大黄素通过NF-κB信号途径抑制胰腺癌生长和转移

目的:观察大黄素抑制体内外胰腺癌生长和转移的作用及其机制。方法:以不同浓度的大黄素(10⁴0μmol·L-1)作用胰腺癌BxPC-3细胞24 h后,应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖;流式细胞术(FCM)及膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)/碘化丙啶(PI)双染色法检测大黄素作用后细胞凋亡率的变化;划痕试验和Matrigel细胞侵袭实验分别测定胰腺癌细胞体外迁移和侵袭能力;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测胰腺癌细胞中NF-κB活性表达水平的变化;Western blot法检测药物作用后细胞中蛋白表达;裸鼠胰腺癌原位移植模型建立后2周,使用大黄素进行干预治疗,采用免疫组化方法检测Ki-67、NF-κB、Survivin和MMP-9的表达。结果:与对照组相比较,大黄素可呈浓度依赖性抑制BxPC-3细胞生长、迁移和侵袭;大黄素可上调BxPC-3细胞中Caspase-3表达,并下调Survivin和MMP-9的表达水平,呈现出明显的量效关系;体内试验结果表明,大黄素可抑制体内胰腺癌生长和转移,并降低肿瘤组织中Ki-67、NF-κB、Survivin和MMP-9的表达。结论:大黄素可显著抑制体内外胰腺癌生长和转移,通过抑制NF-κB及其调控蛋白Survivin和MMP-9可能是其重要作用机制之一。     

丹参酮ⅡA抑制人宫颈鳞癌细胞SiHa侵袭与诱导凋亡的研究

目的观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对宫颈癌鳞癌细胞SiHa细胞侵袭的抑制作用及诱发细胞发生凋亡情况,探讨其可能作用机制。方法常规体外培养人宫颈鳞癌癌细胞系SiHa,加入0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L浓度的TanⅡA,继续培养24 h。通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用MTT试验检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测TanⅡA对细胞迁移能力的影响,用Transwell小室法检测TanⅡA对SiHa细胞侵袭的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察SiHa细胞凋亡变化。Western blotting法检测MMP-2、NF-κB p65蛋白的表达。结果细胞形态学观察显示,不同浓度TanⅡA均可导致细胞形态学发生改变;MTT试验表明,TanⅡA对SiHa细胞的生长有明显抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强(P0.05,P0.01);划痕实验结果显示,随TanⅡA药物浓度的增加,SiHa细胞迁移能力下降(P0.01);Transwell小室实验显示,TanⅡA对SiHa细胞体外的侵袭力具有很强的抑制作用;Western blotting结果表明,TanⅡA给药能够抑制SiHa细胞MMP-2蛋白的表达与NF-κB p65的激活(P0.01)。结论 TanⅡA能够抑制人宫颈鳞癌细胞SiHa细胞侵袭与诱导凋亡,其机制可能与抑制NF-κB蛋白的激活下调MMP-2的表达有关。     

高良姜素抑制乳腺癌转移作用机制研究

目的探究高良姜素对MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度高良姜素对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验考察高良姜素对MDA-MB-231水平迁移能力和垂直迁移能力的影响;Transwell小室侵袭实验分析高良姜素对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响;采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法考察高良姜素对MDA-MB-231细胞PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,免疫荧光染色实验验证高良姜素对MDA-MB-231细胞PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blotting法和免疫荧光染色实验考察高良姜素对核转录因子(NF-κB)p65磷酸化表达和入核的影响;制备乳腺癌MDA-MB-231细胞株裸鼠移植瘤模型,高良姜素200μg/kg ig给药15 d,检测肿瘤体积和质量,计算抑瘤率,Western blotting分析肿瘤组织PI3K、AKT、MMP-2、MMP-9表达及NF-κB p65磷酸化表达情况。结果高良姜素体外浓度为50、100、200μmol/L时可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖;高良姜素能剂量依赖性抑制PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达,降低NF-κB p65磷酸化表达和入核;200μg/kg高良姜素能抑制裸鼠乳腺癌的生长,抑瘤率为43.66%;高良姜素能抑制瘤组织中PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9表达以及NF-κB p65磷酸化表达。结论高良姜素在体内对MDA-MB-231生长有明显的抑制作用,在体外能抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭,抑制相关蛋白PI3K、Akt和MMP-2、MMP-9蛋白表达,抑制转录因子NF-κB磷酸化表达及入核,阻断其激活。     

华蟾素抑制人胃癌BGC-823细胞体外侵袭、迁移的机理

目的探讨华蟾素(Cinobufacin)体外抑制人胃癌BGC-823细胞侵袭的作用及其机制。方法以0.156 mg/L和0.313 mg/L华蟾素体外作用人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测华蟾素对BCG-823细胞生长的抑制效果,Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测BGC-823细胞中NF-κB p56、MMP-9蛋白的表达量。结果华蟾素可浓度依赖性抑制体外BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭,同时下调BGC-823细胞中NF-κB和MMP-9蛋白表达。结论华蟾素体外可抑制胃癌的转移,该作用可能通过下调NF-κB、MMP-9的表达相关。     

知母皂苷AⅢ调控miR-494对原发性皮肤黑色素瘤生物学行为的影响

目的:探讨知母皂苷AⅢ调控miR-494对原发性皮肤黑色素瘤增殖、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人黑色素瘤A375细胞,分别用0、4、8、16 μmol/L的知母皂苷AⅢ处理A375细胞24 h。将miR-NC、miR-494转染至A375细胞,作为miR-NC、miR-494组; 将anti-miR-NC、anti-miR-494转染至A375细胞,再用知母皂苷AⅢ(16 μmol/L)干预,作为anti-miR-NC+16 μmol/L组、anti-miR-494+16 μmol/L组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖情况; 蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达; Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况; 实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-494表达水平。结果:与对照组比较,8、16 μmol/L中、高剂量组的知母皂苷AⅢ明显下调组细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05)。与对照组比较,8 μmol/L中剂量组、16 μmol/L高剂量组的知母皂苷AⅢ明显上调细胞miR-494表达水平(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-494组细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05)。与anti-miR-NC+16 μmol/L组比较,anti-miR-494+16 μmol/L组细胞miR-494表达水平显著降低; 细胞A值、迁移数量和侵袭数量以及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:知母皂苷AⅢ上调miR-494抑制原发性皮肤黑色素瘤增殖、迁移和侵袭。     

大黄素抑制体内外胰腺癌转移的实验研究

目的:探讨大黄素抑制体内外胰腺癌转移的作用及其机制.方法:不同浓度大黄素(10,20,40μmol·L-1)作用人胰腺癌细胞株SW1990 2 h后,观察大黄素对SW1990细胞迁移和侵袭的作用;不同浓度大黄素(10,20,40 μmol·L-1)作用SW1990细胞48 h后,Western blot印迹检测胰腺癌细胞中NF-kB和MMP-9表达的变化;建立胰腺癌原位移植模型,分成对照组、大黄素低、高剂量组(20,40 mg·kg-1),实验结束后观察大黄素对裸鼠胰腺癌转移的抑制作用;免疫组织化学法检测裸鼠胰腺肿瘤组织中CD34,NF-kB,MMP-9的阳性表达.结果:大黄素可抑制体外人胰腺癌SW1990细胞迁移和侵袭,呈浓度依赖性;大黄素可下调人胰腺癌SW1990细胞中NF-kB和MMP-9的表达水平;与对照组相比较,大黄素低、高剂量均可明显抑制瘤荷裸鼠中胰腺癌转移,并下调CD34,NF-kB和MMP-9在胰腺肿瘤组织中的阳性表达(P＜0.05).结论:大黄素可抑制体内外胰腺癌转移,该作用可能通过下调NF-kB和MMP-9表达而实现.     

盐酸小檗碱对人宫颈癌细胞株转移侵袭研究

目的:研究不同浓度盐酸小檗碱对人宫颈癌Hela细胞转移侵袭的影响,探讨其抗癌机制。方法:将不同浓度的盐酸小檗碱作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;应用Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭和运动实验,观察盐酸小檗碱对Hela细胞侵袭和转移的影响;采用免疫组化SABC法检测Hela细胞中MMP-9、NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明,盐酸小檗碱能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖(P0.05),并具有剂量、时间依赖性(P0.05),同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;免疫组化SABC法结果显示,盐酸小檗碱能引起细胞内MMP-9、NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。结论:盐酸小檗碱对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用;盐酸小檗碱能够减弱人宫颈癌细胞Hela的侵袭和转移,其作用机制可能与降低MMP-9、NF-κBp65的表达有关。     

雷公藤内酯醇对神经胶质瘤侵袭的体外抑制作用

目的:研究雷公藤内酯醇对胶质瘤侵袭性的体外抑制作用,并探讨其作用分子机制.方法:通过MTT法测定雷公藤内酯醇对胶质瘤细胞株U87细胞增殖抑制作用,划痕实验和Transwell实验评价雷公藤内酯醇对细胞侵袭能力的影响,Real-Time PCR和Western印迹法检测雷公藤内酯醇对U87胶质瘤细胞的组织蛋白酶B(cathepsins B,CB)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核因子NF-κB(p65)表达的影响.结果:雷公藤内酯醇对胶质瘤细胞增殖有显著的抑制作用,同时可降低U87胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力,下调其CB,MMP-9和NF-κB表达水平.结论:雷公藤内酯醇降低U87胶质瘤细胞侵袭能力的机制可能与抑制NF-κB通路、下调CB及MMP-9的表达、降低恶性胶质瘤水解细胞外基质的能力有关.     

五龙消癥丸抑制人胃癌BGC-823细胞侵袭与迁移作用及机制研究

目的探究五龙消癥丸对胃癌BGC-823细胞侵袭与迁移能力的影响及其作用机制。方法分别用五龙消癥丸、PI3K激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)及PI3K特异性抑制剂LY294002作用于BGC-823细胞,采用MTT法检测不同质量浓度五龙消癥丸对BGC-823细胞增殖的影响;Transwell小室模型研究五龙消癥丸对BGC-823细胞垂直侵袭和迁移能力的影响;采用ELISA法检测五龙消癥丸对血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达的影响;采用Western blotting及RT-PCR法检测脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中相关蛋白及m RNA的表达。结果五龙消癥丸可显著抑制BGC-823细胞的增殖、黏附、侵袭和迁移能力,显著抑制BGC-823细胞中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,显著抑制p-PI3K、p-Akt、磷酸化Ik B激酶-α(p-IKK-α)、p-NF-κB p65Ser 276蛋白及PI3K、Akt、IKKα、NF-κB m RNA的表达,并且呈现一定的时效和量效关系。结论五龙消癥丸通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白及m RNA表达,从而达到抑制BGC-823细胞的增殖、迁移、侵袭作用。     

芦荟大黄素对肝癌HepG2细胞生长、迁移及纤维状肌动蛋白的影响

目的:探讨芦荟大黄素对肝癌Hep G2细胞生长、迁移及纤维状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:通过对人正常肝细胞株QSG-7701细胞的药物毒性实验筛选出芦荟大黄素对人正常肝细胞无明显毒性的最大无毒浓度(TC0);以TC0为最高浓度并稀释成3个不同的芦荟大黄素浓度,作用于体外培养人肝癌Hep G2细胞为芦荟大黄素组,另设置未加药物Hep G2细胞为空白组;通过噻唑蓝(MTT)比色法检测两组细胞作用48 h后细胞增殖抑制率;采用细胞小室移动实验及划痕实验检测两组细胞迁移能力;高内涵细胞成像系统分析芦荟大黄素对Hep G2细胞F-actin表达的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS),核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:芦荟大黄素对人正常肝细胞株QSG-7701细胞的TC0为50μmol·L-1,以TC0为最高浓度,将芦荟大黄素(10,30,50μmol·L-1)作用于Hep G2细胞;与空白组相比,芦荟大黄素组细胞培养48 h后增殖抑制率升高,且呈剂量递增型(P0.01);芦荟大黄素组细胞培养48 h后划痕距离增宽,迁移能力降低,且呈剂量递减型(P0.01);F-actin面积缩小,排列紊乱且不规则,边缘模糊,且呈浓度递减型(P0.01);芦荟大黄素组细胞NF-κB p65表达增多,p-e NOS表达减少,且呈浓度递减型(P0.01)。结论:芦荟大黄素可能通过增强NF-κB p65,降低p-e NOS表达,促进F-actin解聚,减少微丝形成,从而降低肝癌Hep G2细胞的增殖和迁移能力,发挥其抑制肿瘤的作用。     

大黄素对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠胰腺及肺组织Toll样受体4和9表达的影响

目的:研究Toll样受体TLR4和TLR9在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤中的表达及大黄素(EMO)对其的影响。方法:56只大鼠随机分为3组,模型组、EMO组各24只及假手术组8只。模型组和EMO组采用开腹胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠建立SAP肺损伤模型,假手术组以开腹轻微翻动胰腺即关腹代替;EMO组在术前、术后1h按10ml/kg体重腹腔注射4mg/ml浓度的EMO混悬液,假手术组和模型组大鼠以注射4%蔗糖脂肪酸酯混悬液代替,假手术组术后3h后处理,模型组和EMO组于术后3h、6h、12h分批处理8只;采用免疫组化检测胰腺和肺组织TLR4、TLR9和核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果:与假手术组比,模型组除肺组织术后3h的TLR4、TLR9、NF-κB以及6h的TLR9外,其余各时间点胰腺及肺组织TLR4、TLR9和NF-κB表达均显著增高(P0.05,P0.01);6h时间点,EMO组胰腺、肺组织TLR4、NF-κB以及胰腺TLR9表达均较模型组明显上调(P0.05);12h时间点,EMO组胰腺及肺组织TLR4、TLR9、NF-κB表达较模型组表达明显下调(P0.05)。结论:TLR4和TLR9在SAP大鼠肺损伤中有重要作用;EMO防治SAP肺损伤的机制可能与其调节胰腺和肺组织中TLR4和TLR9的表达有关。     

NF-κB在大黄素联合吉西他滨治疗裸鼠胰腺癌肝转移中的作用

目的：观察大黄素联合吉西他滨对裸鼠胰腺癌肝转移模型的影响及其可能机制。方法：建立裸鼠胰腺癌肝转移模型,随机（随机数字法）分为对照组、大黄素组、吉西他滨组和联合用药组（n=10）,观察各组荷瘤裸鼠肝转移瘤生长情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和CD-34的表达;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡;凝胶电泳迁移率实验（EMSA）检测肿瘤细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测肿瘤组织中Survivin、Caspase-3、VEGF和MMP-9的表达。结果：相对吉西他滨组,吉西他滨联合大黄素可显著抑制胰腺癌肝转移瘤生长;与吉西他滨组相比较,大黄素单独或联合吉西他滨可抑制体内胰腺癌肝转移瘤中Ki-67和CD34的阳性表达,并降低NF-κB活性以及Survivin、VEGF和MMP-9的表达水平,同时上调Caspase-3的表达。结论：大黄素可增强吉西他滨对体内外胰腺癌肝转移瘤的增殖抑制和诱导凋亡作用,该作用可能通过下调NF-κB及其调控蛋白而实现。     

槲皮素对U937细胞迁移和侵袭能力及MMP-2,MMP-9表达的影响

目的:观察槲皮素(quercetin)对人急性髓系白血病(human acute myeloid leukemia)U937细胞增殖、凋亡、黏附力、迁移和侵袭能力及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响。方法:体外培养U937细胞,分别以0,10,20,40μmol·L-1槲皮素处理24,48,72 h,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测槲皮素对U937细胞增殖的抑制作用。实验随机分为空白组,槲皮素10,20,40μmol·L-1组。末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测U937细胞凋亡情况;细胞黏附实验检测U937细胞黏附力;划痕修复实验检测U937细胞迁移能力;transwell小室体外侵袭实验检测U937细胞侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测U937细胞MMP-2,MMP-9蛋白表达。结果:槲皮素可抑制U937细胞的增殖。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显升高U937细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显降低U937细胞黏附率,迁移率,侵袭细胞数及MMP-2,MMP-9蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:槲皮素可显著抑制U937细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与其抑制MMP-2和MMP-9表达有关。     

人参皂苷CK抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的实验研究

目的探讨人参皂苷CK对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的影响及潜在机制。方法体外培养MCF-7细胞,分别通过四甲基噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、Transwell侵袭实验及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同浓度的人参皂苷CK对MCF-7细胞活力、迁移能力、侵袭能力及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达的影响。结果人参皂苷CK可剂量依赖性的抑制MCF-7细胞的增殖;与对照组相比,人参皂苷CK 5,10μmol/L组的细胞迁移能力及2.5,5,10μmol/L组的细胞侵袭能力呈显著性降低(P0.05);与对照组相比,人参皂苷CK 2.5,5,10μmol/L剂量组的MMP-2及5,10μmol/L剂量组的MMP-9表达呈显著性降低(P0.05)。结论人参皂苷CK具有抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的作用,该作用与MMP-2及MMP-9的表达减少有关。     

隐丹参酮对人乳腺癌细胞MDA-MB-231转移的影响及其分子机制

目的:探究隐丹参酮对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)体内、外转移的影响及其作用机制。方法:体外采用溴脱氧尿苷(BrdU)掺入免疫荧光实验考察隐丹参酮(0.5~8μmol·L-1)作用24 h对MDA-MB-231细胞(密度5×105/孔)增殖的影响;应用划痕和Transwell实验观察隐丹参酮(0.5~8μmol·L-1)作用24 h对肿瘤细胞(密度1×105/孔)迁移的影响;采用Western blot的方法考察隐丹参酮(0.5~8μmol·L-1)作用24 h对上皮间质转化相关蛋白E-钙黏素和N-钙黏素表达的影响;利用荧光素酶报告基因系统观察隐丹参酮(0.5~8μmol·L-1)作用6 h对MDA-MB-231细胞(密度为1×105/孔)核因子-κB(NF-κB)转录活性的影响;体内再应用斑马鱼肿瘤转移模型研究隐丹参酮(0.125~2μmol·L-1)作用6天对人乳腺癌MDAMB-231细胞转移数目及转移距离的作用来考察其对体内肿瘤转移的影响。结果:在体外,隐丹参酮在0.5~8μmol·L-1可以剂量依赖性地抑制MDA-MB-231BrdU阳性细胞的比例,抑制划痕实验和Transwell实验中迁移细胞的数目,增加E-钙黏素的表达,同时降低N-钙黏素的表达,并抑制NF-κB的相对启动子活性。在体内,隐丹参酮在0.125~2μmol·L-1可以剂量依赖性地减少MDA-MB-231乳腺癌细胞远端转移的数目,降低转移的最远距离。结论:隐丹参酮在体内外均有显著的抗乳腺癌转移作用,在体外对肿瘤细胞增殖还有一定作用,其机制可能是通过抑制NF-κB转录活性从而逆转MDA-MB-231细胞的上皮间质转化起作用的。     

抑肺饮抑制肺癌转移的机制研究

【目的】 观察抑肺饮对肺癌细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）-核转录因子kappaB（NF-κB）信号通路以及细胞上皮间质转化（EMT）的影响,探讨抑肺饮对肺癌细胞生长和转移的抑制作用及机制。【方法】 制备抑肺饮含药血清,通过四甲基偶氮唑盐（MTT）实验、侵袭实验和迁移实验观察抑肺饮对肺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移能力的影响。以TNF-α诱导A549细胞建立细胞EMT模型,采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法观察抑肺饮对细胞EMT的影响,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法观察抑肺饮对A549细胞中EMT标志物蛋白表达水平及NF-κB p65磷酸化水平的影响,采用荧光素酶报告基因实验观察抑肺饮对NF-κB启动子活性的影响。建立Lewis肺癌移植瘤小鼠模型,称瘤体质量,观察肺脏转移灶情况,采用免疫组织化学法检测瘤组织磷酸化 NF-κB p65 的表达水平,荧光定量 PCR 法检测瘤组织 B 细胞淋巴瘤-xL（Bcl-xL）、细胞周期蛋白 D1（CyclinD1）的mRNA表达水平。【结果】（1）抑肺饮含药血清能够抑制肺癌A549细胞的增殖、侵袭、迁移能力;（2）抑肺饮含药血清能够上调上皮细胞标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达水平,下调间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）的表达水平,抑制NF-κB p65磷酸化水平和NF-κB启动子活性;（3）体内研究结果显示,抑肺饮高剂量组的瘤质量和肺转移率,瘤组织中NF-κB p65磷酸化表达水平,靶基因Bcl-xL、CyclinD1的mRNA表达水平显著低于模型组,且抑肺饮联合顺铂使用时抑制效果最佳。【结论】 抑肺饮可能通过干预TNF-α-NF-κB信号通路,调节细胞EMT,从而发挥抑制肺癌细胞增殖和转移的作用。     

金丝桃苷对卵巢癌细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭的影响

目的探讨金丝桃苷(hyperin)对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法将SKOV3细胞分为:正常对照组、金丝桃苷组和阳性对照顺铂组。MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western Blot检测cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、Bcl-2、p65和p-IκB-α的蛋白表达;划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果与正常对照组相比,金丝桃苷处理显著抑制SKOV3的细胞增殖(P0.05),促进细胞凋亡(P0.05),上调cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9而下调Bcl-2的蛋白水平(P0.05),降低细胞的迁移和侵袭能力(P0.05),减少p65和p-IκB-α的蛋白水平(P0.05),抑制NF-κB信号通路的激活,且以上作用均随金丝桃苷处理浓度的增大而增强。结论金丝桃苷抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,这可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

头顶一颗珠正丁醇萃取物对人肝癌HepG2细胞的抑制作用及其对MMP-9、NF-κB p65的表达研究

目的 探究头顶一颗珠提取物对人肝癌Hep G2细胞抑制作用及其对基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinases-9,MMP-9)、核转录因子-κB p65(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)的表达研究。方法 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、6、12、24、48、96)μmol/L分别作用于人肝癌细胞株(hepatocarcinoma G2,HepG2) 24小时、48小时、72小时,使用细胞增殖和毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法,比较各组肝癌HepG2细胞的生长抑制率。多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、3、6、12、24)μmol/L分别作用于HepG2细胞48小时后,用实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR,qPCR)检测MMP-9、NF-κB p65的表达水平。结果 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物,与对照组比较,HepG2细胞的生长增殖均受到明显抑制(P0.01),且呈时间和浓度依赖性; MMP-9、NF-κB p65表达水平明显降低(P0.01),药物浓度越高,MMP-9 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达水平越低,MMP-9、NF-κB p65 mRNA表达水平呈正相关性。结论 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,可能通过抑制MMP-9mRNA、NF-κB p65 mRNA的表达,从而达到抗肝癌作用。     

乙酰紫草素对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭及NF-κB通路的影响

目的:探讨乙酰紫草素对结肠癌HT29细胞增殖、凋亡、侵袭及NF-κB通路的影响。方法:培养结肠癌HT29细胞至对数生长期,分别加入终浓度为0、10、20、40μmol/L的乙酰紫草素,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测凋亡率,实时定量PCR法检测凋亡相关基因表达,Western blot法检测MMP-2、MMP-9、p65、pIκB-α蛋白表达。结果:与对照组比较,10、20、40μmol/L乙酰紫草素处理24、48、72 h的细胞增殖抑制率均显著升高(P0.05);与对照组比较,10、20、40μmol/L乙酰紫草素处理48 h的细胞凋亡率及Bax、Bak mRNA表达均显著升高(P0.05),而Bcl-2 mRNA表达显著降低(P0.05);与对照组比较,10、20、40μmol/L乙酰紫草素处理48 h的MMP-2、MMP-9、p65、pIκB-α蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论:乙酰紫草素可在体外抑制结肠癌HT29细胞的增殖、诱导凋亡,也可抑制其侵袭作用及NF-κB通路的激活。     

肺岩宁颗粒调节肿瘤相关巨噬细胞对Lewis肺癌细胞迁移能力影响的研究

目的观察肺岩宁颗粒对肿瘤相关巨噬细胞调节作用及对Lewis肺癌细胞迁移能力影响。方法采用肺岩宁颗粒给SD大鼠灌胃制备药物血清;利用Lewis肺癌细胞制作条件培养基(Conditioned medium,CM)并诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞转化为肿瘤相关巨噬细胞;MTT法检测对肿瘤相关巨噬细胞增殖的影响;迁徙实验检测肺岩宁颗粒对Lewis肺癌细胞迁移能力的影响;刘氏染色的方法观察对肿瘤相关巨噬细胞形态的影响;PCR法检测肺癌细胞中MMP-2、MMP-9、NF-κBp65m RNA的表达。结果 MTT:培养24 h、48 h和72 h后,DDP组、肺岩宁颗粒组OD值均显著低于模型组(P<0.05)。迁徙实验:DDP组、肺岩宁颗粒组穿过膜细胞个数明显低于模型组(P<0.05),且肺岩宁颗粒组细胞个数明显低于DDP组(P<0.05)。肿瘤相关巨噬细胞刘氏染色:模型组、DDP组细胞显得粗糙和较多分支(M2型),肺岩宁颗粒组细胞呈不规则形或类圆形(M1型)。PCR检测MMP-2、MMP-9、NF-Bp65 m RNA的表达发现:DDP组、肺岩宁颗粒组在细胞中的表达减低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),且与DDP组比较,肺岩宁颗粒组MMP-2、MMP-9、NF-Bp65的表达更低(P<0.05)。结论肺岩宁颗粒能在体外能抑制Lewis肺癌细胞迁移能力,其机制可能是通过NF-κB的信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞及其分泌的细胞因子。