Caco-2细胞模型对毛萼乙素的摄取与转运

目的研究Caco 2细胞对毛萼乙素（ERB）的摄取和跨膜转运特性。方法采用体外培养的人肠腺癌上皮细胞模型研究Caco 2细胞对ERB的摄取与跨膜转运,考察时间、浓度及温度对Caco 2摄取和转运ERB的影响。采用高效液相色谱法测定ERB含量,计算其表观渗透系数（Papp）。结果Caco 2摄取和转运ERB过程中,A B侧表观渗透系数在45 min前与时间、温度呈正相关,与有效浓度也呈正相关。结论ERB主要以被动扩散方式被小肠上皮细胞吸收并实现跨膜转运。     

麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制研究

目的研究麦冬多糖抗心肌缺血活性成分MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制。方法以Caco-2细胞作为转运研究模型,分别测定改变转运方向,使用P糖蛋白(P-gp)外排泵专属抑制剂维拉帕米(verapam il),以及改变给药浓度各种条件下,MDG-1的跨细胞转运情况。结果麦冬多糖MDG-1的分泌转运(BL-AP)的表观渗透系数Papp并未数倍于吸收转运(AP-BL),两者相近,同时P-gp抑制剂维拉帕米加入与否对麦冬多糖MDG-1转运没有影响;在考察的系列药物浓度范围内,MDG-1的转运随着药物浓度的增加而呈线性增加。结论麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中的转运机制很可能是以被动扩散为主,并且以未降解的药物形式转运,无P-gp外排泵参与。     

麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制研究

目的研究麦冬多糖抗心肌缺血活性成分MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制。方法以Caco-2细胞作为转运研究模型,分别测定改变转运方向,使用P糖蛋白(P-gp)外排泵专属抑制剂维拉帕米(verapam il),以及改变给药浓度各种条件下,MDG-1的跨细胞转运情况。结果麦冬多糖MDG-1的分泌转运(BL-AP)的表观渗透系数Papp并未数倍于吸收转运(AP-BL),两者相近,同时P-gp抑制剂维拉帕米加入与否对麦冬多糖MDG-1转运没有影响;在考察的系列药物浓度范围内,MDG-1的转运随着药物浓度的增加而呈线性增加。结论麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中的转运机制很可能是以被动扩散为主,并且以未降解的药物形式转运,无P-gp外排泵参与。     

芦丁在Caco-2细胞模型中吸收和外排机制的研究

利用Caco-2细胞模型研究芦丁在小肠上皮的摄取、跨膜转运及外排动力学机制,评价孵育时间、芦丁浓度、p-糖蛋白抑制剂环孢素A和多药耐药相关蛋白抑制剂维拉帕米对芦丁的细胞摄取与转运的影响.结果表明,药物摄取量与孵育时间、药物浓度呈正相关,环孢素A和维拉帕米对芦丁的细胞摄取量无显著影响(P＞0.05).不同浓度药物从基底侧(basolateral,BL)到肠腔侧(Apical,AP)的表观渗透系数Papp,BL-AP与AP到BL的Papp,AP-BL比值均在0.5～1.5.试验结果提示芦丁是以被动扩散为主要转运方式被小肠上皮细胞摄取和转运,且不受外排蛋白外排作用的影响.     

大蒜素在Caco-2细胞模型转运特征的研究

目的研究大蒜素在Caco-2细胞的转运特征。方法应用Caco-2细胞模型考察转运时间、药物浓度时大蒜素吸收的影响,采用高效液相色谱法测定大蒜素浓度,计算其表观渗透系（Papp）。结果随着浓度增加和时间延长,大蒜素累积通透量逐渐增加;大蒜素的Papp在2个方向比值[Papp（BL→AP）,Papp（AP→BL）]为1．80,存在方向性差异。结论大蒜素的转运属于双向转运,且吸收良好。     

牡荆素鼠李糖苷在Caco-2细胞模型中的跨膜转运研究

目的 研究牡荆素鼠李糖苷(RHV)在Caco-2细胞模型中的跨膜转运机理.方法 采用Caco-2细胞模型,考察不同浓度、不同吸收促进剂(十二烷基硫酸钠、牛胆盐)对RHV跨膜转运的影响.结果 RHV从肠腔侧到基底侧的转运与从基底侧到肠腔侧的转运相似,前者表观渗透系数随浓度的增大逐渐降低,但差异不具有统计学意义(P>0.05).与对照组比较,加入吸收促进剂后,其表观渗透系数增大.结论 RHV在Caco-2细胞模型中主要表现为被动转运,十二烷基硫酸钠和牛胆盐都能增大RHV从肠腔侧到基底膜侧的转运量.     

隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制

目的 研究隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法 用Caco-2细胞单层模型研究隐丹参酮的双向转运，并考察时间、药物浓度及抑制剂对隐丹参酮吸收的影响。用高效液相色谱法检测药物浓度，计算其表观渗透系数。结果 隐丹参酮在Caco-2细胞模型中，从单层细胞层顶端到基底端的转运大于基底端到顶端的转运，随时间和浓度的增加，药物吸收呈饱和趋势，且可被其结构类似物丹参酮Ⅱ。竞争性抑制。结论 隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收主要是由载体介导的主动转运，且该主动转运的载体位于Caco-2细胞单层的顶端。     

千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的研究千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法 MTT实验考察千层纸素A在Caco-2细胞中的安全浓度范围,再利用Caco-2细胞单层模型研究千层纸素A的双向转运机制,以转运量及表观渗透系数(Papp)为指标,考察时间、浓度、pH和P-gp抑制药维拉帕米对其吸收的影响。结果千层纸素A在Caco-2细胞模型中的转运与时间和浓度呈正相关;并受pH值影响,P-gp抑制药维拉帕米对其转运无影响,从单层细胞层顶端(AP)到基底端(BL)的转运与基底端到顶端的转运大致相同。结论千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收是被动转运。     

布洛芬在Caco-2细胞模型中的转运行为考察

采用Caco-2细胞单层模型考察了布洛芬的吸收机制.用HPLC法测定了磷酸盐缓冲液中布洛芬的转运量.结果显示,布洛芬的转运量受培养时间、浓度和P-糖蛋白抑制剂维拉帕米的影响,其表观渗透系数为1×10-6～7×10-6cm/s,且双向转运的表观渗透性存在方向性差异.这提示布洛芬在Caco-2细胞模型中以主动转运和被动扩散两种机制吸收,且存在P-糖蛋白介导的外排机制.     

左旋紫草素肠道转运及Caco-2细胞转运特性

目的研究左旋紫草素肠道及Caco-2细胞转运特征及其机制。方法应用翻转肠囊法和Caco-2细胞模型考察时间、浓度对左旋紫草素转运吸收特性的影响,应用P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对左旋紫草素转运吸收机制进行研究,采用HPLC法测定左旋紫草素的浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果在Caco-2细胞模型,随浓度增加和时间延长,左旋紫草素的累积转运量逐渐增加;加用维拉帕米后,使AP侧到BL侧的表观渗透系数Papp(AP→BL)显著增加,而从BL侧到AP侧的表观渗透系数Papp(BL→AP)显著降低。在翻转肠囊模型,100μmol·L-1左旋紫草素中加入维拉帕米后Papp显著增加。结论左旋紫草素的转运存在被动转运和主动转运2种形式,P糖蛋白参与主动转运过程;该药经肠道吸收中等,加入维拉帕米可能促进吸收。     

LC-MS测定雷公藤甲素及其在Caco-2细胞上的转运特征

目的：建立体外模拟体内肠道细胞的Caco-2细胞Transwell模型,以此研究雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上的跨膜转运特征。方法：采用聚酯碳酸酯膜连续培养Caco-2细胞21天,形成致密的单层细胞模型。然后对影响雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上转运特征的因素包括浓度、时间及跨膜转运蛋白（P-糖蛋白,多药耐药蛋白,乳腺癌耐药蛋白）进行考察;同时采用LC-MS对溶液中的雷公藤甲素的含量进行测定。结果：雷公藤甲素主要以主动转运的方式进行吸收,且随着时间和药物浓度的增加,转运量明显增加。结论：雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运存在一定的浓度及时间依赖性,且P-gp介导雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运。     

仙茅苷在Caco-2细胞模型中跨膜转运特征研究

目的：采用Caco-2细胞Transwell模型研究仙茅苷的跨膜转运机制。方法：建立Caco-2细胞Transwell吸收模型,用聚酯碳酸酯膜培养Caco-2细胞21天,形成致密的单层细胞模型。研究浓度、时间、温度、细胞旁路转运及跨膜转运蛋白（P-糖蛋白,多药耐药蛋白,乳腺癌耐药蛋白）在仙茅苷跨膜转运中的作用。结果：仙茅苷在Caco-2细胞模型中的跨膜转运存在一定的浓度及时间依赖性,细胞旁路转运不参与其转运,仙茅苷的外排转运存在一定的能量依赖性,且由P-gp参与。结论：仙茅苷在Caco-2细胞模型上主要以主动转运方式作跨膜转运,且P-gp参与其跨膜转运。     

阿立哌唑在Caco-2细胞单层模型中的跨膜转运

本文研究了阿立哌唑（aripiprazole）在Caco-2细胞模型中的跨膜转运特征。一种体外培养的人小肠上皮细胞模型 —— Caco-2细胞模型应用于阿立哌唑的跨膜转运研究。评价了时间、供给液浓度、pH值、温度及P-糖蛋白抑制剂对阿立哌唑跨膜转运的影响。采用高效液相色谱法检测药物浓度。结果表明阿立哌唑主要通过被动扩散的机制转运,同时兼有载体介导转运。阿立哌唑的转运量与时间、pH值、温度成正相关。表观渗透系数P_app值随供给液浓度升高而增大,10 μg·mL^-1时趋向饱和,之后随阿立哌唑浓度的增加而逐渐减小。P-糖蛋白抑制剂环孢菌素-A显著增加阿立哌唑的跨膜转运。     

克拉霉素对Caco-2细胞转运他克莫司的影响及机制研究

目的 探讨克拉霉素对Caco-2细胞转运他克莫司的影响及机制。方法 用化学发光免疫分析法测定他克莫司药物浓度；建立Caco-2细胞单层模型，计算表观渗透系数，比较不同浓度他克莫司在Caco-2细胞单层中转运及不同浓度克拉霉素抑制他克莫司的转运。结果 他克莫司浓度为20，40和80 μg·mL^-1时吸收渗透系数P_appAP-BL分别为（2.47±0.09）×10^-6，（3.91±0.17）×10^-6和（4.49±0.16）×10^-6 cm·s^-1；分泌渗透系数P_appBL-AP分别为（6.05±0.21）×10^-6，（9.86±0.70）×10^-6和（11.75±0.28）×10^-6 cm·s^-1；外流比（apparent permeability ratio，PDR）分别为2.45±0.03，2.52±0.12和2.62±0.11；加入不同浓度的克拉霉素（15，30，60 μg·mL^-1）后，分泌渗透系数显著降低，而吸收系数影响不大，PDR随着克拉霉素浓度增加显著降低。结论 Caco-2细胞外排转运体可能参与了他克莫司的转运，克拉霉素合用他克莫司可显著影响他克莫司的吸收。     

Mechanisms of Transport and Structure-Permeability Relationship of Sulfasalazine and Its Analogs in Caco-2 Cell Monolayers

Purpose. To investigate the mechanisms involved in transport of sulfasalazine in Caco-2 cells. Methods. Permeability coefficients of sulfasalazine and its analogs across Caco-2 cell monolayers were measured as a function of direction of transport, energy and concentration dependence, and in the presence of inhibitors of various cellular efflux pumps and transporters. Results. Permeability coefficients of sulfasalazine across Caco-2 cell monolayers were approximately 342-, 261-, and 176-fold higher from basolateral to apical direction (BLAP) than from apical to basolateral direction (APBL) at 100, 200, and 500 M, respectively. Carrier permeability coefficient, non-saturable membrane permeability coefficient, and Michaelis constant were estimated to be 1.4×10^–5 cm/s, 1.9×10^–8 cm/s, and 369 M, respectively. The efflux of sulfasalazine was completely blocked at 4°C and in the presence of an uncoupler of oxidative phosphorylation. Using cellular efflux inhibitors, the permeability of sulfasalazine was shown to depend on multidrug resistance-associated protein and anion sensitive transport mechanisms. Structure-permeability studies showed that the affinity of sulfasalazine for the cellular efflux pumps and transporters in Caco-2 cells depended strongly on the carboxylic acid functional group. Conclusions. The permeability of sulfasalazine across Caco-2 cell monolayer is very low due to its strong interaction with multiple cellular efflux pumps and transporters. This may partially explain its low absorption in vivo.     

Transport Characteristics of Fexofenadine in the Caco-2 Cell Model

PURPOSE: To investigate the membrane transport mechanisms of fexofenadine in the Caco-2 model. METHODS: Transport studies were performed in Caco-2 cell monolayers 21-25 days after seeding. The apparent permeability (Papp) of fexofenadine was determined in the concentration range 10-1000 microM in the basolateral-to-apical (b-a) and 50-1000 microM in the apical-to-basolateral (a-b) direction. The concentration-dependent effects of various inhibitors of P-glycoprotein (P-gp) (GF120918, ketoconazole, verapamil, erythromycin), multidrug resistant associated protein (MRP) (indomethacin, probenecid), and organic anion transporting polypeptide (OATP) (rifamycin SV) on the bidirectional transport of 150 microM fexofenadine were also examined. RESULTS: Fexofenadine displayed polarized transport, with the Pappb-a being 28- to 85-fold higher than the Papp(a-b). The Papp(a-b) was independent of the concentration applied, whereas Pappb-a decreased with increasing concentration (Vmax = 5.21 nmol cm(-2)s(-1) and K(M) = 150 microM), suggesting saturation of an apical efflux transporter. All four P-gp inhibitors had a strong, concentration-dependent effect on the Papp of fexofenadine in both directions, with GF 120918 being the most specific among them. The IC50 of verapamil was 8.44 microM on the P-gp-mediated secretion of fexofenadine. The inhibitors of OATP or MRP appeared not to affect the Papp(a-b) of fexofenadine in the Caco-2 model. CONCLUSIONS: This study clearly indicates that P-gp was the main transport protein of fexofenadine in the Caco-2 model. Even though P-gp was completely inhibited, fexofenadine was predicted to have a low fraction dose absorbed in humans due to poor intestinal permeability, and low passive diffusion seems to be the major absorption mechanism.     

熊果酸在Caco-2细胞单层模型中的跨膜转运

熊果酸(Ursolic acid, UA),又名乌索酸,乌苏酸,属a-香树脂醇(a-amyri)型五环三萜类化合物.在自然界分布非常广泛,据目前所知,至少存在于26个科70多种天然植物中[1].大量的研究表明,UA具有广泛的药理作用和重要的生物活性,尤其在抗炎、护肝、抗肿瘤以及机体免疫调节等方面已经显现出令人关注的药理特性[2,3].体内药代动力学研究表明, UA的生物利用度低[4],口服吸收情况较差,而且其在体内吸收转运的方式和机制也并不清楚.Caco-2细胞系来源于人结肠类腺癌细胞,其结构和生化作用类似于人小肠上皮细胞,含有与小肠刷状缘上皮相关的转运系统以及一     

姜黄素在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的测定姜黄素透过Caco-2单细胞层的浓度,研究其吸收特征。方法用Caco-2细胞单层模型来考察时间、浓度、不同药物酮康唑、维拉帕米、胡椒碱对姜黄素吸收的影响。采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法,测定姜黄素浓度并计算其表观渗透系数(Papp)。结果不同浓度姜黄素在90 min之前Papp大小顺序为:180>240>300μg/ml;与对照组比较,胡椒碱,低浓度酮康唑,维拉帕米对姜黄素的吸收均呈不同程度的促进作用(P<0.05)。结论姜黄素的吸收具有明显的高浓度饱和现象,且不呈线性变化,初步判定其吸收为主动吸收机制;促进姜黄素吸收的原因可能与酮康唑抑制Ⅰ相代谢酶CYP450 3A4和1A2酶的活性;胡椒碱抑制姜黄素Ⅱ相代谢酶—葡萄糖醛酸苷酶;维拉帕米抑制药物外排性转运蛋白—P-糖蛋白的活性有关。