抗人淋巴细胞E受体单克隆抗体的研究

用杂交瘤技术制备了一识别E受体单克隆抗体Tlla(JN20-5),间接免疫荧光分析表明Tlla(JN 20-5)与多种T细胞反应,并识别人外周血全部T细胞。此抗体对E玫瑰花生成有明显阻断作用,其相应抗原又与E受体一样对胰酶消化敏感。外周血单个核细胞经PHA刺激不同时间后与Tlla(JN 20-5)及另一CD_2抗体的反应百分率无明显增加,但反应强度增加。标准CD_2抗体Leu 5b、Anti-CCT_3都有阻断FITC标记Tlla(JN 20-5)的作用,说明Tlla(JN 20-5)为一识别E玫瑰花受体的单克隆抗体。     

抗人淋巴细胞E受体单克隆抗体的研究

用杂交瘤技术制备了一识别E受体单克隆抗体T11a(JN20-5),间接免疫荧光分析表明T11a(JN20-5)与多种T细胞反应,并识别人外周血全部T细胞。比抗体对E玫瑰花生成有明显阻断作用,其相应抗原又与E受体一样对胰酶消化敏感。经PHA刺激不同时间后T11a(JN20-5)与另一CP_2抗体一样,同外周血单个核细胞反应百分率无明显增加,但反应强度增加。标准CO_2抗体Leu5b、Anti-CCT_3都有阻断F1TC标记T11a(JN20-5)的作用,说明T11a(JN20—5)为一识别E玫瑰花受体的单克隆抗体。     

抗人淋巴细胞再循环受体单克隆抗体的制备与鉴定

用人外周血高纯度的淋巴细胞做抗原，通过杂交瘤技术，获得一鼠抗人单克隆抗体（ＭｃＡｂ）－ＱＭ５（ＩｇＧ１，ｋ轻链）。ＭｃＡｂＱＭ５能特异地与９８％的淋巴细胞、５２％的单核细胞和１０％左右的胸腺细胞反应，而不与红细胞、血小板和多核白细胞反应，与ＯＫＴ３和ＯＫＴ８抗原亦不相关。     

抗人转铁蛋白受体单克隆抗体体外抗瘤效应研究

目的:探讨抗人转铁蛋白受体(TfR)单克隆抗体(mAb)体外抗瘤效应.方法:采用CFSE染色、PI-Annexin Ⅴ染色和PI染色,通过流式细胞术分析抗人TfR mAb对高表达的人肝癌细胞系HepG2和人乳腺癌细胞系MCF-7增殖、凋亡和周期的影响;通过MTT法检测抗人TfR mAb联合化疗药物对HepG2和MCF-7细胞增殖的抑制作用.结果:抗人TfR mAb能抑制HepG2和MCF-7细胞的增殖,并诱导其凋亡和S期阻滞;与化疗药物联用可增强其对肿瘤细胞增殖的抑制作用.结论:抗人TfR mAb具有良好的体外抗瘤效应.     

抗人孕激素受体单克隆抗体的初步应用

抗人孕激素受体单克隆抗体的初步应用巩平张蕾孙素莲（北京市肿瘤防治研究所免疫室，北京１０００３４）测定乳腺癌组织中的雌激素受体（ＥＲ）及孕激素受体（ＰＲ）水平，对乳腺癌的治疗具有指导意义并能估测预后。受体阳性的乳腺癌患者内分泌治疗有效率和生存率均明显优...     

抗人活化B淋巴细胞单克隆抗体制备及鉴定

自儿童手术摘除的新鲜扁桃体分离人Ｂ淋巴细胞，经ＰＭＡ（佛波醇）激活后得到人活化Ｂ淋巴细胞，用于免疫ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠后，取免疫小鼠之脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，融合后细胞于含ＨＡＴ－ＩＭＤＭ完全培养基的２％甲基纤维素半固体培养基选择生长，经细胞酶联免疫吸附（ＣＥＬＩＳＡ）筛选间接免疫荧光流式细胞仪鉴定，获培养上清对活化Ｂ细胞及３Ｄ５细胞株细胞反应阳性，而Ｊｕｒｋａｔ细胞株细胞反应阴必的杂交     

抗人载脂蛋白E单克隆抗体制备及免疫学特性的研究

应用人血清纯化的ApoE免疫BALB/C小鼠,其脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,获得3株分泌抗人ApoE单克隆抗体的杂交瘤细胞株(E6C3,E4C2和E3C3),对其免疫学特性进行了研究。腹水效价为8×10~(-5)～2×10~(-6),与其它载脂蛋白没有交叉反应,制备免疫亲和层析柱纯化了ApoE,单抗相加试验和双抗体夹心试验证明,两株MeAb识别ApoE的两个不同抗原决定簇,抗体亚型均为IgG_1型。应用ELISA双抗体夹心法测定了人血清ApoE含量。     

抗乙酰胆碱受体的单克隆抗体

用电鳗等放电鱼类放电器官的乙酰胆碱受体(AChR,由分子量分别为40,000、50,000、60,000和65,000的α、β、γ和δ亚单位按2∶1∶1∶1比例结合而成)或用由哺乳类动物肌肉提取的AChR免疫小鼠或大白鼠,获得能产生抗AChR抗体的细胞.用这种细胞再和小鼠或大白鼠的骨髓瘤细胞     

用体外免疫的人淋巴细胞研制抗HBsAg单克隆抗体

应用抗ＨＢｓＡｇ抗体阳性供者的外周血淋巴细胞和随机取样的人扁桃体和外伤脾细胞，经乙型肝炎疫苗体外免疫后和骨髓瘤细胞融合制作杂交瘤。在以１２例人外周血、扁桃体和脾来源的淋巴细胞为亲本细胞制作的杂交瘤中，共获得了抗ＨＢｓＡｇＩｇＭ抗体阳性的孔３８个，ＩｇＧ抗体阳性的孔１６个。经比较，细胞融合率和杂交瘤分泌抗体阳性率均以扁桃体来源的细胞最佳。抗体阳性的杂交瘤细胞经克隆化后，只获得了３株分泌抗ＨＢｓＡｇＩｇＭ抗体的杂交瘤克隆。对这３株杂交瘤克隆分泌抗体的特异性进行了分析，讨论了人源单克隆抗体交叉反应的可能原因。     

用体外免疫的人淋巴细胞研制抗HBsAg单克隆抗体

应用抗ＨＢｓＡｇ抗体阳性供者的外周血淋巴细胞和随机取样的人扁桃体和外伤脾细胞，经乙型肝炎疫苗体外免疫后和骨髓瘤细胞融合制作杂交瘤。在以１２例人外周血、扁桃体和脾来源的淋巴细胞为亲本细胞制作的杂交瘤中，共获得了抗ＨＢｓＡｇＩｇＭ抗体阳性的孔３８个，ＩｇＧ抗体阳性的孔１６个。经比较，细胞融合率和杂交瘤分泌抗体阳性率均以扁桃体来源的细胞最佳。抗体阳性的杂交瘤细胞经克隆化后，只获得了３株分泌抗ＨＢｓＡｇＩ     

E受体的研究近况——E受体与淋巴细胞功能的关系

近十余年来,国内外学者对人类及其某些动物的淋巴细胞与绵羊红细胞(简称SR-BC)自然结合这一现象作了广泛的研究.这些工作包括E玫瑰花实验技术的改进,实际应用和理论探讨等方面.在实际应用方面,进行了影响实验结果诸因素的研究、E玫瑰花各种实验技术的临床应用并试图将其作为细胞免疫的指标而用于疗效观察以及应用E玫瑰花实验鉴定某些生物制剂(如抗淋巴细胞血清、胸腺素和转移因子等)的生物活性.由于E玫瑰花实验操作不易控制和某些理论问题尚未解决,E玫瑰花的实际应用研究难以深入,有关文献报告日趋减少.在理论探讨方面,以下问题已有报导尚无争议:     

抗淋巴细胞单克隆抗体的临床应用

一、单克隆抗体的特点单克隆抗体(McAb)的最大特点在于抗原特异性.目前正有效地利用这点对很多精制困难的抗原制备McAb.对淋巴细胞上的许多抗原制备了一些McAb,这样不仅易于区别T细胞、B细胞,即使是其亚群也能容易区别.特别是抗T细胞亚群的McAb,     

抗淋巴细胞单克隆抗体的临床应用

一、单克隆抗体的特点 单克隆抗体(McAb)的最大特点在于抗原特异性。目前正在有效地利用这点,对很多精制困难的抗原制备McAb。对淋巴细胞上许多抗原也制备了一些McAb。这样不仅易于区别T细胞、B细胞,即使是其亚群也能容易区别。特别是抗T细胞亚群的McAb,在临床上也有许多应用的例子。本文叙述以这为重点。     

由人免疫球蛋白转基因小鼠制备人抗乙酰胆碱受体单克隆抗体

目的：从人免疫球蛋白（Ig）转基因小鼠制备人源性抗乙酰胆碱受体（AChR）单克隆抗体。方法：以电鳐（Torpedo）AChR（tAChR）作为基础免疫原，分别以tAChR或人AChR（hAChR）α亚单位1～210位氨基酸（Hα1-210）与thioredoxin（Trx）融合制备的融合蛋白Trx-Hα1-210作为加强免疫原，注射人Ig转基因小鼠。应用ELISA检查由该小鼠制备的杂交瘤细胞培养上清液中人源性抗tAChR或抗Trz-Hα1-210单克隆抗体的分泌，应用放射免疫测定法（RIA）测定抗tAChR或抗Trx-Hα1-210单克隆抗体与hAChR的交叉反应性。结果：从tAChR作为加强免疫原组小鼠得到433株分泌人源性抗tAChR单克隆抗体的细胞株，从抗Trx-Hα1-210作为加强免疫原组小鼠得到20株分泌人源性抗Trx-Hα1-210单克隆抗体的细胞株。但这些人源性抗体均不能与hAChR起交叉反应。结论：由人Ig转基因小鼠制备人源性抗AChR单克隆抗体是可行的。     

抗人血清载脂蛋白E单克隆抗体的制备和鉴定

载脂蛋白E(APOE)主要存在于极低密度脂蛋白(VLDL)中,其含量及变异与某些高脂血症密切相关。为了进一步研究APOE在人群中的水平及与动脉硬化、冠心病的关系,我们在国内首先制备出抗人血清APOE单克隆抗体。     

抗人肺癌单克隆抗体的研究

用人肺腺癌LTEP-a_2细胞免疫BALB/c小鼠取其脾细胞与Sp/0骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光染色法在a_2癌细胞及人胚肺二倍体纤维母细胞2BS上进行筛选,得到2A_7、2E_9、4F_2、5F_(11)四个杂交瘤,这些抗体主要识别人肺癌细胞,与2BS及包括四种不同ABO血型的10个人红血球和淋巴细胞无反应,用ABC免疫酶染色试验检查了四种单克隆抗体与     

抗人Toll样受体4单克隆抗体的制备及其生物活性研究

目的运用单克隆抗体技术制备抗人Toll样受体4(TLR4)单克隆抗体(mhTLR4抗体),并鉴定其生物学活性。方法以重组人TLR4(rhTLR4)作为抗原,腹腔注射免疫Balb/c小鼠。分离小鼠脾脏B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合并培养,挑选阳性杂交瘤细胞,扩大培养,制备和鉴定mhTLR4其生物学效应。结果经3次免疫后的小鼠血清中抗rhTLR4抗体的效价具有较高水平的表达。1∶500的小鼠免疫血清可明显抑制人PBMC的TNF-α表达。分离小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,获得3株阳性单克隆杂交瘤细胞。其中2株经过增殖培养、纯化浓缩制备出较高产量的鼠抗人TLR4单克隆抗体。生物学活性测定表明,产生的抗rhTLR4单克隆抗体,能够明显地阻断脂多糖(LPS)诱导的人PBMC细胞对TNF-α的表达。结论本文制备的鼠抗人TLR4单克隆抗体,经鉴定具有较高的阻断内毒素信号传导的效应。为进一步研制人源化抗TLR4抗体、研制新一代抗内毒素靶向药物奠定了基础。     

抗人胚肝低密度脂蛋白受体单克隆抗体的制备及其性质研究

低密度脂蛋白(LDL)受体是存在于哺乳类动物细胞膜上的一种糖蛋白,在调节血浆胆固醇浓度,保持体内固醇代谢平衡中起着关键性的作用,因此,与动脉粥样硬化的发生有密切关系。国内对该受体的研究尚停留     

淋巴细胞E受体的研究——Ⅷ.抗猪E受体抗体与植物凝集素促增殖效应的比较研究

关于人淋巴细胞有丝分裂原受体与E受体之间的关系问题,迄今尚未阐明。Silva等报告,绵羊红细胞(SRBC)与人T细胞作用后,能加强后者对亚最适剂量的PHA和ConA的反应以及某些T细胞反应;但对最适剂量的PHA和ConA的效应则无明显影响。一些作者报告,抗人E受体单抗能抑制PHA