大鼠延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元向孤束核投射

目的观察延髓和脊髓背角内蛋白激酶Cγ亚单位(PKCγ)阳性神经元向孤束核的投射. 方法荧光金(FG)逆行追踪与PKCγ的免疫荧光组织化学染色相结合的双标记技术. 结果 PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核;将FG注入孤束核后,在延髓和脊髓背角的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核内可见FG标记神经元;部分FG标记神经元呈PKCγ阳性,FG/PKCγ双标神经元也主要见于延髓和脊髓背角的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核. 结论延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元可能参与将躯体和内脏伤害性刺激信息向孤束核的传递.     

大鼠延髓背角和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝隐核的投射

目的研究大鼠延髓背角和脊髓背角浅层内蛋白激酶Cγ亚单位（PKCγ）阳性神经元向中缝隐核（NRO）的投射。方法应用荧光金（FG）逆行追踪和PKCγ免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法,观察大鼠延髓背角和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝隐核的投射。结果将FG注入NRO,在延髓背角和脊髓背角的Ⅰ-Ⅲ层内可见FG逆标神经元;PKCγ阳性神经元主要分布于延髓背角和脊髓背角的Ⅱ层内侧部及Ⅱ、Ⅲ层交界处,Ⅰ、Ⅲ层内较少;延髓背角Ⅰ层和脊髓背角Ⅰ-Ⅲ层可观察到FG逆标并呈PKCγ阳性的双标神经元。结论延髓背角和脊髓背角浅层向NRO投射的神经元为PKCγ阳性神经元,其在向NRO传递信息的通路中可能发挥重要作用。     

大鼠延髓和脊髓背角的RKCγ阳性神经元向孤束核投射

目的：观察延髓和脊髓背角内蛋白激酶Cγ亚单位（PKCγ）阳性神经元向孤束核的投射。方法：荧光金（FG）逆行追踪与PKCγ的免疫荧光组织化学染色相结合的双标记技术。结果：PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核,将FG注入孤束核后,在延髓和背髓背角的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核内可见FG标记神经元;部分FG标记神经元呈PKCγ阳性;FG／PKCγ双标神经元也主要见于延髓和脊髓背角的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ层及脊髓的外侧脊核。结论：延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元可能参与将躯体和内脏伤害性刺激信息向孤束核的传递。     

大鼠延髓和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝苍白核的投射

目的研究大鼠延髓背角和脊髓背角浅层内蛋白激酶C的γ亚单位（PKCγ）阳性神经元向中缝苍白核（NRP）的投射。方法采用荧光金（FG）逆行追踪和PKCγ免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法。结果将FG注入NRP,在延髓和脊髓背角的Ⅰ-Ⅲ层内可见FG逆标神经元;PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅱ层内侧部及Ⅱ、Ⅲ层交界处,Ⅰ、Ⅲ层内较少;延髓背角Ⅰ层和脊髓背角Ⅰ-Ⅲ层可观察到FG逆标并呈PKCγ阳性的双标神经元。结论延髓和脊髓背角浅层向NRP投射的神经元是PKCγ阳性神经元,提示其在向NRP传递的信息通路中可能发挥重要作用。     

大鼠延髓腹外侧区向迷走神经背核簇尾侧部和脊髓的投射

用荧光素双标记法和辣根过氧化物酶(HRP)轴突逆行传递法研究大鼠延髓腹外侧区(VLM)向迷走神经背核簇(VDC)尾侧部和脊髓的投射。结果在两侧(同侧较多)VLM内有许多分别投射VDC尾侧部和脊髓的神经元,还有一些以轴突分支投射两处的神经元,后者主要分布在腹外侧网状核、巨细胞网状核腹侧部和α部以及邻近延髓的腹侧面处。     

大鼠中枢神经系统对脾脏神经支配的调控--假狂犬病毒跨突触标记

为探讨大鼠中枢神经系统与脾脏之间的神经通路联系及大鼠中枢神经系统对脾脏免疫功能的调控机制,采用免疫组化法及荧光金(Flouro-Gold, FG)神经追踪法研究了假狂犬病毒(PRV)及FG注入脾脏72小时、96小时后逆行标记的FG神经元在腹腔神经节内、跨突触标记的PRV神经元及神经纤维在脾脏及神经系统内的分布.结果:①各时间组大鼠脾被膜及实质内均见PRV标记的呈串珠状的神经纤维,有的纤维以终末与免疫细胞密切接触.②各时间组大鼠下胸段(T10～12)脊神经节实质内见PRV标记阳性神经元,被膜内及实质的神经元之间可见 PRV阳性神经纤维.③各时间组大鼠腹腔神经节内见散在的FG标记神经元.④各时间组大鼠中胸段(T5～9)脊髓侧角中间外侧柱,后角背侧固有核及胶状质,延髓迷走神经背核和孤束核内均见PRV标记阳性神经元胞体及突起.⑤96小时组大鼠除上述阳性结果外,标记细胞还可见于下丘脑室旁核.由此推测神经系统与脾脏之间可能存在下列神经通路联系:①下丘脑室旁核→延髓迷走神经背核→脊髓侧角中间外侧柱的交感神经节前神经元→交感神经腹腔节神经元→脾脏.②脾内感觉神经纤维→脊神经节感觉神经元→脊髓后角背侧固有核和胶状质联络神经元→延髓孤束核神经元→下丘脑感觉中枢.     

大鼠延髓和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝大核的投射

目的 研究大鼠延髓背角和脊髓背角浅层内蛋白激酶Cγ亚单位（PKCγ）阳性神经元向中缝大核（NRM）的投射。方法 荧光金（FG）逆行追踪和PKCγ免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法。结果 将FG注入NRM，在延髓和脊髓背角的Ⅰ-Ⅲ层内可见FG逆标神经元；PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅱ层内侧部及Ⅱ、Ⅲ层交界处，Ⅰ、Ⅲ层内较少；延髓背角Ⅰ层和脊髓背角Ⅰ－Ⅲ层可观察到FG逆标并呈PKCγ阳性的双标神经元。结论 延髓和脊髓背角浅层向NRM投射的神经元含PKCγ，提示PKCγ在向NRM传递痛信息的通路中可能发挥重要作用。     

大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间纤维联系

目的 研究大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区间的纤维联系。方法于13只成年SD大鼠的面神经后核内侧区内注射辣根过氧化物酶(HRP)0.5－1.0μl,5只注射30%麦角HRP 20-60 nl,并以7只成年SD大鼠为对照,逆行/顺行迫踪mNRF神经元。结果发现HRP标记神经元胞体主要位于双侧延髓孤束核、疑核、巨细胞网状核。旁巨细胞背侧网状核、中间网状核、外侧网状核、中缝核群(raphe nuclei)、桥脑臂旁核、K－F核、脊髓中间区(Spinal intermediate zone)、脊髓后角、延髓及桥脑网状结构;WGA-HRP标记神经纤维主要存在双侧于孤束核、疑核、脊髓中间区、延髓网状结构。结论mNRF(神经元与脑干不同呼吸相关核团之间具有广泛的纤维联系,基本呼吸节律起源及维持过程中可能通过这些神经结构进行调控。     

乙酰胆碱转移酶单克隆抗体在大鼠脊髓前角和延髓脑神经运动核的定位及其图象分析

用免疫细胞化学ABC法研究乙酰胆碱转移酶(ChAT)单克隆抗体在脊髓前角和延髓脑神经运动核的定位。结果发现脊髓各个节段的前角运动神经元、胸髓侧角、骶副交感核部位和延髓脑神经运动核(舌下神经核、迷走神经背核和疑核)均有ChAT标记的细胞。形态多样,有多极形、三角形、椭圆形和梭形不等。利用VIDS-Ⅲ型图象分析仪对ChAT标记神经元胞体进行了圆直径、周长和面积测量分析。结果还提示ChAT阳性神经元的分布与背髓前角运动神经元、胸髓侧角、骶副交感核,脑神经运动核的部位一致,ChAT是上述神经元的重要递质之一,可能与躯体运动、内脏活动的调节有关。     

大鼠脑干中缝核群EP3受体阳性神经元向脊髓背角的投射

目的 观察大鼠脑干中缝核群前列腺素E受体EP3亚型（EP3R）阳性神经元向脊髓背角的投射。方法 荧光金（FG）逆行追踪和EP3R免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法。结果 将FG注入一侧脊髓背角浅层，FG逆标神经元主要见于中脑导水管周围灰质（PAG）、脑干中缝核群、巨细胞网状核α部（GiA)、延髓网状结构、外侧网状核、三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核。EP3R阳性神经元主要见于PAG、脑干中缝核群和网状结构。FG标记并呈EP3R阳性的双标神经元主要见于脑干中缝核群和GiA。结论 脑干中缝核群和GiA向脊髓背色投射的部分神经元含EP3R，前列腺素E2可能通过EP3R对这些下行投射神经元发挥调控作用。     

树鼩中枢神经系统胰岛素免疫反应阳性神经元的研究

用改良的 Nakane 免疫组织化学辣根过氧化物酶间接法对8只云南野生树鼩中枢神经系统胰岛素免疫反应阳性神经元进行了观察研究。结果胰岛素免疫反应阳性神经元在以下脑区出现:嗅脑球外侧皮质的中型神经元;视束外、上方神经核团中的大、中型神经元;丘脑外侧核团和下丘脑外侧核团中的大、中型神经元;中脑背盖部红核的大型神经元;三叉神经核中的大、中型神经元等。此外,在脊髓各段的前角,特别在颈膨大和腰膨大处,还可见较弱的胰岛素免疫反应阳性神经元。免疫反应阳性物集中在核周部及树突的根部中。     

NPY在仓鼠肾上腺髓质的免疫组织化学定位研究

应用PAP免疫组织化学方法发现:NPY样免疫活性广泛分布在仓鼠肾上腺髓质的嗜铬细胞中,NPY阳性细胞占髓质细胞总数的25％～30％。经连续切片以不同第一抗体孵育结果得出:NPY与亮啡肽在肾上腺髓质中的分布特点不一致,部分NPY阳性细胞与亮啡肽有细胞内共存现象。结合免疫金标记技术进行超微结构观察进一步证实:NPY、亮啡肽样免疫活性反应颗粒出现在部分去甲肾上腺素细胞内。从光镜、电镜观察结果中推测;仓鼠肾上腺髓质中的去甲肾上腺素细胞具有4种亚型。     

青年和老年大白鼠脊髓运动神经细胞突触的观察

目的研究老年大白鼠脊髓运动神经细胞突触的变化，探讨衰老的形态学基础。方法用Golgi Deineka银染法研究比较青年（4～6个月龄）和老年（26～30个月龄）大白鼠脊髓腰段前角运动神经细胞胞体和近侧树突突触的形态和数目。结果老年大白鼠脊髓运动神经细胞上不规则和网形突触明显较青年大白鼠增多，并且突触密度明姓少于青年大白鼠。结论脊髓是神经系统的初级反射中枢，突触是其神经元实现其生理功能的重要结构，随着个体的衰老，突触数目和形态会发生改变，这也是机体衰老后生理机能减退的形态学基础之一。     

实验性瞬时高血压诱发大鼠脑内Fos表达

目的：观察大鼠中枢神经系统调节血压的部位,和苯肾上腺素静脉注射制作大鼠高血压模型,以抗Ｆｏｓ蛋白免疫组织化学方法,观察全脑Ｆｏｓ阳性神经元分布。结果高血压诱发下列区域Ｆｏｓ阳性细胞集中分布：延髓内脏带、臂旁外侧核、室核、视上核,杏仁核、终纹床核、额皮质１,２区、扣带皮质及梨状前皮质。位于延髓内脏带孤束核内的Ａ２细胞群和腹外侧区的Ａ１细胞群分别有３７．６３％和５４．２５％的酪氨酸羟化酶阳性神经元表达     

大鼠肾上腺髓质组织的冰冻储存和移植

通过观察移植物的细胞形态和检测移植后巴金森氏模型鼠旋转行为的变化,探讨了低温储存肾上腺髓质组织的可行性。肾上腺髓质组织取自成年Sprague--Dawley大鼠,以每分钟降温1～2℃的速率冰冻,在液氮中储存1周,然后移植于6羟多巴胺损毁一侧黑质的模型鼠尾状核内。移植后Apomorphine诱发模型鼠的旋转行为有不同程度改善;冰冻储存的肾上腺髓质组织在细胞形态和染色特性上未发生变化;荧光观察表明移植物仍然保持产生儿茶酚胺的机能。这提示低温冰冻没有改变肾上腺髓质组织的生物学特性,可应用冰冻储存肾上腺髓质组织的方法建立组织库。     

P2X2和P2X4受体在新生和成年大鼠延髓的表达

目的研究嘌呤能受体（purinergic receptors，P2）家族中P2X不同亚型在新生和成年SD大鼠延髓的表达。方法成年SD大鼠（6-8w）和新生SD大鼠（1-5d），各6只，雌雄不计，取延髓。应用免疫组织化学的方法和图像分析技术，比较P2X2和P2X4受体在新生和成年SD大鼠延髓的表达。结果P2X2和P2X4嘌呤受体的阳性神经元和阳性纤维在新生鼠和成年鼠的延髓都有广泛表达，主要分布在孤束核、Ⅻ颅神经核和延髓腹外侧区，延髓其他区域为散在的分布。成年鼠和新生鼠的P2X2受体均比P2X4受体表达水平高。在新生鼠延髓，P2X2和P2X4的表达水平均比成年鼠低。结论P2X2和P2X4阳性神经元和阳性纤维广泛分布在大鼠延髓，为ATP对心血管活动、呼吸活动和痛觉等的调节作用提供了结合位点，也有利于实验中P2X受体亚型阻断剂的选择。随着动物发育成熟，P2X2和P2X4表达水平均增加。     

原发性脑干损伤后碱性成纤维细胞生长因子改变的实验研究

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在原发性脑干损伤后网状结构内表达的特点。方法 :采用撞击法造成实验大鼠脑干损伤死亡。用免疫组化SABC法检测延髓网状结构中bFGF的改变。结果 :脑干损伤组延髓网状结构内bFGF阳性细胞数 (12 11± 2 2 5 )和阳性强度 (18 5 0± 3 4 8)与正常对照组 (7 0 6± 1 4 1,12 0 8± 1 81)及死后损伤组 (6 5 3± 1 98,11 32± 1 35 )比较显著升高 (P <0 0 5 ) ,后两者无显著差异。结论 :原发性脑干损伤导致延髓网状结构内神经细胞bFGF表达增高。     

宫内香烟烟雾暴露对新生大鼠延髓3-巯基丙酮酸转硫酶表达的影响

目的 探讨3-巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3MST)在正常新生大鼠延髓的表达及宫内香烟烟雾暴露对其表达的影响。 方法 SD孕鼠随机分为正常对照组和香烟烟雾暴露组(n=8),与孕鼠相对应的新生(1 d)大鼠为本研究的实验对象。采用RT-PCR和Western blot法,分别观察正常新生大鼠延髓组织中3MST mRNA和蛋白的表达情况及宫内香烟烟雾暴露对其表达的影响;采用免疫组织化学法观察正常新生大鼠延髓呼吸相关核团神经元3MST的表达和分布情况及宫内香烟烟雾暴露对其表达的影响。 结果 正常对照组新生大鼠延髓组织中有3MST mRNA和蛋白的表达;香烟烟雾暴露组新生大鼠延髓组织中3MST mRNA和蛋白的表达水平显著增加(P<0.05)。3MST在正常对照组新生大鼠前包钦格复合体(pre-B tC)、舌下神经核(12N)、疑核(Amb)、面神经核(FN)和孤束核(NTS)神经元中有弱表达。与对照组比较,香烟烟雾暴露组新生大鼠pre-B tC、12N、Amb和FN神经元中3MST免疫阳性产物平均光密度值增加(P<0.05);NTS神经元中3MST免疫阳性产物平均光密度值无明显变化(P>0.05)。 结论 3MST存在于正常新生大鼠延髓呼吸相关核团神经元;宫内香烟烟雾暴露可上调延髓3MST的表达,提示3MST-硫化氢(H₂S)途径可能参与宫内香烟烟雾暴露致新生大鼠延髓呼吸中枢损伤保护过程。     

闭合性颅脑损伤脑内白蛋白的免疫组化研究

应用免疫组化ＡＢＣ法对脑损伤后脑内各个部位组织中白蛋白的分布进行系统研究。结果发现白蛋白不仅出现于脑挫伤出血局部,在挫伤区邻近及远离挫伤部位的非损伤区域的部分神经细胞,神经纤维,星形胶质细胞及软灶内格子细胞亦有白蛋白出现。     

电针内关穴诱导大鼠延髓原癌基因c-fos表达

[目的]观察电针内关穴诱导大鼠延髓内的原癌基因c-fos表达及分布特点。[方法]采用抗FOS蛋白的免疫组织化学方法。[结果]电针内关穴可引起大鼠延髓内神经元的广泛c-fos表达,其FOS样免疫反应（FOS-like-immunoreactivity,FLI)阳性刘经元广泛分布于延髓的孤束核、迷走神经背核、下橄榄核、楔束核、楔束外核、腹外侧网状核、疑核,网状结构中也散在分布着ELI神经元如网状巨细胞核等。[结论]提示电针“内关”穴激活了上肢的本体觉传导路,并且激活了延髓内与内脏信息相关的中枢核团。