只,随机分为假手术组（sham）,溶剂对照组（vehi cl econtrol ）,姜黄素组（CUR）。MCAO术后立即腹腔注射姜黄素溶液（80 mg/kg）,溶剂对照组及假手术 组给予同体积含0.5 mol/L NaOH的0.01 PBS。根据不同时间点每组分为对照、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、 72 h共7个亚组,分别在相应时间点进行神经功能学评分,2～4分者纳入实验组。归组后将动物断头 处死,留取病变侧脑组织利用免疫组织化学法及Western blot观察Notch 1及NF-κB的表达。各组仅取 48 h一个时间点进行脑含水量测定及2%的2,3,5-三苯基四唑氮红（triphenyltetrazolium chloride,TTC） 染色观测梗死体积。 结果 CUR组降低Notch 1和NF-κB的表达,这种抑制效果至少持续至MCAO后72 h（P＜0.05）。与 vehicle-control组相比,CUR组在MCAO后48 h时即可显著改善神经功能缺损（P＜0.05）,减少脑含水量 （[ 80.42±9.00）% vs（83.71±7.00）%（P＜0.05）]及梗死体积（[ 40.08±3.66）% vs（28.94±6.20）% （P＜0.05）]。 结论 姜黄素干预后,MCAO模型病变脑组织含水量降低,梗死体积减小,Notch 1和NF-κB表达水平 同步下调,推测姜黄素有脑保护作用,姜黄素可能通过抑制Notch 1和NF-κB的表达对缺血性脑组织 起到脑保护作用。     

脑心通对大鼠局灶性脑缺血脑组织补体C3的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织补体C3表达的影响。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组、生理盐水组、大剂量脑心通组、中剂量脑心通组、小剂量脑心通组,分别给予不同剂量药物,于术后6h,24h,48h,72h和7d进行神经功能评分(NDS),处死后取脑组织观察脑含水量的变化,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定补体C3的动态变化。结果:脑心通治疗组的神经功能评分均降低,病理损伤均减轻,大、中剂量脑心通组治疗后脑水肿明显减轻(P<0.05),补体C3的表达明显减少(P<0.05)。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内补体C3的表达对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

rhEPO对大鼠颅脑损伤后的损伤脑组织NF-κB表达和血清TNF-α水平的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠颅脑损伤后损伤脑组织核因子-κB（NF-κB）表达和血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。方法将90只雄性成年Wistar大鼠分为假损伤组、颅脑损伤组及rhEPO组。采用改进Feeney法制作大鼠颅脑损伤模型,rhEPO组伤后即刻腹腔注射rhEPO（3000IU／kg）;伤后3h、12h、24h、48h、72h、5d和7d免疫组织化学染色法检测NF-κB的表达、双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清TNF-α水平。结果伤后3h,损伤脑组织NF-κB表达明显升高,伤后24h达最高峰,随后其表达水平逐渐下降,至伤后7d仍明显升高（P〈0．05）;rhEPO治疗后,每个时间点损伤脑组织NF-κB表达水平均明显降低（P〈0.05）。伤后3h,血清TNF-α水平也明显升高,伤后12h迅速达到最高峰,随后其水平逐渐下降;伤后3d,其水平又再次升高,随后又逐渐下降,至伤后7d仍明显升高（P〈0．05）。rhEPO治疗后,每个时间点血清TNF-α水平均明显降低（P〈0．05）。结论NF-κB和TNF-α可能在颅脑损伤后的炎症反应中发挥重要作用,而rhEPO可能通过抑制NF-κB和TNF-α的表达而减少损伤脑组织的炎症反应,发挥脑保护作用。     

银杏叶提取物后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨银杏叶提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型.将30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组（n-10）：给予5 ml生理盐水腹腔注射;对照组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,5 ml生理盐水腹腔注射;实验组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,在再灌注即刻20 mg/kg银杏叶提取物生理盐水稀释成5 ml腹腔注射.再灌注24 h后采用四分法测定大鼠的神经功能障碍评分（NDS）;实验结束后断头取脑采用TTC染色法测定脑梗死面积（以其同侧大脑半球体积的百分比表示）;采用western blot测定脑组织微管相关蛋白2（MAP2）的表达水平.结果 与假手术组比较,对照组、实验组小鼠NDS评分均显著升高,分别为（2.49±0.85）分和（1.58±0.62）分,3组间比较差异均明显（P＜0.05）;对照组、实验组脑梗死面积均显著增大（P＜0.05）,实验组脑梗死面积较对照组显著减小（P＜0.05）;与假手术组比较,与假手术组比较,对照组、实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平均显著降低（P＜0.05）,实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平较对照组显著升高（P＜0.05）.结论 银杏提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有显著的保护效应,其效应与MAP2蛋白表达水平升高有关.     

维生素B6、B12、叶酸对高同型半胱氨酸血症致兔动脉粥样硬化脑组织的NF-κB表达的影响

目的 建立兔高同型半胱氨酸（Hcy）血症与动脉粥样硬化模型,观察脑组织核转录因子κB（NF-κB）的阳性表达,探讨VitB6、VitB12、叶酸的干预效果.方法 采用纯种雄性新西兰兔26只,分为三组：对照组、高蛋氨酸组（高Met）、干预组,分别喂以普通兔饲料（200 g/d/只）、普通饲料添加0.5%Met、普通饲料添加0.5%Met＋叶酸2.5 mg＋VitB12 200 mg/d/只,喂养6个月,测定血浆总Hcy （tHcy）,取脑组织标本用免疫组化方法 （SABC法）测定NF-κB的表达.结果 与对照组相比,高蛋氨酸组脑组织中的NF-κB明显升高（P＜0.05）;干预组NF-κB明显降低,但仍高于对照组.结论 高Met引发高Hcy血症致兔动脉粥样硬化,NF-κB的表达与兔动脉粥样硬化脑组织关系密切,且VitB6、VitB12、叶酸的补充可以减轻NF-κB的表达,押制炎症反应.     

高同型半胱氨酸血症对兔脑组织的核转录因子和caspase--3表达的影响

目的探讨高同型半胱氨酸（Hcy）血症对兔脑组织的NF—κB和caspase-3表达的影响及与动脉粥样硬化的关系。方法采用纯种雄性新西兰兔18只，分为两组：对照组、高蛋氨酸组（高Met），分别喂以普通兔饲料每只200g／d、普通饲料每只添加0．5％Met／d，喂养6个月，测定血浆总Hcy（tHcy），取兔脑组织标本用免疫组化方法（SABC法）测定NF—κB的表达。结果与对照组相比，高蛋氨酸组脑组织中的NF—κB明显升高（P〈0．01）；caspase-3的阳性表达明显升高（P〈0．01）。结论HcY血症导致核因子NF—κB和细胞凋亡因子Caspase-3表达增强，与动脉粥样硬化关系密切．     

大剂量高压氧治疗对脑梗死大鼠组织核因子κB的影响

【摘要】 目的 探讨大剂量高压氧治疗方案对永久性大脑中动脉闭塞大鼠的疗效以及高压氧对大鼠梗死部位周围脑组织核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）影响。 方法 制备雄性Sprague-Dawley大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型,随机分为高压氧组和对照组,每组32只,另设立伪手术组。使用Garcia神经行为学评分方法分别在术后24 h、5 d对大鼠进行神经行为学评分;应用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid,TTC）方法对脑组织进行染色,观察24 h、5 d时大鼠脑组织梗死容积;取梗死部位周围脑组织,采用凝胶电泳迁移实验（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）方法检测术后24 h、5 d时的NF-κB脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid,DNA）结合活性。比较三组间上述指标的差异。 结果 术后24 h高压氧组神经行为学评分高于对照组［（13.33±1.53）vs（10.33±0.58）,P<0.001］。术后24 h高压氧组梗死容积小于对照组［（139.73±33.59）vs（203.02±57.66）,P=0.008］。术后5 d高压氧组梗死部位周围脑组织NF-κB活性低于对照组［（16.01±4.56）vs（50.28±9.13）,P=0.035］。 结论 大剂量高压氧治疗方案在脑梗死后24 h内具有脑保护作用。大剂量高压氧可降低大鼠梗死部位周围脑组织NF-κB DNA结合活性。