体外人全血热原实验方法研究

目的 建立体外人全血热原实验方法以满足热原检查的需要.方法 分别选择细菌内毒素(LPS)、脂磷壁酸(lipoteichoicacid,LTA)及酵母多糖(zymosan)进行方法 研究,样品于体外与人全血混合孵育,通过检测细胞释放的白细胞介素(interleukin,IL) 1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF- α)等内热原含量,定量或定性反映样品中所含热原质的量.结果 LPS、LTA和酵母多糖对家兔均有致热活性,最低检测浓度分别为0.5 EU•mL-1,0.5 μg•mL^-1、16 μg•mL^-1.全血法最佳检测指标为IL-1β、孵育时间宜为20 h,人全血 IL-1β法对LPS、LTA、Zymosan最低检测限可以达到0.03 EU•mL^-1,0.25 μg•mL^-1,4.0 μg•mL^-1.通过对合格和不合格样品检测,结果 与BET及家兔法相符合.结论 体外人全血热原实验方法 具有可以标准化、定量的优点,同时可以克服家兔法对边缘产品易造成误判或漏判的缺陷,有很好的应用前景.     

动态浊度法定量测定注射用阿洛西林钠细菌内毒素含量

目的应用动态浊度法鲎实验定量测定注射用阿洛西林钠中细菌内毒素含量。方法通过干扰实验确定样品检测浓度，并建立标准曲线对样品进行细菌内毒素定量测定。结果样品在1 mg•mL 1时，对鲎实验检查无干扰作用，细菌内毒素回收率在50%～200%范围内。样品中的内毒素含量可定量测定。实验结果与半定量凝胶法测定结果吻合。结论动态浊度法可用于注射用阿洛西林钠中细菌内毒素定量检测。     

头孢噻吩钠的细菌内毒素检查方法

［摘要］目的探讨头孢噻吩钠的细菌内毒素检查方法。方法通过干扰实验观察头孢噻吩钠对细菌内毒素的抑制作用。结果选择标示灵敏度0.060 EU•mL 1的鲎试剂，将样品稀释至浓度0.46 mg•mL 1，可消除其对检查的干扰。结论头孢噻吩钠可以用细菌内毒素检查法。     

注射用三磷酸腺苷二钠细菌内毒素检查

目的 建立注射用三磷酸腺苷二钠细菌内毒素的检查方法 . 方法 采用《中华人民共和国药典》2005年版二部附录收载的细菌内毒素检查法. 结果注射用三磷酸腺苷二钠稀释至浓度0.05 mg•mL^-1时对细菌内毒素检查法无干扰作用. 结论 可用细菌内毒素检查法代替注射用三磷酸腺苷二钠的热原检查法.     

磷酸川芎嗪注射液细菌内毒素检查法

目的建立磷酸川芎嗪注射液中细菌内毒素的检查方法。方法利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理对磷酸川芎嗪中细菌内毒素进行检查。结果磷酸川芎嗪注射液不干扰浓度为0.25 mg•mL 1,限值确定为1.5 EU•mg 1。结论磷酸川芎嗪注射液中细菌内毒素检查可以用鲎试剂法,此法灵敏可靠,方便,经济。     

硼酸溶液细菌内毒素检查干扰实验

［摘要］目的建立硼酸溶液细菌内毒素检查方法。方法按《中华人民共和国药典》2010年版附录细菌内毒素检查法,分别进行了鲎试剂灵敏度复核实验、细菌内毒素干扰实验预实验及正式实验。结果硼酸溶液稀释4倍后,用灵敏度为0.125 EU•mL 1的鲎试剂进行检查,可消除抑制干扰。 结论该方法简便可靠,可用于硼酸溶液细菌内毒素的检查。     

高效凝胶色谱法测定注射用盐酸头孢甲肟中的高分子杂质

目的 建立高效凝胶色谱法测定注射用盐酸头孢甲肟中的高分子杂质. 方法采用高效凝胶色谱法,色谱柱为高效凝胶Tsk gel G2000 SWxl(300 mm×7.8 mm,5 μm),流动相为pH7.0的0.005 mol•L^-1磷酸盐缓冲液[0.005 mol•L^-1磷酸氢二钠溶液 0.005 mol•L^-1磷酸二氢钠溶液(61:39)]-乙腈(95:5);流速:0.8 mL•min^-1;检测波长为234 nm,进样量为20 μL. 结果 供试品溶液在0.067～2.700 mg•mL^-1浓度范围内,溶液的浓度与高分子杂质的峰面积总和呈良好的线性关系(r＝0.998 8);盐酸头孢甲肟在0.001～0.010 mg•mL^-1浓度范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.999 9). 结论 该测定方法简便,重复性好,可靠性高,可用于注射用盐酸头孢甲肟中高分子杂质的质量控制.     

柱切换高效液相色谱法测定血浆左氧氟沙星浓度

目的 应用柱切换高效液相色谱(HPLC)技术直接测定血浆中左氧氟沙星的浓度.方法 采用手动柱切换装置,分析柱采用大连依利特公司的Hypersil ODS C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,预柱采用μBondapak C18（50 mm×4.6 mm,37～50 μm,干法自填）.分析流动相（AMP）为甲醇 磷酸二氢钾缓冲液（0.01 mol•L-1,pH值＝2.5） 四丁基溴化铵（0.05 mol•L-1） 三乙胺＝40：60：4：0.2（V/V）;预处理流动相（PMP）为磷酸二氢钾缓冲液（0.01 mol•L^-1,pH值＝2.5） 四丁基溴化铵（0.05 mol•L^-1）＝100：1（V/V）.分析流动相流速1 mL•min^-1,预处理流动相流速2 mL•min^-1.检测波长为294 nm.结果左氧氟沙星在100～8 000 ng•mL^-1内有良好的线性关系.相关系数r＝0.999 8,方法平均相对回收率98.8%,日内及日间差小于10%,最低检测限0.05 μg•mL^-1（S/N≥3）.结论 样品无须预处理,直接进样分析测定,简便易行.     

动态浊度法测定注射用阿奇霉素中细菌内毒素的含量

目的　应用动态浊度法定量测定注射用阿奇霉素中的细菌内毒素含量。方法　建立动态浊度法测定细菌内毒素标准曲线,通过干扰试验确定样品浓度检测范围,并对样品的细菌内毒素定量测定。结果　样品在0.208 3 mg·mL^-1以下浓度时,对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%内,样品中的内毒素含量可定量测定。结论　动态浊度法可用于定量检测注射用阿奇霉素中的细菌内毒素。     

尿激酶溶解纤维条索的初步观察

目的 通过观察纤维条索组织在不同浓度尿激酶溶液中的溶解情况,探讨尿激酶溶解纤维条索组织的合适浓度及合适时间. 方法 胸腔镜下取出纤维条索组织,分别放入0,0.05,0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 万U&#8226;mL^-1尿激酶溶液中,观察3 h内纤维条索组织溶解情况.结果 在相同时间不同浓度条件下,时间≥1.5 h,0.05～1.00万U&#8226;mL^-1尿激酶溶液与0万U&#8226;mL^-1尿激酶溶液比较,差异有统计学意义(P<0.05),但0.05～1.00万U&#8226;mL^-1各浓度之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 在浓度相同时间不同条件下,尿激酶溶液在0,0.6万U&#8226;mL^-1浓度时,各时间段溶解差异无统计学意义(P=0.957,0.052). 在0.05,0.10,0.20,0.40,0.80,1.00 万U&#8226;mL^-1浓度时,时间≥1.5 h,各时间段比较差异无统计学意义(P＞0.05),而时间<1.5 h,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01). 结论 尿激酶溶解纤维条索组织合适的浓度及时间分别是0.05万U&#8226;mL^-1和1.5 h.     

大鼠烯丙基半胱氨酸浓度的测定及组织分布

目的 建立高效液相色谱法测定血清和组织烯丙基半胱氨酸（SAC）浓度的 方法 , 并进行组织分布研究. 方法 采用Hypersil ODS2 色谱柱, 以50 mmol&#8226;L^-1 醋酸盐缓冲液 （pH 5.8 ）：甲醇：乙腈（50：22：28）为流动相; 柱温为35 ℃ , 荧光检测激发波长为350 nm , 发射波长为455 nm.样品的预处理后邻苯二甲醛（OPA）-2-巯基乙醇柱前衍生; 进样10 μL. 结果 血清样品在2～120 mg&#8226;L^-1浓度范围内, 线性关系良好; 组织样品在2～120 mg&#8226;g^-1浓度范围内, 线性关系良好.低、中、高3种浓度的萃取回收率为70.9%～83.5%; 相对回收率为90.2%～110.0%; 日内、日间RSD为4.1%～7.7%.肾脏达峰浓度Cmax为65.7 mg&#8226;kg^-1, 肝脏为58.1 mg&#8226;kg^-1, 脾脏为51.3 mg&#8226;kg^-1, 心脏为43.3 mg&#8226;kg^-1, 肺为35.1 mg&#8226;kg^-1, 脑组织为26.7 mg&#8226;kg^-1 ; 各组织AUC _0~8肾脏为171.9 mg&#8226;h&#8226;kg^-1, 心脏为113.9 mg&#8226;h&#8226;kg^-1, 肝脏为107.2 mg&#8226;h&#8226;kg^-1, 脾脏为90.4 mg&#8226;h&#8226;kg^-1, 肺为93.6 mg&#8226;h&#8226;kg^-1,脑组织为79.8 mg&#8226;h&#8226;kg^-1. 结论 该法简便、快速、准确、灵敏、选择性强, SAC在大鼠体内分布广泛, 其中肾脏分布较多, 而在脑组织中分布较少.     

高效液相色谱法测定养血祛风丸中士的宁的含量

目的 建立高效液相色谱法测定养血祛风丸中士的宁的含量. 方法 采用HyperClone BDS C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）; 流动相：乙腈 0.01 mol&#8226;L^-1庚烷磺酸钠与0.02 mol&#8226;L^-1磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8）（21：79）; 流速1.0 mL&#8226;min^-1; 检测波长：260 nm; 柱温35 ℃. 结果 士的宁浓度的线性范围为4.8～191.8 μg&#8226;mL^-1,r＝0.999 8,回收率为101.30%,RSD＝1.3%. 结论 该方法方便、快速、准确,可用于养血祛风丸的质量控制.     

高效液相色谱法分析不同产地连钱草中三萜酸类成分

目的 建立高效液相色谱（HPLC） 法测定不同产地特别是湖北产地连钱草药材中齐墩果酸（oleanolic acid, OA）和熊果酸（ursolic acid, UA）的含量,为湖北省连钱草资源的开发利用提供科学依据,并为连钱草药材提供质量标准. 方法 色谱柱为Hypersil ODS2（4.6 mm×200 mm, 5 μm）,流动相：甲醇-乙腈-1%冰醋酸（40：40：20）,柱温：30 ℃,流速：1.0 mL&#8226;min^-1,检测波长：210 nm. 采用超声波提取法,提取8个产地（11个批次）连钱草样品中OA和UA,按照上述色谱条件进样分析,用峰高定量. 结果 OA和UA线性范围分别为0.04 ～0.20 mg&#8226;mL^-1和0.40 ～0.75 mg&#8226;mL^-1,定量精密度分别为0.80%（n＝3）和0.37%（n＝3）,加样回收率分别为98.10%和97.90%. 样品在10 h内稳定,重复性好. 11个批次连钱草样品中,OA的含量范围0.17～0.50 mg&#8226;g-1,UA的含量范围0.97～1.92 mg&#8226;g^-1. 结论 HPLC法测定连钱草中齐墩果酸和熊果酸的含量,可作为连钱草药材的质量控制标准. 湖北各产地连钱草均含有较高的齐墩果酸和熊果酸,有开发利用的价值.     

反相高效液相色谱法测定苯酰甲硝唑干混悬剂的含量

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法测定苯酰甲硝唑干混悬剂的含量. 方法 采用Hypersil C18柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）, 甲醇-0.02 mol&#8226;L^-1磷酸二氢钾缓冲液（35：65）为流动相, 检测波长为318 nm; 进样量：20 μL; 流速：1.0 mL&#8226;min^-1; 柱温：室温. 结果 苯酰甲硝唑浓度线性范围为16.04～513.28 μg&#8226;mL^-1, 峰面积对浓度有良好的线性关系（r＝0.999 9）, 精密度实验日内RSD≤0.83%, 日间RSD≤0.91%, 准确度实验平均回收率为100.01%, RSD＝0.94%. 结论 该方法专属性强, 结果准确, 适用于快速测定苯酰甲硝唑干混悬剂的含量.     

复方环丙沙星滴耳液的制备与质量控制

目的 建立复方环丙沙星滴耳液的质量控制标准. 方法 采用高效液相色谱法测定含量并同时进行定性鉴别. 采用Luna C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇 乙腈 0.34%磷酸二氢钾（25：15：60）,流速：1.0 mL&#8226;min^-1;检测波长：240 nm;柱温：30 ℃;进样量：20 μL. 结果 盐酸环丙沙星（按环丙沙星计）和氢化可的松的线性范围分别为0.111 0～0.555 0 mg&#8226;mL^-1,0.010 8～0.054 0 mg&#8226;mL^-1;平均回收率分别为100.6%（RSD=0.2%）,99.8%（RSD=1.1%）. 结论 复方环丙沙星滴耳液制备工艺简便,高效液相色谱法测定含量操作简便、快速,结果准确,专属性强,分离效果好.     

高效液相色谱法测定人血浆中氯氮平浓度

目的 建立测定人血浆中氯氮平浓度的高效液相色谱法. 方法 以DiamonsilTM C18反相柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,流动相为0.03 mol&#8226;L^-1醋酸铵 甲醇（25：75）;流速0.8 mL&#8226;min^-1,柱温40 ℃,检测波长 254 nm. 以醋酸乙酯与二氯甲烷（80：20）为提取剂. 结果 氯氮平的高、中、低（1 000.0,400.0,10.0 ng&#8226;mL^-1）3种浓度平均回收率分别为98.28%,97.63%,101.41%,日内、日间精密度RSD均＜7%（n＝5）;分析方法 的检测限为5.0 ng&#8226;mL^-1;线性范围为10.0～1 000.0 ng&#8226;mL-1. 曲线方程：C＝25.69F＋3.47,r＝0.999 7（n＝10）. 结论 该方法 灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

治痔胶囊与槐角丸体外抑菌活性比较

目的 比较治痔胶囊与槐角丸的体外抑菌活性. 方法 采用琼脂稀释法,观察治痔胶囊与槐角丸溶液对6种常见细菌生长的抑制作用. 结果 治痔胶囊对常见的6种细菌均有抑菌作用,对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、乙型链球菌的最低抑制浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)为0.062 5 g&#8226;mL^-1,对铜绿假单胞菌的MIC为0.125 g&#8226;mL^-1,对大肠埃希菌的MIC为0.25 g&#8226;mL^-1,对肠球菌的的最低抑菌浓度为0.5 g&#8226;mL^-1.槐角丸对金黄色葡萄球菌、变形杆菌的生长有抑制作用,对两者的MIC均为0.125 g&#8226;mL^-1,槐角丸对另外4种细菌生长均无抑制作用. 结论 治痔胶囊比槐角丸具有更广的抗菌谱和更强的抑菌能力.     

疏风活络片质量标准研究

目的 建立疏风活络片的质量标准. 方法 采用薄层色谱(TLC)法对处方中马钱子、麻黄进行定性鉴别; 采用高效液相色谱(HPLC)法, 以乙腈-0.01mol&#8226;L^-1庚烷磺酸钠与0.02 mol&#8226;L^-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值为2.8)(22：78)为流动相; 检测波长：260 nm, 流速l mL&#8226;min^-1, 进样量10 μL, 对方中马钱子中所含士的宁进行含量测定. 结果疏风活络片中马钱子、麻黄薄层色谱鉴别特征明显, 专属性强; 疏风活络片中士的宁的含量测定线性范围为0.002 8～0.056 0 mg&#8226;mL^-1 (r＝0.999 9), 平均回收率为99.81%, RSD为1.42%(n＝5). 结论薄层色谱鉴别和含量测定方法 准确可行, 重复性好, 可有效地控制疏风活络片的质量.     

健康受试者口服复方缬沙坦后血浆中氢氯噻嗪和缬沙坦浓度测定

目的 建立高效液相色谱法测定健康受试者口服复方缬沙坦后血浆中氢氯噻嗪、缬沙坦的浓度. 方法 以奥硝唑为氢氯噻嗪内标、坎地沙坦为缬沙坦内标. 氢氯噻嗪色谱条件, Eurospher-100 C₁₈色谱柱 （250 mm×4.6 mm, 5 μm）;流动相：乙腈 水（30：70,V/V）;流速：1 mL&#8226;min^-1;柱温：室温;检测波长：272 nm;进样量：50 μL. 缬沙坦色谱条件：Eurospher-100 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）;流动相：甲醇 0.02 mol&#8226;L^-1 磷酸二氢钾（70：30,V/V）磷酸调pH值 2.40;流速：1 mL&#8226;min^-1;柱温：室温;检测波长：激发波长265 nm,发射波长395 nm;进样量：20 μL. 结果 氢氯噻嗪在5～1 000 ng&#8226;mL^-1范围内、缬沙坦在0.025～10.000 μg&#8226;mL^-1范围内线性关系良好（r＝0.999 5,r＝0.999 5）,定量下限分别为2.5,10 ng&#8226;mL^-1,氢氯噻嗪日内精密度RSD为1.42%～5.22%,日间精密度为2.62%～9.04%;缬沙坦日内精密度RSD为0.52%～3.30%,日间精密度为2.00%～9.01%. 结论 该法简便灵敏准确、重现性好,可用于血浆中氢氯噻嗪、缬沙坦的测定.     

高效液相色谱法测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量. 方法 固定相为Hypersil ODS柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:乙腈 0.04 mol&#8226;L^-1磷酸二氢钾(13:87),流速1 mL&#8226;min^-1,紫外检测波长220 nm. 用酸溶碱提法提取样品中的苦参碱和氧化苦参碱. 结果苦参碱标准曲线方程为:A=2 158.24C-157.70(r=0.999 8),氧化苦参碱A=1 936.25C-1 137.89(r=0.999 7),线性范围都是25～800 μg&#8226;mL^-1,平均回收率苦参碱为99.06%(RSD=1.69%),氧化苦参碱为100.22%(RSD=1.99%). 结论 该方法 测定痒葏洗剂中苦参碱和氧化苦参碱的含量,操作简便、快速,结果准确,可用于痒葏洗剂的质量控制.