用重组CD4-RicinA杀伤HIV感染细胞

人类免疫缺陷病毒(HIV)膜糖蛋白gp120在许多HIV感染的细胞表面均有表达,它可与正常细胞表面分子CD4结合。重组CD4衍生物(γCD4)是一种可溶性可与gp120结合的蛋白,此结合具有高度亲和性。它可作为向HIV感染细胞运送细胞毒     

CD20scFv-IgGFc T 淋巴细胞的建立及其对B细胞淋巴瘤靶向杀伤作用的比较

目的：研究CD20scFv嵌合T淋巴细胞靶向杀伤Daudi细胞时杀伤的效果和T细胞活化情况。方法：将两种质粒转染至PA317细胞中，用转染成功的PA317上清液感染外周血T淋巴细胞后经800 mg/L的G418筛选1周后去杀伤Daudi、K562细胞，分别在不同时点用流式细胞仪检测Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率 ，用ELISA检测细胞因子IL-2、IFNγ。结果：Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率在24 h内两实验组与K562组相比明显增高，而实验组之间没有显著差异。72 h时CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组比CD20scFv-IgGFc组IL-2（1 509.00 ng/L比220.54 ng/L）和IFNγ（912.16 ng/L比251.42 ng/L）的分泌量有显著增高。结论：①两种CD20scFv特异的T细胞在引起Daudi细胞早期凋亡无显著差异，说明在CD20scFv的靶向杀伤过程中CD28-ζ基因可能不主导Daudi细胞的早期凋亡。②CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组IL-2、IFNγ增幅更加明显，说明CD3ζ和CD28嵌合的T细胞可以自身活化而不受MHC的限制，从而增强了T细胞的活化和杀伤等功能。     

AIDS患者γδ T 细胞能够杀伤自体HIV感染和未感染的CD4 T细胞

 目的：建立自体人类免疫缺陷病毒 (Human Immunodeficiency Virus, HIV) 感染的CD4 T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合症 (Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS) 患者γδ T 细胞对自体HIV感染和未感染的CD4 T细胞的杀伤作用。方法：分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞 (PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4 T细胞,加入植物血凝素（Phytohemagglutinin, PHA）和白细胞介素-2 (interleukin-2, IL-2) 共同培养,建立自体HIV感染的CD4 T细胞模型。流式细胞术检测HIV-p24+ CD4 T细胞的比例。乳酸脱氢酶 (Lactate dehydrogenase, LDH)法测定γδ T 细胞的细胞毒作用。结果：培养到第10 d时,HIV-p24+CD4 T细胞的比例达到最高值。AIDS患者的γδ T 细胞能够杀伤自体HIV感染和未感染的CD4 T细胞（细胞溶解率分别为71.1 ± 9.7和24.2 ± 18.2）。而健康志愿者γδ T 细胞对自体的CD4 T细胞没有杀伤作用（细胞溶解率为4.3 ± 10.1）。结论：AIDS患者γδ T 细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4 T细胞,为采用γδ T 细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据。     

T淋巴细胞表达杀伤细胞抑制性受体的研究进展

Only in recent years,attentions have been drawn to the significance of expressing killer cell inhibitory receptors(KIR)in T cells.KIRs specifically bind to the corresponding region of the MHC class I molecules and transmit negative signals to prevent cytotoxity of T cells.When the ligands of KIRs are missing,the lysis of the target cells can‘t be avoided.Perhaps the existence of KIRs is the main mechanism for preventing T cells from attacking autologous tissues.The recognition mechanism of the interaction between the KIR^ donor T cells and the recipient‘s MHC class I molecule expressing tissue cells might shed light on the establishment of the immunotolerance for the prevention of allo-graft rejection and graft-versus-host disease.     

HIV感染者B淋巴细胞功能损伤机制的研究进展

1983年的一项研究首次揭示了AIDS病人的B细胞出现高活化和功能损伤等异常现象[1],提示HIV感染不仅导致细胞免疫的功能缺陷,而且也能引起体液免疫的功能损伤.HIV感染诱导的B细胞变化主要表现在两方面:一方面是亚群上的变化,体现在未成熟/过渡型B细胞亚群、活化B细胞和浆细胞亚群、以及组织样记忆B细胞亚群增加,而初始和CD27+记忆B细胞亚群减少[2-4];另一方面是功能上的变化,包括高度异常活化、易于凋亡、HIV特异性或非特异性抗体反应性低[5-7]等.B细胞功能损伤使得体液免疫应答缺陷,HIV病毒不能得到有效控制,同时,还会增加机会感染和二次感染的易感性.因此,深入理解HIV感染过程中B细胞功能损伤的机制,不仅能通过改善体液免疫来减少机会感染和二次感染的发生,也为基于抗体的疫苗研究提供了依据.     

细胞毒性T淋巴细胞生物杀伤效应的检测方法

细胞介导的免疫效应在机体抗感染免疫、抗肿瘤免疫、移植排斥效应和自身免疫性疾病发生机制中发挥重要作用,主要效应细胞之一为细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphoclyte,CTL)。近年来,基于CTL特异性表位的多肽疫苗已经成为研究热点之一,CTL的活化及对靶细胞的杀伤效应成为衡     

HIV血清阳性个体中HIV特异性的细胞毒性T淋巴细胞

病毒特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对病毒感染细胞的杀伤作用是宿主抗病毒感染的一种主要机制。本文报导在人免疫缺陷病毒(HIV)感染的个体体内存在有HIV特异性的细胞毒性T淋巴细胞。作者首先建立了实验组和对照组的B淋巴细胞系,其中实验组B细胞来自8例HIV血清阳性的男性同性恋患者,而对照组B细胞来自5例HIV血清阴性个体。然后用HIV-牛痘重组病毒载体感染这些B细胞株,并将其作为靶细胞用于细胞毒活性的测     

B细胞系抑制性淋巴细胞——抑制B细胞

B细胞抑制的现象学抑制B细胞在各种器官中的分布在体内能抑制抗体产生的抑制B细胞存在于骨髓、脾脏和淋巴结,胸腺中无抑制B细胞。致敏豚鼠和小鼠的脾脏、淋巴结中存在能够特异地抑制迟发型超敏反应的抑制B细胞。在肿瘤诱导下,脾脏可以出现能非特异地抑制免疫反应的抑制B细胞。等人研究了在体外能抑制抗体产生的抑制B细胞在正常小鼠、B鼠(切除胸腺,再予以致死性照射,然后注射骨髓使之恢复的小鼠)以及裸鼠淋巴样组织中的分布,证实了B鼠和裸鼠的骨髓细胞和正常     

免疫杀伤细胞治疗对恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨链式激活和诱导的免疫杀伤细胞(CAPRI细胞)治疗对肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 接受CAPRI细胞治疗的滨州医学院附属医院肿瘤内科收治的50例恶性肿瘤患者为研究对象(肿瘤组),同时选择体检健康者30例为对照组,用流式细胞术检测所有患者治疗前后外周血T淋巴细胞CD3+及CD4+、CD8+的百分率,计算CD4+/CD8+比值并进行比较.结果 肿瘤患者治疗前外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+[ (56.40±7.14)％、(30.69±8.01)％、(29.10±7.13)％、1.05 ±0.28]与健康对照组[(66.78±6.05)％、(41.35±5.71)％、(26.08±5.36)％、1.59±0.31]及治疗后13 d[ (59.35±6.31)％、(34.95±7.21)％、(27.95±6.03)％、1.25±0.22]和治疗后25d[(62.36±6.41)％、(37.03±7.62)％、( 25.04±4.53)％、1.46±0.48]比较,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显降低、CD8+均明显升高(均P＜0.05);治疗后25d与治疗后13d比较,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显升高、CD8+均明显降低(均P＜0.05).结论 CAPRI细胞治疗肿瘤,能够纠正CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+失衡状态,能够调节机体T淋巴细胞的免疫功能.     

顺磁性铁纳米粒促进人淋巴细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤

 目的 探索顺磁性氧化铁纳米颗粒是否能调节由肿瘤裂解蛋白所诱发的针对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抗肿瘤免疫反应。方法 将纳米铁颗粒与肿瘤裂解蛋白进行共价连接形成纳米铁-蛋白复合物,用裂解蛋白、纳米铁、纳米铁-蛋白复合物分别刺激人外周血单个核细胞（PBMC）,再将刺激后的PBMC与MCF-7细胞相混合,用MTS方法检测对肿瘤细胞的杀伤率。结果 纳米铁能与60%的肿瘤裂解蛋白相连接,并形成较大的纳米颗粒。与单纯的肿瘤蛋白相比,纳米铁-肿瘤蛋白的复合物能够显著提升PBMC对MCF-7细胞的杀伤,而纳米铁本身对MCF-7无直接杀伤作用。结论 纳米铁-肿瘤蛋白的复合物能够显著增强PBMC在体外杀伤人乳腺癌细胞的能力。     

HIV感染与细胞焦亡

目前艾滋病(AIDS)被认为是一种慢性疾病。炎症和免疫活化在疾病进展中起了重要作用。细胞焦亡是HIV感染过程中造成CD4^+T细胞死亡的主要程序性细胞死亡方式,并伴随着IL-1β等促炎因子和细胞内容物的释放,引起机体炎症反应。细胞焦亡联系起了HIV感染过程中的CD4^+T细胞死亡和炎症反应发生这2个最主要的病理事件。因此,抑制细胞焦亡可能对艾滋患者的治疗有重要意义。本文综述了HIV感染过程中细胞焦亡的发生及其引起的病理性事件,为探索艾滋病患者治疗新策略提供线索。     

淋巴细胞杀伤靶细胞的机制

ＣＴＬ，ＮＫ，ＬＡＤ细胞直接杀伤靶细胞是一个十分复杂的过程，除了依靠其颗粒中含有的穿孔素使靶细胞发生坏死外，它们还可以通过其他途径包括诱导靶细胞发生凋亡（ａｐｏｐｏｓｉｓ）来杀伤靶细胞。本文介绍了近年来淋巴细胞杀伤靶细胞机制研究方面的一些进展。     

HIV 感染者调节性T 细胞表面B、T 淋巴细胞衰减因子的表达研究

目的:对HIV 感染者调节性T 细胞(Regulatory T cell,Treg)上B 、T 淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte at-tenuator,BTLA)的表达水平进行检测,并探讨其在HIV 感染进程中的作用。方法:选取24 例感染在一年之内的HIV 早期感染者(Early HIV infected patients,EHI 组)、14 例感染超过一年的HIV 慢性感染者(CD4+ T 计数>200 cells/ μl,HIV 组)、6 例AIDS患者(CD4+ T 计数<200 cells/ μl,AIDS 组)和9 例健康人作为对照,应用流式细胞仪检测不同时期感染者及健康对照者Treg 细胞BTLA 的表达水平,分析其与疾病进展及免疫活化的相关性。结果:随着HIV 疾病进展,EHI 组、HIV 组及AIDS 组Treg 细胞BTLA 表达水平依次升高,其中HIV 组与AIDS 组Treg 细胞BTLA 表达水平显著高于EHI 组(P<0.05 及P<0.01),AIDS 组Treg 细胞BTLA 的表达水平高于健康对照(P<0.05);Treg 细胞BTLA 表达水平与CD4+ T 淋巴细胞计数呈负相关(P<0.001),与病毒载量呈正相关(P<0.01);Treg 细胞BTLA 表达水平与活化CD4+ CD38+ T 淋巴细胞及CD4+ HLA-DR+ T 淋巴细胞呈正相关(P<0.001,P<0.001)。结论:HIV 感染者Treg 细胞BTLA 表达升高,与疾病进展显著相关,提示其可能通过加强Treg 细胞的抑制功能加速疾病进展,并为未来HIV 感染的干预提供信息。     

淋巴细胞杀伤靶细胞的机制

ＣＴＬ，ＮＫ，ＬＡＤ细胞直接杀伤靶细胞是一个十分复杂的过程。除了依靠其颗垃中含有的穿孔素使靶细胞发生坏死外，它们还可以通过其他途径包括诱导靶细胞发生凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）来杀伤靶细胞．本文介绍了近年来淋巴细胞杀伤靶细胞机制研究方面的一些进展。     

揭开HIV感染T细胞的面纱

本文阐明了ＨＩＶｇｐ１２０的晶体结构，揭示了ＨＩＶ感染Ｔ细胞的分子机制，对ＨＩＶ致病机理的探讨和疫苗的研制具有十分重要的意义。     

揭开HIV感染T细胞的面纱

本文阐明了ＨＩＶｇｐ１２０ 的晶体结构，揭示了ＨＩＶ 感染Ｔ 细胞的分子机制，对ＨＩＶ 致病机理的探讨和疫苗的研制具有十分重要的意义。     

表达CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ及CD20scFv-IgGFcT淋巴细胞的建立及其对B细胞淋巴瘤靶向杀伤作用的比较

目的:研究CD20scFv嵌合T淋巴细胞靶向杀伤Daudi细胞时杀伤的效果和T细胞活化情况.方法:将两种质粒转染至PA317细胞中,用转染成功的PA317上清液感染外周血T淋巴细胞后经800 mg/L的G418筛选1周后去杀伤Daudi、K562细胞,分别在不同时点用流式细胞仪检测Daudi细胞AnnexinV的阳性率,用ELISA检测细胞因子IL-2、IFNγ.结果:Daudi细胞Annexin V的阳性率在24 h内两实验组与K562组相比明显增高,而实验组之间没有显著差异.72 h时CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组比CD20seFv-IgGFc组IL-2(1 509.00 ng/L比220.54 ng/L)和IFNγ(912.16 ng/L比251.42 ng/L)的分泌量有显著增高.结论:①两种CD20scFv特异的T细胞在引起Daudi细胞早期凋亡无显著差异,说明在CD20scFv的靶向杀伤过程中CD28-ζ基因可能不主导Daudi细胞的早期凋亡.②CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组IL-2、IFNγ增幅更加明显,说明CD3ζ和CD28嵌合的T细胞可以自身活化而不受MHC的限制,从而增强了T细胞的活化和杀伤等功能.     

细胞毒性T淋巴细胞增殖、分化能力对HIV/HCV重叠感染患者病情进展的影响

目的 探讨HIV/HCV重叠感染患者细胞毒性T淋巴细胞增殖能力和分化状态对病情进展的影响.方法 采用流式细胞仪检测CD57、CD27和CD28在CD8+T细胞上的表达,根据其表达差异,判断CD8+T细胞的增殖能力和不同的分化状态,比较HIV/HCV重叠感染者和单独HCV感染者增殖能力和分化状态的差异.探讨CTL功能与病情进展的关系.结果 HIV/HCV重叠感染者中CD57在CD8+T细胞上高表达28.84%±4.49%,而在HCV单独感染者中较低表达8.24%±5.05%,两组差异非常显著(P＜0.001).CD57+CD8+T细胞的百分数与HCV载量对数值间存在着正线性相关(P=0.023,R2=0.21).HIV/HCV重叠感染者的CTL细胞分化状态以晚期为主,而HCV单独感染者的CTL细胞分化状态以中期为主,两者比较差异非常显著(P＜0.001).结论 HIV/HCV重叠感染患者较HCV单独感染者CTL细胞增殖能力较低、呈终末期分化状态,进而影响CTL的免疫应答,可能是重叠感染者肝病进展的原因之一.     

对HIV感染测定CD4细胞计数和血浆HIV RNA水平的意义

本文从两个方面介绍了对HIV感染病人测定CD4细胞计数和血浆HIV RNA水平的意义，包括：CD4细胞计数和血浆HIV RNA水平作为HIV感染的预后预告因子，CD4细胞计数和血浆HIV RNA用于评估抗HIV化学药物的作用。