高效液相色谱法测定血浆中氯胺酮对映体的浓度

目的:建立以高效液相色谱手性固定相法测定血浆中氯胺酮对映体浓度的方法。方法:色谱柱为Chirobiotic V手性柱,流动相为甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.02∶0.02),检测波长为269nm,流速为1mL·min-1,内标为非那西丁。结果:S-氯胺酮、R-氯胺酮分别在19.5～2600(r=0.9992)、26～2600ng·mL-1(r=0.9989)范围内线性关系良好,最低检测浓度分别为13.0、19.5ng·mL-1;相对回收率分别为99.48%～103.40%、98.53%～103.20%,绝对回收率分别为63.2%～73.1%、64.5%～72.3%;日内RSD分别为3.3%～6.4%、3.5%～5.7%,日间RSD分别为7.1%～9.7%、6.3%～9.9%。结论:本方法简便、准确、灵敏、快速、专属,可用于血浆中R-氯胺酮和S-氯胺酮的测定及药动学研究。     

HPLC手性固定相法测定患者血浆中布洛芬对映体的浓度

目的 建立用高效液相色谱法测定血浆中布洛芬对映体浓度的方法。方法 用正己烷-异丙醇混合液(100∶5)提取血浆样品中布洛芬,在Chirobiotic V(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱上,以甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.04∶0.02)为流动相进行分离,于226 nm 波长处检测,内标为吲哚美辛。结果 R-布洛芬、S-布洛芬和内标没有干扰,分离度良好。R-布洛芬和S-布洛芬血药浓度在0.01~5 mg·L^-1内线性关系良好。两个对映体相对回收率分别为99.1%~102.2%和99.3%~102.4%,绝对回收率分别为66.8~72.9和66.3~71.4,日内RSD分别为4.2%~5.4%和3.6%~5.1%,日间RSD分别为5.9%~7.3%和6.2%~7.9%。结论 该方法准确、快速、简便、灵敏度高、重复性好,可同时测量血浆中R-布洛芬和S-布洛芬的药物浓度,并可用于药动学参数的研究及患者血药浓度监测。     

高效液相色谱法检测人血浆中氟西汀及其代谢产物的浓度

目的 :建立一种快速测定人血浆中氟西汀及其代谢产物去甲氟西汀的反相高效液相色谱法。方法 :用正己烷 -乙腈(98∶2 )提取血浆样品中氟西汀、去甲氟西汀及氯丙帕明 (内标 ) ,在EclipseXDB -C8柱上 ,以 0 0 5mol·L-1磷酸二氢钾 -乙腈 -甲醇 (5 5∶40∶5 )为流动相进行分离 ,流速 1 2mL·min-1,于 2 2 6nm检测。结果 :线性范围为 10～ 5 0 0ng·mL-1,氟西汀和去甲氟西汀相对回收率分别为 99 1%～ 10 4 2 %和 98 2 %～ 10 0 3 % ,日内RSD分别为 4 1%～ 4 8%和 4 5 %～5 8% ,日间RSD分别为 3 5 %～ 5 9%和 4 9%～ 6 8%。结论 :本法简便、精密度高、重现性好 ,结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定人血浆氟比洛芬对映体浓度

目的:建立用高效液相色谱法测定血浆氟比洛芬对映体浓度的方法。方法:本试验采用环己烷提取血浆样品中氟比洛芬,色谱柱为Chirobiotic V(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.01∶0.01),检测波长为250 nm,内标为S-酮洛芬。结果:各组分之间没有干扰,分离度良好。血浆中R-氟比洛芬和S-氟比洛芬浓度在30～1 000 ng.mL-1范围内线性关系良好。两个对映体相对回收率分别为98.6%～100.2%和98.7%～101.2%,绝对回收率分别为76.1%～81.6%和76.6%～80.5%,日内RSD分别为3.9%～5.7%和4.1%～6.2%,日间RSD分别为5.8%～7.5%和6.1%～7.4%。结论:该方法操作快速简便,重现性好、灵敏度高,可满足血浆氟比洛芬对映体浓度测定及药代动力学研究的需要。     

LC/MS联用法测定人血浆中氟西汀的浓度

目的:建立测定人血浆中氟西汀浓度的液/质联用方法。方法:以氯氮平为内标,血浆样品用饱和碳酸钠溶液碱化,经乙酸乙酯振荡萃取后,进样分析。其中色谱柱为C18,流动相为5mmol.L-1乙酸铵溶液(0.5%乙酸)-甲醇-乙腈(42∶22∶36),流速为0.24mL.min-1,柱温40℃;通过电喷雾离子化(ESI)质谱以扫描方式检测,选择性正离子监测质荷比(m/z)为310(氟西汀,M+H)和327(内标,氯氮平,M+H)。结果:氟西汀血浆药物浓度在0.5~100ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.998 6),最低定量浓度为0.5ng.mL-1;方法回收率在96.0%~98.0%之间,日内、日间RSD均小于13%。结论:本方法简便、准确、灵敏度高,可用于临床氟西汀血药浓度的监测和药动学研究。     

高效液相色谱荧光法测定Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度

目的:建立Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度的高效液相色谱荧光测定方法。方法:Beagle犬口服消旋体酒石酸美托洛尔100mg后取1·5h血样进样测定,手性色谱柱为ChiralcelOD-H,流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺(65∶35∶0·1),荧光检测波长Ex和Em分别为267nm、290nm,柱温为25℃,流速为0·6ml/min,内标物为(S)-阿替洛尔。结果:酒石酸美托洛尔2种对映体检测浓度在10~2000ng/ml范围内线性关系良好,平均回收率为96·12%~116·9%(RSD<7·6%)。结论:该分析方法选择性好、准确性高、重现性好,适于酒石酸美托洛尔对映体的药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀和氟伏沙明的质量浓度

目的建立一种简单、快速的能同时测定血浆中氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀和氟伏沙明质量浓度的LC-MS/MS方法。方法血浆经乙腈沉淀后,上清液直接进样分析。色谱柱为Hypersil GOLD aQ,流动相为乙腈-1 mL·L~(-1)甲酸溶液,梯度洗脱。正离子检测,扫描方式为选择性反应监测,氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀、氟伏沙明和内标罗红霉素的检测离子对分别为m/z 310.2→44.4,296.1→134.1,330.2→192.1,319.2→259.1和837.7→679.3。结果血浆中氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀和氟伏沙明的质量浓度在1～1 000 ng·mL~(-1)范围内线性关系良好,最低定量下限为1 ng·mL~(-1)。氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀和氟伏沙明的日内和日间精密度RSD值均小于15%,日内和日间相对误差在-15%～15%之间,药物的提取回收率均大于90%,无显著基质效应。药物在反复冻融3次、室温下保存12 h和-80℃保存1个月的条件下稳定。该方法成功应用于抑郁症患者的氟西汀、去甲氟西汀、帕罗西汀和氟伏沙明血药质量浓度监测。结论建立的LC-MS/MS分析方法简便、灵敏、准确,可用于临床血药质量浓度的监测。     

氟西汀衍生物对映体在直链淀粉手性固定相上的拆分

目的:建立用手性固定相拆分氟西汀的NBD-COCl衍生物对映体的高效液相色谱方法。方法:色谱柱为Chiralpalk AD-RH(150nm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水或乙腈-水,荧光法检测。结果:用甲醇或乙腈作改性剂均能拆分氟西汀衍生物对映体。结论:温度对对映体拆分影响较大;氢键作用力不是溶质和手性固定相之间的主要作用力。     

HPLC-荧光法同时测定人血浆中3种抗抑郁药的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法同时测定人血浆中文拉法辛、氟西汀、舍曲林浓度的方法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后经液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(50mmol·L-1磷酸二氢钠用磷酸调节pH值至2.5)=35∶65,流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃。荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测氟西汀和舍曲林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、氟西汀、舍曲林血药浓度分别在5～1000μg·L-1(r=0.9980)、40～1000μg·L-1(r=0.9990)、20～800μg·L-1(r=0.9980)范围内线性关系良好;日内、日间RSD均<10%,提取回收率均>70%,方法回收率均>90%。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,可用于文拉法辛、氟西汀、舍曲林的治疗药物监测、中毒分析及药动学研究。     

固相萃取高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中度洛西汀浓度

目的:建立固相萃取高效液相色谱荧光法测定人血浆度洛西汀血药浓度的方法。方法:采用固相萃取HPLC荧光法,以氟西汀为内标,依利特Hypensil ODS2(4.6mm×200mm,5μm)柱为色谱柱,20mmol.L-1醋酸铵溶液(pH3.5)-甲醇-乙腈(40∶20∶40)为流动相,荧光激发波长:232nm,荧光发射波长:350nm。结果:度洛西汀血浆质量浓度在1.0~200.0μg.L-1范围内与峰面积比之间线性关系良好,回归方程为:A/AIS=0.01221C 0.004557(r=0.9992,n=8),方法回收率在90%~110%之间,萃取回收率大于85%;日内日间RSD小于10%。结论:本方法测定人血浆中度洛西汀浓度可靠、实用;可用于临床药物动力学研究。     

手性GC法测定麝香中麝香酮的含量

目的:建立麝香酮对映体拆分和麝香中麝香酮含量测定的方法。方法:采用Agilent CYCLODEX-B手性气相毛细管柱、FID检测器、程序升温法,对麝香酮消旋体进行拆分,并测定天然麝香和人工合成麝香中麝香酮的含量。结果:麝香酮消旋体的质量浓度在0.05～5.00mg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系([S)-和(R)-麝香酮的r分别为0.9986和0.9993];平均回收率分别为97.1%和99.2%,RSD分别为1.83%、1.76%(n=15);检测限为2.5ng·mL-1,定量限为6.0ng·mL-1。结论:本方法可将(S)-和(R)-麝香酮进行有效拆分,并能有效控制麝香的质量。     

RP-HPLC法测定人血浆中黄豆苷元的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法。方法:采用甲醇沉淀蛋白法提取血浆中黄豆苷元,色谱柱为Hypersil ODS C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为5%乙酸溶液(用三乙胺调pH值为4)-甲醇(55∶45),检测波长为254nm,流速为1.0mL·min-1,柱温25℃。结果:黄豆苷元血药浓度在1.5～700.0ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),低、中、高浓度(5.0、16.5、231.0ng·mL-1)的平均回收率分别为(96.95±4.36)%、(101.30±3.32)%和(98.73±2.54)%。结论:本法简单、快速、准确,可用于黄豆苷元的血药浓度测定和人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中法罗培南的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法测定人血浆中法罗培南浓度的方法。方法:采用API3200型四极杆串联质谱仪进行检测,色谱柱为Zorbax Eclipse C18,流动相为乙腈-水(70∶30),流速为0.4mL·min-1,离子源为电喷雾离子化源,检测方式为负离子方式,扫描方式为多重反应监测。结果:法罗培南血药浓度在50～2000ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),最低检测浓度为1ng·mL-1(S/N>3);日内RSD<10%,日间RSD<12%,平均回收率为86.96%。结论:本方法简便、快速、精密度好,可用于法罗培南血药浓度的监测及药动学研究。     

HPLC法测定(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺中S,S对映异构体

目的建立高效液相色谱法测定(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺中S,S对映异构体含量的方法。方法柱前衍生反相高效液相色谱法,利用间甲基苯甲酰氯为衍生化试剂,采用Chiral-AGP(4.0 mm×150 mm)色谱柱,以异丙醇-磷酸盐缓冲液(pH值=6.1)(15∶85)为流动相、流速0.7 mL.min-1、检测波长为214 nm。结果 1,2-环己二胺的R,R与S,S对映异构体衍生物达到基线分离;S,S-对映异构体的定量限为30.1 ng、检测限12.4 ng;S,S-对映异构体在0.015～0.09μg.mL-1浓度范围内线性良好,平均回收率为98.3%,RSD(n=9)为9.36%。结论建立的间甲基苯甲酰氯柱前衍生高效液相色谱法适用于(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺中S,S对映异构体含量的测定。     

RP-HPLC法测定人血浆中血管紧张素Ⅱ的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光法检测人血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的方法。方法:采用固相萃取法纯化血浆样本,以荧光胺柱前衍生后进样测定。以乙腈-10mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷盐缓冲液(pH8.5)作为流动相,梯度洗脱,流速为1mL·min-1,色谱柱为LunaC5,激发波长为273nm,发射波长为476nm。结果:血管紧张素Ⅱ血药浓度在10～200ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),最低检出限(S/N=3)为5ng·mL-1,日内、日间RSD分别为1.65%和4.20%。结论:本方法快速、灵敏、准确、重复性好,可用于血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的检测。     

盐酸氟西汀口腔崩解片人体生物等效性研究

目的:研究盐酸氟西汀口腔崩解片在健康人体内的药动学及相对生物利用度。方法:18名健康志愿者分别单剂量交叉口服盐酸氟西汀口腔崩解片(受试制剂)和盐酸氟西汀胶囊(参比制剂)40mg,用高效液相色谱法测定血药浓度,以3p97程序计算药动学参数并进行生物等效性评价。结果:受试制剂与参比制剂在体内血药浓度药-时曲线呈一室模型,tmax分别为(5·17±1·10)、(5·11±1·02)h,Cmax分别为(76·24±38·42)、(77·92±34·97)ng·mL-1,AUC0～150分别为(3216·21±899·69)、(3220·62±1275·57)ng·h·mL-1,AUC0～∞分别为(3570·60±1299·29)、(3662·49±1444·69)ng·h·mL-1。经组间t检验,受试制剂与参比制剂药动学参数无显著性差异(P>0·05),受试制剂的相对生物利用度为(96·47±10·43)%。结论:盐酸氟西汀口腔崩解片与盐酸氟西汀胶囊具有生物等效性。     

HPLC-荧光法测定兔血浆中伊曲康唑及其代谢产物羟基伊曲康唑的浓度

目的:建立可同时测定兔血浆中伊曲康唑(ITZ)及其代谢产物羟基伊曲康唑(HITZ)浓度的高效液相色谱-荧光法。方法:色谱柱为Agilent Eclipse C18,流动相为0.1%三乙胺缓冲液(85%磷酸调pH为2.5)-乙腈(63∶37),流速为1.0mL.min-1,荧光检测激发波长为260nm,发射波长为365nm,柱温为室温。结果:ITZ和HITZ的线性范围分别为7.4~2 960(r=0.999 1)、5.4~2 160ng.mL-1(r=0.999 3),检测限分别为0.518、0.318ng.mL-1;ITZ、HITZ的提取回收率和方法回收率均在80%以上,日内、日间RSD均小于4.47%。结论:所建立的检测方法操作简便、灵敏度高、专一性强、结果可靠,可用于兔血浆中ITZ和HITZ浓度的同时测定和药动学研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中塞曲司特的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中塞曲司特浓度的方法。方法:色谱柱为Lichrospher C18,流动相为0.02mol.L-1磷酸二氢钾(含0.1%三乙胺,pH=5.0)-乙腈(70∶30),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为268nm。结果:塞曲司特血药浓度在28～5600ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),最低检测浓度为28ng·mL-1;低、中、高3种浓度相对回收率分别为102.9%、100.4%、99.7%;日内、日间RSD均<6%。结论:本法可用于塞曲司特血药浓度的测定以及其药动学研究。