针刺对TBI大鼠健侧海马MCT2、MCT4表达的影响

目的观察针刺对TBI大鼠健侧海马组织单羧酸转运蛋白MCT2、MCT4表达的影响。方法选取30只SD大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)和治疗组(10只),模型组和治疗组大鼠采取Feeney式自由落体撞击法制备TBI大鼠模型,治疗组在大鼠造模12 h后行针刺治疗,取百会、人中、内关(左侧)、足三里(左侧)穴进行针刺,1次/日,每次20min,治疗10天。模型组和空白组大鼠正常喂养,不予针刺。采用神经功能评价、平衡功能评价、行走功能评价以及肢体回缩力测试对各组大鼠行为学进行评价。Western Blot检测大鼠健侧海马组织MCT2、MCT4蛋白表达水平。结果模型组较空白组在神经、平衡、行走功能方面有明显差异(P0.01,0.05);与模型组比较,针刺治疗后大鼠的神经功能评分在术后第10天有明显的差异(P0.05);与空白组比较,模型组健侧脑组织中MCT2、MCT4在术后均升高(P0.01);与模型组相比,针刺组大鼠健侧海马组织MCT2、MCT4表达均下调(P0.01)。结论针刺可以改善TBI大鼠行为学能力,其作用机理可能与健侧海马组织能量底物转运蛋白MCT2、MCT4含量表达下调有关。     

电针对不同阶段SAMP8小鼠学习记忆能力、神经元超微结构及β-淀粉样蛋白、Tau蛋白水平的影响

目的观察电针"百会""大椎""肾俞"对3月龄及9月龄SAMP8小鼠学习记忆能力及海马区β-淀粉样蛋白(Aβ)、Tau蛋白表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的时机。方法将SAMP8小鼠随机分为早期电针组(3月龄电针干预)、晚期电针组(9月龄电针干预)、模型组,以同龄正常老化SAMR1小鼠为对照组,并均于10月龄取材。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA1区神经超微结构变化,免疫组化检测小鼠海马区Aβ、Tau蛋白的表达。结果与晚期电针组比较,早期电针组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),原平台象限停留时间明显延长(P0.05),跨越原平台次数明显增加(P0.05),海马区Aβ、Tau蛋白异常表达明显减少(P0.05),突触结构较完整,数量增加。结论电针能提高SAMP8小鼠学习记忆能力,降低小鼠海马区Aβ、Tau蛋白的异常表达,改善神经元超微结构,且其疗效早期介入优于晚期介入。     

补肾活血针刺法对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马内源性神经干细胞增殖的影响

目的观察补肾活血针刺法对阿尔茨海默病(AD)模型SAMP8小鼠行为学及海马内源性神经干细胞增殖的影响。方法将18只7月龄雄性SAMP8小鼠作为AD模型,随机分为针刺组、非穴组和模型组,另取同月龄雄性SAMR1小鼠6只作为正常组。针刺组小鼠选取"肾俞""百会""血海""膈俞"进行针刺干预,非穴组小鼠取双侧肋下固定非穴点进行针刺,模型组和正常组小鼠予相同程度捉抓刺激,连续干预8周。采用水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,免疫组化检测海马Brd U阳性细胞数。结果与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P0.05),停留在原平台象限时间明显缩短(P0.05),Brd U阳性细胞数明显减少(P0.05);与模型组、非穴组比较,针刺组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),停留在原平台象限时间明显延长(P0.05),Brd U阳性细胞数明显增加(P0.05)。结论补肾活血针刺法可能通过诱导海马内源性神经干细胞的增殖,改善AD模型SAMP8小鼠的学习记忆能力。     

针刺对SAMP8小鼠海马Flotillin-1、NEP及Aβ42表达的影响

目的探讨针刺对阿尔茨海默病模型小鼠SAMP8的行为学影响及其作用机制。方法将60只6月龄雄性SAMP8小鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组和非穴位对照组,每组20只,另备同月龄雄性SAMR1小鼠20只作为正常对照组。针刺治疗组采用针刺肾俞、百会、血海、膈俞进行干预。8星期后,采用Morris水迷宫对各组小鼠的行为学进行检测,同时采用western blot检测小鼠海马组织Flotillin-1、NEP以及A?42表达情况。结果 Morris水迷宫实验中,与模型对照组比较,针刺治疗组小鼠的逃避潜伏期明显缩短(P0.05),其停留在原平台象限的时间和穿越原平台次数增加(P0.05);与模型对照组比较,非穴位对照组小鼠的逃避潜伏期无明显差别(P0.05),其停留在原平台象限的时间和穿越原平台次数也无明显差别(P0.05)。Flotillin-1在针刺治疗组的表达较模型对照组明显减弱(P0.05),而在非穴位对照组与模型对照组之间,Flotillin-1的表达水平无明显差别(P0.05);NEP在针刺治疗组的表达较模型对照组明显增强(P0.05),而在非穴位对照组与模型对照组之间,NEP的表达水平无明显差别(P0.05);A?42在针刺治疗组的表达较模型对照组明显减弱(P0.05),而在非穴位对照组与模型对照组之间,A?42的表达水平无明显差别(P0.05)。结论针刺能够明显改善AD模型小鼠SAMP8的学习记忆能力,降低SAMP8小鼠海马Flotillin-1含量及上调NEP的表达,从而减少A?42表达,减轻神经毒性,发挥神经保护作用。     

“补肾活血”针刺法对老年性痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响

目的观察“补肾活血”针刺法对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响。方法选取8月龄SAMP8小鼠20只,随机分为针刺组10只,SAMP8空白对照组10只,另选取10只8月龄的SAMR1小鼠为SAMR1对照组。疗程结束后评定疗效,测各组小鼠的学习记忆能力及脑组织中AchE含量。结果与SAMR1组比较,SAMP8空白对照组小鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长（P〈0．05）,针刺组逃避潜伏期较SAMP8空白对照组显著缩短（P〈0．05）;探索试验巾针刺组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8空白对照组（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;针刺组针刺后脑组织AChE活性较SAMP8空白对照组显著性降低（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学差异（P〉0．05）。结论“补肾活血”针刺法能有效提高AD小鼠学习记忆能力,这种作用可能是通过抑制脑组织AChE活性实现的。     

针刺对阿尔茨海默病模型小鼠行为学及线粒体分裂蛋白1、融合蛋白1表达和超微结构的影响

目的观察针刺对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠行为学,大脑海马神经元线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白1(OPA1)表达及线粒体超微结构的影响,探讨针刺治疗AD的作用机制。方法 40只雄性SAMP8小鼠随机分为针刺组和模型组,每组20只。另取20只同月龄雄性正常老化模型小鼠(SAMR1小鼠)作为正常组,针刺组选取"肾俞""百会""血海""膈俞"进行干预。8周后,Morris水迷宫实验检测小鼠行为学,之后提取海马组织,Western blot检测小鼠海马线粒体相关蛋白Fis1和OPA1的表达,电镜观察小鼠海马神经元线粒体超微结构。结果与模型组比较,针刺组逃避潜伏期明显缩短(P0.05),其停留在原平台象限时间延长和穿越原平台次数明显增加(P0.05);针刺组Fis1表达明显减弱,OPA1表达明显增强(P0.05,P0.01);针刺组线粒体超微结构明显改善,线粒体体密度及面密度明显增加(P0.05)。结论针刺可能通过提高模型小鼠学习记忆能力、下调Fis1表达、上调OPA1表达和改善线粒体超微结构,达到治疗AD的作用。     

电针对不同阶段SAMP8小鼠学习记忆能力及海马区突触素和突触后致密物-95表达的影响

目的观察电针对不同阶段SAMP8小鼠学习记忆能力及海马区突触素(SYN)和突触后致密物-95(PSD-95)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的最佳时机。方法 SAMP8小鼠48只随机分成模型组、3月龄电针组、6月龄电针组和9月龄电针组,每组12只,同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组均选取"百会""大椎""肾俞",电针频率为2 Hz,每日1次,8 d为1个疗程,每个疗程间隔2 d,共3个疗程。运用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,免疫组化和Westernblot检测海马突触相关蛋白SYN和PSD-95的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间明显缩短,跨越原平台次数明显减少,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01),海马区SYN和PSD-95蛋白表达明显下降(P0.01);与模型组比较,各电针组小鼠逃避潜伏期明显缩短,原平台象限停留时间明显延长,跨越原平台次数明显增加,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01),海马区SYN和PSD-95蛋白表达均明显升高(P0.01),且均以3月龄电针组最显著(P0.05,P0.01)。结论电针能提高SAMP8小鼠学习记忆能力,促进海马区SYN、PSD-95蛋白的表达,改善突触功能。     

补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型小鼠海马脑红蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力的影响及作用机制。方法将20只5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组各10只,另设5月龄雄性抗快速老化小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。针刺治疗组予以补肾活血针刺法干预,选穴百会、血海、肾俞、膈俞,采用捻转补泻手法。模型对照组及正常对照组未予特殊处理。干预4周后,取各组小鼠海马组织,采用免疫组化法检测脑红蛋白(Ngb)的表达情况。结果模型对照组小鼠海马组织Ngb的表达水平较正常对照组减弱(P<0.01);与模型对照组相比,针刺治疗组小鼠海马组织Ngb的表达水平明显升高(P<0.01)。结论补肾活血针刺干预能够明显增强SAMP8小鼠海马组织Ngb的表达,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆能力的潜在分子机制之一。     

针刺对颅脑损伤大鼠海马单羧酸转运蛋白表达的影响

目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠海马组织单羧酸转运蛋白MCT2、MCT4表达的影响,探讨针刺促TBI大鼠康复的海马能量代谢机制。方法 33只SD大鼠随机分为模型组11只,针刺组12只,空白组10只。模型组和治疗组采用Feeney自由落体撞击法制备TBI模型大鼠,造模12 h后治疗组进行针刺干预,选取"人中""百会""内关""足三里"进行针刺,1次/d,共治疗10次。采用神经功能评价、行走功能评价、平衡功能评价以及肢体回缩力测试对各组大鼠进行行为学评价,Western blot和免疫组化方法检测大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠神经功能显著下降(P 0.01),平衡功能评分显著升高(P 0.01),行走耗时显著延长(P 0.01);针刺治疗后,针刺组大鼠神经功能改善不具有统计学意义(P 0.05),平衡功能和行走功能均得到显著提升(P 0.05,P 0.05)。Western blot检测显示,与空白组相比,模型组大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达显著降低(P 0.01),针刺治疗后,MCT2、MCT4蛋白表达显著升高(P 0.01,P 0.05);免疫组化检测显示,与空白组相比,模型组大鼠海马组织MCT2、MCT4蛋白表达显著降低(P 0.01),针刺治疗后,针刺组大鼠MCT2蛋白表达显著升高(P 0.05),MCT4蛋白表达升高不具有统计学意义(P 0.05)。结论针刺可以改善TBI大鼠平衡和行走功能,促进其神经功能康复,可能与促进海马组织MCT2、MCT4表达,调控神经元能量转运代谢有关。     

基于RhoA/ROCK通路探讨三焦针法对老年痴呆小鼠学习记忆及突触可塑性的影响

目的:观察三焦针法对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马小G蛋白鸟苷三磷酸酶亚家族蛋白RhoA/Rho激酶(ROCK)通路的调控作用,探讨其改善AD小鼠学习记忆的机制。方法:取SAMP8老年痴呆小鼠40只,用随机数字表法分为老年痴呆模型组(模型组)、三焦针法针刺组(针刺组)、非穴位针刺组(非穴组)、法舒地尔组,每组10只,另取SAMR正常衰老小鼠10只,作为正常衰老组。针刺组选取"膻中""中脘""气海"及双侧"血海""足三里"进行针刺干预,非穴组取左右肋下固定非经非穴点各一个进行针刺干预,法舒地尔组经腹腔注射法舒地尔溶液(25 mg/kg),各组小鼠均在分组后第2天开始干预,连续28 d, 1次/d。末次干预后用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;HE染色法观察小鼠海马组织的病理变化;FD快速高尔基染色试剂盒检测小鼠海马CA1区神经元树突棘数目;ELISA法检测小鼠海马组织β-淀粉样蛋白42(Aβ42)与磷酸化Tau蛋白(p-tau)含量;Western blot法检测小鼠海马组织RhoA、ROCK、F-肌动蛋白(F-actin)、磷酸化切丝蛋白cofilin(p-cofilin)相对表达量。结果:与正常衰老组比较,模型组小鼠海马神经元排列紊乱、数量减少,逃避潜伏期延长,海马组织Aβ42及p-tau含量、RhoA及ROCK蛋白表达升高(P0.05),穿越原平台次数减少,海马组织神经元树突棘数目、F-actin、p-cofilin蛋白表达降低(P0.05)。与模型组比较,非穴组小鼠上述指标差异无统计学意义(P0.05)。与模型组及非穴组比较,针刺组及法舒地尔组小鼠海马病理损伤减轻,逃避潜伏期缩短,海马组织Aβ42及p-tau含量、RhoA及ROCK蛋白表达降低(P0.05),穿越原平台次数增加,海马神经元树突棘数目、F-actin、p-cofilin蛋白表达升高(P0.05)。与针刺组比较,法舒地尔组上述指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:三焦针法可能通过抑制RhoA/ROCK通路的激活,改善AD小鼠学习记忆功能,增加海马神经元树突棘数目,促进突触重塑。     

左、右归丸对肾虚质大鼠学习记忆及海马ERK蛋白表达的影响

目的探讨左、右归丸对肾虚质大鼠学习记忆能力及大脑海马组织中细胞外信号调节激酶(ERK)含量的调节作用。方法采用"猫吓鼠"的方法,建造肾虚质大鼠模型,待大鼠产子后,将子代鼠分为空白组、模型组、左归丸组、右归丸组,继续对子代鼠进行恐吓,同时用补肾药物进行干预治疗。结果①Morris水迷宫测试:与空白对照组比较,肾虚质模型组在逃避潜伏期、总路程、首次穿越目标时间均延长,目标区域停留时间减少(P 0. 05);与肾虚质模型组比较,左归丸组和右归丸组在逃避潜伏期、总路程、首次穿越目标时间均缩短,目标区域停留时间增加(P 0. 05)。②酶联免疫吸附测定ERK蛋白表达:与空白组比较,肾虚质模型组大鼠大脑海马组织中ERK蛋白含量显著降低(P 0. 05),与肾虚质模型组比较,左、右归丸组ERK蛋白含量明显升高(P 0. 05)。结论补肾方药左、右归丸通过调节大脑海马组织中细胞外信号调节激酶(ERK)的表达,从而改善肾虚质大鼠学习记忆能力。     

早期电针干预对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白水平的影响

目的:探讨早期电针"百会""大椎""肾俞"穴对快速老化小鼠(SAMP8小鼠)学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白表达的影响,为临床电针治疗阿尔茨海默病(AD)时间点的选择提供参考。方法:将36只3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、3月龄电针组、9月龄电针组,每组12只;以12只同龄正常老化SAMR1小鼠作为空白对照组。3月龄电针组及9月龄电针组分别于小鼠3月龄及9月龄时予电针"百会""大椎""肾俞"穴治疗(连续波,2 Hz,1.5~2 mA),20 min/次,每日1次,8 d为一疗程,疗程间隔2 d,共治疗3个疗程。每组小鼠在水迷宫检测学习记忆能力结束后统一于10月龄取材;免疫组织化学法、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠海马磷酸化Tau蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马Tau mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原平台象限停留时间较短,跨越平台次数减少(P<0.01),海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达较高(P<0.01);与模型组比较,3月龄电针组及9月龄电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),原平台象限停留时间延长,跨越平台次数增多(P<0.05),小鼠海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达降低(P<0.05);与9月龄电针组比较,3月龄电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),原平台象限停留时间延长,跨越平台次数增多(P<0.05),海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达降低(P<0.01)。结论:早期电针干预能更有效地改善SAMP8小鼠学习记忆能力并降低其海马磷酸化Tau蛋白水平。     

电针对SAMP8小鼠学习记忆与海马神经元NMDA受体表达的影响

目的观察电针"百会""大椎""肾俞"对SAMP8小鼠学习记忆与海马神经元NMDA受体NR2A和NR2B表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的机制。方法 6月龄SAMP8小鼠24只,随机分为模型组和电针组,同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞"30d。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,免疫组化染色和Western blot检测海马神经元NR2A和NR2B的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P0.01),原平台象限停留时间明显缩短(P0.01),跨越原平台次数明显减少(P0.01),海马神经元NR2A相对表达量明显升高(P0.01),NR2B相对表达量明显下降(P0.01);与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),原平台象限停留时间明显延长(P0.01),跨越原平台次数明显增加(P0.05),海马神经元NR2A相对表达量明显下降(P0.05),NR2B相对表达量明显升高(P0.01)。结论电针能改善SAMP8小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与电针抑制海马神经元NMDA受体NR2A的表达和促进NMDA受体NR2B的表达有关。     

左、右归丸对肾虚质大鼠学习记忆及海马区CREB蛋白表达的影响

目的观察左归丸和右归丸对肾虚质大鼠学习记忆和海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,进一步明确左归丸和右归丸治疗肾虚质学习记忆减退的作用靶点。方法采用"猫吓鼠"的方法,建造肾虚质大鼠模型,继续对子代鼠进行恐吓的同时用左归丸和右归丸进行干预治疗。用Morris水迷宫对大鼠的学习记忆能力进行测试,同时用酶联免疫吸附法测定海马区CREB的蛋白表达水平。结果 (1)各组子代鼠学习记忆情况:定位航行试验中,与空白组比较,肾虚质模型组逃避潜伏期、总路程均明显延长(P 0. 05);与肾虚质模型组比较,左、右归丸组逃避潜伏期、总路程均明显缩短(P 0. 05);(2)酶联免疫吸附测定CREB浓度:与空白组比较,肾虚质模型组CREB蛋白含量显著降低(P 0. 05);与肾虚质模型组比较,左、右归丸组CREB蛋白含量明显升高(P 0. 05)。结论左、右归丸可能是通过调控海马区CREB蛋白表达来改善肾虚质大鼠学习记忆能力。     

电针对SAMP8小鼠海马区细胞周期蛋白依赖性激酶5及Tau蛋白的影响

目的:观察电针"肾俞"对SAMP8小鼠海马区神经元超微结构及细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)、Tau蛋白的影响,探讨电针防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:将5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、电针组和针刺组,以同品系SAMR1小鼠为正常组,每组15只。针刺组针刺小鼠"百会"及双侧"肾俞";电针组针刺"百会"并电针双侧"肾俞"。两组均20 min/次,每日1次,7 d为1个疗程,共治疗4个疗程。治疗后行Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力,透射电镜观察海马区超微结构,免疫组织化学法检测海马CDK5的阳性表达,Western blot法检测海马区Tau-5和p25、CDK5蛋白的表达水平。结果:①水迷宫测试结果显示:与正常组比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期延长(P0.05,P0.01),原平台象限停留时间缩短、跨越原平台次数减少(P0.01);与模型组比较,电针组和针刺组平均逃避潜伏期缩短(P0.05,P0.01),电针组原平台象限停留时间延长、跨越原平台次数增多(P0.01),针刺组原平台象限停留时间延长(P0.05);与电针组比较,针刺组平均逃避潜伏期延长(P0.05),原平台象限停留时间缩短(P0.05)。②透射电镜结果显示:模型组小鼠海马形态不规则且模糊不清,神经元体积缩小,线粒体数目减少,肿胀并伴随线粒体嵴畸形样改变;针刺组海马区神经元形态较规则,细胞器数目有所减少,胞质水肿严重,胞核固缩,内质网、核糖体及线粒体未见明显异常;电针组神经元突触形态完整,核和膜结构清晰,可见较多数量的细胞器,内质网、线粒体、溶酶体和高尔基体等形态均正常。③与正常组比较,模型组海马区Tau-5和p25、CDK5蛋白相对表达量及CDK5阳性表达升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,电针组和针刺组Tau-5和p25、CDK5蛋白相对表达量下降(P0.05,P0.01),电针组CDK5阳性表达下降(P0.01);与电针组比较,针刺组p25和CDK5蛋白相对表达量升高(P0.05)。结论:电针"肾俞"能降低CDK5的表达,抑制Tau蛋白,对AD的防治具有积极作用。     

七宝美髯口服液对小鼠脑组织SOD活力及羰基化蛋白含量的影响

目的观察七宝美髯口服液(制何首乌、当归、补骨脂等)对SAMP8小鼠学习记忆功能、海马组织病理形态及SOD活力、羰基化蛋白含有量的影响。方法 27只SAMP8小鼠随机均分为模型对照组、盐酸多奈哌齐组及七宝美髯口服液组,另取9只SAMR1小鼠作为正常对照组,连续灌胃60 d,在给药第56天进行避暗训练,5 d后测定学习记忆能力;HE染色观察病理形态;ELISA法检测脑组织中SOD活力和羰基化蛋白含有量。结果与模型对照组比较,七宝美髯口服液组小鼠的逃避潜伏期显著延长,错误次数明显降低(P0.01),海马组织的病理形态显著改善,SOD活力显著升高,羰基化蛋白含有量明显降低(P0.01)。结论七宝美髯口服液能改善SAMP8小鼠的学习记忆功能,减轻海马组织的退行性病变程度。     

督脉灸疗法对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及海马CA1、CA3区HE染色的影响

目的:探讨督脉灸疗法(督灸)对阿尔兹海默病模型小鼠学习记忆能力及海马CA1、CA3区HE染色的影响。方法:将40只SAMP8小鼠随机分为正常组、模型组、督灸组、中药组和督灸+中药组各8只,其中督灸组采用督灸疗法,中药组给予六味地黄丸灌胃,实验结束后,采用Morris水迷宫实验法进行行为学检测,HE染色法检测CA1、CA3区组织形态学改变。结果:与模型组相比,中药组、督灸组、督灸+中药组的小鼠逃避潜伏期均降低(P0.05或P0.01),其中督灸组和督灸+中药组用时最短,与中药组比较(P0.05或P0.01),表明督灸疗法可提高SAMP8小鼠学习记忆能力,且疗效优于中药组;HE染色结果显示,相比正常组,模型小鼠CA1、CA3区细胞组织均有坏死损伤,相比模型组,督灸组和督灸+中药组CA1、CA3区细胞坏死数量最少,形态学改变最轻,中药组损伤较为明显,说明督灸疗法对SAMP8小鼠海马CA1、CA3区神经元具有保护作用,可减少细胞损伤。结论:督灸疗法能提高SAMP8小鼠学习记忆能力,其机制与督灸能保护海马CA1、CA3区神经元和抑制细胞损伤有关。     

镇心省睡益智方及其精油对AD模型小鼠学习记忆的影响

目的:观察镇心省睡益智方水提液及其精油对β淀粉样前体蛋白基因/早老素基因(APP/PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响并探讨其可能机制。方法:采用APP/PS1双转基因痴呆小鼠及同月龄相同遗传背景C57BL/6JNju小鼠2种小鼠。C57BL/6JNju小鼠作为正常组,APP/PS1双转基因痴呆小鼠随机分为模型组,镇心省睡益智方精油低、高质量浓度组(12.13,48.50 mg·L~(-1)),镇心省睡益智方水提液组(0.46 g·kg~(-1)),每组12只。每天给药1次,连续给药22 d。给药结束后采用跳台实验、Morris水迷宫实验对小鼠行为学能力进行检测,采用尼氏染色观察海马CA1区神经元变化,采用硫磺素(Th S)染色观察海马DG区老年斑(SP)沉积,采用免疫组化法检测小鼠脑组织中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1),胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠海马组织中乙酰胆碱(ACH),γ-氨基丁酸(GABA),谷氨酸(GLU)含量的变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠跳台实验潜伏期显著缩短,错误次数显著增加(P0.01),Morris水迷宫实验定位航行逃避潜伏期明显延长(P0.05,P0.01),海马CA1区神经元出现缺失,DG区出现明显的老年斑沉积(P0.05),ACH,GLUT1含量均显著下降(P0.01),GABA,GLU水平及IRS-1的表达均显著升高(P0.01);与模型组比较,各给药组均可显著延长小鼠跳台实验潜伏期、减少跳台错误次数(P0.01),明显降低定位航行小鼠逃避潜伏期(P0.05,P0.01),可一定程度保护小鼠海马CA1区神经元,减少DG区老年斑沉积(P0.05,P0.01),明显增加小鼠脑组织中ACH,GLUT1表达(P0.05,P0.01),显著降低GABA,GLU水平及IRS-1的表达(P0.01)。结论:镇心省睡益智方水提液及其精油能够改善APP/PS1小鼠的学习记忆行为,保护神经元,增加脑组织GLUT1的表达,减少脑组织IRS-1的表达,减少老年斑沉积,升高ACH含量,降低GABA,GLU含量,可能是其防治阿尔茨海默症的机制。     

黑逍遥散对AD模型小鼠海马区APP，PERK表达的影响

目的:研究黑逍遥散对阿尔茨海默症(AD)模型小鼠海马神经元内质网应激的影响,包括行为学、组织病理学及淀粉样前体蛋白(APP),类蛋白激酶内质网激酶(PERK)等因子的表达。方法:使用SPF级的4月龄双转基因(APP/PS1)雄性小鼠42只随机分为黑逍遥散高、低剂量组(6,3 g·kg~(-1)),盐酸多奈哌齐组(3. 25 mg·kg~(-1))及模型组4组,同种系同月龄C57BL小鼠10只作为正常组。首先适应环境1周,经不同药物干预治疗2个月后,用Morris水迷宫行为学检测每组小鼠的学习和记忆能力;再治疗1个月后,通过光镜来观察每组小鼠海马区组织病理学改变;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马区细胞内质网组织中APP,PERK蛋白及mRNA的表达情况。结果:药物干预治疗后,与正常组比较,模型组小鼠的逃避潜伏期显著延长(P 0. 01);模型组小鼠海马区内神经元严重损伤;模型组APP,PERK的表达量显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,各给药组小鼠逃逸潜伏期均明显缩短(P 0. 05,P 0. 01);海马区内神经元损伤程度均减轻; APP,PERK的表达均明显降低(P 0. 05)。结论:黑逍遥散能够显著改善AD小鼠的学习记忆能力,可能与减少内质网过度应激反应等方面来减轻AD小鼠认知能力损伤有关。     

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠学习记忆及海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路的影响

目的观察补益脾胃元气类方药人参汤、洗心汤、大补元煎对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马区蛋白激酶A(PKA)/细胞外调节激酶(ERK)/磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响,探讨其防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、安理申组、补益脾胃元气类方药组(人参汤组、大补元煎组、洗心汤组),另以3月龄SAMR1小鼠作为对照组,共6组,连续ig给药10周后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠空间学习记忆能力。免疫组化法检测PKA蛋白表达,免疫荧光法检测ERK、p-CREB蛋白表达。蛋白印迹法检测小鼠海马区PKA、p-CREB、ERK蛋白表达。结果与模型组比较,补益脾胃元气类方药各组小鼠逃避潜伏期缩短,在目的象限游泳时间及穿越平台次数增加(P0.05、0.01);免疫组化结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区PKA蛋白表达量增加;免疫荧光结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区ERK、p-CREB蛋白表达量增加;蛋白印迹实验结果与免疫组化、荧光结果一致(P0.05、0.01)。结论补益脾胃元气类方药对SAMP8小鼠空间学习记忆有明显的改善作用,其机制可能与改善海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路有关。