芹菜素纳米乳对肝纤维化的治疗作用

目的 研究芹菜素纳米乳对肝纤维化大鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步研究.方法 采用四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝纤维化模型,90只SD大鼠经适应性饲养1周后,随机分为6组,每组15只.正常组以2 mL/kg橄榄油皮下注射;模型组以25％CCl4橄榄油为造模剂,按2 mL/kg皮下注射;治疗组分3组,在皮下注射25％CCl4橄榄油的同时灌胃给予芹菜素纳米乳25、50、100 mg/kg,1次/d;阳性对照组给予造模剂的同时给予水飞蓟宾100 mg/kg.每周造模2次(间隔2d),连续8周.末次给药后24 h,取大鼠血清和肝脏,观察芹菜素纳米乳对大鼠血清肝功能指标ALT和AST,肝纤维化指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和肝组织中丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),转化因子-β1(TGF-β1)、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.结果 芹菜素纳米乳能显著降低ALT、AST、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平(F=13.851、6.877、5.352、7.469、20.874,P均＜0.01),升高SOD和GSH-PX活性,降低Hyp含量(F=5.470、20.734、195.76,P均＜0.01),显著降低TIMP-1、TGF-β1和α-SMA的表达(F=82.281、72.359和91.226,P＜0.01).结论 芹菜素纳米乳对CC14致肝纤维化大鼠具有一定的治疗作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化反应、影响TGF-β1、TIMP-1、α-SMA表达有关.     

Effects of genistein and folic acid on neuronal membrane and mitochondrial membrane damaged by β-amyloid peptides 31-35

Objective To observe the neuro-protective effects of genistein (Gen) and folic acid (FA) on neurons membrane and mitochondrial membrane damaged by β-amyloid peptides 31-35 (Aβ31-35).Methods The primary cultured rat cerebral cortical neurons were randomly divided into DMEM(control) ,Aβ31-35 (25 μmol/L) ,Gen( Gen 27 μg/ml) ,FA( FA 40 μg/ml) and Gen + FA( Gen 27 μg/ml + FA 40 μg/ml).Gen and/or FA were added two hours before Aβ31-35 addition.After twenty four hours, MTT assay was performed to measure the viability of cultured neurons.Fluorescence polarization was performed to observe the neuron cell membrane fluidity.The mitochondrial membrane potential(MMP) was determined to investigate the alteration of mitochondrial structure and function of neurons by laser scanning confocal microscope and a flow cytometer was used to investigate the activation of mitochondrial permeability transition pore (MPTP).Each experiment was repeated three times.Results Compared with group Aβ31-35 (0.845 ± 0.050, F = 4.931, P ＜ 0.05 ＝, the absorbance was significantly higher in group Gen (0.982 ± 0.110, t=3.523,P＜0.01＝,FA (0.947 ±0.061,t=2.745,P＜0.01＝ and Gen+ FA (0.996 ± 0.090, t = 3.966, P ＜ 0.01 ＝.The viscosity of cell neuron membrane in group Gen ( 1.75 ± 0.28,t=2.085,P＜0.05＝,FA (1.66±0.37,t=2.357,P＜0.05＝ andGen + FA (1.50±0.20,t=3.784,P ＜ 0.05 ＝ was significantly lower than that in group Aβ31-35 (2.11 ± 0.44, F = 5.529, P ＜ 0.01 ＝, which indicated the cell membrane fluidity was significantly higher in group Gen and/or FA than that in group Aβ31-35.MMP was significantly decreased by Aβ31-35 (3.364 ± 1.140, t= 3.949, P＜ 0.01 ＝ when comparing to control group (6.383 ± 1.683) ,while it was significantly increased by Gen (5.286 ± 1.792,t=2.406,P＜0.05＝,FA (5.884±2.022,t=2.887,P＜0.01＝ and Gen + FA (6.120 ±2.124,t=3.304,P ＜ 0.01 ＝ when comparing to group Aβ31-35 ( F = 7.585, P ＜ 0.01 ＝.MPTP was activated by Aβ31-35 and Gen and/or FA could reverse this progress.Conclusion Gen and/or FA could protect the neuronal and mitochondrial membrane from the impairment induced by Aβ31-35.     

Effects of genistein and folic acid on neuronal membrane and mitochondrial membrane damaged by β-amyloid peptides 31-35

Objective To observe the neuro-protective effects of genistein (Gen) and folic acid (FA) on neurons membrane and mitochondrial membrane damaged by β-amyloid peptides 31-35 (Aβ31-35).Methods The primary cultured rat cerebral cortical neurons were randomly divided into DMEM(control) ,Aβ31-35 (25 μmol/L) ,Gen( Gen 27 μg/ml) ,FA( FA 40 μg/ml) and Gen + FA( Gen 27 μg/ml + FA 40 μg/ml).Gen and/or FA were added two hours before Aβ31-35 addition.After twenty four hours, MTT assay was performed to measure the viability of cultured neurons.Fluorescence polarization was performed to observe the neuron cell membrane fluidity.The mitochondrial membrane potential(MMP) was determined to investigate the alteration of mitochondrial structure and function of neurons by laser scanning confocal microscope and a flow cytometer was used to investigate the activation of mitochondrial permeability transition pore (MPTP).Each experiment was repeated three times.Results Compared with group Aβ31-35 (0.845 ± 0.050, F = 4.931, P ＜ 0.05 ＝, the absorbance was significantly higher in group Gen (0.982 ± 0.110, t=3.523,P＜0.01＝,FA (0.947 ±0.061,t=2.745,P＜0.01＝ and Gen+ FA (0.996 ± 0.090, t = 3.966, P ＜ 0.01 ＝.The viscosity of cell neuron membrane in group Gen ( 1.75 ± 0.28,t=2.085,P＜0.05＝,FA (1.66±0.37,t=2.357,P＜0.05＝ andGen + FA (1.50±0.20,t=3.784,P ＜ 0.05 ＝ was significantly lower than that in group Aβ31-35 (2.11 ± 0.44, F = 5.529, P ＜ 0.01 ＝, which indicated the cell membrane fluidity was significantly higher in group Gen and/or FA than that in group Aβ31-35.MMP was significantly decreased by Aβ31-35 (3.364 ± 1.140, t= 3.949, P＜ 0.01 ＝ when comparing to control group (6.383 ± 1.683) ,while it was significantly increased by Gen (5.286 ± 1.792,t=2.406,P＜0.05＝,FA (5.884±2.022,t=2.887,P＜0.01＝ and Gen + FA (6.120 ±2.124,t=3.304,P ＜ 0.01 ＝ when comparing to group Aβ31-35 ( F = 7.585, P ＜ 0.01 ＝.MPTP was activated by Aβ31-35 and Gen and/or FA could reverse this progress.Conclusion Gen and/or FA could protect the neuronal and mitochondrial membrane from the impairment induced by Aβ31-35.     

哺乳期过度营养对大鼠血压及血管内皮舒张功能的影响

目的　观察出生后过度营养及高脂饮食对大鼠血压的影响，探讨哺乳期及早期持续过度营养导致高血压发生发展的病理生理机制。方法　应用小窝鼠模型，SD大鼠雄仔出生3 d后按随机数字表法分为哺乳期正常营养组（10只/窝）和哺乳期过度营养组（3只/窝）。3周断乳后，再分别按随机数字表法完全随机分组给予标准饲料和高脂饲料至16周；共分为4组：正常营养组、哺乳期过度营养组、断乳后过度营养组、持续过度营养组。每周监测体质量，于3、16周测定大鼠内脏脂肪质量、收缩压及心率。取大鼠胸主动脉行血管内皮舒张功能测定。HE染色观察血管组织形态，硝酸还原法检测血管组织中一氧化氮，实时定量-PCR测定血管内皮型一氧化氮合酶（eNOS）mRNA表达，Western blot法检测其总蛋白及磷酸化蛋白表达水平。结果　出生后3周哺乳期过度营养组大鼠体质量［（77.80±0.57）g 比 （62.80±0.85）g，t=14.576, P＜0.01］、脂肪质量［腹膜后：（8.19±0.49） mg/g 比 (4.92±0.31)mg/g, t=5.629, P＜0.01; 生殖周：(3.50±0.29)mg/g比(2.08±0.13)mg/g, t=4.552,P＜0.01］显著高于正常营养组大鼠;血管组织中磷酸化-eNOS的蛋白表达明显下降并持续到16周（F=15.215, P＜0.01）；断乳后高脂喂养增加哺乳期过度营养组大鼠体质量、脂肪质量。至16周时，持续过度营养组出现高血压［（149±1.94） mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），F=22.834, P＜0.01］、血管内皮舒张功能受损（F=7.648， P＜0.05）及磷酸化-eNOS的蛋白表达下降（F=15.215, P＜0.01），而断乳后过度营养组仅出现血压改变。结论　哺乳期过度营养断乳后高脂饮食可导致高血压，血管组织磷酸化eNOS表达的持续下降可能是哺乳期过度营养诱导成年期血管内皮舒张功能紊乱发生的重要分子机制。     

低水平丙氨酸转氨酶慢性乙型肝炎病毒感染者肝组织学改变的危险因素分析

目的 了解低水平ALT慢性HBV感染者肝组织学改变的危险因素.方法 将2014年1月至2016年9月在浙江省人民医院行肝组织活检且ALT低于2倍正常上限值(ULN)的慢性HBV感染患者共321例纳入研究,根据肝脏组织学病变程度,分为有显著组织学改变组(217例)和无显著组织学改变组(104例),分析比较两组的性别、年龄、WBC、肝功能、HBeAg、HBV DNA等临床资料水平.通过Logistic回归筛选变量,建立回归模型,并绘制ROC曲线.结果 无显著组织学改变组的年龄为(35.14±9.35)岁,ALT、AST、γ-GT的中位数分别为29.00、25.00、19.00 U/L,均明显低于有显著组织学改变组(t=-3.214,P＜0.01;Z=-2.269,P＜0.05;Z=-4.596,P＜0.01;Z=-2.810,P＜0.01),而PLT为(197.09±64.44)×109/L,ALB、HBV DNA的中位数分别为45.25 g/L、5.16 lgIU/mL,高于有显著组织学改变组(t=2.777,P＜0.01;Z=3.148,P＜0.01;Z=2.387,P＜0.05).多因素分析显示,AST(OR=1.071,95％CI=1.043～1.100)、HBV DNA(OR=0.828,95％CI=0.743～0.923)两项因素可能与肝脏组织学改变有关.预测概率P绘制的ROC曲线下面积为0.714,诊断敏感性和特异性分别为63.13％和70.19％.结论 对于低水平ALT的HBV慢性感染者,AST和HBV DNA是肝脏组织学改变的独立危险因素.     

白细胞介素-33在成人麻疹患者中的表达及意义

目的 探讨成人麻疹患者血清IL-33水平与临床生化及炎症指标的相关性.方法 选取成人麻疹并肝损害患者36例为麻疹肝损组,麻疹无肝损害患者28例为麻疹无肝损组,健康体检人群20例为健康对照组,于治疗前、治疗第7和第14天分别测定入组麻疹患者血清IL-33及主要肝功能指标及炎症指标.结果 治疗前,麻疹肝损组、麻疹无肝损组和健康对照组血清IL-33水平分别为(185.20±19.44) pg/mL、(168.70±18.14) pg/mL、(132.17±12.41) pg/mL,三组间差异有统计学意义(F=13.17,P＜0.05);两组麻疹患者IL-33水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(t=15.43、10.59,P＜0.05).经治疗,麻疹肝损组患者不同检测时间点IL-33水平差异有统计学意义(F=10.82,P＜0.05),逐步下降,至治疗第14天与健康对照组间差异无统计学意义(t=2.05,P＞0.05).相关分析提示IL-33与ALT、γ谷氨酰氨基转移酶、IL-6呈正相关(r=0.332 8、0.200 3和0.597 2,P均＜0.01).结论 血清IL-33在麻疹中高表达,其动态变化能够反映肝脏炎症的程度及转归.     

肠道屏障功能测定方法的相关性

目的　研究测定肠道黏膜屏障功能的几种方法及评价不同方法之间的相关性。 方法　16只无特定病原体动物（SPF）级雄性SD大鼠,随机分为对照组(Control)和缺血/再灌注(I/R)组,每组8只。适应性饲养5 d后,I/R组大鼠进行肠道缺血60 min,Control组只开腹60 min,然后继续饲养1 d后取材。检测两组血浆二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LAC）、内毒素、谷氨酰胺（Gln）的浓度,观察小肠黏膜形态学。术前1 d和术后1 d分别测定肠道通透性乳果糖/甘露醇（L/M）。结果　I/R组血浆DAO、D-LAC和内毒素水平显著高于Control组［DAO：（0.498±0.032）U/ml比（0.247±0.051）U/ml,t=-11.790,P=0.000;D-LAC：（5.47±1.55）mg/L比(3.83±0.63)mg/L,t=-2.757,P=0.022;内毒素：(0.039 5±0.002 8)EU/ml比 （0.025 6±0.004 5）EU/ml,t=-7.377,P=0.000］;血浆Gln浓度显著低于Control组,为（646.12±34.75）μmol/L比（839.13±163.76）μmol/L（t=3.261,P=0.012);I/R组术后1 d L/M值明显高于术前1 d,为3.63±2.09比1.22±0.66（t=-3.118,P=0.013）。术后I/R组的空肠黏膜厚度、空肠绒毛高度、回肠黏膜厚度和回肠绒毛高度明显低于Control组,分别为（329.80±64.68） μm比（512.82±38.41）μm（t=6.881,P=0.000）,（ 253.06±69.33）μm比（386.79±56.39）μm（t=4.232,P=0.001）,（205.89±18.71）μm 比（335.29±27.71）μm（t=10.945, P=0.000）,（135.61±22.30）μm 比（253.18±31.02）μm（t=8.705,P=0.000）。I/R组肠道缺血/再灌注后血浆DAO、D-LAC、内毒素及L/M均增高,DAO与D-LAC（r=0.971,P＜0.01）、内毒素（r=0.915,P＜0.01）及L/M（r=0.957,P＜0.01）相互之间呈正相关;缺血/再灌注后血浆Gln浓度降低,与DAO（r=－0.964,P＜0.01）、D-LAC（r=－0.966,P＜0.01）、内毒素（r=－0.927,P＜0.01）和L/M（r=－0.993,P＜0.01）分别呈负相关。 结论　肠道缺血/再灌注后,各项指标均有明显改变并具有良好的相关性,DAO与D-LAC、内毒素及L/M间呈显著正相关,与肠道屏障功能呈负相关。Gln和小肠黏膜形态之间呈正相关且分别与其他几项指标呈显著负相关。     

高脂饮食对大鼠肠道益生菌和肝脂肪含量的影响

目的研究高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型大鼠肠道益生菌变化及其与肝脏脂肪含量的关系。方法雄性SD大鼠20只随机分为对照组(control,C)和高脂饮食组(high fat,HF),分别给与普通大鼠饲料和高脂饮食喂养12w。观察体重、血ALT(alanine aminotransferase)、血脂水平、肝脏病理变化和肝脏脂肪含量;采用荧光定量PCR方法检测大鼠肠道双歧杆菌和乳酸杆菌动态变化(每两二周一次)。结果从第4w至实验结束,髙脂喂养大鼠体重明显高于普通饲料喂养组大鼠(均P<0.05)。与对照组相比,高脂饮食喂养大鼠血ALT(C:58.9±18.6 IU/L vs HF:59.8±6.8 IU/L)无明显变化,而血浆甘油三酯(C:0.3±0.1mmol/L vs HF:0.7±0.3 mmol/L,P=0.03)和胆固醇(C:1.4±0.1 mmol/L vs HF:1.7±0.3 mmol/L,P=0.04)水平明显增高。肝脏病理显示高脂组大鼠肝脏可见较多空泡脂肪变性和脂肪滴,而对照组大鼠无明显异常。髙脂组大鼠每克肝脏内脂肪组织所占比例亦较对照组大鼠明显增高(C:0.04±0.01%vs HF:0.16±0.03%,P<0.01)。髙脂饮食喂养大鼠肠道乳酸杆菌自第10周开始明显低于对照组大鼠,而双歧杆菌则从第8w即明显降低。大鼠体重和肝脏脂肪含量呈明显正相关关系(r=0.656,P=0.021),而肝脏脂肪含量与乳酸杆菌(r=-0.811,P=0.001)和双歧杆菌含量(r=-0.879,P=0.000)呈明显负相关关系。结论高脂饮食可致大鼠肠道肠道乳酸和双歧杆菌明显降低,且该现象与肝脏脂肪含量密切相关。     

铁死亡参与四氯化碳致肝纤维化发病过程的研究

目的 探讨铁死亡是否参与CCl4致肝纤维化发病过程。方法 小鼠分为对照组和CCl4组。采用腹腔注射法造模,每隔2 d给药1次,共8次,造模完成后隔2 d处死。通过HE、MASSON和天狼星红染色评价CCl4致小鼠肝损伤及纤维化情况;铁离子检测试剂盒检测小鼠肝组织铁离子含量;MDA检测试剂盒检测小鼠肝组织MDA含量;免疫荧光法观察小鼠肝组织中MDA含量;谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)评价小鼠肝组织脂质过氧化情况;通过Western Blot和RT - qPCR评价谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白(Ferritin)的蛋白和mRNA表达水平。结果 通过HE染色、MASSON染色和天狼星红染色发现,CCl4引起小鼠肝细胞排列紊乱,炎症细胞浸润,纤维化隔片形成。而对照组没有显著的病理变化;CCl4组小鼠肝组织铁离子含量(2.83±0.81) μmol/g较对照组小鼠肝组织铁离子含量(1.54±0.19) μmol/g增加(t = 5.415,P＜0.001);CCl4组MDA荧光强度高于对照组;CCl4组MDA含量(0.74±0.13) nmol/mg较对照组MDA含量(0.21±0.06) nmol/mg增加(t = 15.650,P＜0.001);GSH/GSSG在CCl4组(1.29±0.19)较对照组(1.90±0.16)降低(t = 10.580,P＜0.001);在CCl4组GPX4蛋白相对表达水平(0.27±0.07)较对照组(0.42±0.10)降低(t = 3.000,P = 0.013)。CCl4组Ferritin蛋白相对表达水平(0.18±0.06)较对照组(0.30±0.06)降低(t = 3.571,P = 0.005);CCl4组Ferritin mRNA相对表达水平(1.83±0.60)较对照组(0.84±0.30)降低(t = 4.420,P＜0.001)。CCl4组GPX4 mRNA相对表达水平(1.10±0.45)较对照组(3.54±0.87)降低(t = 7.385,P＜0.001)。结论 铁死亡参与了四氯化碳致肝纤维化的发病过程。     

糖尿病微血管病变患者血清瘦素水平的变化

目的探讨糖尿病微血管病变患者血清瘦素水平变化规律.方法对照组、糖尿病无微血管病变组及糖尿病微血管病变组各30例,其中糖尿病微血管病变组包括糖尿病肾病25例,糖尿病视网膜病变12例,同时合并DN与DR者7例.检测血清瘦素、胰岛素、Ⅳ型胶原及血糖浓度,分析瘦素水平与其它指标的相关性.结果对照组、无微血管病变组及微血管病变组血清瘦素浓度分别为(7.20±2.11)μg/L、( 7.95±3.78)μg/L及(10.26±4.37)μg/L,糖尿病微血管病变组显著高于无微血管病变组(t=2.18,P＜0.05)及对照组(t=2.71,P＜0.01),而后两者间无显著差异;瘦素浓度与体重指数、胰岛素呈正相关(r=0.29,P＜0.05;r=0.34,P＜0.01).结论糖尿病微血管病变血清瘦素浓度升高,瘦素与糖尿病微血管病变的发病密切相关.     

CYP2E1在大蒜油拮抗正己烷神经损伤中的作用

目的 研究CYP2E1在大蒜油(garlic oil,GO)阻止正己烷(n-hexane)致大鼠周围神经损伤的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常对照组、GO对照组、正己烷模型组、GO低剂量加正己烷组和高剂量加正己烷组(n=10).模型组及GO低、高剂量组大鼠分别给予2000 mg/kg正己烷灌胃;GO低、高剂量组大鼠在正己烷灌胃前1h分别给予40、80 mg/kg GO灌胃,GO对照组给予80 mg/kg,每周6次,持续10周.每2周测步态评分,监测大鼠周围神经损伤情况.于第10周末,断头处死大鼠,检测肝组织中CYP2E1表达及活力的改变,以及血清中2,5-己二酮(2,5-HD)含量的变化.结果 与正常对照组相比,GO对照组大鼠肝脏中CYP2E1含量及活力分别下降83.1％和48.3％,且差异均有统计学意义(P＜0.01);与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中CYP2E1含量及活力分别升高122.5％和72.2％,且差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比,GO低、高剂量组大鼠肝脏中CYP2E1含量分别降低32.9％和39.1％,且CYP2E1活力分别降低27.4％和44.5％,差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比,GO低、高剂量组大鼠血清中2,5-HD含量分别下降47.7％和78.7％,且差异均有统计学意义(P＜0.01).各组步态评分显示,模型组及GO低、高剂量组均明显高于对照组,但GO低、高剂量组低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 GO能够有效拮抗正己烷的外周神经损伤,其机制可能与肝脏中CYP2E1含量及活力降低,使正己烷代谢为2,5-HD减少有关.     

大豆异黄酮对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂代谢的影响

目的 研究大豆异黄酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏脂质、血脂、抗氧化指标及肝脏脂肪代谢相关因子的影响.方法 将36只雄性SD大鼠用随机数字表法按体重分层随机分为正常对照组、NAFLD模型对照组、大豆异黄酮低剂量组(10 mg/kg)及高剂量组(20 mg/kg),每组9只.正常对照组采用D12450B饲料(10%脂肪热能),模型对照组和大豆异黄酮干预组采用D12492饲料(60%脂肪热能),喂养12周后,检测各组大鼠肝脏脂质、血脂和抗氧化指标的变化,Western blotting检测大鼠肝组织中固醇调节原件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的蛋白表达.结果 正常对照组、NAFLD模型对照组、大豆异黄酮低剂量组、高剂量组肝脏甘油三酯(TG)分别为(8.11±4.13)、(57.06±16.95)、(31.26±10.48)、(31.38±13.25)mmol/mg蛋白(F=22.569,P＜0.01);肝脏游离脂肪酸(FFA)分别为(0.030±0.007)、(0.042±0.009)、(0.038±0.009)、(0.032±0.005)μmol/mg蛋白(F=4.857,P＜0.01);肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性分别为(502.29±23.71)、(201.83±16.99)、(228.93±21.71)、(238.08±15.96)U/mg蛋白(F=9.555,P＜0.01);肝脏丙二醛(MDA)含量分别为(1.29±0.29)、(2.85±0.73)、(2.07±0.49)、(2.03±0.37)nmol/mg蛋白(F=13.449,P＜0.01);肝脏SREBP-1c蛋白表达分别为0.45±0.16、1.42±0.30、1.02±0.31、0.47±0.27(F=24.515,P＜0.01);FAS蛋白表达分别为0.27±0.08、1.97±0.47、1.35±0.30、0.49±0.12(F=60.361,P＜0.01);PPARα蛋白表达分别为2.03±0.56、0.41±0.17、0.81±0.27、0.66±0.16(F=37.97,P＜0.01).结论大豆异黄酮可能通过抑制SREBP-1 c、激活PPARα的表达来减少肝脏脂质沉积,增加抗氧化能力.

Abstract：

Objective To study the effects of soybean isoflavone on liver lipid,serum lipid,antioxidant index and hepatic lipid metabolism associated factors in nonalcoholic fatty liver rats.Methods Thirty-six male rats(SD)were randomly divided into four groups by weight: normal control group,nonalcoholic fatty liver disease(NAFLD) model control group,low-dose isoflavone treatment group (10 mg/kg)and high-dose isoflavone group(20 mg/kg),9 rats in each group.Normal control rats were fed with D12450B(10% fat energy),model control and isoflavone intervention rats were fed with D12492(60%fat energy).Twelve weeks later,liver lipid,serum lipid and antioxidant index were observed.Liver sterol regulatory element binding protein-1 c(SREBP-1 c),fatty acid synthase(FAS)and Peroxisome proliferators activated receptor alpha(PPAR alpha)were detected by western blotting.Results Liver triglyceride(TG)in normal control group,NAFLD model control group,low-dose isoflavone group and high-dose isoflavone group were(8.11 ± 4.13),(57.06 ± 16.95),(31.26 ± 10.48),(31.38 ± 13.25)mmol/mg protein,respectively(F = 22.569,P ＜0.01); liver free fatty acid(FFA)were(0.030 ± 0.007),(0.042 ± 0.009),(0.038 ± 0.009),(0.032 ± 0.005)μmol/mg protein,respectively(F = 4.857,P ＜0.01); liver superoxide dismutase(SOD)activity were(502.29 ± 23.71),(201.83 ± 16.99),(228.93 ± 21.71),(238.08 ±15.96)U/mg protein,respectively(F = 9.555,P ＜0.01); liver malondialdehyde(MDA)were(1.29 ±0.29),(2.85 ± 0.73),(2.07 ± 0.49),(2.03 ± 0.37)nmol/mg protein,respectively(F = 13.449,P ＜0.01);SREBP-1 c protein expression were 0.45 ± 0.16,1.42 ± 0.30,1.02 ± 0.31,0.47 ± 0.27,respectively (F=24.515,P＜0.01);FAS protein expression were 0.27 ±0.08,1.97 ±0.47,1.35-0.30,0.49 ±0.12,respectively(F = 60.361,P ＜0.01); PPARα protein expression were 2.03 ± 0.56,0.41 ± 0.17,0.81 ±0.27,0.66±0.16,respectively(F=37.97,P＜0.01).Conclusion Soy isoflavone can reduce the hepatic lipid deposition and increase antioxidant capacity,the mechanism may be related to inhibition of SREBP-1c and activation of PPARα expression in liver.     

胰高糖素样肽-1受体激动剂通过JNK信号通路促进肝星形细胞凋亡的机制研究

目的 探讨胰高糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)通过JNK信号通路促进肝星形细胞(HSC)凋亡的机制.方法 体外培养人HSC并进行形态学鉴定,将HSC样本随机分成对照组(20份)、GLP-1RA组(20份)和JNK阻断组(20份).对照组HSC在常规培养基础上加入高糖(终浓度25 mmol/L),GLP-1RA组在对照组基础上加入GLP-1RA利拉鲁肽(终浓度10 mmol/L),JNK阻断组在GLP-1RA组基础上加入JNK信号通路阻断剂SP600125(终浓度20 μmol/L)进行培养;培养120 h后用流式细胞术检测各组的HSC凋亡情况.同时采用Western印迹法检测各组的p-JNK蛋白表达水平.结果 三组的平均凋亡率和平均p-JNK的表达水平差异均有统计学意义(F=19.412和66.451,P均＜0.01).GLP-1RA组的凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(30.61±4.07)％和(22.79±3.80)％,均高于对照组,差异均具有统计学意义(t=0.530和9.854,P均＜0.01);JNK阻断组的细胞凋亡率和p-JNK蛋白表达水平分别为(23.48±4.41)％和(10.66±4.15)％,均低于GLP-1RA组,差异有统计学意义(t=-5.428和-8.757,P均＜0.01).结论 JNK信号通路在GLP-1RA介导的HSC凋亡中起着关键作用,GLP-1RA可以通过JNK信号通路促成经高糖诱导活化的HSC发生凋亡.     

前列腺素E1脂微球联合大黄治疗肝肾综合征的疗效观察

目的 观察前列腺素E1脂微球联合大黄治疗肝硬化失代偿期肝肾综合征的疗效.方法 26例肝肾综合征患者随机分为2组,在综合治疗的基础上,对照组22例患者给予多巴胺联合大剂量呋塞米,治疗组24例使用前列腺素E1脂微球联合大黄.观察两组疗效、尿量、尿素氮、肌酐、肝功能、血氨及治疗后转归情况.结果 治疗组总有效率为85.71％,...     

硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激和Nrf2基因表达及乌司他丁的影响

目的 研究硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激水平及核转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)基因表达的变化及乌司他丁(ulinastatin,UTI)的影响.方法 将96只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组(8只)、UTI对照组(8只)、硫化氢染毒组(40只)、UTI干预组(40只).正常对照组和UTI对照组大鼠于染毒柜内吸人与硫化氢同样流量的空气1h,UTI对照组大鼠立即腹腔注射UTI(10万U/kg),2h后处死.硫化氢染毒组和UTI干预组大鼠在染毒柜内吸入硫化氢(浓度为283.515 mg/m3)1h,UTI干预组大鼠立即腹腔注射UTI(10万U/kg),两组大鼠分别于2、6、12、24、48 h处死,每组8只.检测肺组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)活力和谷胱甘肽(GSH)含量及Nrf2 mRNA的表达,观察肺组织病理学改变并行肺损伤评分.结果 与正常对照组比较,2、6、12 h硫化氢染毒组大鼠肺组织中SOD、CAT活力和GSH含量及2、6、12、24h GSH-Px活力明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);2、6、12、24h硫化氢染毒组大鼠肺组织中MDA含量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).与相应时间点硫化氢染毒组比较,UTI干预组6、12h时GSH-Px活力,2、6、12h时CAT活力,2、6、12、24h时GSH含量及2、6、12、24、48 h时SOD活力明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);UTI干预组2、6、12h时MDA含量明显低于相应时间点硫化氧染毒组,差异有统计学意义(P＜0.01).染毒后2、6、12、24 h,硫化氢染毒组肺组织中Nrf2 mRNA表达(0.314±0.011、0.269±0.010、0.246±0.011、0.221士0.018)明显高于正常对照组(0.149±0.012),差异有统计学意义(P＜0.01);与相应时间点硫化氢染毒组比较,2、6、12、24、48 h UTI干预组的Nrf2 mRNA表达(0.383:±-0.017、0.377±-0.014、0.425±0.017、0.407±0.011、0.381±0.010)明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).光学显微镜下观察可见,硫化氢染毒组染毒后24h大鼠肺组织损害明显,UTI干预组大鼠肺损伤较硫化氢染毒组有所减轻.UTI干预组12、24、48 h时肺损伤评分明显低于相应时间点硫化氢染毒组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 氧化应激和Nrf2活化是参与硫化氢中毒急性肺损伤的重要因素,UTI能抑制氧自由基产生,纠正氧化还原失衡,上调Nrf2 mRNA表达水平,减轻氧化应激损伤,对肺组织损伤有保护作用.     

抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA防治大鼠肝纤维化的研究

目的 探讨抗结缔组织生长因子(CTGF)小分子干扰RNA(siRNA)是否能抑制大鼠肝脏CTGF基因表达及防治大鼠肝纤维化.方法 雄性SD大鼠30只,按数字表法随机分成5组,每组6只.模型组腹腔注射40%四氯化碳(CCl4)及尾静脉注射生理盐水,1次/3 d,共8周;预防组腹腔注射40%CCl4及尾静脉注射抗CTGF ...     

N-乙酰半胱氨酸对汞致大鼠肾皮质线粒体能量代谢损伤的影响

目的通过亚急性汞染毒实验研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对汞所致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的影响。方法将24只清洁级Wistar大鼠按体重随机分为分别为对照组、汞染毒组和NAC+汞染毒组,每组8只。对照组、汞染毒组大鼠腹腔注射生理盐水,NAC+汞染毒组腹腔注射0.480mmol/L的NAC,注射剂量为5ml/kg;2h后,对照组皮下注射生理盐水,汞染毒组和NAC+汞染毒组大鼠皮下注射368μmol/L的HgCl2溶液,注射剂量为5ml/kg。每天注射1次,连续注射14天。最后一次注射24h后,处死大鼠,取肾皮质,梯度离心得线粒体,测定丙二醛(MDA)含量、磷脂酶A2(PLA2)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活力以及线粒体膜电位。结果与对照组相比,汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中MDA含量和PLA2活力以及膜电位升高,SDH活力下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);NAC+汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中PLA2活力升高,差异有统计学意义(P0.05)。与汞染毒组相比,NAC+汞染毒组大鼠肾皮质线粒体中MDA含量和PLA2活力以及膜电位降低,SDH活力升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论汞可导致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的障碍;NAC预处理能降低汞所致大鼠肾皮质线粒体能量代谢的障碍。