白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用。方法：以Res（10、20、40μg／mL）作用人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSo和培养液作用为对照组。采用MTT法检测Res对人胃癌SGC7901细胞的生长抑制情况．荧光染色法观察细胞形态变化。琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片断化。结果：Res对SGC7901细胞生长有明显抑制作用,且随着剂量的增高（10～40μg／mL）而增高,最大抑制率达（53．39±5．32）％;荧光染色结果发现Res48h凋亡细胞增多,镜下可见较为典型的凋亡形态学变化：细胞变小,核皱缩,荧光强度增强．呈囊月或环状．核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的“梯状”条带,而对照组未出现梯状务带。结论;Res能押制人胃癌SGC7901细胞的生长并诱导其凋亡。     

榄香烯衍生物诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的研究榄香烯衍生物(榄香烯哌嗪)对人宫颈癌细胞HeLa体外增殖的抑制作用及其作用机制。方法采用SRB法考察榄香烯哌嗪对多种人癌细胞体外增殖的抑制作用。普通光学显微镜及荧光显微镜观察榄香烯哌嗪对HeLa细胞形态的影响,利用流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡及细胞周期变化情况。结果榄香烯哌嗪对HeLa、HepG2、SGC-7901及Bel-7402细胞有较强的体外增殖抑制作用。光学显微镜和荧光显微镜观察榄香烯哌嗪10μmol.L-1处理的HeLa细胞,细胞体积变小、细胞核皱缩致密,可见凋亡小体。此外,榄香烯哌嗪可将HeLa细胞阻滞于G0/G1期,且随药物作用时间延长或剂量增加,DNA直方图上可见渐强的SubG1峰。结论榄香烯哌嗪可诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,且具有细胞周期阻滞作用。     

益气活血清热方对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的实验研究

目的研究益气活血清热方对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响。方法根据实验动物学原理制备大鼠含药血清和正常血清,应用MTT、台盼蓝染色以及AO/EB荧光染色法检测益气活血清热方对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响,观察细胞凋亡形态学变化。结果含药血清对SGC-7901细胞存活有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,SGC-7901细胞的凋亡呈增长趋势。结论益气活血清热方能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖。     

四嗪二甲酰胺诱导人胃癌AGS、SGC7901细胞系凋亡及其分子机制的实验研究

目的：观察四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）体外抑制胃癌细胞株AGS和SGC7901增殖并诱导细胞凋亡及其作用机制。方法：将不同浓度的ZGDHu-1与AGS和SGC7901细胞在体外培养，用台盼蓝染色、SRB法、5′溴-2′脱氧尿苷（Brdu）-ELISA法观察ZGDHu-1对AGS和SGC7901细胞增殖的抑制作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin—V／PI双标记、Hoechst33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。用流式细胞术观察经ZGDHu-1作用后AGS和SGC7901细胞bcl-2、bax、P53蛋白质和P38MAPK和Star3磷酸化表达的变化的表达改变。结果：ZGDHu-1能抑制AGS和SGC7901细胞增殖和活力，呈现作用时间和剂量的量效关系。AGS和SGC7901细胞与ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G2-M期；出现典型的细胞形态改变，DNA片断化，亚G1峰检出并显著增加，Annexin—V＋／PI-表达升高，Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导AGS和SGC7901细胞凋亡。AGS和SGC7901细胞经不同浓度的ZGDHu-1体外培养后，bcl-2蛋白有所下调，但主要是上调bax和P53蛋白，导致bax／bcl-2比值明显增高，均并呈现剂量依赖性；磷酸化P38MAPK表达增强，而磷酸化Stat3表达降低。结论：ZGDHu-1通过诱导细胞凋亡抑制AGS和SGC7901细胞增殖，其机制可能与上调bax和P53的表达，增强P38MAPK的磷酸化和抑制STAT3的活化有关。     

对-氨基苯甲酸-4’去甲表鬼臼酯的抗氧化与抗肿瘤作用

目的：研究对-氨基苯甲酸-4’去甲表鬼臼酯（4-p-amino-benzoinc acid-4’-demethylepipodophyllotoxin ester，PDE）的体外抗氧化与抗肿瘤活性。方法：体外对SGC-7901细胞的抗肿瘤活性用MTT比色法，体内抗肿瘤活性用动物移植瘤法。用TBA法测大鼠肝自发性，Fe^2＋-抗坏血酸诱发的心、肝、肾组织匀浆丙二醛（MDA）生成，分光光度法测H2O2诱导的红细胞溶血。结果：PDE剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞生长，作用48h IC50为84．7（51．7-138．9）mg／L，在体内PDE 10、20mg／kg对S180和H22肿瘤的抑制率分别为25．2％、46．5％和22．9％、39．3％。PDE浓度依赖性地抑制大鼠肝组织自发性MDA生成，IC50为22．7（16．9-30．4）mg／L，也能浓度依赖性地抑制Fe^2＋-AA诱导的大鼠心、肝、肾组织匀浆MDA生成，IC50分别为30．3（13．9-66．1）、29．9（20．9-42．7）和13．3（1．8-96．9）mg／L。PDE对H2O2诱导的大鼠红细胞溶血也有一定的抑制作用，40、80mg/L的抑制率分别为26．8％和100．2％。结论：PDE有明显抗氧化及抗肿瘤作用，二者有一定的关系。     

龙葵碱对HepG2细胞线粒体膜电位及细胞内[Ca^2＋]i的影响

目的：观察龙葵碱对HepG2细胞线粒体膜电位及细胞内[Ca^2＋]i的影响，揭示龙葵碱诱导细胞凋亡的机制。方法：采用AO／EB双染HepG2细胞，激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态学改变；TMRE单染HepG2细胞，激光共聚焦扫描显微镜观察细胞线粒体膜电位的改变；Fluo-3／AM单染HepG2细胞，激光共聚焦扫描显微镜观察细胞内[Ca^2＋]i的改变；TMRE和Fluo-3／AM双染HepG2细胞，激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体膜电位和细胞内[Ca^2＋]i的改变。结果：形态学实验表明0．0032μg／mL、0．016μg／mL龙葵碱使细胞外周呈微弱皱缩状改变，0．08、0．4、2μg／mL龙葵碱使HepG2细胞出现大量碎片及凋亡小体等典型的细胞凋亡形态，即龙葵碱能够诱导HepG2细胞凋亡；TMRE单染激光共聚焦测定表明龙葵碱能够降低HepG2细胞膜电位；Fluo-3／AM单染激光共聚焦测定表明龙葵碱能够升高肿瘤细胞内[Ca^2＋]。浓度；TMRE和Fluo-3／AM双染激光共聚焦观察表明龙葵碱在降低线粒体膜电位的同时能够升高细胞内[Ca^2＋]i浓度。结论：龙葵碱能够诱导HepG2细胞凋亡，其机制为降低HepG2细胞膜电位，开放细胞膜PT通道，使细胞内Ca^2＋顺浓度梯度转运，从而升高细胞内Ca^2＋浓度启动细胞凋亡机制。     

华蟾素诱导HL-60细胞凋亡及机制研究

目的：观察华蟾素（cinobufacini）对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用的机制。方法：以HL-60细胞为研究对象，采用MTT法观察细胞增殖作用；Annexin V-FITC／PI双染和吖啶橙／溴乙锭（AO／EB）荧光染色法检测细胞凋亡；罗丹明染色法检测线粒体膜电位；分光光度法检测Caspase-3活性。结果：在0．78～6．25μg·ml^-1，华蟾素能明显的抑制HL-60细胞的增殖；华蟾素作用24h后，AnnexinV阳性的细胞从7．81％增加至66．02％，而且在荧光显微镜下可以明显观察到凋亡细胞；线粒体膜电位下降和Caspase-3活性升高。结论：华蟾素能够抑制HL-60细胞增殖，这种作用与其诱导细胞凋亡破坏线粒体功能和激活Caspase-3有关。     

新化合物（Z）-7-氟-6-甲基-3（哌嗪-1-亚甲基）硫色满-4-酮体外抗肿瘤作用

目的：研究（Z）-7-氟-6-甲基-3（哌嗪-1-亚甲基）硫色满4-酮（FMTK）对人宫颈癌HeLa细胞系,肺癌A549细胞系,肝细胞癌HepG2细胞系,低分化胃腺癌BGC-823细胞系的抗肿瘤活性,为深入研究FMTK抗肿瘤作用提供实验依据。方法：4种肿瘤细胞培养于含有不同浓度的FMTK培养液中,实验设受试药物组、阴性对照组、阳性对照组、空白对照组、溶剂对照组,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶比色法（MTF法）检测FMTK对以上4种肿瘤细胞增殖的影响;采用大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6检测FMTK对正常细胞的毒性。结果：通过检测以上细胞的增殖情况,得出FMTK半数抑制浓度（IC50）如下：HeLa（80．09±1．48μg·ml^-1）,BGC-823（55．87±1．14μg·ml^-1）,HePG2（35．06±2．68μg·ml^-1）,FMTK对A549几乎没有抑制作用。FMTK对人宫颈癌HeLa细胞系,肝细胞癌HepG2细胞系,低分化胃腺癌BGC-823细胞系抑制作用随着剂量和时间的增加而增高,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;FMTK对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6没有抑制作用。结论：FMTK具有体外抗肿瘤活性,对正常细胞IEC-6无毒性。     

西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐诱导肿瘤细胞凋亡作用及机理研究

目的：探讨西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐体内、体外抗肿瘤作用，并初步探讨作用机理。结果：在体内研究中，实验以S180和H22小鼠为研究对象。实验结果表明，GS对S180／小鼠具有抑瘤作用，其中，以中、高剂量组效果最好，与阴性对照组相比具有显著性差异（P〈0.01），抑瘤率呈现一定量效关系（45.45％、57.58％、63.64％）；在生存时间方面，GS能延长H22小鼠的生存时间，其中以高剂量的生存时间延长显著（P〈0．05）。GS还能升高S180小鼠胸腺指数和脾指数，与阴性组比较有显著性差异（P〈0．05，P〈0.01），说明GS对荷瘤小鼠两大免疫器官具有良好的保护作用。在体内抗肿瘤研究中。GS可提高S180和H22小鼠红细胞中SOD、CAT和全血中GSH的活性，并降低全血中红细胞MDA含量。GS的抗肿瘤作用可能是通过提高SOD、CAT、GSH活性，和降低自由基水平来实现的。在体外研究中GS对SGC-7901和HepG2细胞的凋亡过程及其可能机理。从SRB实验结果可看出，1、10、100和1000μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞72h后，均可抑制肿瘤细胞的增殖，采用荧光倒置显微镜观察GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，细胞均出现早期凋亡细胞的形态；通过流式细胞仪检测得300、600、1200μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，SGC-7901细胞凋亡率分别为14．544％、10．110％、34．117％，对细胞周期作用显著；HepG2细胞凋亡率分别为2．159％、16．538％和54．455％。可见GS具有一定程度诱导肿瘤细胞凋亡的作用。在GS诱导肿瘤细胞凋亡机理实验中，300、600、1200％μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，肿瘤细胞内的Ca^2＋。浓度剂量升高，此作用可能是GS诱导肿瘤细胞凋亡的作用机理之一。线粒体是细胞凋亡的调控中心。所以，通过流式细胞仪检测300、600、1200μg／mL的GS作用于SGC-7901和HepG2细胞18h后，肿瘤细胞内活性氧均增加，线粒体跨膜电位均降低。GS诱导肿瘤细胞凋亡可能是Ca^2＋、活性氧和线粒体之间相互作用的结果，这也许是GS诱导肿瘤细胞凋亡的机理之一。结论：GS无论在体内还是在体外研究中均表现出良好的肿瘤抑制作用，具有一定的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷与顺铂联用对肝癌HepG2细胞的作用

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)与顺铂(CDDP)联合对肝癌细胞HepG2的作用.方法:应用普通光学显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪分别观察As2O3、CDDP和两者联合应用时对HepG2:细胞株的形态学改变和诱发凋亡率.结果:AO/EB荧光染色法显示在联合应用药物后,可看到较典型的细胞凋亡形态学改变.噻唑蓝(MTT)法检测各个浓度的As2O3与CDDP联合应用时,对HepG2细胞的生长抑制率均较单用相应一种药物时增强,而低浓度联合用药组合的生长抑制率增加尤为明显.结论:在体外Aa2O3和CDDP两种化疗药物联合应用具有明显的协同抗肝癌作用,显著抑制人肝癌细胞HepG2的细胞株的生长,并且具有明显的剂量时效关系.两药联用有显著的协同诱导肝癌细胞凋亡的作用.     

低氧对人胃癌SGC7901细胞株SP细胞比例的影响与HIF-2α、OCT-4表达变化的关系

目的:通过观察低氧对人胃癌SGC7901细胞株侧群(side population,SP)细胞比例的影响及其与HIF-2α和OCT-4表达变化的关系,初步研究低氧对肿瘤干细胞的影响及机制.方法:Hoechst33342染色检测人胃癌SGC7901细胞系SP细胞比例,免疫荧光化学法检测OCT-4在SP和非SP细胞中的表达,免疫细胞化学法检测HIF-2α和OCT-4蛋白的表达.结果:常氧下人胃癌SGC7901细胞系中SP细胞的比例为2.36%,低氧诱导24、48、72h后其比例逐渐增加,分别为3.01%、3.23%、3.45%(P<0.05);常氧下OCT-4在SP和非SP细胞中的表达差异无统计学意义(P>0.05),低氧诱导24、48、72h后,OCT-4在SP细胞和非SP细胞中的表达逐渐增强(P<0.05),在SP细胞中的表达要高于非SP细胞.常氧下HIF-2α和OCT-4蛋白呈低水平表达,低氧诱导24、48、72h后,二者的表达逐渐增加(P<0.05),且HIF-2α和OCT-4蛋白呈高度正相关(P<0.05).结论:低氧可使人胃癌SGC7901细胞系中的SP细胞增多,其机制可能与低氧诱导HIF-2α-OCT4通路的表达,促进肿瘤细胞的干细胞化及维持干细胞的未分化状态有关.     

三氧化二砷诱导人胃腺癌细胞SGC7901凋亡机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2O3)诱导人胃腺癌细胞SGC7901的凋亡效应以及细胞线粒体跨膜电位 (ΔΨm )的改变。方法 :通过形态学观察以及测定细胞活力、亚G1 期细胞含量 ,细胞膜磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻量 ,罗丹明123(Rh123)/碘化丙啶 (PI)双染色 ,流式细胞仪检测ΔΨm变化等方法鉴定细胞凋亡。结果 :As2O3 诱导细胞凋亡效应与其诱导ΔΨm下降密切相关。结论 :细胞ΔΨm下降是As2O3 诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

恩度联合紫杉醇热化疗对人胃癌SGC7901细胞株增殖抑制及凋亡影响

目的观察恩度联合紫杉醇热化疗对人胃癌SGC7901细胞株增殖抑制及凋亡的影响。方法取对数生长人胃癌SGC7901细胞株,分为对照组、41℃、42℃、43℃、44℃组,5组分别加入终浓度30nmol／L、60nmol／L、120nmol／L、240nmol／L、480nmol／L紫杉醇,于水浴箱中分别水浴0．5h、1h、1．5h,72h后MTr法测定紫杉醇热化疗对SGC7901胃癌细胞株细胞抑制作用并确定最佳紫杉醇浓度及热疗温度、热作用时间。流式细胞术分别检测对照组、恩度组（15mg／L）,紫杉醇热化疗组,恩度联合组（恩度＋紫杉醇热化疗）的细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果随着紫杉醇浓度以及温度的提高,SGC7901细胞株的抑制率逐步升高。在紫杉醇浓度480nmol／L、43℃作用1h条件下,SGC7901细胞株的抑制率达到70．99％,在各组最高。细胞凋亡率在对照组、恩度组、紫杉醇热化疗组以及联合治疗组分别为O．70％、1．48％、8．56％、12．97％。细胞周期分析可见与对照组相比恩度组的增殖期（S＋G2／M）细胞比例由（52．5±2．1）％下降到（42．3±2．0）％（P〈0．05）,紫杉醇热化疗组G2／M期细胞比例由（15．2±1．4）％上升至（32．1±2．2）％（P〈0．05）。与紫杉醇热化疗组相比,恩度联合治疗组的G2／M期细胞比例由（32．1±2．2）％下降到（19．9±1．3）％,而G1期比例由（30．5±1．7）％上升到（48．1±2．4）％（P〈0．05）。结论43℃热作用lh联合480nmol／L紫杉醇对人胃癌SGC7901细胞株增殖抑制作用在5组中最强,紫杉醇热化疗联合恩度后能够进一步增卉口时SCr7Q01冒癌细日白楼拍枷制他阐算诱导丘涸十     

甲基莲心碱对长春新碱诱导人胃癌细胞凋亡的影响

目的　观察甲基莲心碱 (Nef)在体外对长春新碱诱导人胃癌细胞凋亡的影响。方法　采用MTT比色法检测药物的细胞毒性作用 ,并用流式细胞术、AO/EB双重荧光染色法和TUNEL法测定甲基莲心碱对长春新碱诱导人胃癌细胞凋亡率的影响。结果　 2 5、5、1 0 μmol·L- 1 Nef能增强长春新碱对人胃癌细胞 (SGC790 1 )增殖的抑制作用 ;1 0 μmol·L- 1 Nef能增强长春新碱 (0 1、0 5、2、4mg·L- 1 )诱导SGC790 1细胞凋亡。结论　甲基莲心碱能增强长春新碱诱导人胃癌细胞凋亡 ,推测其为一种低毒高效的化疗增敏剂。     

13-甲基十四烷酸对H2O2诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的：探讨13-甲基十四烷酸（13-MTD）对过氧化氢（H2O2）诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的影响。方法：采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。光镜观察细胞形态,SRB法检测细胞存活率,AO/EB双重染色法检测细胞凋亡,MTT法检测线粒体活性。结果：与正常对照组相比,H2O2损伤模型组细胞出现明显病理改变,细胞存活率、线粒体活性均显著下降（P〈0.01）,细胞凋亡率显著升高（P〈0.01）;13-MTD10、20、40μg/mL可显著提高细胞存活率（P〈0.01）;13-MTD5、10、20μg/mL可显著下调细胞凋亡率（P〈0.01）;13-MTD5、10、20、40μg/mL可显著提高细胞MTT代谢率（P〈0.01）;且存在一定量效差异（P〈0.05,P〈0.01）。结论：不同剂量的13-MTD对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤具有保护作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂在小白菊内酯抑制胃癌细胞转移中的作用

目的：探讨小白菊内酯（Par）抑制人胃癌SGC7901细胞转移活性及对尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）的调控作用。方法：MTT法检测SGC7901细胞增殖能力的变化;倒置显微镜下观察细胞形态;transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测细胞uPA蛋白表达;RT-PCR法检测uPA的RNA表达。结果：在100-200μmol/L浓度范围内,Par以浓度和时间依赖方式抑制胃癌细胞增殖,倒置显微镜下见到细胞生长明显受到抑制,细胞的迁移能力和侵袭力均显著下降,穿过人工基底膜的细胞数逐渐减少。随着Par作用时间的延长,SGC7901细胞表达uPA水平逐渐下降。结论：Par可以抑制SGC7901的增殖和转移,uPA在Par降低胃癌细胞转移活性中起重要作用。     

2-(3,5-二甲氧基苯甲撑基)-环戊酮的合成及其抗感染与抗肿瘤活性的研究

目的:研究2-(3,5-二甲氧基苯甲撑基)-环戊酮(IV)的合成方法及其对抗炎和抗肿瘤活性的影响。方法:环7戊酮与吗啡啉脱水反应得到烯胺,然后与3,5-二甲氧基苯甲醛进行缩合反应,生成目标化合物IV7。采用人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法评价IV7对Hela细胞株增殖的影响;应用二甲苯致小鼠耳肿胀模型评价IV7的抗炎活性。结果:IV7与阴性对照药CMC-Na组相比,抗炎活性的差异有统计学意义(P<0.05)。IV7抑制Hela细胞增殖的作用较弱,在培养48h时IC50为76.0靘ol/L。结论:IV7具有较好的抗炎活性。     

四硫化四砷对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用

目的:研究四硫化四砷(As4S4)对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用及其作用机制。方法:体外培养SGC7901,取对数生长期的细胞分为空白对照组(不加药物)和20、40、60、80μmol/LAs4S4处理组,分别作用24、48、72 h。采用MTT法检测细胞增殖的抑制率,透射电镜观察细胞的形态,流式细胞仪分析细胞的周期分布,逆转录-聚合酶链式反应法和蛋白质印迹法检测作用48 h后细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,20(作用48、72 h)、40、60、80μmol/LAs4S4处理组细胞增殖的抑制率明显升高(P<0.01),与浓度和时间呈正相关;从40μmol/L As4S4处理组细胞开始出现凋亡,60μmol/L As4S4处理组细胞开始出现大量凋亡,细胞周期阻滞于S期;与空白对照组比较,As4S4处理组细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白表达随As4S4浓度的增加而减弱,Bax mRNA和蛋白表达随As4S4浓度的增加而增强。结论:As4S4具有抑制SGC7901细胞增殖的作用,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调Bcl-2表达、上调Bax表达有关。     

大黄素对人胃癌MNK-45和MGC8-03细胞增殖的影响

目的观察大黄素对人胃癌MNK-45和MGC8-03细胞增殖的影响。方法采用MTT法测定MNK-45细胞和MGC8-03细胞增殖抑制率;采用AO/EB双染观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪测定细胞周期。结果大黄素（5～80μg/mL）对MNK-45和MGC8-03细胞增殖均具有显著抑制作用（P〈0.01或0.05）,且药物剂量越大,作用时间越长,其抑制作用越强（P〈0.01）;大黄素作用于两种细胞后荧光显微镜下观察均显示细胞凋亡特征;大黄素使MNK-45和MGC8-03细胞增殖被阻滞于G0/G1期。结论大黄素能抑制人胃癌MNK-45和MGC8-03细胞增殖,诱导其凋亡,影响其细胞周期时相的分布。