肾祖细胞与肾脏病

肾祖细胞( Renal ProgenitorCe1ls,RPCs)因其具有多向分化潜能和无限增殖、修复能力,可定向分化为肾小管上皮细胞,参与肾小管结构的重组以及生理功能的维持,在急性肾损伤和缺血再灌注损伤的修复过程中具有重要作用.本文就RPCs的起源、特征及其在AKI、IRI、肾纤维化中的研究进展综述.     

内皮祖细胞在急性肾脏损伤中的研究进展

内皮祖细胞(EPCs)作为一种重要的成体干细胞,在病理条件下可定向归巢至损伤组织或器官,参与血管新生和内皮修复,有望成为一种治疗急性肾损伤(AKI)的新方法.     

成体骨髓干细胞在肾脏疾病中的研究

成体骨髓干细胞(adult bone marrow stem cell)具有多向分化潜能,在再生医学的应用研究中具有广阔的前景.本文就骨髓干细胞在肾组织中的分化、与肾脏疾病的关系、在肾脏疾病治疗中的作用及可能机制作一综述.     

间充质干细胞在肾纤维化中的研究

随着肾脏疾病的进展,肾脏不可避免的出现纤维化,最终导致终末期肾病.虽然肾移植是治疗终末期肾脏病的有效措施,但肾源的不足及免疫排斥反应限制了肾移植的应用,为了克服这些问题,需要寻找一种新的治疗措施.间充质干细胞是目前广泛关注的一种成体干细胞,伴随着再生医学及间充质干细胞生物学特性的研究进展,有可能从间充质干细胞的角度找到治疗肾纤维化的理想措施.     

间充质干细胞在急性肾损伤中的研究进展

间充质干细胞是当前干细胞研究的热点之一,具有取材方便、分离培养纯度高、低免疫原性、多向分化能力和旁分泌的功能等优点,近年来,许多研究报道证实间充质干细胞可以治疗急性肾损伤,因此,本文对间充质干细胞在急性肾损伤中的应用作一综述.     

间充质干细胞在急性肾损伤修复中作用

动物体内本身就存在干细胞,并且参与肾损伤修复,理论上,外源性干细胞的作用机制应该与其类似,很有可能是加强体内干细胞的修复作用,但目前尚未有证据证实这一点或明确指出具体机制.本文就间充质干细胞在急性肾损伤后修复中作用的研究进展作一综述.     

骨髓干细胞促进肾细胞癌生长的研究进展

BMSCs是新生血管内皮祖细胞的来源,BMSCs中的EPC募集到瘤灶中参与新生血管和转移微环境的形成促进肿瘤的生长转移,SDF-1/CXCR4是EPC被募集迁徙的主要机制;同理推测,肾癌组织中的CD133+祖细胞可能来源于BMSCs或者是血管的内皮祖细胞(EPC).肾癌中CD133+祖细胞与骨髓中VEGFR1+和VEGFR2+BMSCs可能是用不同表面标志鉴别的相同亚群.肾细胞癌HIF的高表达可能是肾癌富含血管和生长转移的主要始动原因.这些推测有待于进一步的实验证实.     

干细胞治疗与肾脏病研究

干细胞是一类可以自我更新、多向分化和高度增殖的细胞。由于干细胞的可塑性、无限扩增性、便于遗传操作等优势,干细胞疗法为现代医学提供了一个新的治疗途径。近年来干细胞治疗在肝病、肿瘤疾病、血液疾病等各个研究领域逐步发展和广泛应用,同样也为肾脏疾病治疗学的研究带来了新的契机。故本文针对干细胞生物学基础、干细胞治疗与肾脏病研究及其目前所面临的主要问题等方面作一综述。     

骨髓间质干细胞在肾脏疾病中的研究进展

骨髓间质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，MSC）是目前备受关注的一类具有多向分化潜能的组织干细胞，体外培养的MSC已被广泛应用于多个研究领域。本文就MSC一般的特性、功能及其对于肾脏的作用机制研究及目前在各种肾脏疾病中的应用研究作一综述。     

干细胞与肾脏修复

目前,对于慢件肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD),肾脏移植和维持透析仍是最基本的治疗手段.干细胞疗法为现代医学提供了一个新的途径,同时也为肾脏疾病的治疗提供的新的契机.本文就各类十细胞在肾脏病研究中的应用作一综述.     

Hematopoietic stem cells contribute to the regeneration of renal tubules after renal ischemia-reperfusion injury in mice

Ischemia-reperfusion injury (I/R injury) is a common cause of acute renal failure. Recovery from I/R injury requires renal tubular regeneration. Hematopoietic stem cells (HSC) have been shown to be capable of differentiating into hepatocytes, cardiac myocytes, gastrointestinal epithelial cells, and vascular endothelial cells during tissue repair. The current study tested the hypothesis that murine HSC can contribute to the regeneration of renal tubular epithelial cells after I/R injury. HSC isolated from male Rosa26 mice that express beta-galactosidase constitutively were transplanted into female nontransgenic mice after unilateral renal I/R injury. Four weeks after HSC transplantation, beta-galactosidase-positive cells were detected in renal tubules of the recipients by X-Gal staining. PCR analysis of the male-specific Sry gene and Y chromosome fluorescence in situ hybridization confirmed the presence of male-derived cells in the kidneys of female recipients. Antibody co-staining showed that beta-galactosidase was primarily expressed in renal proximal tubules. This is the first report to show that HSC can differentiate into renal tubular cells after I/R injury. Because of their availability, HSC may be useful for cell replacement therapy of acute renal failure.     

放射性损伤对骨髓来源干细胞分化为实体细胞的影响

目的 观察骨髓来源干细胞(BMDSCs)能否在体分化为其他实体组织细胞.方法 野生型C57BL/6J雌性小鼠作为受体接受10 Gy的射线照射后,经尾静脉植入同等背景的转增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的C57BL/6J雄性小鼠(绿鼠)骨髓细胞1×107个/只.移植受体稳定1年后检测各组织中EGFP的表达.结果 野生型小鼠各组织中EGFP的表达为0%,绿鼠各组织中EGFP的表达为100%.受体鼠各组织均有EGFP阳性细胞分布,表达率为100%,与野生型比较差异有统计学意义(P<0.01),但是表达强度均低于绿鼠组.EGFP阳性细胞主要存在于皮肤组织角质形成细胞、毛囊上皮,以及肺间质、支气管上皮、肺泡上皮中.结论 BMDSCs能在体内分化为其他实体细胞,并有组织特异性.     

骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注肾损伤的保护作用

目的探讨外源性骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注肾损伤的可能保护作用。方法取SD雄性大鼠骨髓,梯度离心法分离MSCs,采用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记。32只雌性SD大鼠建立缺血再灌注肾损伤模型后随机分为移植组和对照组,移植组于缺血45min后经下腔静脉注入用DAPI标记的MSCs,对照组注入等量生理盐水。术后每天经腹腔注射5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU),并分别于术后1、2、3、4d处死大鼠,留取血标本,观察血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平。留取肾组织,荧光显微镜及免疫组化染色方法观察移植MSCs在肾组织中的分布及肾细胞增殖状况,并采用蓖麻血凝素(RCA)对迁移入肾脏的MSCs分化状况进行鉴定。结果术后第1、2天,移植组大鼠血清BUN水平(31.93±1.49、19.58±1.58mmol/L)明显低于对照组(41.03±2.14、26.45±1.74mmol/L,P<0.05);第3、4天2组间BUN水平差异无统计学意义(P>0.05);第1、2、3天移植组大鼠血清Cr水平(77.47±4.77、57.45±2.41、44.93±3.97μmol/L)均显著低于对照组(102.37±3.59、67.50±2.92、53.25±2.73μmol/L),差异有统计学意义(P<0.05)。细胞增殖状况:术后第1天偶见BrdU阳性细胞,第2天2组大鼠肾组织中均可见较多BrdU阳性细胞,并随时间延长阳性细胞逐渐增多,且移植组阳性细胞数(33.71±8.50、57.60±4.88、116.29±6.99)明显多于对照组(19.67±5.20、26.88±5.89、71.71±8.44),差异有统计学意义(P<0.05)。移植组术后第3天肾组织内可见DAPI标记细胞,第4天DAPI标记细胞明显增多,且多数标记细胞能结合RCA。结论移植的外源性骨髓MSCs能够迁移、定居于缺血再灌注损伤后的肾组织中并分化为肾小管上皮细胞;MSCs移植可促进损伤肾组织的细胞再生,对缺血再灌注肾损伤具有一定的保护作用。     

Ang-1基因转染的内皮祖细胞移植对大鼠肾脏缺血再灌注后的保护作用

目的 评估Ang-1基因转染的内源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植治疗肾脏缺血再灌注损伤的作用,进一步完善EPCs对缺血肾脏产生保护作用的旁分泌机制.方法利用重组腺病毒载体Ad-Ang-1感染EPCs,并进行转染效率鉴定,进一步移植治疗大鼠缺血肾脏,术后72 h给予肾功能评估,并检测大鼠缺血肾脏中VEGF、Ang-1以及Ang-2表达情况.结果EPCs移植治疗后,大鼠肾脏功能明显改善,术后72 h检测大鼠患肾,其内VEGF、Ang-1以及Ang-2表达均明显提升.结论 Ang-1基因转染的EPCs移植治疗可以有效地治疗大鼠肾脏IRI,其作用机制可能与EPC归巢后旁分泌过量Ang-1相关,并且促使肾脏血管新生.     

人脐带间充质干细胞改善小鼠下肢缺血机制的代谢组学分析

背景与目的：外周血管疾病（PAD）是因各种原因所致血流灌注不足而引发的疾病,部分患者无法手术。近年来,干细胞移植开始应用于PAD的治疗,并取得了一定的效果。然而目前尚未见其作用机制涉及代谢方面的研究。因此,本研究利用液相色谱-质谱（LC-MS）代谢组学初步探讨人脐带间充质干细胞（HUCMSC）促进下肢缺血组织修复中所涉及的代谢通路与代谢分子,并重点分析酸性鞘磷脂酶（ASM）-神经酰胺（Cer）代谢途径的变化。方法：从人脐带组织中分离获得HUCMSC,培养扩增后用流式细胞术鉴定其表面分子标记。8周龄雄性小鼠（C57BL/6J）采用结扎并离断其左侧下肢股动脉、股静脉的方法制备下肢缺血模型,将造模后的小鼠随机均分为两组,分别于缺血侧下肢局部注射HUCMSC混悬液（HUCMSC组）与PBS （对照组）。分别在术后3、7、14 d,取两组小鼠缺血侧腓肠肌组织,行HE染色与Masson染色,观察两组小鼠缺血肌肉的形态学变化;行LC-MS检测,并结合KEGG数据库分析,比较两组肌肉组织的代谢组学差异。结果：分离获得的HUCMSC高表达CD105、CD90、CD73,低表达HLA-DR、CD14、CD...     

肾皮质大部分切除与肾缺血再灌注损伤对大鼠肾干、祖细胞的影响及其对肾损伤预后的意义

目的 比较肾皮质大部分切除与肾缺血再灌注损伤对大鼠肾干、祖细胞的影响,探讨肾干、祖细胞在肾脏损伤修复中的意义及急性肾衰竭（AFR）和慢性肾衰竭（CRF）预后不同的可能机制。 方法 肾动脉结扎再灌注和5/6肾皮质切除术（假手术为对照）分别制作SD大鼠ARF和CRF模型,定期监测血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白量。于设定时间采集肾脏标本,HE染色检查病理改变,免疫荧光检测肾鲍曼囊区CD24、CD133及肾小球podocin表达;RT-PCR检测大鼠肾皮质区podocin mRNA表达和肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、Notch2、肝细胞生长因子（HGF）、成骨蛋白7（BMP7）和Pax-2 mRNA表达。分析5/6肾皮质切除术后Pax-2 mRNA表达量与podocin mRNA表达量及肾小球硬化指数（GSI）的相关性。 结果 两种模型大鼠分别出现急、慢性肾衰竭的典型肾脏病理及功能变化。CRF组随时间延长肾小球硬化指数逐渐升高,于术后第14、30、60、90天分别为（2.34±0.28）%、（25.12±5.67）%、（89.42±12.28）%和（171.23±32.28）%。与假手术组比较,ARF组不同时间点大鼠鲍曼囊区CD24+CD133+表达细胞分布无显著变化,而CRF组大鼠鲍曼囊区CD24+CD133+表达细胞逐渐减弱;ARF组肾小球podocin表达有短暂减少后迅速恢复,而CRF组肾小球podocin表达则进行性减少。与假手术组相比,ARF组HGF、BMP7 mRNA表达升高（P ＜ 0.05）,而CRF组TGF-β1、Notch2 mRNA表达升高（P ＜ 0.05）,Pax-2和podocin mRNA表达均进行性减少（P ＜ 0.05）。后两者呈正相关（r = 0.872）,且均与GSI呈负相关（r = -0.906、-0.872,均P ＜ 0.05）。 结论 肾脏缺血再灌注损伤对大鼠肾干、祖细胞无明显损伤,足细胞修复迅速,肾脏结构及功能完全恢复。肾皮质大部分切除引起大鼠肾干、祖细胞所处环境中生长抑制因子水平上调,促生长因子降低,导致肾干、祖细胞逐渐减损,足细胞修复缺陷,肾小球硬化及肾功能进行性衰竭。两种肾损伤对肾脏干、祖细胞的不同影响及由此产生肾脏再生修复功能的差异可能是其预后不同的主要机制。     

热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤后肾功能的影响

目的 探讨热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾功能的影响及与肾脏损伤分子1(KIM-1)的关系.方法 选取雄性C57BL/6小鼠36只,异氟烷吸入麻醉下阻断双侧肾蒂血管,建立双侧肾脏IRI模型.根据肾缺血时间将小鼠分为四组,即假手术组(Sham组)、阻断28 min组(28 Min组)、30 min组(30...     

Insights into the role of bone marrow-derived stem cells in renal repair

Acute kidney injury (AKI) is a frequent clinical problem with a high mortality rate, generally caused by ischemic insults. Nevertheless, the kidney has a remarkably high capacity to regenerate after ischemic injury. Tubular cells can restore renal function by proliferation and dedifferentiation into a mesenchymal cell type, but also stem cells residing in bone marrow may contribute. We compiled a protocol from several published methods to study the contribution of bone marrow-derived cells to renal regeneration. Bone marrow was isolated from donor FVB mice and labeled with enhanced green fluorescent protein (eGFP) through adenovirus transduction. After cell sorting, eGFP-labeled cells were transplanted in sublethally irradiated recipient FVB mice. Four weeks after transplantation, we provoked AKI in mice by inducing unilateral ischemic-reperfusion injury for 30 min. Seven days after the injury, eGFP-positive bone marrow-derived cells were clearly detectable in ischemic kidney tissue, and they contribute to the regeneration of approximately 10% of proximal tubular mass. In this review the advantages and shortcomings of our procedure are critically discussed and compared with other methods described.     

骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的实验研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs)分化为肉芽组织中血管内皮细胞的可能性。及其参与创面修复的可能机制。方法：抽取小型香猪的骨髓，经密度梯度离心分离、纯化MSCs，体外培养扩增后，应用溴脱氧尿嘧啶（BrdU)标记技术标记细胞。于已抽取骨髓的小型香猪背部制作全层皮肤缺损创面，即刻以纤维蛋白胶为载体，将已标记的MSC回植到供体动物创面上。术后2、4、6、8、12周切取创面组织，行BrdU和因子Ⅷ（FⅧ）免疫组织化学染色，进行对比观察。结果：BrdU阳性的MSCs多聚集在创面肉芽组织中的小血管周围，且有个别血管内皮细胞也呈现BrdU 阳性。部分BrdU阳性的MSCs胞浆中亦有FⅧ表达。结论：创面愈合过程中，MSCs与肉芽组织中小血管的形成密切相关。在创面微环境下，MSCs可分化为血管内皮细胞，并参与创面修复。     

Dynamic of distribution of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells after transplantation into adult unconditioned mice

BACKGROUND: The use of mesenchymal stem cells (MSC) for cell therapy relies on their capacity to engraft and survive long-term in the appropriate target tissue(s). Animal models have demonstrated that the syngeneic or xenogeneic transplantation of MSC results in donor engraftment into the bone marrow and other tissues of conditioned recipients. However, there are no reliable data showing the fate of human MSC infused into conditioned or unconditioned adult recipients. METHODS: In the present study, the authors investigated, by using imaging, polymerase chain reaction (PCR), and in situ hybridization, the biodistribution of human bone marrow-derived MSC after intravenous infusion into unconditioned adult nude mice. RESULTS: As assessed by imaging (gamma camera), PCR, and in situ hybridization analysis, the authors' results demonstrate the presence of human MSC in bone marrow, spleen, and mesenchymal tissues of recipient mice. CONCLUSIONS: These results suggest that human MSC transplantation into unconditioned recipients represents an option for providing cellular therapy and avoids the complications associated with drugs or radiation conditioning.