乙型肝炎患者外周血各淋巴细胞亚群绝对值的变化及临床意义

目的分析乙型肝炎患者外周血各淋巴细胞亚群的绝对值的变化,以评估乙型肝炎患者机体的免疫水平。方法选取2012年6月至2014年8月在上海交通大学医学院附属新华医院就诊的109例乙型肝炎肝患者作为乙型肝炎组,另选取20例同期体检健康者作为健康对照组。采集所有研究对象的促凝和肝素抗凝外周血,临床检测乙型肝炎病毒(HBV)抗原抗体免疫指标,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA载量,采用流式细胞术检测其外周血各淋巴细胞亚群的百分比与绝对值。并根据乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达水平及HBVDNA载量将患者分为HBeAg阳性组与阴性组,以及HBV-DNA阳性组与阴性组,比较外周血各淋巴细胞亚群绝对值。结果乙型肝炎患者外周血CD3+T细胞、CD4+T辅助细胞(CD4+Th细胞)、CD8+杀伤性T细胞(CD8+Tc细胞)、CD19+B细胞绝对数均低于健康对照组(P0.05),组间CD3-CD16+CD56+自然杀伤性细胞(NK细胞)绝对数比较差异无统计学意义(P0.05)。HBeAg阴性患者外周血CD3+T、CD4+Th、CD8+Tc及CD19+B细胞绝对值均低于HBeAg阳性患者(P0.05),但CD3-CD16+CD56+NK细胞绝对值比较差异无统计学意义(P0.05);HBV-DNA阳性患者CD4+Th细胞绝对值低于HBV-DNA阴性患者(P0.01),其余各淋巴细胞亚群的绝对值比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论乙型肝炎患者外周血淋巴细胞绝对数量的变化可提示其免疫功能的紊乱。     

重型和普通型严重传染性非典型肺炎患者淋巴细胞亚群改变初步分析

目的 研究传染性非典型肺炎(SARS)重型和普通型患者外周血淋巴细胞亚群异常变化，以期完善诊断标准。方法 采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪检测155例SARS患者的外周血淋巴细胞及其亚群的表达情况。结果 普通型组与重型组比较，外周血白细胞、淋巴细胞、CD3 CD4 、CD3 CD4-CD8-、NK、CDl9 CD5 、CD45RA CD4 、CD45RO CD4 、CD28 CD4 、CD28 CD8 、CD28 CD8-、CD95 CD4 等亚群的绝对值差异有显著性，两组均低于健康人，且重型组低于普通型组。结论 SARS患者的大部分淋巴细胞及亚群均受到破坏，以T淋巴细胞功能减低最为显著。外周血淋巴细胞各亚群的绝对值和百分比对于反映SARS患者免疫功能的改变情况均有意义。外周血淋巴细胞各亚群检测有望成为新的SARS实验诊断与监测指标。     

类风湿性关节炎患者淋巴细胞和Treg/Th17平衡的检测及意义

目的通过对类风湿性关节炎(RA)患者外周血的淋巴细胞亚群和调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)的检测,探讨淋巴细胞亚群变化和Treg/Th17平衡与RA疾病的关系。方法采用流式细胞术对65例RA患者(RA组)和67例体检健康者(健康对照组)的外周血中的T、B、NK细胞及Treg、Th17细胞的表型和数量进行检测。结果与健康对照组相比,RA组患者的CD4比例明显增高,差异有统计学意义(P0.01);CD8比例明显降低,差异有统计学意义(P0.01);CD4/CD8比值显著增高,差异有统计学意义(P0.01)。B细胞和NK细胞比例无明显变化;RA患者的T、B、NK细胞绝对计数均比健康对照组低,差异有统计学意义(P0.01)。RA组患者的Treg细胞比例较健康对照组有所下降,差异有统计学意义(P0.05);Th17细胞比例较健康对照组明显上升,差异有统计学意义(P0.01)。结论 RA患者存在淋巴细胞亚群改变和Treg/Th17比例失衡,这些表现可能与RA发病机制相关。     

抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病中的应用价值

目的探讨用间接免疫荧光法(IIF)抗核抗体(ANA)与免疫印迹法(LIA)特异性抗核抗体谱(ANAs)的联合检测在自身免疫性疾病(AID)中的应用价值。方法 436例患者,其中自身免疫病患者271例,非自身免疫病患者165例,所有患者同时检测血清ANA和ANAs,两种检测方法产生4种检出模式:IIF(+)/LIA(+)、IIF(-)/LIA(-)、IIF(+)/LIA(-)和IIF(-)/LIA(+)。结果 436份标本中IIF(+)/LIA(+)占40.15%,IIF(-)/LIA(-)占25.52%,IIF(+)/LIA(-)占15.27%,IIF(-)/LIA(+)占9.81%,IIF与LIA检测ANA的结果总体符合率为65.67%,ANA和ANAs在自身免疫病患者中的阳性率分别是65.3%和57.9%,显著高于非自身免疫病患者的17.6%和20.0%;ANA和ANAs在自身免疫病组和非自身免疫病组间阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两检测结果仅在MCTD和SLE患者中存在相关性(P<0.01),在其他观察组中不存在相关性(P>0.05)。结论 IIF检测ANA容易导致AID患者部分具有临床意义的ANA特异性抗体漏检,而ANAs检测因其测定的抗体数量有限也容易导致AID患者的ANA漏检。IIF-ANA和LIA-ANAs检测不能相互代替,对需要通过检测ANA来排除AID的患者标本应同时进行IIF-ANA和LIF-ANAs的检测,以避免仅采用一种方法进行检测时导致AID患者漏诊。ANA的IIF法易导致以抗-SSA、抗-SSB和抗-Ro52为主要抗体的患者ANA假阴性,而LIA法特异性ANAs的检测因检测的抗体不全面也无法取代ANA的IIF法检测。在临床实际工作中两种ANA的检测方法不能相互取代,应联合应用。     

口腔黏膜病外周血淋巴细胞亚群的观察及分析

目的观察2种常见的口腔黏膜病——复发性阿佛他溃疡(RAU)和口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血淋巴细胞亚群分类的变化,探讨其免疫学发病机制。方法用流式细胞术分析105例RAU患者、70例OLP患者和65名健康对照者的外周血淋巴细胞亚群(总T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+、NK细胞、B细胞),比较各指标的组间差异。结果与健康对照组相比,RAU组总T细胞和CD8+T细胞显著增加(P0.05、P0.01),CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值和B细胞均显著减少(P0.01、P0.001、P0.05);而OLP组与健康对照组相比,CD8+T细胞显著降低(P0.05);RAU组的总T细胞和CD8+T细胞显著高于OLP组(P0.01、P0.001)),而CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值和NK细胞均显著低于OLP组(P0.01、P0.001、P0.05)。结论 RAU和OLP患者多出现外周血淋巴细胞亚群百分率异常,细胞免疫功能紊乱,但二者的免疫状态存在差异,因此针对性的免疫干预将成为一项极具潜力的治疗措施。     

强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群分析

目的 了解强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群变化规律,探讨患者体内的免疫功能状态.方法 采用三色流式细胞学检测技术分析75例患者及50例健康对照的外周血T细胞亚群、B细胞与NK细胞水平,并对其结果进行比较分析.结果 强直性脊柱炎组总T细胞、T4细胞、T8细胞的百分含量依次为(65.74±9.99)%、(35.70±6.92)%和(23.02±5.35)%;T4/T8比值1.70±0.51,总T细胞、T4细胞、T8细胞的绝对含量依次为(1.25±0.63)、(0.47±0.27)和(0.31±0.19)×109/L.B细胞和NK细胞的百分含量分别为(11.84±4.50)%和(15.43±6.28)%;B细胞和NK细胞的绝对含量分别为(0.22±0.15)和(0.27±0.15)×109/L.与健康对照组比较,患者总T细胞、B细胞和NK细胞绝对含量增加(P＜0.01或P＜0.05),但各淋巴细胞亚群的百分含量无明显改变(P>0.05).与腰背痛组、B27+无临床症状组、B27+非强直组比较,各淋巴细胞亚群的百分含量和绝对含量均略有增高,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 强直性脊柱炎患者机体免疫功能存在一定程度的紊乱,且以总T细胞、B细胞、NK细胞功能亢进为特点.临床腰背痛患者、B27+无症状者、B27+非强直患者均表现出与临床强直患者相似的免疫功能紊乱.     

临床就诊患者抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析

目的比较间接免疫荧光法(IIF)筛查抗核抗体(ANA)与线性免疫印迹法(LIA)检测抗核抗体谱(ANAs)特异性抗体结果不一致性,分析二者的相互关系及临床意义。方法采用间接免疫荧光法与线性免疫印迹法对871份血清标本进行抗核抗体检测,检测结果可分为自身免疫病组(AID)和非AID组,并分析结果的相互关系和临床意义。结果IIF法与LIA法检测抗核抗体的阳性率分别为21.01%和15.50%,差异有统计学意义(χ2=12.64,P<0.01),IIF法阳性者中以均质型(34.4％),颗粒型(33.9％)和胞质颗粒型(17.5％ )多见。LIA法中阳性抗体出现较多的是抗SSA,抗Ro-52等。ANA和ANAs在自身AID患者中的阳性率分别是96.4%和73.2%,显著高于非AID患者(13.1%和8.1%);ANA和ANAs在AID组和非AID组间阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论间接免疫荧光法是良好的筛查试验,ANA核型与ANAs相结合对自身免疫性疾病的诊断与鉴别诊断有重要意义;临床诊断中,IIF筛查ANA应与LIA检测ANAs同时进行,以避免单一方法检测导致AID患者的漏诊。     

骨髓增生异常综合征患者细胞及体液免疫功能分析

目的 探讨骨髓增生异常综合征( myelodysplastic syndrome,MDS)患者细胞免疫和体液免疫水平的变化及意义.方法 采用流式细胞术(FCM)检测30例健康志愿者(健康对照组)及31例确诊但未治疗的MDS患者(低危、中危和高危)外周血淋巴细胞亚群,包括CD3+T淋巴细胞及其亚群、CD3 CD19+B淋巴细胞和CD3(CDI6CD56)+自然杀伤(NK)细胞比例.结果 与健康对照组比较,MDS患者的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞总数均明显减低.另外,在T淋巴细胞亚群中,CD3+ CD4+的辅助性T细胞(Th)表达降低,CD3+ CD8+的抑制性T细胞(Ts)表达增高,Th/Ts比值倒置,比例失衡;且随着MDS疾病的进展,Ts细胞的表达逐渐增加,但低危、中危和高危3组间的差异无统计学意义,NK细胞的表达逐渐降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),MDS 3组间T淋巴细胞和Th/Ts比值差异无统计学意义.结论 MDS患者的细胞和体液免疫功能均降低,淋巴细胞亚群检测可用来评估MDS患者免疫功能状态.     

淋巴细胞亚群在新型冠状病毒肺炎患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨淋巴细胞亚群在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者外周血中的表达及临床意义。方法选取2020年1月18日至2月25重庆市长寿区人民医院收治的25例新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测为阳性的患者为研究对象,其中21例有临床症状、确诊为COVID-19的患者为COVID-19组;4例无临床症状但SARS-CoV-2核酸检测为阳性的患者为无症状感染组;选取同期体检的20例健康者为对照组。检测各组淋巴细胞亚群,分析各组不同淋巴细胞水平的差异。结果 21例COVID-19患者中,18例患者的总淋巴细胞计数(Lym#)低于参考区间下限,3例患者的Lym#在正常参考区间内;20例患者的自然杀伤细胞计数(NK#)低于参考区间下限,1例患者的NK#在参考区间内。COVID-19组T淋巴细胞百分比、B淋巴细胞百分比高于对照组(P0.05),NK细胞百分比(NK%)、Lym#、T淋巴细胞计数、CD4~+T淋巴细胞计数、CD8~+T淋巴细胞计数、NK#低于对照组(P0.05)。COVID-19组NK#及NK%低于无症状感染组(P0.05)。结论 COVID-19患者存在淋巴细胞亚群水平异常,其中NK细胞下降显著;COVID-19组、无症状感染组与健康组淋巴细胞亚群水平存在差异,提示淋巴细胞亚群在COVID-19的诊断、病情评估中可能具有一定的临床价值。     

急性白血病患者T、B淋巴细胞的检测与分析

目的:探讨不同类型的急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞等在疾病的不同时期的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测95例初诊白血病患者[急性淋巴细胞白血病(ALL)43例,急性髓系白血病(AML)52例]诱导治疗前后及50例正常对照者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞及Treg细胞百分比。结果:初诊白血病各组CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、NK细胞阳性率和CD4~+/CD8~+比值均明显低于正常对照组(P0.05),治疗后完全缓解患者的上述指标均明显高于治疗前(P0.05)。初诊白血病各组患者Treg细胞阳性率均高于正常对照组(P0.01),AML和ALL治疗组完全缓解患者Treg细胞阳性率较治疗前有所降低(P0.05)。AML初诊组CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于正常对照组(P0.01),ALL初诊组CD3-CD19~+细胞阳性率高于正常对照组(P0.01);治疗后AML组缓解患者CD3-CD19~+细胞阳性率高于治疗前(P0.05),ALL组缓解患者CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于治疗前(P0.01);ALL治疗后未缓解者CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于治疗前(P0.01);ALL治疗后未缓解者的其余各项指标及AML治疗后未缓解者各项指标与治疗前比较无统计学差异。结论:初诊白血病各组T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞的变化明显,完全缓解组的上述指标基本恢复正常,说明T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞水平检测在评价急性白血病严重程度、疗效及判断患者预后有一定的临床价值。     

疟疾患者外周血T淋巴细胞亚群检测及临床意义

目的 探讨疟疾患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法 选取2020年1月～10月期间广州医科大学附属市八医院就诊的49例病人标本,分为疟疾患者组（n=36）和健康对照组（n=13）,采用流式细胞技术检测其外周血T淋巴细胞亚群,比较两组间T淋巴细胞亚群绝对计数与百分比的差异性;将疟疾患者组分为恶性疟组（n=33）与卵形疟组（n=3）,比较两组间T淋巴细胞亚群绝对计数与百分比的差异性;将疟疾患者组分为普通型组（n=30）与重症型组（n=6）,比较两组间T淋巴细胞亚群绝对计数与百分比的差异性;同时比较恶性疟患者治疗前后的T淋巴细胞亚群绝对计数与百分比的差异性。结果 疟疾患者组CD45+(882.21±595.94个/μl),CD3+(636.00±390.84个/μl),CD3+CD4+(363.81±234.90个/μl)和CD3+CD8+(230.92±81.93个/μl)T淋巴细胞绝对计数值均低于健康对照组（2291.15±674.20个/μl,1 680.15±510.72个/μl,934.15±317.80个/μl,615.07±280.14个/μl）,差异具有统计学意义...     

甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和T细胞亚群的变化情况分析

目的了解甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和T细胞亚群的变化情况。方法采用美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞仪检测30例甲型H1N1流感患者及22例健康人外周血NK细胞和T细胞亚群,并进行统计分析。结果甲型H1N1流感患者的NK细胞百分数,CD4+T淋巴细胞绝对数及CD8+T淋巴细胞绝对数与健康组相比有明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);而CD4+/CD8+比值与健康组相比基本无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和淋巴细胞亚群水平存在异常,提示甲型H1N1流感患者免疫功能下降。     

严重急性呼吸综合征患者淋巴细胞及其亚群的表型分析

目的 研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者淋巴细胞及其亚群的表型变化，以期为SARS的诊断治疗提供新的监测指标。方法 采用多色流式细胞术结合血液分析仪测定38例SARS患者外周血淋巴细胞及其亚群的表达情况。结果 84％的患者其淋巴细胞绝对计数降低。各类淋巴细胞亚群[T／B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞]的绝对计数均有不同程度的降低，其中T细胞降低者最多(占95％)；在T细胞中，T辅助／诱导细胞(T4)降低者(100％)高于T抑制／杀伤细胞(T8)(87％)。从各类淋巴细胞分布看，T淋巴细胞百分率下降者最多(占58％)；B细胞和NK细胞百分率以相对正常或升高为主，相对下降者均很少，分别占2．6％和5．3％；在T细胞中，T4细胞的百分率降低者(82％)高于T8细胞降低者(34％)，二者比值降低者占44％。结论 SARS患者的淋巴细胞及其各亚群均受到破坏，以T淋巴细胞受损为主，且T4细胞较T8细胞受损严重；淋巴细胞亚群的绝对计数变化较相对计数更明显。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症淋巴细胞亚群数量异常与GPI蛋 …

目的 分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者外周血淋巴细胞亚群数量及Ｔ、Ｂ淋巴细胞和ＮＫ细胞表面糖基磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）蛋白表达情况,以期能深入探讨ＰＮＨ的本质。方法 ＰＮＨ患者共１５例,采用双色和三色荧光标记的单克隆抗体在流式细胞仪上分析淋巴细胞亚群分类计数和测定Ｔ、Ｂ淋巴细胞和ＮＫ细胞表面ＣＤ４８、ＣＤ５５、ＣＤ５９抗原。结果 １５例患者均有不同程度的淋巴细胞亚群数量异常,以Ｂ淋巴细胞和Ｎ     

骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群的特征分析

目的：检测和分析骨髓增生异常综合征（M DS）患者T淋巴细胞亚群的分布,评估M DS患者免疫功能状态。方法：采用FC 500流式细胞仪对35例M DS患者和10例正常对照组外周血标本进行T淋巴细胞亚群检测。结果：M DS组的辅助性细胞T细胞（T h）,辅助性细胞T细胞/抑制性T细胞（T h/T s）和自然杀伤细胞（NK）的表达均低于正常对照组,T s细胞的表达高于正常对照组;随着M DS疾病的进展,抑制性T细胞（T s）的表达是逐渐增加的,其中只有RA/RA S组与RAEB组之间差异有显著性（P=0.027）;M DS患者各组间T h,T h/T s比值和NK细胞的表达均无差异性。结论：T h,T s和NK细胞参与人体重要免疫功能,T淋巴细胞亚群免疫失调,则导致细胞免疫功能紊乱,T h,T s和T h/T s比值成为监测人体免疫功能、反映机体免疫状态的重要指标。     

Seasonal modulation of the circadian time structure of circulating T and natural killer lymphocyte subsets from healthy subjects.

A seasonal modulation of the circadian time structure of circulating T and natural killer (NK) lymphocyte subtypes was documented in five healthy men aged 24-36 yr. Venous blood was obtained every 4 h for 24 h from each subject in January, March, June, August, and November 1984. Three subjects were also studied in April and/or August and/or November 1983 for the T subsets only. Mononuclear cells were isolated on Ficoll-Paque gradient and aliquots were incubated with OKT3, OKT4, OKT8, or HNK-1 monoclonal antibodies for characterizing all, T, T helper, T suppressor-cytotoxic, and NK lymphocytes, respectively, under an epifluorescence microscope. An effect of both sampling time and study month was statistically validated (P less than 0.01) with both two-way analysis of variance and cosinor for the peripheral counts in total, pan-T, T helper, and NK lymphocytes (cells per cubic millimeter). Seasonal changes affected both the circadian patterns and the 24-h mean values. Thus the double amplitude (total extent of variation) of the circadian rhythm in circulating total, T and T helper lymphocytes varied between 0 in March (P greater than 0.30; no rhythm) and up to 46-68% of the 24-h-mean (M) in November, with acrophases (times of maximum, 0) localized in the first half of the night (P less than 0.001). Maximal values were found at 8:30 h for both T suppressor-cytotoxic and NK lymphocytes; a smaller second peak was also found at 20:30 h, and a 12-h rhythm was validated by cosinor (P less than 0.0001), with no patient change in waveform along the year scale. A circannual rhythm was statistically validated by cosinor for total (0 in November), pan-T (0 in March), T suppressor-cytotoxic (0 in December), and NK lymphocytes (0 in October). A rhythm with a period equal to 6 mo was found for circulating T helper cells with 0 occurring both in April and October. Seasonal variations in the incidence of several immunologically related diseases may correspond to an endogenous circannual time structure.     

抗核抗体及特异性自身抗体检测结果的应用分析

目的探讨间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体(ANA)及线性免疫印迹法(LIA)检测特异性自身抗体在自身免疫性疾病(AID)诊断中的应用价值。方法 1 386例患者标本同时采用IIF法检测ANA和用LIA法检测特异性自身抗体,结合临床诊断将患者分为AID组和非AID组,将两种方法检测结果进行比较分析。结果 IIF和LIA诊断AID的灵敏度分别为83.02%和60.38%,特异度分别为65.87%和84.13%,两者联合检测诊断AID的灵敏度和特异度分别为83.73%和94.58%,阴性预期值为85.22%;在222例IIF与LIA结果不一致的AID患者中,有129例诊断为类风湿性关节炎(RA),其中结果为IIF(+)LIA(-)的,诊断为RA的114例,占62.30%;结果为IIF(-)LIA(+)的,诊断为RA的15例,占38.46%,其次诊断为多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)的占30.77%,没有诊断为系统性红斑狼疮的病例。结论 IIF和LIA联合检测,可提高AID诊断的特异性和准确性,且对排除AID诊断是有一定意义的。当两种检测结果不一致时,应根据患者临床症状,作进一步相关检查,以便明确诊断。