环孢素对慢性再生障碍性贫血患儿外周血T调节细胞及Foxp3表达的影响

目的：探讨再生障碍性贫血（简称再障）患儿应用环孢素治疗后外周血中CD4+CD25+CD127low T调节细胞（Treg）及Foxp3 mRNA表达水平的变化。方法：选取50例慢性再障（CAA）患儿,随机分为环孢素治疗组（30例）及非环孢素治疗组（20例）,同时选取健康儿童20例作为对照组。采用流式细胞术检测各组患儿CD4+CD25+CD127low Treg的表达,并用实时荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA的水平。结果：治疗6个月后,环孢素治疗组外周血CD4+CD25+CD127low Treg和Foxp3 mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义;而非环孢素治疗组两者表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义;环孢素治疗组两者表达水平明显高于非环孢素治疗组,差异有统计学意义。结论：环孢素可以促进再障患儿外周血CD4+CD25+CD127low Treg及Foxp3 mRNA表达水平上升。     

毛细支气管炎CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3 mRNA表达及与IgE关系

目的：通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿CD4+CD25+调节性T细胞（CD4+CD25+Treg）、Foxp3 mRNA的表达、IgE合成的检测,以探讨其在RSV毛细支气管炎发病机制中的作用。方法：在RSV检测阳性的57例毛细支气管炎患儿中,运用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg的比例,RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达量、ELISA法检测血清总IgE含量。25例健康儿童作为对照组。结果：毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞数量减少,特应性体质（7.7±1.6%）和非特应性体质组（8.8±2.1%）均低于对照组（10.5±1.6%）（P均<0.01）。毛细支气管炎特应性体质和非特应性体质组外周血Foxp3 mRNA表达亦均低于对照组（P<0.01）。而血清总IgE含量毛细支气管炎特应性体质（241.2±102.5 IU/mL）和非特应性体质组(125.5±63.2 IU/mL)均高于对照组(27.2±10.5 IU/mL)（P<0.01）。外周血CD4+CD25+Treg细胞数量、Foxp3 mRNA表达及血清总IgE含量在毛细支气管炎特应性体质和非特应性体质组之间差异有显著性意义。CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA与血清IgE水平之间相关密切,r=-0.70,-0.79(均P<0.01)。结论：毛细支气管炎外周血淋巴细胞CD4+CD25+Treg和Foxp3 mRNA表达降低,二者低水平表达使IgE合成增多,共同参与了RSV毛细支气管炎的发病。［中国当代儿科杂志,2009,11（5）：349-353］     

肾母细胞瘤患儿外周血调节性T细胞和自然杀伤T细胞的表达研究

目的 研究肾母细胞瘤患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞（Treg）和CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞（NKT）的表达变化,初步探讨发生改变的原因及其临床意义。方法 选取2015年11月至2016年7月就诊的21例肾母细胞瘤患儿作为病例组,21例于本院体检的同年龄段健康儿童为健康对照组,采用流式细胞术检测两组儿童外周血中 CD4+CD25+CD127low T细胞占CD4+T细胞百分比和CD3+CD16+CD56+T细胞占CD3+T细胞百分比,分别代表Treg水平和NKT水平。结果 病例组肾母细胞瘤患儿外周血Treg水平低于健康对照组（P < 0.05）;病例组肾母细胞瘤患儿外周血NKT水平高于健康对照组（P < 0.05）。结论 Treg和NKT水平变化与肾母细胞瘤的发生与发展有关,Treg和NKT水平可能是反映肾母细胞瘤患儿免疫功能状态的较好指标。     

CD4+CD25high+CD127low调节性T 细胞在毛细支气管炎患儿外周血中的表达改变及其临床意义

目的：探讨CD4+CD25high+CD127low调节性T 细胞（regulatory T cell, Treg）在毛细支气管炎患儿外周血中的数量变化及其临床意义。方法：随机选取31例2岁以下毛细支气管炎患儿作为毛细支气管炎组,同期住院的同年龄段支气管肺炎患儿25例和患有疝气、肾结石等非感染性疾病患儿25例分别作为支气管肺炎组和对照组,采用流式细胞术检测3组患儿外周血中CD4+CD25high+CD127lowTreg 占CD4+T 细胞百分比。结果：毛细支气管炎组患儿外周血中CD4+CD25high+CD127lowTreg 占总CD4+T 细胞的8.0%±2.1%,低于支气管肺炎组（9.6%±2.6%）及对照组（11.3%±2.9%）,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25high+CD127lowTreg水平可能是一个较好的反映毛细支气管炎患儿免疫功能状态的参考指标,其在外周血中数量下降提示Treg细胞可能参与毛细支气管炎的发生发展。     

CD4+CD25int/highCD127low 调节性T细胞在再生障碍性贫血患儿中的检测及意义

目的：探讨再生障碍性贫血（AA）患儿外周血 CD4+ CD25int/high CD127low 调节性 T 细胞（Treg）的表达特点及其与 Hb、WBC 和 血小板（Plt）数量的相关性。方法：采用流式细胞术检测 15 例正常儿童（对照组）和 22 例治疗有效的AA患儿治疗前后外周血 CD4+ CD25int/high CD127low Treg百分比的变化,分析 CD4+CD25high-CD127low Treg与 Hb、WBC 和 Plt 数量的相关性。结果：AA 组急性期外周血 CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low、CD4+CD25highCD127low Treg占 CD4+ T 细胞的百分比均较对照组显著降低（P﹤0.05）;恢复期的表达则高于急性期（P﹤0.05）,而与对照组比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。AA组急性期、恢复期及对照组的 CD4+CD25highCD127low Treg表达率与外周血中 Hb、WBC 和 Plt 数量均呈正相关（r分别为 0.499、0.526、0.540,P<0.05）。结论：CD4+CD25int/highCD127low Treg 减低可能与 AA 发病有关,为其作为判断 AA 病情变化的指标提供了可能的理论依据,并可以作为免疫治疗的靶点之一进行深入研究。     

癫癎患儿外周血中调节性T细胞的变化及其临床意义

目的：研究CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞（Treg细胞）在癫癎患儿外周血的表达水平,探讨其在癫癎发病机制中的作用。方法：采用流式细胞术分别检测41例癫癎患儿和38例健康儿童外周血Treg细胞占CD4+ T细胞的比例,及CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、自然杀伤细胞（NK）、B细胞分别占淋巴细胞的比例。结果：癫癎组患儿外周血Treg细胞比例、CD4+ T细胞比例、CD4+ /CD8+ 比值分别为（2.4±0.5）%、（35±5）%、1.32±0.24,较对照组的（6.1±1.2）%、（38±4）%、1.60±0.24显著降低（P<0.05）;而癫癎组CD8+ T细胞比例、NK细胞比例、B淋巴细胞比例分别为（27±3）%、（11.1±5.1）%、（24±9）%,较对照组的（24±3）%、（8.5±1.9）%、(16±5)%显著升高（P<0.05）。结论：癫癎患儿外周血中存在 Treg 细胞比例异常,提示免疫机制可能参与了癫癎的发生和发展。     

生长因子β1对儿童哮喘的作用及孟鲁司特钠对其影响

目的 探讨生长因子β1在儿童哮喘中的作用及观察孟鲁司特钠对其的影响。方法 筛选2009年9月-2010年9月我院哮喘专病门诊轻度持续哮喘患儿60例及来院健康体检儿童30例,将哮喘患儿随机分成孟鲁司特钠组和安慰剂对照组;采用双抗夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)、RT-PCR技术分别检测治疗前后患儿血浆中TGF-β1水平和外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1mRNA表达;采用流式细胞技术,检测表达叉状头/翅膀状螺旋转录因子3的CD4T调节细胞(Foxp3+ CD4+ Treg)及各亚型的比例。结果 (1)血浆中TGF-β1水平：治疗前哮喘组[(11.51±1.12) ng/L]明显低于健康对照组[(47.92±1.52) ng/L](q=20.01,P＜0.01);治疗后,孟鲁司特钠组[ (20.03±1.14)ng/L]高于安慰剂组[(12.10±3.91) ng/L]（q=14.62,P＜0.05）,但均值仍低于健康对照组;(2)外周血单个核细胞中TGF-β1 mRNA表达：治疗前哮喘组(0.31 +0.07)明显低于健康对照组(0.61±0.2) (q =8.97,P＜0.05);治疗后,孟鲁司特钠组(0.46±0.13)表达高于安慰剂组(0.32±0.04)（q=8.25,P＜0.05）,但仍低于健康对照组;(3)流式细胞检测结果各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)：哮喘患儿与健康对照组相比,Foxp3+ CD4+ Treg细胞比例增加[(8.30±1.30)％,(6.05±1.80)％];其中CD45 RA+ Foxp3lo比例增高[(4.60±1.04)％,(3.27±1.03)％];CD45 RA - Foxp3h1比例降低[(0.75±0.13)％,(0.93±0.26)％];CD45 RA-Foxp3lo比例两组差异无统计学意义。治疗后,孟鲁司特钠组较安慰剂组,aTreg细胞占Foxp3+ CD4+ Treg比例增加[(1.16±0.24)％,(0.89±0.22)％],差异有统计学意义。结论哮喘儿童体内存在血浆及外周血单个核细胞中TGF-β1表达的降低,可能是导致哮喘发病的重要原因;孟鲁司特钠能有效改善TGF-β1的表达并通过调节Foxp3的表达来发挥治疗作用。     

特发性血小板减少性紫癜儿童外周血调节性T细胞的变化

目的：研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4+CD25+CD127-及CD3+CD4-CD8-调节性T细胞（Treg）的变化及意义。方法：采用免疫荧光流式细胞技术检测33例ITP患儿及21例正常儿童外周血CD4+CD25+CD127-及CD3+CD4-CD8- Treg水平。结果：ITP患儿CD4+CD25+CD127-及CD3+CD4-CD8- Treg百分比明显低于正常儿童,分别为(2.7±1.7)％ vs (4.8±1.6)％;(5.2±3.1)％vs (8.1±3.5)％(P<0.01)。结论：ITP患儿CD4+CD25+CD127-及CD3+CD4-CD8- Treg百分率降低,提示其可能参与了ITP的发病机制。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与IL-33在儿童哮喘发病机制中的作用

目的 探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)与IL-33在儿童哮喘发病中的作用.方法 采用流式细胞仪检测45例哮喘患儿(哮喘组)、50例呼吸道合胞病毒感染喘息患儿(喘息组)及40例健康儿童(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比,采用ELISA法检测各组外周血血清IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-33浓度,进行比较分析.结果 哮喘组患儿体内CD4+CD25+Foxp3+Treg 水平较喘息组及对照组均降低(P<0.05);哮喘组患儿体内IL-33水平较喘息组及对照组均升高(P<0.05),哮喘组患儿体内CD4+CD25+Foxp3+Treg与IL-33呈负相关(r=-0.156,P<0.01).结论 在哮喘患儿发病机制中,CD4+CD25+Foxp3+Treg与IL-33可能存在相互作用.     

CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞在儿童重症肺炎支原体肺炎中的作用

目的 探讨CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞在儿童重症肺炎支原体肺炎(severe mycoplasma pneumoniae pneumonia,SMPP)中的作用.方法 采用流式细胞仪检测65例重症肺炎支原体肺炎患儿(SMPP组)、75例非重症肺炎支原体肺炎患儿(Non-SMPP组)及40例健康儿童(健康对照组)急性期及恢复期外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞占CD4+T细胞的比例并进行比较分析.结果 急性期SMPP组CD4+CD25+FoxP3+Treg表达低于Non-SMPP组(0.87±0.66％ vs.1.17±0.70％,P＜0.05)及对照组(0.87 +0.66％ vs.3.88±2.00％,P＜0.01).Non-SMPP组CD4+CD25+FoxP3+Treg表达低于对照组(1.17 +0.70％ vs.3.88±2.00％,P＜0.01).恢复期SMPP组CD4+CD25+FoxP3+淋巴细胞比例较Non-SMPP组降低(1.66±0.85％ vs.3.61±1.45％,P＜0.01).恢复期SMPP组CD4+CD25+ FoxP3+淋巴细胞比例较急性期升高(1.66±0.85％ vs.0.87±0.66％,P＜0.01),恢复期Non-SMPP组CD4+CD25+FoxP3+淋巴细胞比例较急性期亦升高(3.61±1.45％ vs.1.17±0.70％,P＜0.01).结论 CD4+CD25+FoxP3+Treg在SMPP的发病中起一定作用,低表达CD4+CD25+FoxP3+Treg的患儿可能在感染MP后患SMPP的易患性增加,同时影响SMPP患儿预后.     

屋尘螨过敏的支气管哮喘患儿调节性T淋巴细胞水平变化及其临床意义

目的探讨对屋尘螨过敏的支气管哮喘(哮喘)患儿CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞数量和功能的变化,及调节性T淋巴细胞水平与哮喘严重程度的相关性。方法选择60例对屋尘螨过敏的哮喘患儿,依据临床特征分为轻、中、重3组;同时选择20例健康儿童作为健康对照组。分离所有儿童外周血单个核细胞,予屋尘螨浸出液刺激48 h后,应用流式细胞分析仪检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞和CD4+CD25+Foxp3+IL-10+调节性T淋巴细胞的数量。结果轻度组和中度组哮喘患儿CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞的数量与健康对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05),而重度组显著低于健康对照组(P<0.001);哮喘患儿CD4+CD25+Foxp3+IL-10+调节性T淋巴细胞水平与健康对照组比较显著降低(P<0.001),且中度组低于轻度组(P<0.05),而重度组几乎检测不到CD4+CD25+Foxp3+IL-10+调节性T淋巴细胞,其水平显著低于中度组(P<0.01);CD4+CD25+Foxp3+IL-10+T淋巴细胞水平与哮喘患儿疾病严重程度呈负相关(r=-0.637,P<0.05)。结论轻、中度哮喘患儿调节性T淋巴细胞数量无降低,但存在功能障碍,而重度哮喘患儿不仅存在调节性T淋巴细胞功能障碍,而数量降低。CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞可能在哮喘的发病中发挥着重要作用。     

Selective expansion of donor‐derived regulatory T cells after allogeneic bone marrow transplantation in a patient with IPEX syndrome

IPEX syndrome is a rare and fatal disorder caused by absence of regulatory T cells (Tregs) due to congenital mutations in the Forkhead box protein 3 gene. Here, we report a patient with IPEX syndrome treated with RIC followed by allogeneic BMT from an HLA‐matched sibling donor. We could achieve engraftment and regimen‐related toxicity was well tolerated. Although the patient was in mixed chimera and the ratio of donor cells in whole peripheral blood remained relatively low, selective and sustained expansion of Tregs determined as CD4+CD25+Foxp3+ cells was observed. Improvement in clinical symptoms was correlated with expansion of donor‐derived Tregs and disappearance of anti‐villin autoantibody, which was involved in the pathogenesis of gastrointestinal symptoms in IPEX syndrome. This clinical observation suggests that donor‐derived Tregs have selective growth advantage in patients with IPEX syndrome even in mixed chimera after allogeneic BMT and contribute to the control of clinical symptoms caused by the defect of Tregs.