p16基因甲基化与脑胶质瘤的关系

抑癌基因p16位于人类染色体9p21,由3个外显子和2个内含子组成.脑胶质瘤中,p16基因5'CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关.本文总结了p16基因5'CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考.     

p16基因与脑胶质瘤

肿瘤的发生和发展是一个十分复杂的过程.现已肯定地认为,肿瘤是一种基因病变,癌基因的激活和抑癌基因的失活是正常机体癌变的主要机理.p16基因是继P53抑癌基因之后又一引人注目的新型肿瘤抑制基因,也是人们发现的第一个直接作用于细胞周期抑制细胞分裂的抑癌基因,其编码产物为CDK4抑制因子.由于CDK4在细胞增殖和恶性转化过程中发挥重要作用,所以该基因一经发现即成为肿瘤生物学、分子遗传学等领域研究的热点.     

垂体腺瘤p16基因启动子甲基化分析

目的：探讨垂体腺瘤p16基因表达缺失的原因。方法：对无p16基因纯合性缺失的肿瘤标本进行甲基化分析。结果：30例标本甲基化敏感性内切酶SmaⅠ消化后p16基因第一外显子扩增片段消失,表明存在p16启动子的甲基化。结论：垂体腺瘤p16基因的表达缺失与该基因启动子的甲基化有关。     

p16基因甲基化与脑腔质瘤的关系

抑癌基因 p16位于人类染色体 9p21,由3个外显子和2个内含子组成。脑胶质瘤中,p16基因5’CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关。本文总结了p16基因5’CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考。     

p16基因CpG岛甲基化与胶质瘤生物学特性的关系

目的：研究p16基因CpG岛甲基化与胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性的关系。方法：应用半巢式甲基化特异性多聚酶链反应（MSP）检测40例不同级别的胶质瘤组织标本中p16基因CpG岛甲基化状态。免疫组化SP法分析肿瘤组织p16蛋白和Ki-67抗原的表达情况。结果：肿瘤组织甲基化发生率为42.5%（17/40）,p16蛋白表达缺失率为72.5%（29/40）,其中55.2%（16/29）缺失与甲基化有关（P=0.0085）。甲基化发生率随胶质瘤恶性程度增加有增高趋势（χ2=11.4288,P=0.0007）。甲基化阳性者中Ki-67抗原增殖指数明显高于甲基化阴性者（P〈0.05）。结论：p16基因CpG岛甲基化导致该基因灭活是胶质细胞恶性增生的主要机制之一。     

脑胶质瘤中p16基因缺失的研究及意义

目的研究胶质瘤的发生,演化及预后与p16基因的关系.方法采用聚合酶链反应体外扩增DNA(PCR法)对45例石蜡标本中p16基因进行了检测.结果Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中p16基因缺失率(65%)高于Ⅰ-Ⅱ级(20%),p＜0.01,缺失率随组织学分级的升高而升高.结论胶质瘤发生,演化及恶性程度可能与p16基因缺失有关.     

小儿脑胶质瘤p16基因的表达

目的：检测２０例小儿脑软质瘤中Ｐ１６基因及其蛋白的存在情况。方法用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析和免疫组织化学技术检测了２０例１－１４岁小儿脑胶质瘤。成果显示Ｐ１６基因和Ｐ１６蛋白的丢失率分别为５０％（１０／２０％）及（５／２０）。结论本结果提示Ｐ１６基因和蛋白缺失可能与部分小儿脑有质瘤发生,发展有关。     

p16基因对脑胶质瘤细胞生长及放射敏感性的影响

目的探索p16基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及p16基因与肿瘤细胞放射敏感性间的关系.方法将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251、C6,筛选阳性克隆.同时以空载体质粒为对照,免疫组化检测p16基因表达,用MTT法测定细胞生长曲线及肿瘤杀伤率.结果转染p16基因的U251、C6细胞有外源p16基因的整合及表达,克隆形成率减少,生长速度明显减慢,对辐射的敏感性增强.结论导入外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖,提高胶质瘤细胞对辐射的敏感性.     

p16基因抑制脑胶质瘤细胞恶性增殖并诱导细胞凋亡

目的：探索p16基因在脑胶质瘤发生过程中的作用及其与脑胶质瘤细胞凋亡的关系。方法：采用脂质体,磷酸钙＋DMSO休克转染的方法,分别将外源野生型p16基因导入胶质瘤细胞株U251,SWO,观察p16基因短暂转染与长期稳定转染对胶质瘤细胞的作用,并筛选阳性克隆。同时以空载体质粒pCDNA3为对照,免疫组化,Northern杂交检测p16基因表达,对转染后细胞生长的抑制,细胞周期,凋亡及裸鼠致瘤能力的变化进行分析,结果：外源p16基因的高水平表达显著抑制了胶质瘤U251,SWO细胞的生长,克隆形成率减少,肿瘤细胞发生了G1期阻滞,p16基因短暂转染可诱导胶质瘤细胞凋亡,而长期稳定转染无明显的凋亡诱导作用。结论：外源野生型p16基因可抑制胶质瘤细胞恶性增殖并诱导细胞凋亡,肿瘤细胞的异质性特点与p16基因转染后的“自然选择”作用可能是p16基因长期稳定转染无明显凋亡诱导作用的主要机制。     

人脑胶质瘤中p16,p15基因分子的病理学研究

目的:探讨p16、p15基因改变、蛋白表达与脑胶质瘤组织病理的相互关系。方法:应用PCR、银染PCR-SSCP及免疫组化技术检测68例脑胶质瘤中p16、p15基因变化和蛋白表达情况。结果:显示脑胶质瘤中p16、p15基因缺失和P16蛋白丢失主要见于Ⅱ~Ⅳ级肿瘤中,而PCR-SSCP分析未见p16、p15基因点突变。结论:表明脑胶质瘤中p16、p15基因改变是以缺失为主,该基因功能的丧失促进了肿瘤细胞由良性向恶性的演进过程;P16蛋白表达状态可作为判断脑胶质瘤恶性程度及预后的指标。     

垂体腺瘤p16基因启动子甲基化分析

目的 :探讨垂体腺瘤p16基因表达缺失的原因。方法 ;对无p16基因纯合性缺失的肿瘤标本进行甲基化分析。结果 :30例标本甲基化敏感性内切酶SmaI消化后p16基因第一外显子扩增片段消失 ,表明存在p16启动子的甲基化。结论 :垂体腺瘤p16基因的表达缺失与该基因启动子的甲基化有关     

脑胶质瘤P16基因分子病理研究

目的：检测１５例脑胶质瘤中Ｐ１６基因及蛋白的存在状况。方法：用复合ＰＣＲ和免疫组织化学技术检测１５例脑胶质瘤。结果：显示Ｐ１６基因与Ｐ１６蛋白丢失率均为６０．０％（９／１５）；Ｐ１６基因和蛋白丢失主要见于Ⅲ级（８５．７％）和Ⅳ级（１００％）脑胶质瘤。结论：本文结果间接提示Ｐ１６基因和蛋白的丢失可能与脑胶质瘤的发生和演化有关。     

抑癌基因p16蛋白在脑胶质瘤中的缺失及意义

目的 研究ｐ１６蛋白的缺失率与脑胶质瘤性程度的关系。方法 应用ＳＰ免疫级化检测７２例人脑胶质瘤,４个人脑体外恶性胶质瘤细胞系及１０例正常脑组织中抑癌基因ｐ１６蛋白的表达,结果 正常脑组织、Ｉ级、ＩＩ级、ＩＩＩ级、ＩＶ级、ＣＬ中ｐ１６蛋白的缺失率分别为０．１０％,３１．８％,６３．２％,７１．４％,１００％,脑胶质瘤细胞系,高恶度脑胶质瘤（ＷＨＯ,ＩＩＩ级～ＩＶ级）与低恶度脑胶质瘤（ＷＨＯ,Ｉ级～Ｉ级）之间差异显（Ｐ〈０．０５）,结论 ｐ１６蛋白的缺失率与脑胶质瘤的汪事分极和恶性程度密切相关,提示ｐ１６基因在脑胶质瘤的发生,发展过程中起重要作用。     

Exogenous p16 gene therapy combined with X-ray irradiation suppresses the growth of human glioma cells

In this study, we infected human glioma U251 cells with a replication-defective recombinant adeno-virus carrying the p16 gene. This adenovirus constructed was able to transfect exogenous p16 into the human glioma cells efficiently, and direct a high level of p16 protein expression. Tumor-inhibition experiments demonstrated that treatment with the adenovirus-p16 significantly inhibited the growth of glioma cells in vitro as well as the in vivo development of tumors in nude mice bearing a brain glioma. The combination of adenovirus-p16 gene treatment and X-ray irradiation resulted in a greater inhibition of tumor growth. Adenovirus-mediated p16 gene therapy conferred a significant antitumor effect against human glioma cells both in vitro and in vivo, and that there was a synergistic effect when X-ray irradiation was also used.     

腺病毒介导的p16基因对TJ899细胞系活性的影响

目的研究五型腺病毒载体(Ad5)携带p16基因对恶性脑胶质瘤细胞系TJ899生长状态的影响.方法免疫组化(SP法)测定p16蛋白表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和克隆形成实验测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态.结果重组体腺病毒能介导p16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899细胞中阳性表达,6 d时肿瘤细胞生长抑制率为93%,并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力.结论腺病毒介导p16基因能在肿瘤细胞中表达,并能明显抑制肿瘤细胞生长的状态.