慢性肾衰竭大鼠肾细胞外基质变化

目的:分析慢性肾衰竭大鼠肾去细胞组织结构特点,探讨慢肾衰大鼠肾细胞外基质的病理变化。方法:SD大鼠实验组腺嘌呤灌胃,行去细胞处理后,H-E、Masson染色及电镜观察慢肾衰大鼠肾形态学结构变化及去细胞支架的生物学特性,免疫荧光分析其细胞外基质成分的变化。结果:腺嘌呤灌胃造模组慢肾衰血尿素氮、血肌酐明显增高,肾大体显示透明度降低,且随灌胃时间延长,H-E染色整体支架更加粗大,同时细胞数目以及小管区结晶数目明显增多;Masson三色染色显示实验组肾支架可见大量蓝色的胶原纤维沉积;扫描电镜显示2组肾细胞外基质三维结构紊乱,细胞外胶原纤维更加致密且有不同程度的增生;进一步免疫荧光检测,显示实验组支架的层黏连蛋白、胶原蛋白Ⅰ及Ⅳ都有明显的绿色荧光表达。结论:慢性肾衰肾支架病理形态结构改变及细胞外基质增生,为进一步研究慢肾衰肾支架是否可作为复细胞支架提供依据。     

细胞外基质在人系膜增生性肾小球肾炎病变中的变化

肾小球细胞外基质（尤其系膜基质）的过量聚积是肾小球硬化的主要变化之一。我们应用免疫酶标技术及计算机图像分析系统，检测了系膜增生性肾小球肾炎病变过程中细胞外基质的变化。结果表明：增生扩张的系膜基质中含有Ⅳ型胶原，层粘连蛋白等多种正常肾小球细胞外基质成分，并随病变进展明显增加。Ⅲ型胶原在中，重度系膜增生性肾小球肾炎时也出现于增多的系膜基质中，说明正常时不存在于肾小球的间质胶原在肾小球过程中也起重要作用     

组织蛋白酶与细胞外基质重塑

细胞外基质重塑是多种疾病的病理学基础,与之相关的细胞外蛋白酶中,组织蛋白酶起非常重要的作用,本文就组织蛋白酶在细胞外基质重塑相关疾病中的作用以及调节等作一综述。     

TGF-β1对Heymann肾炎肾小球细胞外基质的影响

目的 探讨TGF-β1对不同病变阶段主动型Heymann肾炎肾小球细胞外基质的影响。方法 建立主动型Heymann肾炎模型，在主动型Heymann肾炎第4、6、8和12周，用RT-PCR法检测TGF-β1 mRNA在病变肾组织内的表达，并用免疫组化SP法检测纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原在Heymann肾炎病变各阶段大鼠肾小球内的表达，再用计算机图像分析系统进行定量分析。结果 自主动型Heymann肾炎模型诱发后第4周开始，TGF-β1 mRNA即有表达，至第8周最明显，第12周有所下调。主动型Heymann肾炎大鼠肾小球内纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的含量，随TGF-β1表达的上调和病变的进展而增多。结论 TGF-β1可能通过刺激主动型Heymann肾炎大鼠肾小球上皮细胞产生过量细胞外基质，从而介导了主动型Heymann肾炎病变的发生和发展。     

甲基强的松龙对免疫复合物型肾炎大鼠细胞外基质的影响

目的：观察甲基强的松龙治疗免疫复合物型肾炎大鼠后肾小球细胞外基质成份的变化及其与PAI-1含量改变的关系及该药的效果。方法：以阳离子化小牛血清白蛋白（C-BSA）诱导的肾炎大鼠模型，以ELISA方法检测不同疗程组的大鼠肾组织中的FN、LN的含量，发色底物法检测肾组织中PAI-1含量变化，并以24小时尿蛋白定量评价甲基强的松龙的治疗作用。结果：模型组大鼠肾组织的FN、LN及PAI-1含量较正常组显著升高，且FN、LN与PAI-1的含量呈正相关关系，肾小球系膜基质轻、中度增生；经甲基强的松龙治疗1周及2周后，治疗组的FN、LN及PAI-1含量较模型组明显下降，肾小球系膜基质增生不同程度减轻，但未达到正常组水平；治疗后大鼠尿蛋白含量显著降低。结论：免疫复合物肾炎大鼠细胞外基质积聚与PAI-1含量升高密切相关，甲基强的松龙可能通过干扰PA／PAI-1系统而影响细胞外基质积聚并达到治疗作用。     

细胞外基质作为组织工程支架的最新进展

目前存在很多由于先天缺陷、创伤或肿瘤切除等导致人体完整性缺陷的现象,故近年来组织工程成为研究热点。支架材料是组织工程的要素之一。人脂肪组织细胞外基质粉末呈三维空间结构,能促进干细胞增殖、分化、新生血管形成及生长因子释放等,已成为组织工程支架的新材料。     

大鼠睾丸巨噬细胞与 Leydig 细胞关系的研究

本实验用胰蛋白酶和胶原酶分离得到大鼠睾丸巨噬细胞(MФ)和 Leydig 细胞,用腹腔冲洗法获得大鼠腹腔 MФ,用 McCoy 5 A 培养液进行培养。结果显示,当睾丸 MФ和 Leydig 细胞共同培养时,Leydig 细胞的睾丸酮分泌量为9.1±0.9 pmoI/10~0细胞,(?)对照组(6.3±1.5 pmol/10~0细胞)显著增加。相反,当腹腔 MФ和 Leydig 细胞共同培养时,L dig 细胞的睾丸酮分泌量为4.1±0.3 pmol/10~0细胞,比对照组(14.2±0.4 pmol/10~0细胞)显著下降。结果表明,大鼠睾丸MΦ在体外培养时能促进 Leydig 细胞分泌睾丸酮,而腹腔 MΦ则抑制 Leydig 细胞分泌睾丸酮.本文的研究对不同部位的巨噬细胞具有异质性提供了又一例证。     

细胞外基质与细胞周期调控

细胞外基质 (ECM)主要包括胶原蛋白、蛋白多糖、糖蛋白和弹性蛋白等。细胞经整合素介导与 ECM粘附 ,则 ECM各成分对细胞的增殖周期产生影响。 ECM主要通过调节细胞形状和细胞骨架结构张力、p5 3- p2 1waf1 、p Rb/ E2 F、FAK、SPARC、JAK/ STAT等胞内信号途径调节细胞周期进程     

细胞外基质在大鼠胚胎心脏的时相性分布

采用酶免疫组织化学法检测 ECM及其受体 β1 在胎龄 11至 19天胚鼠心脏中的表达 ,结果显示 ECM中 FN、L MN、Vn及受体 β1 均于 ED11起在胚鼠心脏存在表达 ,但其表达高峰及在流出道、心内膜垫、心室肌及室间隔中表达持续时间各不相同 ,Co IV在胚胎各期均为阴性表达 ,提示不同的 ECM在胚胎心脏的不同部位有着不同的时相性表达规律 ,ECM(主要是 FN与 L MN)及其受体 β1 在胚胎心脏的发生发育中起着一定的介导作用     

肾炎益气液对肾毒血清性肾炎大鼠肾脏超微结构的影响

目的:观察肾毒血清性肾炎大鼠肾组织超微结构变化及肾炎益气液对该变化的影响。方法: 采用大鼠肾毒血清性肾炎模型,常规电镜制片、染色,观察肾组织超微结构的变化。结果: 注射肾毒血清(NTS)后,病理组大鼠电镜下可见明显的系膜细胞增生,系膜基质增多,毛细血管腔闭塞及上皮下、内皮下电子致密物沉积等多种病理损伤性变化。而肾炎益气液组上述病变有所减轻。结论: 肾炎益气液有不同程度减轻肾小球电镜下病变的作用。     

实验性肾小管间质性肾炎免疫发病机理的探讨

为探讨肾小管间质性肾炎的免疫发病机制，观察Ia抗原表达与肾小管间质性肾炎损害的关系，用兔肾小管基底膜（TBM）完全福氏佐剂及百白破疫苗，免疫雌性Wistar大鼠，成功地建立了肾小管间质性肾炎（TIN）模型。我们采用免疫组化和图像分析技术，研究TIN病变中单个核细胞的特征以及Ia抗原表达和TIN之间的关系。结果显示：在TIN发生时，TBM上有线型IgG沉积，这表明有抗TBM抗体产生。肾小管间质中渗出的单个核细胞，大多数为T细胞，部分有肉芽肿形成。B细胞逐渐减少，而单核细胞由少变多。肾间质损害表现为小管萎缩和间质纤维化。这些表明细胞免疫在TIN发病过程中起着重要作用。模型组中肾小管上皮细胞和Bowman囊Ia抗原表达强度比对照组高（P＜0．01），提示Ia抗原的表达可能影响TIN的发生和发展。     

不同类型胶质瘤移动性的比较及其与细胞外基质成分关系的研究

用３株不同类型的恶性胶质瘤进行细胞体外移动性及其与细胞外基质成分关系的比较研究。结果表明，髓母细胞瘤移动性最强，多形性胶质母细胞瘤次之，ＳＷＯ－３８胶质瘤最弱。３株胶质瘤体外移动性受Ⅰ型胶原，Ⅳ型胶原，层粘连蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）和纤维结合蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）等细胞外基质成分的影响基本上是一致的。故不能以此解释其移动性差异的原因。Ⅳ型胶原蛋白和ＬＮ能促进瘤细胞在体外的移动，但Ⅳ型胶原和ＬＮ两者之间不表现出叠加作用，也无拮抗作用。Ⅰ型胶原网能明显地阻遏肿瘤细胞的体外移动性。ＦＮ对这３株胶质瘤的移动性影响不大，但对非神经系统肿瘤（ＧＬＣ－８２肺腺癌）却有较明显的趋触作用。     

肾炎益气液对大鼠肾毒血清性肾炎肾功能、肾组织病理学的影响

目的:观察肾炎益气液对肾毒血清性肾炎大鼠肾功能及肾组织学变化的影响。方法:应用大鼠肾毒血清性肾炎模型,以尿蛋白定量,血清肌酐、尿素氮测定反映肾功能的改变。肾组织分别进行常规苏木素伊红(HE)、磷钨酸苏木素(PTAH)、六胺银-苏木素伊红复合染色(PAM-HE),免疫荧光、光镜观察。结果:静脉注射肾毒血清(NTS)后,模型组大鼠肾功能有明显损伤,表现为血肌酐、尿素氮明显升高,尿蛋白阳性。2周时,取肾组织活检,免疫荧光染色,可见IgG沿肾小球毛细血管壁呈连续线形沉积。7周时,光镜观察可见肾小球系膜细胞增生,肾小球硬化和新月体形成,并有蛋白和红细胞管形。肾炎益气液组上述改变明显轻于模型组。结论:肾炎益气液有不同程度的改善肾功能和减轻肾小球病变的作用。     

非诺贝特对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的：探讨苯氧乙酸类降血脂药非诺贝特（fenofibrate）对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法：将实验用SD大鼠随机分为正常对照组（C组），糖尿病组（D组），非诺贝特治疗组（F组）。第4、6周分别随机取各组大鼠一半检测血糖、血甘油三酯、血胆固醇、血肌酐、尿白蛋白及肾脏肥大指数。应用免疫组织化学方法检测肾组织转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、层粘连蛋白（LN）、IV型胶原蛋白的表达。用计算机图象分析系统测定肾小球平均体积（MGV）、肾小球平均面积（MGA）。结果：非诺贝特治疗组血甘油三酯、血胆固醇、尿白蛋白排泄率均低于糖尿病组（P<0.05, P<0.01）。第6周时，F组TGF-β₁、LN、IV型胶原蛋白表达低于D组（P<0.05）。结论：非诺贝特对糖尿病肾脏有部分保护作用，其机制可能部分通过降血脂、下调糖尿病大鼠TGF-β₁的表达减少细胞外基质的积聚。     

单核因子在Tamm-Horsfall蛋白所致肾小管间质肾炎纤维化形成中的作用

将Wistar大鼠的腹腔巨噬细胞(Mφ)分别与Tamm-Horsfall蛋白(THP,A组)、去糖基THP(B组)或RPMI1640(C组)在体外共育4小时,而后更换培养液继续孵育24小时。用生物学方法测定发现唯A组Mφ上清液含肿瘤坏死因子和IL-1样活性。将三组Mφ上清液分别注入各自大鼠右肾,6周后A组右肾全部发生了炎症和纤维化,伴有肾小管功能改变,而B、C组肾间质无明显异常。由此表明,THP对单核、Mφ的活化作用及由此而产生的生物活性介质可能在某些肾小管间质疾病纤维化的形成中具有重要意义。     

4种肾炎模型大鼠尿液中补体C5b-9复合物排泄的比较研究

目的: 探讨不同类型的免疫复合物肾炎大鼠尿液中补体C5b-9复合物检出的意义。方法: 复制大鼠被动型Heymann肾炎(PHN)、抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)、抗肾小球基底膜性肾炎(AGBMN)及慢性血清病肾炎(CSDN)4种动物模型。用双抗体夹心ELISA法定期检测各种肾炎大鼠血液及尿液中补体C5b-9的含量,同时观察大鼠肾小球中C5b-9的沉积情况。结果: 4种肾炎模型鼠血浆C5b-9复合物均见上升,肾小球内也有C5b-9复合物的沉积,但尿液中C5b-9含量升高仅见于罹患PHN的大鼠。此外,尿液中C5b-9复合物的升高先于PHN大鼠尿蛋白的升高。结论: 尿液中C5b-9复合物的检测可作为PHN早期诊断和鉴别诊断的一种敏感性较高的免疫学指标。     

Carbohydrate-independent recognition of collagens by the macrophage mannose receptor

Mannose receptor (MR) is the best characterised member of a family of four endocytic molecules that share a common domain structure; a cysteine-rich (CR) domain, a fibronectin-type II (FNII) domain and tandemly arranged C-type lectin-like domains (CTLD, eight in the case of MR). Two distinct lectin activities have been described for MR. The CR domain recognises sulphated carbohydrates while the CTLD mediate binding to mannose, fucose or N-acetylglucosamine. FNII domains are known to be important for collagen binding and this has been studied in the context of two members of the MR family, Endo180 and the phospholipase A2 receptor. Here, we have investigated whether the broad and effective lectin activity mediated by the CR domain and CTLD of MR is favoured to the detriment of FNII-mediated interaction(s). We show that MR is able to bind and internalise collagen in a carbohydrate-independent manner and that MR deficient macrophages have a marked defect in collagen IV and gelatin internalisation. These data have major implications at the molecular level as there are now three distinct ligand-binding sites described for MR. Furthermore our findings extend the range of endogenous ligands recognised by MR, a molecule firmly placed at the interface between homeostasis and immunity.     

Abnormal relationship between sodium excretion and hypertension in spontaneously hypertensive rats

Summary Inulin clearance, single nephron glomerular filtration rate (SNGFR), Na and K excretion were studied following an acute saline infusion in spontaneously hypertensive (Okamoto strain) rats (SH). 1. Hypertonic saline load: experiments were performed in adult and young SH rats. As compared to control normotensive Wistar rats (NT), the sodium excretion rose much less following the load in SH. During the 75 min following the beginning of the load, adult SH excreted 15% (NT: 58%) and young SH 9% (NT=38%) of the sodium load (P<0.01 in both cases). Cin were similar in SH and NT during control period, and a similar increase was observed following the load. The superficial to juxtamedullary SNGFR ratio was 0.80±0.05 in 5 non diuretic adult SH, a value not different from that found in normal rats, and 0.87±0.07 in 3 salt loaded SH, indicating that no significant intrarenal GFR redistribution occurs in SH following an acute hypertonic saline load. 2. Following an isotonic saline load, the results were not different: the percentage of the sodium load excreted was 44±5% and 10±2% in NT and SH adult rats respectively.The possibility that the observed defect in sodium excretion of SH rats involves distal tubular function is suggested by the pattern of evolution in Na and K excretion.This work was partially presented at the Symposium on Current problems of Hypertension, 1973, Mainz (Germany).Maître de Recherches INSERM.