阵发性睡眠性血红蛋白尿症血栓的发生机制及防治现状

血栓栓塞是阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)最常见的并发症,有调查显示血栓事件可发生于半数以上的PNH和大约5％的再生障碍性贫血(AA)-PNH综合征的患者.国外报道的血栓发生率高于国内,特别是欧美国家最为多见,为23.1％ ～ 49.7％,甚至超过50％,国内仅5.3％～7.9％,原因不明[1].研究显示PNH患者血栓发生率与PNH克隆比例呈正相关,但血栓发生的具体机制目前尚未明确.迄今为止,已发现如下因素可能参与了PNH患者血栓形成:(1)血管内皮因素及高凝状态;(2) GPI锚连蛋白-尿激酶纤溶酶原激活受体(u-PAR)的缺失;(3)游离血红蛋白的作用及一氧化氮(NO)的耗竭;(4)血小板功能异常及血小板微粒(PMP)释放增多[2].关于PNH患者血栓防治目前也尚无统一方案.现就有关PNH患者血栓形成机制及防治现状综述如下.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症溶血机理的探讨Ⅲ.鲎血凝集素对类PNH红细胞补体溶血的影响

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)病人溶血的原因之一是对补体敏感。Rosse等报告PNH病人红细胞膜C_3b受体比正常人高3～7倍,易与C_3结合产生溶血反应。本文用与唾液酸特异结合的鲎血凝集素为工具,用蛇毒因子(CoF)激活C_3。,以类PNH红细胞为材料,探讨补体反应中唾液酸的作用。     

红细胞膜蛋白电泳对MDS及PNH诊断的意义

用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对骨髓增生异常综合征(MDS),阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者及正常人外周血进行红细胞膜蛋白电泳,发现 MDS 及 PNH 患者红细胞膜蛋白组分均有异常。在 PNH 红细胞膜蛋白电泳图谱上的4.2～4.9之间出现额外条带;MDS 患者红细胞膜蛋白的区带3,其波峰明显低于正常,且 S_(1+2)/S_3值高于正常。此法有可能成为临床诊断这些疾病的指标之一。     

再生障碍性贫血与其它病变相关性的探讨

再生障碍性贫血(再障)是因骨髓造血功能衰竭引起全血细胞减少的一组综合征。近年来,再障与某些疾病的关系已逐渐被重视,并且相互影响转归,有必要加以介绍。一、再障与阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH) 再障与PNH同属造血干细胞疾病,两者关系十分密切。它们不仅在临床表现、血象和骨髓象有时有相似之处,个别可以相互转变或共存。约有1/4的PNH呈再障表现,约有1/2的PNH在病程中曾表现有骨髓增生低下,再障患者有5～15％的红细胞有     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症溶血机理的探讨——Ⅳ.红细胞膜唾液酸与补体溶血的关系

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种红细胞膜异常的溶血性疾病,其特征之一是对补体敏感,但机理不明。Rosse[1]观察,PNH病人红细胞膜结合补体3b(C_(3b))的数量比正常人多3～7倍。Musscl[2]最近指出人红细胞C_(3b)受体是糖蛋白,并证实C_(3b)与其受体结合时糖基起主要作用。唾液酸常位于糖蛋白寡糖链的末端,可推测当两者结合时唾液酸是不可缺少的。所以我们对正常人与PNH病人红细胞膜上唾液酸与补体溶血的关系进行研究,以期对PNH发病机理有进一步了解。     

PNH/AA-PNH综合征患者免疫表型与临床特征的相关性

目的 :研究阵发性睡眠性血红蛋白尿 (PNH)患者血细胞表面锚蛋白的表达与临床特征的相关性。方法 :利用流式细胞术和单克隆抗体免疫荧光标记技术 ,对PNH/AA PNH综合征患者血细胞CD5 9锚蛋白进行分析 ,同时做血红蛋白、蛇毒溶血试验 ,并将实验结果和临床特征进行比较。结果 :轻度和重度贫血患者之间 ,PNH克隆的大小差异有显著性 (P <0 .0 1) ,重度贫血患者体内的PNH克隆的大小明显大于轻度贫血患者 ,且PNHⅢ型细胞较多。结论 :PNH克隆的大小是影响PNH疾病和贫血严重程度的因素之一。     

关于PNH克隆演变的研究进展

随着阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)发病机制研究的深入,很多学者都发现PNH细胞克隆的演变与疾病进展密切相关,可能是PNH发病的关键环节.与正常造血干/祖细胞相比,PNH缺陷细胞克隆可能存在增殖优势,而且PNH克隆的演变与PNH患者的临床病程有很大的关系.PIG-A基因突变本身并不能赋予PNH缺陷细胞的增殖优势,而免疫和凋亡机制可能参与了PNH克隆的选择.这些认识对PNH克隆演变机制的研究、PNH发病机制的阐明以及为临床提供更有效的诊断和治疗手段具有重要意义.     

CD55、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的作用

目的：探讨衰变加速因子(CD55)、反应性溶血膜抑制物(CD59)在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)诊断中的意义。方法：用流式细胞仪检测CD55、CD59的表达量(％)。结果：PNH组CD55、CD59明显低于AA—PNH组和AA组、对照组。结论：检测患者外周血粒细胞膜表面抗原CD55、CD59可作为PNH的早期确诊指标,其中CD59是较敏感指标,CD55是特异性指标。     

流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨

目的探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,PNH)的诊断价值。方法采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)、21例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者、12例缺铁性贫血(irondeficient anemia,IDA)患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用流式细胞术检测贫血患者外周血红细胞及中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷,是临床鉴别诊断PNH与AA、IDA、MDS可靠而敏感的指标。     

七例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)症合并血栓形成

阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)合并血栓形成国内报道较少,我们诊断7例,男3例,女4例;年龄25～64岁,平均39岁.7例均有血红蛋白尿发作,经Ham等试验证实.其血栓系在PNH确诊后1～10年发生.其中脑血栓、肠系膜血栓各2例,下肢静脉血栓5例,眼     

低增生性骨髓增生异常综合征、慢性再生障碍性贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿的临床特点比较分析

目的:按照WHO新分型标准对低增生性骨髓增生异常综合征(HMDS)患者与慢性再生障碍性贫血(CAA)患者、阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者的临床特点进行比较与分析,探讨三种疾病之间的差异。方法:对11例已确诊的低增生性骨髓增生异常综合征(HMDS)、55例慢性再生障碍性贫血(CAA)患者及10例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者进行回顾性分析。结果:HMDS组与PNH组外周血计数(WBC计数、RBC计数、HB测定、PLT计数)高于CAA组;PNH组网织红细胞计数高于PMDS组及CAA组;HMDS组发病年龄大于PNH组与CAA组;HMDS组外周血及骨髓涂片镜检血细胞形态异常明显高于CAA组与PNH组;骨髓原始细胞计数及三系血细胞的病态造血现象对于HMDS、CAA及PNH的鉴别诊断意义重大;HMDS常有幼稚造血前体细胞异位现象(ALIP),微巨核异常,而CAA及PNH患者一般无此现象;HMDS患者与CAA患者CD34+细胞检测结果差异有统计学意义。结论:HMDS、CAA及PNH三种疾病同属于造血干细胞疾病,均表现为骨髓衰竭综合征,可相互转化,临床上对它们的正确诊断与鉴别意义重大。     

糖水溶血试验临床意义的进一步探讨

本研究采用糖水溶血试验、Ham氏试验和红细胞热溶血试验等指标对167例再生障碍性贫血(AA)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)、AA—PNH综合征和血管外溶血及其它类型疾病患者进行测定。检测结果表明糖水溶血试验对PNH和AA—PNH综合征诊断具有一定的特异性和高度的敏感性,尚未出现假阴性,是一项较好的过筛试验。     

流式细胞术在PNH诊断中的应用体会

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种少见的溶血性贫血疾病。传统诊断PNH的试验,特异性低,经常造成假阳性,致使PNH的诊断延误,影响治疗。随着对PNH发病机制的进一步研究及流式细胞术的广泛应用,为PNH的诊断带来了新的福音。流式细胞术不但增加了PNH诊断的敏感性,更重要的是使特异性有了大幅度的提升,使得PNH的诊断更快速、准确。现总结在PNH诊断中最常用到的几种抗体的优缺点,希望能为以后使用流式细胞术诊断PNH提供更完善的方案。     

骨髓增生异常综合征患者外周血细胞免疫表型分析

目的：探讨糖基磷脂配肌醇锚蛋白(GPI-AP)在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血细胞上的表达情况。方法：利用免疫荧光标记技术和流式细胞仪的方法，对20名正常人、36例MDS、42例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)和再障—PNH(AA—PNH)综合征患者的外周血细胞表面GPI-AP：退变加速因子(DAF，CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL，CD59)表达情况进行分析。结果：部分MDS患者血细胞有GPI-AP的缺乏，缺陷红细胞、粒细胞异常率均明显低于PNH或AA—PNH综合征患者(P＜0．005)。结论：部分MDS患者血细胞有锚蛋白的表达缺陷，缺陷细胞的检出率较低且以Ⅱ型细胞为主。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

流式细胞仪检测CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)系获得性红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血.近年来,利用流式细胞术(FCM)检测和计数缺乏CD59的血细胞,被认为是诊断PNH更敏感、更特异的方法[1].本文采用流式细胞术测定红细胞CD59表达,探讨该方法在PNH诊断中的意义.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿58例临床分析

阵发性睡眠性血红蛋白尿 (paroxysmalnoctu malhemoglobinuria ,PNH )是一种获得性造血干细胞克隆缺陷性疾病 ,其临床特征为贫血 ,发作性血红蛋白尿。为了提高PNH诊断和治疗水平 ,本文就我院 195 7～ 2 0 0 2年 5 8例PNH病人进行临床分析。1　病例资料1.1　一般资料5 8例PNH患者均符合全国统一诊断标准[1] ,其中男性 4 6例 ,女性 12例 ,年龄 15～ 5 8岁 ,平均年龄 35 .1岁。1.2　临床表现本组 5 8例均有不同程度头昏、乏力、心悸、气促等贫血症状 ,突出的表现为血红蛋白尿 ,共 5 5例 ,以首发症状为血红蛋白尿者 19例 ,多数病例发作频繁…     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者外周血CD55、CD59测定

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)是一种获得性克隆性造血干细胞疾病,临床表现为全血细胞减少、血管内溶血、反复静脉血栓形成[1],PNH是由于各种原因造成骨髓损伤,导致糖化肌醇磷脂-锚(PIG-A)基因突变,使糖基磷酯酰肌醇(GPI)锚连蛋白合成障碍,患者血细胞呈现多种锚连接蛋白的减少或缺失,其中包括衰变加速因子(DAF,CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL,CD59)的缺失[2].作者测定了PNH患者外周血CD55、CD59的表达,以探讨CD55、CD59检测对PNH诊断及鉴别诊断的意义.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者尿激酶受体的表达及临床意义

目的:检测尿激酶型纤溶酶原激活物受体在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者中的表达,并探讨其与PNH诊断以及血栓形成的关系。方法:PNH患者22例,其中4例伴血栓形成;单纯心/脑血栓形成患者20例;健康志愿者20例。以流式细胞术检测外周血粒细胞上CD87的表达,ELISA法检测血清可溶性尿激酶受体(su鄄PAR)。结果:健康志愿者外周血CD87 粒细胞比例皆>90%,单纯心/脑血栓形成组与健康志愿者组表达率差异无统计学意义。与其他两组相比,PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低(P<0.01)。PNH组血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01),PNH患者伴血栓形成组与不伴血栓形成组比较,前者外周血CD87 粒细胞比例明显降低,血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01)。PNH患者血清su鄄PAR与CD87 粒细胞百分率呈负相关。结论:PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低,血清su鄄PAR水平明显增高,与血栓形成并发症相关。以流式细胞术检测粒细胞CD87及血清su鄄PAR,有助于PNH的诊断及监测血栓形成的病情变化。     

外周血B细胞上糖肌醇磷脂连接蛋白的表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用

目的评价外周血B细胞上糖肌醇磷脂(glycosylphosphatidylinositol,GPI)连接蛋白之一CD59的表达能否作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmalnocturnalhemoglobinuria,PNH)的指标。方法采用流式细胞术双色免疫荧光分析法,结合B细胞特异性抗体CD20,分析92例外周血标本B细胞和中性粒细胞上CD59的表达,并通过临床指标评价方法,分析该指标临床应用的可行性。结果健康人B细胞上CD59均为完全阳性表达,表达率的参考范围为(96.3±1.2)%;PNH患者B细胞上CD59的表达率降低,均出现阴性或部分阳性病态细胞,病态细胞表达率为10.5%～92.3%;92.9%(26/28)非PNH贫血患者B细胞上CD59的表达均在正常参考范围内。该方法精密度的变异系数(coefficientvariation,CV)值小于4.4%,标本染色后无固定剂情况下可稳定保存24h,与常规检测CD59的方法(即中性粒细胞上CD59检测法)比较,PNH阳性和阴性检出符合率均高达100%。结论采用流式细胞术检测B细胞上CD59的表达具有简单、准确、重复性好的特点,可以成为诊断PNH的新指标。