FISH技术检测乳腺癌HER-2基因的探讨

FISH技术采用荧光标记的DNA探针,根据探针与被测样本中的DNA序列的互补性,在探针与样本DNA杂交后,在荧光显微镜下检测荧光信号而得出结果,该技术操作简单,有较高的稳定性和灵敏性,重复性好[1]。     

乳腺癌细胞块免疫细胞化学和荧光原位杂交(FISH)法HER-2检测对比研究

目的研究乳腺癌细针穿刺细胞蜡块采用免疫细胞化学的方法检测HER-2蛋白,并用FISH方法检测该方法的准确性。方法对40例乳腺癌患者进行细针穿刺细胞学检测,并用免疫细胞化学方法检测HER-2蛋白表达情况,并与术后肿块切除或者粗针穿刺标本FISH方法检测HER-2基因状态的结果进行对比统计,以此探讨乳腺癌免疫细胞化学检测HER-2蛋白表达情况的意义。结果 40例细胞块HER-2免疫细胞化学结果 :3+有3例,2+有2例,1+有4例,阴性31例。FISH检测结果 :HER-2免疫细胞化学3+的3例,HER-2基因均有扩增;HER-2免疫细胞化学2+的2例,其中1例HER-2基因有扩增;HER-2免疫细胞化学1+的4例,HER-2基因无扩增。结论本实验应用用乳腺癌穿刺细胞块用免疫细胞化学检测HER-2蛋白的表达情况,并和手术标本做FISH检测HER-2基因扩增状态进行对比,证实免疫细胞化学检测HER-2结果有较高的准确性。     

乳腺癌HER-2、FISH分子病理检测技术及临床意义

目的:探讨乳腺癌HER-2、FISH分子病理检测技术及临床意义。方法:选取江苏省人民医院病理科2017年8月份分析的100个乳腺癌HER-2阳性蜡块为研究对象,分别采用免疫组化技术(IHC)和荧光原位杂交技术(FISH)对蜡块标本中的HER-2基因扩增以及HER-2蛋白表达进行比对分析。结果:FISH检HER-2基因扩增阳性30例(30%),IHC检测蛋白表达(-^+)80例,HER-2蛋白表达(++)4例,HER-2蛋白表达(+++)8例。结论:IHC检测HER-2蛋白表达(++^+++)与FISH检测HER-2基因的扩增具有很高的一致性。乳腺癌HER-2 FISH分子病理检测技术对乳腺癌诊断及分型、发生、发展,对于IHC(++^+++)者需要进一步进行FISH检测,提高检测的准确性。     

乳腺癌HER-2基因检测的临床价值

目的:探讨乳腺癌HER-2基因在蛋白及基因水平的表达情况及其临床应用价值.方法:应用免疫组织化学法及荧光原位杂交法分别测定44例乳腺癌患者HER-2蛋白表达及基因扩增情况.结果:免疫组织化学检测HER-2蛋白,44例乳腺癌中(+++)11例(25%),(++)19例(43%),(+～0)14例(32%).荧光原位杂交检测HER-2基因,44例乳腺癌中(+)10例(23%),(一)34例(77%).免疫组织化学检测(+++),(++),(+～0)与荧光原位杂交检测符合率分别为64%(7/11),16%(3/16),100%(14/14),3组间差异有统计学意叉(P＜0.05).结论:免疫组织化学可作为乳腺癌HER-2是否过表达的初筛,但只有与荧光原位杂交检测方法结合,才能更准确客观地指导临床用药及预后判断.     

乳腺癌HER-2基因扩增和蛋白表达与ER、PR的关系及临床意义

目的探讨HER-2基因及其蛋白在乳腺癌中扩增及表达状况,并研究其与ER、PR的相关性。方法用FISH技术和IHC技术检测51例乳腺癌新鲜标本中的HER-2基因的扩增及蛋白表达情况,并检测ER、PR进行对比分析。结果51例中10例HER-2蛋白表达强阳性（＋＋＋）,6例阳性（＋＋）,2例弱阳性（＋）,33例阴性,其中基因过表达率（IHC检测＋＋／＋＋＋）为31．4％;FISH检测中基因扩增14例,37例无扩增,扩增率为27．5％。IHC（＋＋／＋＋＋）与FISH检测符合率87．5％（P〈0．05）,ER、PR表达情况与HER-2基因及蛋白扩增呈负相关,ER和PR均为阴性的HER-2基因扩增率及蛋白表达率明显高于ER和（或）PR阳性的患者（IHC50％与24．3％,P〈0．05;FISH42．9％与19．4％,P〈0．05）。结论HER-2的扩增和蛋白过度表达提示乳腺癌预后不良,HER-2与ER、PR在乳腺癌的治疗中起重要作用,IHC可以作为检测HER-2基因状态的首选方法,但对于HER-2（＋＋）需要进一步进行FISH检测。     

乳腺癌HER-2基因荧光原位杂交检测的临床应用

目的研究荧光原位杂交(FISH)用于乳腺癌HER-2检测的临床应用及HER-2基因扩增与乳腺癌临床病理的相关性。方法应用FISH技术和免疫组化(IHC)技术检测40例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋标本,对比分析。结果IHC检测CerbB-2(3+)/(2+)/(1+或0),其FISH阳性率分别为85.7%、50%、5.9%。24例腋窝淋巴结阳性者,其FISH检测HER-2基因扩增10例(P=0.0399)。ER/PR阴性8例,其HER-2基因扩增6例(P0.05)。结论IHC检测HER-2蛋白有很高的假阳性及假阴性,FISH有效性及准确性显著高于IHC,可在临床广泛推广应用。HER-2基因扩增与腋窝淋巴结阳性相关。     

HER-2与乳腺癌关系的研究

原癌基因的激活和抑癌基因的失活是肿瘤形成的重要分子机制。原癌基因HER-2是人类表皮生长因子受体（EG—FR）家族的第二个成员,该家族中的受体均位于细胞膜上,在许多组织中都能发现。它在胎盘、胚胎上皮组织及许多肿瘤细胞中呈高表达,而在正常组织中为阴性或微量表达。HER-2作为肿瘤发生的癌基因,     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的比较桂林市荧光原位杂交法（FISH）和免疫组织化学法（IHC）检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体（HER-2）基因扩增及其蛋白表达情况的一致性．探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义。方法应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相关性。结果FISH与IHC结果总的符合率为82．0％．两者之间存在较好的一致性fkappa=0．6401,FISH检测IHC结果为3＋、2＋和0／1＋者的符合率分别为92．9％、70．0％和80．8％;IHC3＋及2＋者出现17号染色体多体性的几率比IHC0／1＋者高（P〈0．05）。结论FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性：FISH检测IHC3＋者符合率较高,FISH与IHC的差异主要在于IHC2＋和IHC0／＋组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法．而IHC结果为2＋或0／1＋者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定。     

乳腺癌HER-2基因荧光原位杂交检测的临床应用

目的研究荧光原位杂交（FISH）用于乳腺癌HER-2检测的临床应用及HER-2基因扩增与乳腺癌临床病理的相关性。方法应用FISH技术和免疫组化（IHC）技术检测40例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋标本,对比分析。结果IHC检测CerbB-2（3＋）/（2＋）/（1＋或0）,其FISH阳性率分别为85.7%、50%、5.9%。24例腋窝淋巴结阳性者,其FISH检测HER-2基因扩增10例（P=0.0399）。ER/PR阴性8例,其HER-2基因扩增6例（P〉0.05）。结论IHC检测HER-2蛋白有很高的假阳性及假阴性,FISH有效性及准确性显著高于IHC,可在临床广泛推广应用。HER-2基因扩增与腋窝淋巴结阳性相关。     

HER-2与乳腺癌:生物学特点、临床意义及检测

随着乳腺癌发展和演进的分子遗传学研究的深入．乳腺癌的治疗策略发生了极大变化，认识到HER-2／neu基因(即c-erbB-2)的重要性是这一变化的根源,有学者将新世纪乳腺癌研究和诊治形象地称为“Neu opportunities and Neu Challenges”。     

乳腺癌中c—erbB-2与HIF-1基因表达相关性研究

目的探讨c-erbB-2与HIF1基因过表达在乳腺癌进程中的内在相关性,寻找检测癌浸润转移的联合分子指标。方法乳腺癌组织芯片中200例样品经原位杂交检测c-erhB-2和HIF-1mRNA表达,87例样本经荧光原位杂交检测c—erbB-2基因扩增。结果①185例乳腺癌样本中c-erbB-2和HIF1基因有不同程度的共表达,浸润型的非特殊导管癌Ⅰ级中c-erbB-2与HIF-1的表达2级以上的样本比率都超过70％。非特殊导管癌Ⅰ、Ⅱ级中e-erbB-2表达的样本比率高于HIF-1。c-erbB-2和HIF1基因在非特殊导管癌Ⅰ、Ⅱ级中两者表达存在显著差异（P=0．003,P=0．036）,小叶癌中两者表达无显著差异（P=0．607）。②浸润型的非特殊性导管癌Ⅰ级中c-erbB-2基因扩增与表达存在显著差异（P=0．046）,非特殊性导管癌Ⅱ级与小叶癌中差异不显著（P=0．496m,P=0．878）。结论在乳腺癌浸润转移程度高时,c-erbB-2与HIF-1 mRNA的过表达一致,c-erbB-2扩增与其过表达一致,两者可成为乳腺癌浸润转移的联合分子指标。     

乳腺癌中c-erbB-2与HIF-1基因表达相关性研究

目的探讨c-erbB-2与HIF 1基因过表达在乳腺癌进程中的内在相关性,寻找检测癌浸润转移的联合分子指标。方法乳腺癌组织芯片中200例样品经原位杂交检测c-erbB-2和HIF-1 mRNA表达,87例样本经荧光原位杂交检测c-erbB-2基因扩增。结果①185例乳腺癌样本中c-erbB-2和HIF 1基因有不同程度的共表达,浸润型的非特殊导管癌I级中c-erbB-2与HIF-1的表达2级以上的样本比率都超过70%。非特殊导管癌Ⅰ、Ⅱ级中c-erbB-2表达的样本比率高于HIF-1。c-erbB-2和HIF 1基因在非特殊导管癌Ⅰ、Ⅱ级中两者表达存在显著差异(P=0.003,P=0.036),小叶癌中两者表达无显著差异(P=0.607)。②浸润型的非特殊性导管癌Ⅰ级中c-erbB-2基因扩增与表达存在显著差异(P=0.046),非特殊性导管癌Ⅱ级与小叶癌中差异不显著(P=0.496m,P=0.878)。结论在乳腺癌浸润转移程度高时,c-erbB-2与HIF-1 mRNA的过表达一致,c-erbB-2扩增与其过表达一致,两者可成为乳腺癌浸润转移的联合分子指标。     

胃癌组织HER-2基因扩增和蛋白表达检测及临床意义

目的 探讨免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测胃癌HER-2蛋白表达和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）法检测HER-2基因扩增的临床意义.方法 收集256例胃癌患者手术切除及胃镜活检的胃癌组织标本,分别采用IHC法及FISH法检测胃癌组织HER-2蛋白表达及基因扩增状态,并对结果进行统计学分析.结果 256例胃癌组织标本中,有26例HER-2蛋白表达阳性,阳性率为10.16％;46例HER-2基因有扩增,阳性率17.97％.26例HER-2蛋白表达（3＋）的标本中,24例有HER-2基因扩增,2例无扩增;95例HER-2蛋白表达（2＋）的标本中,20例有基因扩增,75例无扩增;90例HER-2蛋白表达（1＋）的标本中,2例有基因扩增,88例无扩增;45例HER-2蛋白表达（0）的标本中,HER-2基因均无扩增.IHC法和FISH法检测HER-2表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 IHC法检测胃癌HER-2蛋白表达可作为临床治疗的初筛,HER-2蛋白表达（2＋）的患者应常规行FISH法,以确定HER-2基因扩增状态.FISH法检测结果具有较高的稳定性和可靠性,联合IHC法可更准确和客观评价胃癌预后,并指导临床选用靶向药物治疗.     

赫赛汀与多西他赛联合应用治疗HER-2阳性转移性乳腺癌疗效分析

目的分析赫赛汀与多西他赛联合应用治疗人类表皮生长因子受体-2(HER-2)过表达的转移性乳腺癌的临床疗效。方法随机选取2011年1月至2013年12月期间收治的39例HER-2阳性的转移性乳腺癌患者,分成观察组和对照组。观察组给予赫赛汀联合多西他赛方案化疗,对照组给予赫赛汀联合长春瑞滨方案化疗。观察对比两组临床疗效及不良反应。结果观察组总有效为21例(78.8%),患者临床受益为23例(85.2%);对照组总有效为5例(41.7%),患者临床受益为7例(58.3%)。观察组总有效率显著优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组临床受益率对比,差异无统计学意义(P0.05)。两组患者临床不良反应均不明显,主要不良反应表现为发热、皮疹、骨髓抑制以及胃肠道不适。结论赫赛汀与多西他赛联合应用治疗HER-2阳性转移性乳腺癌具有良好的临床疗效及安全性,值得临床推广应用。     

乳腺癌组织中NF-κB和HER-2的表达及意义

目的探讨核转录因子κB(NF-κB)和HER-2基因在乳腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测40例乳腺癌组织中NF-κB和HER-2的表达情况。结果乳腺癌组织中NF-κB、HER-2的阳性表达率分别为65%和50%;NF-κB、HER-2与乳腺癌淋巴转移相关(P0.05),且两者间存在相关性(P0.05)。结论乳腺癌中NF-κB、HER-2基因的表达具有相关性,在乳腺癌的发生发展中具有重要作用。     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的 比较桂林市荧光原位杂交法(FISH)和免疫组织化学法(IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体(HER-2)基因扩增及其蛋白表达情况的一致性,探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义.方法 应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相天性.结果 FISH与IHC结果 总的符合率为82.0%,两者之间存在较好的一致性(kappa=0.640),FISH检测IHC结果 为3+、2+和0/1+者的符合率分别为92.9%、70.0%和80.8%;IHC3+及2+者出现17号染色体多体性的几率比IHC0/1+者高(P<0.05).结论 FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性;FISH检测IHC3+者符合率较高,FSH与IHC的差异主要在于IHC2+和IHC0/+组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法 ,而IHC结果 为2+或0/1+者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定.     

HER-2预测术后ER阴性乳腺癌患者长期生存的探讨

目的分析HER-2和ER表达对术后乳腺癌患者长期生存时间的预测作用。方法收集143例经长期随访（〉5年）的乳腺癌患者的组织标本，并通过免疫组化进行HER-2、ER检测，统计学分析这些指标与患者生存时间的关系。结果在143例具有完整治疗的乳腺癌患者中，Cox回归分析发现，ER和HER．2的表达状态明显与患者的预后有关。以ER表达作为分类变量，发现在ER阴性组，HER-2阳性患者的生存时间明显短于阴性患者。在生存曲线上，HER-2阴性患者生存80个月的可能性大于阳性患者。在ER阳性组，虽然HER-2阳性患者的生存时间与阴性患者存在差异，但无统计学意义。结论HER-2是预测术后ER阴性乳腺癌患者长期生存时间的理想生物学标记。     

GP和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的比较

目的 通过与进口PathVysion HER2试剂盒比较,评价国产金菩嘉GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的临床应用价值.方法 收集108例乳腺浸润性导管癌(简称乳腺癌)肿瘤组织标本,分别采用FISH技术与GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达水平,比较2种试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达差异,并评价GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性.结果 GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增率分别为25.0%(27/108)和26.9%(29/108).与PathVysion HER2试剂盒相比,GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性分别为89.7%(26/29)、98.7%(78/79)和96.3%(104/108),PPV和NPV均为96.3%(26/27,78/81).GP HER2试剂盒检出第17号染色体多倍体的敏感度、特异度和准确性分别为93.3%(14/15)、100%(93/93)和99.1%(107/108).结论 GPHER2试剂盒在检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因状态的敏感度和特异度及准确性高,在临床评价乳腺癌HER2基因状态中具有广泛应用价值.

Abstract：

Objective To evaluate clinical application of Jin Pujia GP HER2 probe kit in testing HER2 gene status of breast cancer through comparing it with PathVysion HER2 probe kit. Methods HER2 gene status were detected from 108 cases with invasive ductal breast cancer using GP and PathVysion HER2 probe kits by FISH. HER2 gene expression levels were measured by GP and PathVysion HER2 probe kits, and the sensitivity, the specificity and the accuracy of GP HER2 probe kit were evaluated. Results HER2 gene amplification positive rates detected by GP HER2 probe kit and PathVysion HER2 probe kit were 25.0%(27/108) and 26.9% (29/108), respectively. As compared with PathVysion HER2 probe kit, the sensitivity, the specificity and the accuracy of the GP HER2 kit were 89. 7% (26/29), 98.7% (78/79)and 96. 3% ( 104/108), respectively, whereas the PPV and NPV were 96. 3% (26/27) and 96. 3% (78/81), respectively. The GP HER2 probe kit had a sensitivity of 93.3% ( 14/15), a specificity of 100%(93/93) and an accuracy of 99. 1% (107/108) for detecting polysomy 17. Conclusion GP HER2 probe kit has high sensitivity and specificity for detecting HER2 gene status in breast cancer patients, and it has clinical application value.