“嗅三针”对阿尔茨海默病小鼠空间记忆能力和海马APP、Aβ蛋白表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马APP、Aβ蛋白表达的干预效应,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:将40只AD小鼠随机分为AD模型组、嗅三针组、嗅三针加嗅神经切断组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,以3mg/(kg·d)的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2d,共干预4周。小鼠空间记忆能力采用Morris水迷宫进行检测,海马APP、Aβ蛋白表达采用western blot法进行检测。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃均能显著增加AD小鼠穿越平台次数和靶象限占总时间百分比,并能显著降低海马APP、Aβ蛋白表达(P0.05);嗅三针加嗅神经切断组对各指标表达均无明显影响(P0.05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0.05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠空间记忆能力,降低海马APP、Aβ蛋白表达的作用,嗅觉通路的完整性是其发挥干预效应的核心机制。     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠海马区磷酸化P38MAPK和TNF-α表达的影响

目的:观察嗅三针对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马磷酸化P38MAPK和TNF-α表达的影响,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:将40只AD小鼠随机分为模型组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过嗅三针对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,每次10min,以3mg(kg·d)的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2d,共干预4周。应用Western blot技术检测海马p-p38MAPK蛋白,免疫组化法检测TNF-α表达水平。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著降低海马p-p38MAPK蛋白和TNF-α的表达,与AD模型组比较,差异具有显著性(P<0.05)。嗅神经切断嗅三针组对AD小鼠海马p-p38MAPK蛋白和TNF-α的表达均无明显影响,与AD模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:嗅三针具有调控P38MAPK通路,降低AD小鼠海马炎症因子TNF-α表达的作用,嗅觉通路的完整性可能是其发挥干预效应的核心机制。     

艾灸对AD大鼠学习记忆能力及海马Aβ、IL-1β、IL-2表达的影响

目的观察艾灸对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠学习记忆能力及海马β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)1-42、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)表达,探讨艾灸治疗AD的作用及其机制。方法将48只健康SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组和艾灸组,每组12只。采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备AD大鼠模型。术后第10天起,艾灸组采用艾灸百会、命门、长强及关元穴治疗,同时西药组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。治疗30 d后应用水迷宫测试检测各组大鼠的学习记忆能力的变化,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马Aβ1-42的情况,并采用双抗体夹心法检测各组大鼠海马区IL-1β以及IL-2的表达。结果与模型组比较,艾灸能显著减少海马中Aβ42沉积的情况(P0.05),降低IL-1b蛋白水平(P0.05),提高IL-2蛋白水平(P0.05),并且显著改善模型大鼠的学习记忆能力(P0.05)。结论艾灸能提高机体的免疫力和学习能力,其机制可能与降低海马中IL-1β含量、升高IL-2含量以及改善Aβ42沉积有关。     

“嗅三针”对阿尔茨海默病大鼠海马Bcl-2和Bax表达的干预效应

目的:探讨"嗅三针"通过嗅觉通路对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元细胞凋亡的影响,以阐明其治疗AD的作用机制。方法:成年SD雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、AD模型组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组,每组10只。β-淀粉样蛋白(Aβ)1-40肽段注射法制作AD大鼠模型,嗅神经切断术造大鼠嗅觉通路阻断模型。"印堂"穴及两侧"迎香"穴交替电针刺激行"嗅三针"治疗,每次10 min,每周治疗5次,共治疗6周。免疫组化法检测海马Bcl-2和Bax表达。结果:AD模型组较正常对照组Bcl-2阳性细胞减少(P<0.05),Bax阳性细胞表达增多(P<0.01);嗅三针组较AD模型组Bcl-2阳性细胞明显增多(P<0.01),Bax阳性细胞显著减少(P<0.01);嗅神经切断嗅三针组与AD模型组比较Bcl-2、Bax阳性细胞变化不明显(P>0.05)。结论:"嗅三针"能够调节海马Bcl-2和Bax的表达,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

“嗅三针”对帕金森病小鼠TH表达的影响

目的通过观察"嗅三针"干预对长期低剂量鼻饲脂多糖(LPS)帕金森(PD)模型小鼠行为学、嗅黏膜及黑质TH表达的影响,初步探讨针刺"嗅三针"调节PD早期的作用机制。方法选取C57BL/6雄性小鼠40只,随机分为空白组(Control),帕金森模型组(Model),嗅三针干预组(XSZ),西药左旋多巴组(L-DOPA),10只/组。除空白组外,其余各组均用经鼻灌注脂多糖(LPS)的方法建立PD模型,造模同时进行电针干预10 d,观察嗅黏膜病理变化及酪氨酸羟化酶(TH)表达水平。结果 PD模型组中嗅黏膜病理改变明显,TH在黑质的表达减少(P 0.05),经"嗅三针"干预后可以增加黑质TH表达,西药左旋多巴组对嗅觉改善无明显效应,但对可以增加PD模型小鼠黑质TH的表达(P 0.05)。结论针刺"嗅三针"可以改善PD早期小鼠的行为学功能障碍,其机制可能是通过改善嗅黏膜及增加TH在黑质的表达而实现的。     

艾灸“大椎”对荷瘤小鼠脑皮质白介素(IL)-1β、IL-2、IL-6 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察艾灸"大椎"治疗后荷瘤小鼠脑皮质白介素(IL)-1β、IL-2、IL-6 mRNA及蛋白表达的变化,探讨艾灸调节肿瘤免疫抑制状态的机制。方法:H22荷瘤小鼠随机分为:正常组、荷瘤组、艾灸组、非经穴组,每组10只。采用艾灸"大椎"治疗,原位杂交法检测脑皮质IL-1β、IL-2、IL-6 mRNA表达,免疫组化法检测脑皮质IL-1β、IL-2、IL-6蛋白表达。结果:与正常组比较,荷瘤组小鼠脑皮质中IL-1β、IL-2的mRNA和蛋白表达均显著下降,IL-6 mRNA和蛋白质表达显著上升(P0.05,P0.01);与荷瘤组比较,艾灸组小鼠脑皮质中IL-1β、IL-2 mRNA和蛋白表达显著上升,IL-6 mRNA和蛋白则显著下降(P0.05)。结论:艾灸治疗能上调荷瘤小鼠脑皮质IL-1β、IL-2 mRNA和蛋白表达,下调IL-6 mRNA和蛋白表达。艾灸调节荷瘤小鼠机体免疫抑制状态可能与调节脑皮质IL-1β、IL-2、IL-6mRNA和蛋白表达有关。     

"嗅三针"对阿尔茨海默病大鼠海马毒覃碱型受体的影响

目的:探讨"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马胆碱能毒覃碱型受体(M受体)表达及功能的影响,了解其对嗅觉通路完整性的依赖作用.方法:成年SD雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、AD模型组、嗅神经切断+嗅三针组和嗅三针组,每组10只.采用Aβ1-40淀粉样肽注射法制作AD大鼠模型,嗅神经切断术造大鼠嗅觉通路阻断模...     

嗅三针对阿尔茨海默病患者认知功能影响的临床研究

目的:探索嗅三针刺激法对于阿尔茨海默病患者认知功能的影响。方法:治疗组用嗅三针刺激法,对照组用药物疗法。同时,分别于治疗前后进行长谷川痴呆修改量表(HDS)、简易智力状态检查表(MMSE)评分。结果:治疗前后两组HDS、MMSE评分改变均有极显著性差异(P<0.01);治疗前后两组HDS、MMSE评分差值之差异无显著性意义(P>0.05)。治疗组和对照组总有效率分别为75.00%和72.50%,两组疗效比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:嗅三针刺激法对于改善阿尔茨海默病患者认知功能具有确切疗效。     

电针对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力及海马细胞凋亡的影响

目的:观察电针阿尔茨海默病(AD)模型幼年小鼠"百会""风府"和双侧"肾俞"对其认知和学习记忆功能的影响及凋亡机制。方法:40只6周龄APP/PS1转基因雄性幼鼠作为AD模型,随机分为电针穴位组和AD模型组,每组20只;另选20只同月龄C57BL/6J雄性幼鼠作为正常对照组。电针穴位组小鼠电针"百会""风府"和双侧"肾俞",20 min/次,1次/d,每周休息1 d,连续治疗16周。采用水迷宫实验评价小鼠学习记忆能力;刚果红染色法和免疫组织化学法检测大脑皮层和海马的老年斑;TUNEL法检测小鼠海马神经元凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测海马凋亡相关因子半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、 B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:和正常对照组比较,AD模型组小鼠定位航行实验潜伏期明显延长(P<0.05);穿越原平台次数、平台象限停留时间明显减少(P<0.05);海马齿状回和大脑皮层的Aβ老年斑阳性表达量、海马齿状回凋亡细胞、Caspase 3和Bax表达明显升高(P<0.05)。与AD模型组比较,电针穴位组小鼠的定位航行实验潜伏期明...     

槲皮素对实验性肺结核病小鼠TLR4、TRAF6、IL-1β表达影响的研究

目的:探讨槲皮素对肺结核小鼠Toll样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)、肿瘤坏死因子相关因子-6 (Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)表达的影响。方法:120只昆明系雌性小鼠,随机选取15只为空白组,其余105只建立肺结核病小鼠模型。选取模型制备成功的60只小鼠分为模型组、槲皮素低、中、高剂量组,每组15只,低、中、高剂量组分别灌胃0.4 mL浓度分别为1 mg/mL,2.5 mg/mL,5 mg/mL的槲皮素,空白组及模型组给予等量PBS,于给药8天后,检测各组小鼠体征变化,HE染色观察肺脏病理变化,用免疫组织化学法,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量检测肺脏组织TLR4、TRAF6、IL-1β表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠皮毛暗淡无光,精神萎靡,懒动,且体质量增加量显著下降(P 0.05),肺脏炎症明显增加,TLR4、TRAF6、IL-1β蛋白及m RNA表达量显著上升(P 0.05);与模型组比较,槲皮素各剂量组能显著改善小鼠皮毛及精神状态,且体质量增加量显著增加(P 0.05),肺脏炎症明显改善;TLR4、TRAF6、IL-1β蛋白及mRNA表达量显著下调(P 0.05),且呈现药物剂量依赖性(P 0.05)。结论:槲皮素可明显减轻肺结核病造成的肺脏炎症反应,推测其机制为槲皮素抑制TLR4、TRAF6的高表达,阻碍相关炎症信号通路激活从而减少相关炎症因子的释放,抑制炎症反应,减轻组织病理损伤,起免疫调节抗感染作用。     

嗅三针对痴呆大鼠海马胆碱能系统功能影响

目的:探索嗅三针对拟痴呆大鼠脑海马区胆碱能系统功能的影响作用。方法:测定大鼠脑海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)。结果:迷宫学习记忆能力测试表明,嗅三针组成绩优于模型组(P<0.01);嗅三针组海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性明显高于模型组(P<0.01)。结论:嗅三针可以增强中枢神经胆碱能系统的功能,并且由此对痴呆大鼠产生治疗作用。     

蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠海马NF-κB、IL-6表达的影响

目的:观察蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及海马核因子κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血的方法制备小鼠血管性痴呆模型,将小鼠随机分成假手术组,模型组,天保宁0.01g/kg剂量组,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组,每组12只,各组灌胃相应药物20ml/kg,连续35d。给药35d后利用跳台仪、Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力;采用苏木素-伊红(HE)染色考察海马区病理形态;采用免疫组织化学染色法检测海马区NF-κB、IL-6表达。结果:与模型组相比,蓝布正10g/kg、5g/kg剂量组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,穿越平台数显著增加;与模型组比较,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组小鼠海马组织病变情况改善,海马区NF-κB、IL-6表达显著下降。结论:炎症反应在血管性痴呆的发生中起到重要作用,蓝布正可能是通过降低NF-κB表达,抑制炎性因子(如IL-6)的释放,保护脑神经元,改善血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。     

电针对阿尔茨海默病小鼠海马细胞内β-淀粉样蛋白及自噬相关蛋白表达的影响

目的:通过观察电针对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马细胞内β-淀粉样蛋白(Aβ)及自噬相关蛋白表达的影响,探讨电针治疗AD的机制。方法:将18只6月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和电针组,每组9只;以9只同月龄同性别的C57BL/6野生型小鼠作为正常对照组。电针组小鼠给予针刺“百会”及电针双侧“涌泉”,20 min/次,隔日1次,共治疗21次。采用Morris水迷宫实验观察小鼠空间学习记忆能力,透射电镜法观察小鼠海马自噬相关病理变化,免疫荧光染色法观察小鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3(LC3)及Aβ的表达,Western blot法检测小鼠海马组织中LC3、p62蛋白的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),原平台象限停留时间缩短(P<0.05),海马CA1区LC3、Aβ阳性表达均升高(P<0.01),海马组织中LC3Ⅱ、p62蛋白表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),原平台象限停留时间延长(P<0.0...     

芒针治疗对脊髓损伤大鼠TNF-α、IL-6β、IL-1β、NF-Kβ表达的影响

目的:应用改良Allen’s造模法制备大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型,观察芒针对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后脊髓组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6),白介素-1(IL-1β)和核转录因子Kβ(NF-Kβ)含量的影响。方法:将72只SD大鼠随机分为两组:模型组36只和芒针组36只,采用改良Allen’s打击法致伤模型组和芒针组大鼠T9~T11脊髓。芒针组采用芒针刺秩边与水道穴,1次/d,共治疗7d。分别于术后1d,3d,7d行BBB评分测定;术后1d,3d,7d取材,用ELLSA法检测脊髓组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、NF-Kβ的含量。结果:实验发现7d时芒针组BBB评分明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);脊髓损伤后,模型组和芒针治疗组TNF-α、IL-6、IL-1β、NF-Kβ含量显著升高。经治疗,与模型组相比,芒针组受损脊髓组织内TNF-α,IL-6、IL-1β、NF-Kβ的表达均降低,且在1d,3d,7d的差异具有统计学意义(P0.01)。结论:早期芒针治疗可显著抑制脊髓损伤炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β、NF-Kβ的表达,改善局部微环境,促进损伤后期大鼠运动功能的恢复。     

电针后血清对脂多糖诱导的软骨细胞IL-1β、IL-6表达的影响

目的探讨电针后血清对脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞IL-1β、IL-6表达的影响。方法将40只两月龄雄性SD大鼠按1∶3随机分为空白组和造模组,造模组采用改良Hulth造模法建立膝骨关节炎模型并随机分为对照组、实验1组和实验2组各10只,实验1组、实验2组分别予电针治疗15 min/d、30 min/d,空白组和对照组正常饲养,共干预12周,疗程结束后,腹主动脉采血,制备实验用血清。选取4周龄健康雄性SD大鼠10只,Ⅱ型胶原酶消化法体外分离培养软骨细胞后分为正常组、模型组、电针15 min组和电针30 min组,使用LPS诱导建立体外培养软骨细胞炎症模型,并同时予大鼠空白组血清、对照组血清、实验1组血清和实验2组血清进行干预,观察4组软骨细胞干预后IL-1β、IL-6表达的变化。结果与正常组比较,模型组软骨细胞IL-1β、IL-6的表达明显升高(P0.01);与模型组比较,电针15 min组和电针30 min组软骨细胞IL-1β、IL-6表达明显降低(P0.01,P0.05)。结论电针后血清能有效抑制软骨细胞炎症因子IL-1β、IL-6的表达,从而抑制软骨细胞炎症反应。     

嗅三针对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马生长抑素、精氨酸加压素含量的影响

目的:观察嗅三针对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆功能及海马神经肽的影响,探讨嗅三针治疗VD的作用机制。方法:成年SD雄性大鼠40只,随机分为正常组、VD模型组、VD嗅球损毁针刺组、嗅三针组,每组10只。四血管阻断法制作VD大鼠模型,电凝法损毁嗅球模型。电针双侧"迎香"印堂",每日1次,共6周,水迷宫测试大鼠学习记忆能力,放射免疫法测定海马神经肽生长抑素(soma-tostatin,SS)和精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)含量。结果:定位航行试验显示:平均逃避潜伏期比较,VD模型组长于正常组(P<0.01);嗅三针组短于VD模型组及VD嗅球损毁针刺组(P<0.01);VD嗅球损毁针刺组与VD模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。空间探索试验显示:原平台象限跨越相应平台的次数比较,VD模型组少于正常组(P<0.01);嗅三针组多于VD模型组及VD嗅球损毁针刺组(P<0.01);VD模型组与VD嗅球损毁针刺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。海马SS、AVP含量比较,VD模型组低于正常组(P<0.05);嗅三针组高于VD模型组及VD嗅球损毁针刺组(P<0.05);VD模型组与VD嗅球损毁针刺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:嗅三针能够增强VD大鼠学习记忆功能,并且能提高海马神经肽SS、AVP的含量,其治疗效应的发挥与嗅觉传导通路的完整性有关。     

胡椒碱对急性心肌梗死大鼠HMGB1、IL-1β和IL-6水平的影响

目的 观察胡椒碱对急性心肌梗死（AMI）大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-1β(IL-1β和白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组、手术组、胡椒碱低剂量组（10 mg/kg）、胡椒碱中剂量组（20 mg/kg）及胡椒碱高剂量组（30 mg/kg）5组。建立大鼠AMI模型后,即刻给予相应剂量的胡椒碱或生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃7 d。TTC染色法检测心肌梗死面积,同时取各组大鼠心尖组织,病理形态学分析心肌损伤情况,ELISA法测定HMGB1、IL-1β和IL-6的含量,最后采用分子对接方法分析胡椒碱和HMGB1之间的相互作用。结果 与假手术组比较,手术组可见较大面积的心肌梗死,心肌组织可见细胞变性、细胞坏死等病理改变,HMGB1、IL-1β和IL-6水平显著升高（均P <0.05）。与手术组比较,胡椒碱低、中、高剂量组可减轻心肌梗死面积,改善心肌细胞变性坏死,降低HMGB1、IL-1β和IL-6水平,且以上改变呈剂量依赖性（均P <0.05）。分子对接分析发现胡椒碱可靶向结合HMGB1,结合能为-8.01 kcal/m...     

清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠IL-1β、 IL-6 mRNA表达的影响

目的：探讨中药清肠栓治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机理。方法：用TNBS50％乙醇溶液肛门注入制作大鼠UC模型，分组分别给予清肠栓、醋酸泼尼松等治疗14d后处死，迅速剖取远端结肠，置液氮中备用。用RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳及凝胶图象分析系统检测各组大鼠结肠粘膜IL-1β、IL-6mRNA的表达情况。结果：清肠栓、醋酸泼泥松均可抑制模型大鼠结肠粘膜IL-1β、IL-6mRNA表达。结论：IL-1β、IL-6是导致UC结肠粘膜损伤的重要炎症介质，清肠栓治疗UC的作用机理与抑制IL-1β、IL-6mRNA表达有关。     

"肾脑相济"电针对阿尔茨海默病模型小鼠行为学及IL-1β、TNF-α表达的影响

目的观察"肾脑相济"电针对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠行为学和大脑皮质炎性因子白细胞介素-1β(IL-1b)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探究"肾脑相济"电针疗法治疗阿尔茨海默病的作用机理。方法将7月龄雄性SAMP8小鼠随机分成模型组、西药组和电针组,每组6只;将SAMR1小鼠作为对照组。西药组给予盐酸多?哌齐灌胃,电针组电针百会、肾俞和三阴交。采用Morris水迷宫观察小鼠行为学,应用免疫组化法、Western Blot法测定大脑皮质区IL-1b、TNF-α的阳性细胞数和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力明显下降,IL-1b、TNF-α的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组和电针组小鼠学习记忆能力增强,IL-1b、TNF-α的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,电针组小鼠学习记忆能力及IL-1b、TNF-α的表达变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论"肾脑相济"电针疗法可以改善SAMP8模型小鼠的学习和记忆能力,降低大脑皮质区IL-1b、TNF-α的含量,从而对阿尔茨海默病达到治疗效果。