川崎病患儿血清基质金属蛋白酶-1表达的意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在川崎病(KD)患儿冠状动脉损伤中的作用.方法 选择KD患儿36例(其中无冠状动脉损伤组15例,冠状动脉损伤组21例),按病程分为急性期、亚急性期和恢复期;10例健康儿童为健康对照组.应用酶联免疫吸附法检测其血清MMP-1蛋白水平.结果 KD急性期患儿血清MMP-1水平明显高于健康对照组(Pa＜0.01),且冠状动脉损伤组较无冠状动脉损伤组升高更显著(P＜0.05);亚急性期、恢复期其MMP-1水平明显降低(各期间比较Pa＜0.01).KD组急性期血清MMP-1水平与外周血白细胞计数呈显著正相关(r＝0.791 P＜0.01).结论 检测血清MMP-1水平对预测和早期诊断KD并冠状动脉病变具有重要意义.     

基质金属蛋白酶9及组织抑制物1对预测和早期诊断川崎病冠状动脉病变的意义

目的探讨川崎病（Kawasaki disease,KD）血清基质金属蛋白酶9（matrix metallopmteinase-9,MMP-9）及其特异性组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）水平的动态变化在冠状动脉病变（coronary artery lesion,CAL）的预测和早期诊断中的临床价值。方法实验组KD合并CAL患儿15例,未合并CAL患儿44例,急性期静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin,IVIG）前后、亚急性期及恢复期各抽取1次外周静脉血,对照组为20例正常体检儿童。ELISA双抗体法测定血清MMP-9与TIMP-1含量。结果KD患儿急性期血清MMP-9含量、TIMP-1含量及MMP-9／TIMP-1均较正常对照组增高（P〈0、01）;IVIG干预后KD患儿血清MMP-9含量与MMP-9／TIMP-1比值降低（P〈0．01）;KD合并CAL患儿IVIG干预前血清MMP-9含量及血清MMP-9／TIMP-1比值高于无CAL患儿（P〈0．01）。结论川崎病冠状动脉病变患儿血清MMP-9含量与MMP-9／TIMP-1比值在急性期高于无冠状动脉病变患儿,提示MMP-9含量的急剧升高及与TIMP-1相互拮抗作用的失代偿可能是川崎病冠状动脉病变的高风险因素,动态监测血清MMP-9含量和（或）MMP-9／TIMP-1比值对预测和早期诊断川崎病合并冠脉病变具有重要的临床意义。     

基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶组织抑制物-1在心内膜弹力纤维增生症患儿心室重构中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)在心内膜弹力纤维增生症(EFE)患儿心室重构发病中的作用.方法　选择2007年3月-2008年5月首都医科大学附属北京儿童医院心脏中心收治的20例EFE患儿(EFE组),同期选择门诊26例健康体检婴幼儿作为健康对照组.根据预后将EFE患儿分组,死亡及病情无缓解者为危重组(n=5),病情缓解者为普通组(n=15).采用ELISA法测量各组血清MMP-9及TIMP-1水平.应用SPSS 11.5软件对数据进行统计学分析.结果　EFE组和健康对照组年龄、性别构成比较差异均无统计学意义,体质量比较差异有统计学意义[(9.00±2.27) kg vs (10.03±1.92) kg,P＜0.01].EFE组与健康对照组血清MMP-9[(568.1±349.2) μg·L-1 vs (446.4±239.8) μg·L-1]、TIMP-1[(342.6±114.2) μg·L-1 vs (313.3±60.5) μg·L-1]水平及MMP-9/TIMP-1比值[(1.8±1.3) vs (1.5±0.8)]比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).健康对照组、普通组和危重组MMP-9[(446.40±239.80) μg·L-1 vs (552.11±404.12) μg·L-1 vs (559.59±205.35) μg·L-1]、TIMP-1[(313.30±60.50) μg·L-1 vs (323.30±118.37) μg·L-1 vs (381.87±121.06) μg·L-1]水平及MMP-9/TIMP-1比值[(1.5±0.8) vs (1.9±1.5) vs (1.5±0.3)]比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论　MMP-9/TIMP-1在EFE心室重构的发病机制中可能无明显作用.     

全反式维A酸对川崎病患儿急性期单核细胞表达基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

目的 观察全反式维A酸（atRA）对川崎病（KD）患儿急性期外周血单核细胞表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响。方法 分离KD患儿急性期外周血单核细胞（PBMC），分别于不同浓度atRA下培养。采用明胶酶谱法测定其MMP-9活性；酶联免疫吸附法（ELISA）检测其MMP-9和TIMP-1蛋白水平；逆转录PCR（RT-PCR）法检测MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平。结果 atRA能在转录水平显著抑制KD患儿急性期单核细胞表达MMP-9和促进TIMP-1表达，引起细胞培养上清MMP-9／TIMP-1蛋白比值和MMP-9活性明显下降（P〈0．01），且在一定浓度范围内，下降趋势与atRA浓度呈正相关。结论 atRA能选择性调节KD患儿急性期单核细胞表达MMP-9和TIMP-1，从而抑制MMP-9活性的过度升高。     

吸入糖皮质激素对支气管哮喘患儿血清基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制物1的影响

目的 观察吸入糖皮质激素对支气管哮喘(哮喘)患儿血清基质金属蛋白酶9( MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1( TIMP-1)的影响,探讨糖皮质激素降低呼吸道重塑的机制.方法 哮喘患儿50例.给予糖皮质激素信必可都保(布地奈德/福莫特罗粉吸入剂),每吸含布地奈德80 μg、福莫特罗4.5 μg,每日2次,疗程12周,采用ELISA法测定布地奈德/福莫特罗粉吸入剂吸入前后,血清MMP-9、TIMP-1水平及肺功能指标[第1秒最大呼气量(FEV1)、最大呼气流速峰值(PEF)]的变化,并对二者进行相关性分析.结果 使用吸入糖皮质激素布地奈德/福莫特罗粉剂后,哮喘患儿血清MMP-9水平由吸入前的(43.25±13.26) μg?L-1下降至(29.62±12.47) μ.g? L-1,TIMP-1由吸入前的(119.88±32.56)μg?L-1上升至(143.15±45.36) μg?L-1,差异均有统计学意义(Pa＜0.01).PEF及FEV1变异占预计值百分比分别由吸入前的(76.15±3.26)％,(73.12±4.63)％,上升至(85.42±4.73)％,(86.49±3.72)％,PEF及FEV1变异占预计值百分比与MMP-9/TIMP-1比率均呈负相关(r=-0.402、-0.364,Pa＜0.05).结论 糖皮质激素可通过调节MMP-9/TIMP-1的平衡,降低胶原沉积,从而干预呼吸道重塑的发生.     

高氧、维甲酸对早产鼠肺组织基质金属蛋白酶-2、-9 及特异性组织抑制物-1、-2表达的影响

目的探讨基质金属原蛋白-2(MMP-2)、MMP-9、基质金属蛋白酶特异性组织抑制物-1(TIMP-1)和TIMP-2在高氧肺损伤中的作用及维甲酸(RA)的保护作用机制。方法建立高氧(FiO285%)暴露早产SD大鼠肺损伤模型,应用RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达,采用明胶酶谱检测MMP-2和MMP-9酶原及活酶表达,采用Western blot技术检测TIMP-1和TIMP-2蛋白表达。结果与空气组比较,高氧暴露4、7、14d,MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达均显著升高(P均<0.01),MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶和TIMP-1蛋白的表达明显上调(P<0.05);RA对空气暴露下它们的表达均无明显影响(P均>0.05),但不同程度下调高氧暴露后MMP-2、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达和MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶的表达,进一步提高TIMP-1蛋白表达;高氧、RA对TIMP-2 mRNA和蛋白的表达均无明显影响(P均>0.05)。结论高氧暴露明显改变MMPs/TIMPs的表达,在肺泡形成关键时期,MMPs/TIMPs之间平衡关系的破坏是造成肺发育受阻和纤维化的重要因素;通过协调MMPs/TIMPs之间的表达,改善肺泡结构,降低肺纤维化程度,从而逆转高氧所致肺损伤,是RA发挥保护作用的重要机制之一。     

川崎病患儿血清MMP-9与TIMP-1质量浓度变化及其临床意义

目的探讨川崎病(KD)患儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制剂1(TIMP-1)质量浓度的变化在预测发生冠状动脉病变(CAL)风险中的临床意义。方法观察组为2003~2004年在四川大学华西第二医院与四川省人民医院住院的KD患儿32例,静脉注射丙种球蛋白(IVIG)前后各抽取患儿外周静脉血1次,同时抽取20名正常体检儿童(正常对照组)外周静脉血。ELISA双抗体法测定血清MMP-9与TIMP-1质量浓度。用二维超声心动图观察心脏冠状动脉病变。结果观察组患儿急性期血清MMP-9、TIMP-1质量浓度及MMP-9/TIMP-1比值均较正常对照组儿童显著增高(P<0.01);IVIG干预前CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1显著地高于非CAL组患儿(P<0.01);IVIG干预后观察组患儿血清MMP-9质量浓度与MMP-9/TIMP-1显著降低(P<0.01);IVIG干预后CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1仍显著高于非CAL组患儿(P<0.05),而后者MMP-9/TIMP-1基本降至正常儿童水平;观察组患儿血清TIMP-1质量浓度在IVIG干预前后无显著变化。结论MMP-9与TIMP-1可作为KD合并CAL的一种关联因素,动态监测血清MMP-9质量浓度和(或)MMP-9/TIMP-1比值对预测KD并发CAL具有较重要临床意义。     

川崎病患儿外周血基质金属蛋白酶1的表达及其与冠状动脉损伤的关系

目的观察基质金属蛋白酶1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）在川崎病患儿外周血不同时期的表达水平,探讨其在冠状动脉（简称冠脉）损伤中的作用。方法40例川崎病患儿（无冠脉损伤组23例,冠脉损伤组17例）,按病程分为急性期、亚急性期和恢复期;另分别以10例败血症患儿、10例健康儿童为发热对照组和正常对照组。应用酶联免疫吸附法检测血清MMP-1蛋白水平、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测外周血白细胞MMP-1 mRNA表达水平。结果急性期有、无冠脉损伤组血清MMP-1和白细胞表达MMP-1 mRNA水平均明显高于发热对照组和正常对照组（均P〈0．01）,且冠脉损伤组MMP-1蛋白和mRNA水平较无冠脉损伤组升高更为显著（P〈0．05）;到亚急性期、恢复期时MMP-1蛋白和mRNA水平依次明显降低（各期间比较,均P〈0．01）。川崎病组急性期血清MMP-1蛋白水平与外周血白细胞计数呈显著正相关（r=0．750,P〈0．01）。结论MMP-1在川崎病急性期,尤其在冠脉损伤时表达明显升高;MMP-1的过度表达可能与川崎病冠脉损伤的形成有关。     

婴幼儿重症肺炎血清中基质金属蛋白酶9与基质金属蛋白酶抑制物1的表达及意义

目的 探讨婴幼儿重症肺炎急性期外周血中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的表达及临床意义.方法 选取2015年10月至2016年5月于郑州大学第三附属医院儿童重症监护病房住院的婴幼儿重症肺炎20例(重症肺炎组)和同期在本院呼吸病区住院的婴幼儿轻症肺炎25例(轻症肺炎组),依据病原学分为病毒性肺炎组(24例)和非病毒性肺炎组(21例),20例同期健康体检儿童为对照组.采用酶联免疫吸附法测定外周血中MMP-9和TIMP-1水平,并行潮气肺功能检查.结果 所有肺炎患儿血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1水平均显著高于对照组,重症肺炎组高于轻症肺炎组,病毒性肺炎组高于非病毒性肺炎组(均P<0.05);重症肺炎组和轻症肺炎组患儿恢复期肺功能达峰时间比(TPTEF/TE)和达峰容积比(VPTEF/VE)均明显低于对照组,重症肺炎组明显低于轻症肺炎组,病毒性肺炎组低于非病毒性肺炎组(均P<0.05);但患儿潮气量(VT/kg)的组间比较差异无统计学意义.外周血清中MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值与肺功能TPTEF/TE、VPTEF/VE均呈负相关(r1=-0.459、-0.376;r2=-0.413、-0.327;均P<0.05).结论 急性期血清中MMP-9及 MMP-9/TIMP-1与婴幼儿肺炎严重程度和恢复期肺功能损伤有关,在病毒性肺炎中表现的尤为突出,可作为判断预后的监测指标.     

小儿先天性心脏病并肺动脉高压血清基质金属蛋白酶与其组织抑制物的变化

目的探讨先天性心脏病(先心病)患儿血清中的基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-1)表达水平及其变化。方法2005年6月至2006年5月广西医科大学第一附属医院儿科收治左向右分流型先天性心脏病患儿81例,按治疗前肺动脉收缩压(SPAP)分为4组:非肺动脉高压(PH)组16例(SPAP<30mmHg),轻PH组21例(30mmHg≤SPAP<40mmHg),中PH组21例(40mmHg≤SPAP<70mmHg)和重PH组23例(SPAP≥70mmHg)。其中19例接受前列腺素E1(PGE1)治疗,24例接受手术治疗。对照组为21例为同龄正常体检儿。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1含量,计算MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1。结果与对照组相比较,先心病各组MMP-2均显著增高;在各PH组MMP-9、TIMP-1均显著增高;在非PH、轻PH、中PH组MMP-2/TIMP-1均显著增高;在轻PH、中PH组MMP-9/TIMP-1显著增高。19例经PEG1治疗14d后,MMP-2、MMP-9和TIMP-1均显著下降。24例在手术治疗1周后,MMP-2、MMP-9、TIMP-1和MMP-2/TIMP-1均显著降低。结论(1)左向右分流型先心病血清存在MMP-2、MMP-9的显著增高,MMP-2、MMP-9可能协同参与肺血管重构,MMP-2对触发肺血管重构可能起着更积极的作用;(2)PGE1可有效降低先心病血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1,这可能是PGE1逆转肺血管重构的机制之一;(3)介入封堵术和外科手术均可有效降低轻、中PH患儿血清MMP-2、MMP-9、TIMP-1和MMP-2/TIMP-1,其机制在于这两手术都阻断了先心病异常的血流动力学这一肺血管重构的始动因子。     

Levels of matrix metalloproteinase-9 and its inhibitor in bronchoalveolar lavage cells of asthmatic children

Our objective was to investigate the role of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 (TIMP-1) and their cellular sources in childhood asthma. We used 12 controls and 16 asthmatic children. The levels of MMP-9 and TIMP-1 in bronchoalveolar lavage (BAL) cells of asthmatic children were measured immunocytochemically. The positive level index, defined as the percentage of positive-stained cells × average optical density, was used to assess the expressing levels of MMP-9 and TIMP-1. The percentages of eosinophils and mast cells in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of asthmatic children were increased. Levels of MMP-9 and TIMP-1 in BAL cell of asthmatic children were increased significantly at about 30- and 35-fold relative to the controls, respectively. These results suggest that both MMP-9 and TIMP-1 contribute to tissue remodeling. MMP-9, which mediates the degradation of extracellular matrix (ECM), is increased significantly in the early or acute stage and may play a role in ECM degeneration. Excessive TIMP-1 may be synthesized following MMP-9 production when the body tries to repair the damage, which results in excessive deposition of ECM component.     

Tissue inhibitor of metalloproteinases-1 and matrix metalloproteinase-3 in Japanese healthy children and in Kawasaki disease and their clinical usefulness in juvenile rheumatoid arthritis

BACKGROUND AND METHODS: To determine the clinical values of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 (TIMP-1) and matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) in juvenile rheumatoid arthritis (JRA), we measured serum levels of these enzymes with rapid one-step sandwich enzyme immunoassay. Forty-one JRA patients, 48 normal healthy children (NC) and 10 Kawasaki disease (KD) patients were investigated. RESULTS: Serum TIMP-1 levels in NC corresponded to those in normal adults reported in the literature, while MMP-3 levels were lower than those in healthy children and the ratio of MMP-3/TIMP-1 decreased. The TIMP-1 levels in JRA and KD at the first clinic examination were statistically higher than those in NC (P < 0.05) and MMP-3 levels and MMP-3/TIMP-1 in JRA were significantly higher than those in NC (P < 0.0001 and 0.0005, respectively) and KD (P < 0.001 and 0.0005, respectively). In JRA, MMP-3 levels of patients with arthritis were statistically higher than those of patients without arthritis (P < 0.05) and MMP-3 levels were correlated with C-reactive protein (rs = 0.465, P < 0.05), while TIMP-1 did not (rs = 0.340). There was a positive correlation between serum levels of MMP-3 and TIMP-1 and prognosis (rs = 0.733, P < 0.05). CONCLUSION: In JRA, the serum MMP-3 level is a useful marker to evaluate joint damage, while serum TIMP-1 remains an acute phase reactant.     

颅内出血足月新生儿血清基质金属蛋白酶-9及其抑制剂水平的动态变化

目的探讨颅内出血足月新生儿血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶组织因子(TIMP)-1水平动态变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别测定30例颅内出血患儿在生后1 d内,3、7、15天血清MMP-9、TIMP-1水平及其两者比值,并与30例健康足月新生儿进行对照比较。结果颅内出血足月新生儿血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1水平明显高于对照组(P<0.01),以出生后3 d内MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1最高,7 d后开始下降,随病情恢复其水平缓慢下降,15 d部分患儿恢复正常,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.05)。小、中、大量出血患儿血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);三组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论颅内出血足月新生儿血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1水平均明显增高,可作为判定病情和评估预后的参考指标。     

白三烯受体拮抗剂对哮喘大鼠基质金属蛋白酶-9 及其抑制剂表达的影响

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1)在支气管哮喘发病中的作用,评价白三烯受体拮抗剂对其的调节作用。方法应用ELISA、免疫组织化学、Western-blot及RT-PCR技术对白三烯受体拮抗剂治疗前后大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1表达进行研究。结果①大鼠肺组织MMP-9mRNA表达:哮喘7d组为(2.74±0.41),21d组为(1.69±0.25),白三烯受体拮抗剂治疗组为(0.91±0.20),正常对照组为(0.64±0.13),组间比较差异有统计学意义(F=123.42,P<0.01)。大鼠肺组织TIMP-1mRNA表达:哮喘7d组为(1.53±0.21),21d组为(1.98±0.28),白三烯受体拮抗剂治疗组(1.03±0.17),正常对照组(0.71±0.10),组间比较差异有统计学意义(F=65.59,P<0.01)。②RT-PCR结果与Westernblot结果一致。结论从蛋白质水平及分子水平显示哮喘大鼠模型肺组织MMP-9表达升高,TIMP-1表达亦增强;白三烯受体拮抗剂可能通过下调MMP-9及TIMP-1表达来抑制气道炎症和气道重塑。     

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目的以肺泡灌洗液(BALF)中羟脯氨酸(HYP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制物(TIMP-1)为观察指标,了解呼吸道异物吸入对气道损害、重建的影响。方法对2002年6月至2003年3月在浙江大学儿童医院住院的46例呼吸道异物患儿,按异物滞留体内时间分为3组(A组:<7d,B组:~30d,C组:>30d),对3组患儿的BALF进行细胞学分析,并对其中的HYP、MMP-9细胞阳性率和TIMP-1质量浓度进行测定。对照组为12例有异物吸入可疑病史,但最后排除的儿童。结果对照组与患儿组间细胞学计数差异无显著性(P>0.05),但肥大细胞仅在患儿BALF中发现。对照组及各组患儿的MMP-9细胞阳性率分别为33.3%、62.5%、80.0%和93.3%,TIMP-1细胞阳性率分别为16.3%、50.0%、80.0%和93.3%,总体差异均有显著性意义(P=0.006和P<0.001);各组间HYP差异有显著性意义(P<0.001)。结论气道异物促进MMP-9、TIMP-1及HYP的表达和分泌,提示气道异物可导致支气管肺组织破坏和重建,其程度与异物滞留时间有关。     

Levels of matrix metalloproteinase-9 and its inhibitor in guinea pig asthma model following ovalbumin challenge

Our objective was to investigate the role of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 (TIMP-1) and their cellular sources in guinea pig asthma model following ovalbumin (OA) challenge. Twenty guinea pigs were divided into 2 groups: OA-challenged group were sensitized by intraperitoneal injection with OA and exposed to OA while the control group used saline in a similar manner. The positive level index (PLI), defined as the percentage of positive-stained cells × average optical density, was used to assess the expressing levels of MMP-9 and TIMP-1. The levels of MMP-9 from OA-challenged group were significantly higher than those of controls. However, no significant difference of the TIMP-1 levels between the OA-challenged group and controls were found. MMP-9 was expressed strongly in both inflammatory and structural cells while TIMP-1 was expressed weakly in inflammatory cells and structural cells. Our results implied that MMP-9 may contribute to tissue remodeling in asthma and both structural and inflammatory cells within lung tissue are the main cellular sources of MMP-9. Excessive expression of MMP-9 in the early or acute stage of asthma may be associated with the initiation of bronchial injury and inflammatory cells accumulation.