去氧乙烯基环己烯致雌鼠卵巢功能衰竭的动物模型研究进展

卵巢功能早衰(premature ovarian failure,POF)是一种以卵巢功能提前衰退为主要特征的生殖系统疾病.POF发病率虽高,但早期发现并诊断为POF的患者甚少,限制了对疾病的研究,因此建立与人类相似的生殖内分泌和组织学变化的POF模型对于POF发病机制的研究和进一步的治疗具有很大价值.实验中可以通过多种方法成功制备POF动物模型.本文主要从去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)注射浓度的大小,注射时间的长短,利用不同日龄的雌鼠,不同物种,及与卵泡的募集、生长、发育和凋亡密切相关的众多调控因子等方面综述VCD诱导的卵巢功能衰竭模型的研究进展.     

手术干预糖尿病大鼠的实验研究

目的探讨Roux-en-Y胃转流术(GBP)对2型非肥胖型糖尿病鼠的降糖作用及Roux-en-Y胃转流术(GBP)对正常鼠血糖有无影响。方法雄性Wister大鼠随机分为四组,空白组(1组)、手术组(2组)、造模组(3组)、造模+手术组(4组),每组10只,测定术前,术后48小时,一周,八周的空腹血糖值,胰岛素值的变化。结果4组手术后一周空腹血糖值由(17.50±0.82)mmol/L下降到(11.08±0.60)mmol/L(P值﹤0.01)。空腹胰岛素值由(28.95±3.99)mIU/L升高到(33.83±5.61)mIU/L(P﹤0.05)至实验结束血糖无反弹。2组手术前后血糖值无明显变化。结论GBP能显著降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖值,对正常鼠血糖无影响。     

氨茶碱增强大鼠前爪刺激BOLD效应的实验研究

目的 应用1．5T MR扫描仪，观察氨茶碱对电刺激前爪的大鼠模型fMRI BOLD反应的作用及其作用的时间过程．方法 20只Sprague—Dawley雄性鼠．应用前爪电刺激的大鼠模型，在注射生理盐水或氨茶碱(0．1mmol／kg)前，后15，30，45，60，75min，对其进行fMRI检查．采取Block design方式，刺激序列被分成6个30s段落，休息和电刺激状态交替．BOLD反应的变化是通过测定氨荼碱和生理盐水组每个大鼠不同时间激活体素的数目和BOLD反应的幅度来量化的．结果 氨荼碱组B0LD反应的激活体素和反应幅度在注射后45—60min较注射前明显增加(分别增加50%—200%，50%—65%)，生理盐水组并没有明显变化．结论 氨茶碱通过提高静息状态下去氧血红蛋白的水平，或者是茶碱的神经激活作用来增强BOLD反应．这种作用应用于人可能具有潜在的增加BOLD反应的敏感性。     

CX/GJIC下调对急性肝功能衰竭大鼠肝细胞增生修复的影响

目的 探讨缝隙连接蛋白,细胞间缝隙连接通讯(CX/GJIC)下调对急性肝功能衰竭(AHF)大鼠肝细胞增生修复的影响.方法 大鼠190只(SPF级,江西实验动物质量检测中心提供),随机分成苯巴比妥PB(n=60),对照组(n=30),模型组(n=100).PB组动物诱导后与模型组采用四氯化碳腹腔注射法造模,造模后1、3、7、10、14d采取肝组织标本行免疫组化查Cx32、切开标记荧光染料传输(IL/DT)查GJIC功能.结果 (1)造模后动物立即出现精神萎靡,活动及摄食减少,尿黄,严重者多脏器出血,昏迷甚至死亡.PB与模型组的组间病死率差异显著(P＜0.01).(2)免疫组化显示,模型组的Cx32蛋白主要集中在胞膜上,细胞间,数量较PB组明显增多,且随着时间呈进行性增加的趋势;PB组的Cx32主要分布在胞浆内.数量极少.(3)荧光染料传输试验发现.模型组的染料传输能力在造模后与对照组比明显减低(P＜0.01);PB组染料传输能力明显受抑制,除在第3天与模型组问的差别无统计学意义外,其余时间点与其它各组间差异均显著(P＜0.05).结论 通过预先下调肝细胞间的CX/GJIC,可以减轻AHF急性期的肝脏损害,促进残存肝细胞增生和肝功能的好转,降低AHF大鼠的病死率.     

菟丝子总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能的作用研究

目的研究菟丝子总黄酮(TFSC)对卵巢早衰大鼠卵巢功能的作用。方法使用一次性环磷酰胺腹腔注射联合皮内注射白消安法制造大鼠卵巢早衰模型。提取与分离TFSC。将90只雌性健康SD大鼠采用随机数字法分为正常组、模型组、雌激素对照组以及TFSC低、中、高剂量(35、70、140 mg/kg)组,每组15只,除正常组外其余均造模,造模成功后开始给药;观察大鼠动情周期,给药10 d后处死大鼠,称重,取血清检测大鼠的卵泡刺激素、雌二醇水平;取大鼠的卵巢组织,称重,计算大鼠卵巢指数; 10%甲醛溶液固定后制片,苏木精-伊红染色法染色,显微镜下观察卵巢的形态学变化;观察卵泡发育,计数卵泡数量。结果模型组表现为持续的动情间期、无动情前期或动情期。正常组、雌激素对照组及TFSC低、中、高剂量组的动情期分别为4～5 d、5～6 d、7～8 d、6～7 d、5～6 d。各组大鼠的雌激素、卵泡刺激素水平均不同程度的降低(P <0. 05)。与正常组比较,模型组、雌激素对照组及TFSC低、中、高剂量组的体重、卵巢指数均降低(P <0. 05),但与模型组比较,TFSC高剂量组大鼠体重、卵巢指数均升高(P <0. 05)。模型组、雌激素对照组及TFSC低、中、高剂量组总卵泡数少于正常组,雌激素对照组及TFSC中、高剂量组多于模型组(P <0. 05);模型组、雌激素对照组及TFSC低、中剂量组生长卵泡少于正常组,雌激素对照组及TFSC中、高剂量组多于模型组(P <0. 05)。病理形态学观察模型组卵巢明显萎缩,生长卵泡数量减少。结论TFSC对卵巢早衰大鼠的卵巢功能有明显的恢复作用,可增加卵巢早衰大鼠的卵巢重量及卵泡数量,提高雌激素水平,对卵巢早衰有明显疗效。     

两次打击大鼠所致多器官功能障碍综合征动物实验模型的建立及病理观察

目的建立两次打击大鼠所致的多器官功能障碍综合征(MODS)的动物模型,研究动物各器官代偿与失代偿的反应过程。方法选择清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组(A组,32只),出血 腹腔注射内毒素组(B组,42只),出血组(C组,42只),腹腔注射内毒素组(D组,42只)。在实验的第8、24、48、72小时随机抽取每组大鼠各8只,观察各组大鼠的症状、体征、死亡率;血清内毒素血症阳性率(鲎试验);各脏器功能指标[外周血白细胞总数(WBC)、动脉血氧分压(PaO2)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、血肌酸激酶(CK)]及重要脏器的病理形态学变化。结果在实验8～24h,B组大鼠的症状、体征与功能指标(WBC、PaO2、ALT、BUN、CK)均有明显变化,与A组、C组、D组差异有显著性;其肺、肝、肾、心、脾及小肠等重要脏器病理改变明显。在48～72h,存活大鼠的症状、体征、功能指标及重要脏器病理变化逐步恢复：血清鲎试验阳性率为16．7％。MODS的发生率45．2％,总死亡率为21．4％。结论以失血加腹腔内注射内毒素的方法,可成功复制大鼠MODS模型,方法简便,能较好地反映大鼠对创伤和感染因素表现出器官功能由代偿到失代偿的反应过程。     

动物实验中大鼠的抓取技巧

大鼠作为最常用的实验动物之一,对医学的发展起到了重大的作用。但大鼠攻击力强,如果实验者抓取方法和手段不当就会造成受伤。本文主要从实验前的准备工作、实验中的抓取方法以及实验结束后的处理三个方面,介绍操作抓取大鼠的经验和技巧,以期为以后实验者提供更有价值的参考。     

磷酰胺氮芥对大鼠卵巢功能损伤的体外实验研究

[摘要] 目的：研究磷酰胺氮芥（Glyciphosphoramide ,PM）引起体外培养大鼠卵巢结构和内分泌功能损伤的最低剂量。方法：实验分为4组,每组12个卵巢,来源于出生8周的Wistar大鼠。实验1、2、3组培养基中加入浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的PM,培养48h后均隔天全量更换不含PM的培养基。正常对照组培养基中不含PM。在PM加入前及加入后2d（48h）、6d时更换的培养基中用放射免疫法测定其雌二醇（E2）浓度。在加入PM6d时取出大鼠卵巢,称湿重,HE染色,显微镜下观察各期卵泡形态并计数总卵泡数量。结果：加入PM后2d及6d的3个实验组的E2浓度均低于正常对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,且3个实验组间两两比较差异也均有统计学意义。加入PM6d,3个实验组分别与正常对照组比较,卵泡数差异均有统计学意义;3个实验组间两两比较,卵泡数量差异亦均有统计学意义。结论：PM浓度为10μg/mL时已能引起体外培养大鼠卵巢结构及功能的损伤。     

醒髓汤对大鼠脊髓损伤内皮素影响的实验研究

目的 :观察醒髓汤对大鼠中度脊髓损伤 (SCI)组织中内皮素 (ET)含量变化的影响。方法 :采用改良式的Allen’s造模方法 ,复制大鼠中度脊髓损伤模型。设立醒髓汤组、强的松龙组、模型组、空白组。结果 :醒髓汤组与强的松龙组 2 4小时内对内皮素影响无显著差异。 3天后 ,醒髓汤组内皮素含量明显低于强的松龙组。结论 :在SCI的后期继发性损伤过程中 ,醒髓汤对脊髓组织中ET含量改变效果优于强的松龙     

育肾养血方治疗卵巢早衰的实验研究

目的探讨全国名老中医朱南孙教授的经验方——育肾养血方治疗卵巢早衰的疗效及作用机制。方法采用75只性周期规律的雌性Wistar大鼠的卵巢组织制备卵巢抗原;另取50只大鼠随机分成正常组(n=10)和模型组(n=40)。模型组采用卵巢抗原皮下注射自身免疫法建立卵巢早衰大鼠模型,造模成功后再分为四组(n=10):中药中、高剂量组(灌服中药复方)、西药对照组(灌服己烯雌酚)、模型对照组(灌服等量生理盐水);正常组为空白对照组(不造模仅灌服等量生理盐水),均连续2周。治疗结束后经腹主动脉采血,留取卵巢组织标本。采用ELISA法检测血清雌二醇(E2)和促卵泡激素(FSH)水平,免疫组织化学法检测卵巢抑制素B(InhB)蛋白阳性表达水平,观察卵巢、子宫湿重变化及组织学改变。结果育肾养血方能提高卵巢早衰大鼠血清E2水平和降低FSH水平;但与模型对照组比较,西药对照组的E2和FSH水平、中药高剂量组的FSH水平差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,西药对照组和中药中、高剂量组大鼠卵巢InhB蛋白表达均显著增加(P<0.01);卵巢内淋巴细胞浸润减轻,各级卵泡数增多,卵巢和子宫的湿重增加。结论育肾养血方可以促进卵巢...     

巢衰复元汤治疗卵巢早衰38例临床观察

目的 观察巢衰复元汤治疗卵巢早衰的临床疗效.方法 治疗组38例运用中药方剂巢衰复元汤(自拟)治疗;对照组19例采取激素替代疗法.均治疗5个疗程,治疗结束3个月后进行疗效比较.结果 治疗组总有效率为71.1%,对照组为36.9%,差异有显著意义(P＜0.05).治疗组症状总改善率为61%,对照组为17%,差异有非常显著意义(P＜.01).结论 巢衰复元汤治疗卵巢早衰疗效显著,中药疗效肯定.     

卵巢早衰31例临床分析及治疗探讨

目的:总结卵巢早衰的临床资料,探讨卵巢早衰的治疗。方法:对1999年1月至2003年12月31例卵巢早衰患者的临床资料进行分析。结果:月经初潮平均年龄为13.4岁,继发闭经的妇女在停经前平均行经8.2年,闭经期限平均为2.8年(5个月至7年),其中突然闭经者7人,月经稀少渐至闭经者24人;16例(51.6%)的患者有低雌激素血症的表现,15例(48.4%)有程度不等的生殖器萎缩及乳房萎缩;血清性激素测定显示:雌二醇值明显低于或等于卵泡期水平,促卵泡素和促黄体生成素值升高及催乳素值在正常范围;全部患者给予人工周期治疗,治愈率为22.6%,有效率为25.8%,但无1例妊娠。结论:卵巢早衰是一种多因素引起的疾病,治疗困难,值得重视和研究。     

葛根素对顺铂诱导小鼠卵巢早衰的作用研究

目的 探讨葛根素对顺铂诱导小鼠卵巢早衰的作用。方法 选取雌性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,每组10只。给药途径均为腹腔注射。模型组给予生理盐水（4.0 ml/kg×9 d）,顺铂（4.5 mg/kg×5 d）及生理盐水（4.0 ml/kg×5 d）;实验组给予葛根素（200.0 mg/kg×9 d）,葛根素（200.0 mg/kg×5 d）及顺铂（4.5 mg/kg×5 d）;对照组给予同体积生理盐水14 d。 实验第9天,称重小鼠并记录,观察小鼠一般活动。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中激素水平;HE染色观察卵巢组织形态结构;免疫荧光染色检测小鼠卵巢组织中Cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax的表达;Western blotting法检测小鼠卵巢组织中Cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的相对表达量。结果 模型组小鼠一般情况差;实验组小鼠相对于模型组,一般情况有所改善;对照组、模型组及实验组小鼠的体重有差异,其中模型组与对照组相比体重呈现下降趋势,实验组相比模型组体重下降更加平缓（P <0.05）。模型组小鼠动情间期占动情周期的比例高于对照组（P <0.05）;实验组小鼠动情间期占动情周期的比例低于模型组（P <0.05）。模型组小鼠血清FSH水平升高（P <0.05）,E2、AMH水平降低（P <0.05）,实验组小鼠血清E2、AMH水平较模型组升高（P <0.05）,FSH水平降低（P <0.05）。对照组小鼠卵巢组织可见不同发育阶段的卵泡,成熟卵泡位于卵巢的边缘,颗粒细胞规则排列;模型组小鼠卵泡闭锁,颗粒细胞减少、排列紊乱;实验组小鼠闭锁卵泡减少,颗粒细胞有序排列且数目多。Cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax在3组小鼠卵巢组织中均有表达,且以颗粒细胞为主。模型组与对照癌比较,卵巢组织细胞中Bax、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量增加（P <0.05）,Bcl-2蛋白相对表达量减少（P <0.05）;实验组与模型组相比,卵巢组织细胞中Bax、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量减少（P <0.05）,Bcl-2蛋白相对表达量增加（P <0.05）。结论 葛根素可以抑制卵巢组织细胞凋亡,恢复顺铂损伤小鼠卵巢的功能,改善小鼠一般活动。     

特发性卵巢早衰的临床特点分析

摘要：目的探讨特发性卵巢早衰(POF)的临床特点,为早期诊断POF提供依据。方法回顾性分析2009年2月~2010年1
月的39例特发性卵巢早衰患者的临床资料,对月经特点、发病情况、B超结果和妊娠情况等进行研究。结果1例患者为原
发性闭经,38例为继发性闭经,平均闭经5.82±3.88年,2例（5.1%）在月经初潮后有1~2次月经即出现闭经,闭经前月经规
律而突然闭经患者9例(23%),月经紊乱27例(69%),其中3例(7.7%)月经频发,24例(61.5%)患者早期表现月经稀发,逐渐
出现闭经。30岁以前发病的POF患者占87.2%,94.9%患者初潮后15年发病。特发性POF患者的子宫体积、卵巢体积小
于正常组,基础窦卵泡计数(AFC)明显少于对照组,阴道超声检测有35例(89.7%)患者至少探及一侧卵巢,31例(79.5%)患
者有窦卵泡样回声。用阴道B超定期监测有2例患者恢复排卵后自然妊娠,妊娠率5.1%。结论对月经不规律、稀发、频
发患者,应用B超监测子宫体积,卵巢体积和AFC,同时进行激素测定,及早识别是否有POF的可能;使用HRT时积极监
测,必要时辅助生殖技术助孕。     

雷公藤多苷致小鼠卵巢早衰后的自然修复时间探讨

[目的]考察雷公藤多苷造成小鼠卵巢早衰停药后能否自然修复及修复周期。[方法]取健康小鼠25只,采用随机数字表方法取出5只作为正常对照组,其余作为模型对照组,实验小鼠灌胃给雷公藤多苷15 d后,通过外观观察;血清E2、P检测;阴道脱落细胞涂片;子宫、卵巢指数测定等,判断雷公藤多苷对小鼠卵巢的影响及停药后的自然修复情况。[结果]雷公藤多苷片40 mg.kg-1/d灌胃,连续15 d能造成确切的雌性小鼠生殖功能低下状态,具体表现为,模型对照组与正常对照组比较,动情周期出现紊乱,血清雌二醇E2水平明显降低,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05);孕酮P较正常对照组有降低趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);子宫指数、卵巢指数均明显降低(P<0.05)。停药10 d后,模型组小鼠生殖功能呈自行恢复趋势,动情周期、性激素水平基本恢复正常。[结论]雷公藤多苷口服连续灌胃15 d后可造成小鼠卵巢早衰,停药10 d后,卵巢功能即可自然修复。     

从肾论治卵巢早衰

卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)是指40岁以前出现至少4个月以上闭经,并有2次或2次以上血清促卵泡激素(follicle-sti mulating hor-mone,FSH)大于40U/L(2次检查间隔1个月以上),雌二醇(estradiol,E2)水平小于73.2pmol/L[1]。据流行病学统计,POF在40岁之前的发病率为1/100,30岁之前为1/1000,20岁之前为1/10000,且发病率呈逐年上升的趋势[2]。患者常有围绝经期综合征症状,如潮热、盗汗、情绪不稳定、阴道干涩、失眠、性欲减退和不孕等,较早发生的生育力丧失和低雌激素水平已严重威胁妇女生殖健康,同时也增加了妇女罹患骨质疏松…     

卵巢早衰易感基因研究

目前,卵巢早衰的发病机制尚未明确,与遗传、免疫、环境、医源性和不良生活习惯等因素均有关,临床表现复杂,且涉及多个器官。治疗方面,西医主要是采用激素替代疗法;中医药治疗则着眼于辨证论治,并注重防治远期并发症。近年来研究发现,越来越多的候选基因通过影响下丘脑垂体卵巢轴的内分泌信号调控途径,从而导致本病的发生。     

小鼠卵巢早衰动物模型的构建

目的 探讨用化学药物及放射性处理,建立小鼠卵巢早衰动物模型的方法.方法 将80只昆明小鼠分为化学药物处理组、放射组、对照组、去势组.化学药物组使用环磷酰胺和白消安干预,放射组采用60Coγ射线放射.通过观察阴道脱落细胞监测小鼠动情周期变化、雌激素水平、卵巢及子宫内膜组织学改变等指标,判断建模效果.结果 化学药物组、放射组与对照组相比动情期构成比降低、动情间期构成比增加(P<0.01);雌激素水平明显降低(P<0.01),接近去势组水平(P>0.05);两个处理组小鼠均可见卵巢萎缩、生长卵泡数明显减少、间质纤维化;卵巢未闭锁原始卵泡数显著减少(P<0.01),且随建模后时间的延长而呈进一步下降趋势,但化学药物组与放射组各相同时间段之间无明显差异.结论 以化学药物及放射方法能够成功建立小鼠卵巢早衰模型.     

不同治法方药治疗小鼠自身免疫性卵巢功能衰退的比较研究

目的：比较补肾法、活血法、疏肝法对小鼠自身免疫性卵巢功能衰退（premature ovarian failure,POF）的干预作用。方法：以BALB／C雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原。皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立自身免疫性卵巢功能衰退模型。六味地黄丸、少腹逐瘀颗粒及柴胡疏肝丸分别治疗3周后,酶联免疫吸附测定法检测血清雌二醇（estradiol,E2）、卵泡刺激素（follicle—stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、催乳素（prolactin,PRL）、睾酮（testosterone,T）以及抗卵巢抗体和抗透明带抗体。结果：模型组小鼠血清FSH、LH较正常组明显升高,E2显著下降（P〈0．05）,PRL、T含量与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;模型组小鼠抗卵巢抗体阳性率为84．2％,抗透明带抗体阳性率为78．9％。与正常组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。六味地黄丸显著下调小鼠血清FSH、LH水平,提高E2含量（P〈0．05）;而抗卵巢抗体及抗透明带抗体仅有下降趋势,与模型组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。少腹逐瘀颗粒组小鼠血清FSH、LH含量有下降趋势,E2含量稍有升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）;其抗卵巢抗体和抗透明带抗体阳性率与模型组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。柴胡疏肝丸组小鼠抗卵巢抗体和抗透明带抗体阳性率,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。各种治疗对血清PRL和T含量无明显影响。结论：补肾中药可以显著改善自身免疫性卵巢功能衰退小鼠生殖内分泌轴功能,活血及疏肝中药可以调整自身免疫性卵巢功能衰退小鼠体液免疫功能。