Ca^2＋超载在缺血性神经元损伤中的作用机制

Ｃａ２＋是神经系统中神经兴奋和传导所必需的离子，神经兴奋时Ｃａ２＋作为第二信使和调节剂在神经细胞代射中起着重要作用。研究表明，细胞内Ｃａ２＋浓度的异常增高是脑缺血后神经元损伤的主要机制之一。１正常胞浆中Ｃａ２＋浓度的维持细胞内Ｃａ２＋浓度仅为１０－８...     

Ca~(2+)与脑缺血神经细胞损伤

Ca~(2+)在脑缺血神经细胞损伤的发生发展中具有重要作用,Ca~(2+)超载是神经细胞死亡的“最后共同途径”。脑缺血早期应有Ca~(2+)拮抗剂是控制Ca~(2+)内流的主要方法。Ca~(2+)超载的发生机制复杂,因此联合应用自由基清除剂、抗炎药物等有助于Ca~(2+)超载的防治。     

脑缺血损伤后Ca2+超载引起神经细胞凋亡的机制

脑缺血是神经系统的常见病,缺血后会发生再灌注损伤,而神经细胞内Ca2+超载是导致细胞凋亡最主要的因素.Ca2超载引起神经细胞凋亡的机制中线粒体途径、内质网途径和核酸内切酶途径最为重要,本文就这三方面进行综述.     

盐酸氟桂嗪对缺血神经细胞保护作用的研究

目的 探讨盐酸氟桂嗪（西比灵）对缺血损伤的神经细胞的保护作用。方法 在缺氧缺糖条件下培养神经细胞,作为体外缺血损伤模型;实验组为无糖培养剂中添加４０μｍｏｌ／Ｌ西比灵,对照组为无糖培养剂,测定缺氧损伤后细胞内钙离子浓度、细胞大小（支配面积）、以及所释放的乳酸脱氢酶的活性,分析判断西比灵的作用。结果 实验组细胞的胞内钙离子浓度显著低于对照组,细胞所支配面积大于对照组细胞,所释放的乳酸脱氢酶活性低于对照组。结论 西比灵能抵抗缺氧缺糖损伤后细胞内的钙离子浓度的升高,能有效减少缺氧缺糖对细胞所造成的损害,具有保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注时神经细胞游离Ca^2＋与FOS表达

目的 观察大鼠脑缺血再灌注时神经细胞内Ｃａ＾２＋与ＦＯＳ的时空变化。方法 利用大鼠脑缺血再灌注模型,结果 随大鼠脑缺血再灌注时间的延长,细胞内Ｃａ＾２＋增加明显,ＦＯＳ表达较快,再灌注６ｈ即达到高峰。ＦＯＳ蛋白在海马区表达最多,纹状体最少。结论 认为神经细胞内钙超载引起细胞死亡,是通过促进ＦＯＳ的表达完成的。     

烫伤早期大鼠肾皮质细胞氧自由基、Ca~（2＋）细胞化学和Ca~（2＋）－Mg~（2＋）－ATP酶活性的变化

研究重度烫伤大鼠肾皮质细胞膜（质膜、内质网及线粒体膜）Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性、细胞内Ｃａ２＋定位和半定量及肾皮质内Ｈ２Ｏ２（氧自由基）定位，以探讨烫伤早期肾损伤的机制。方法：化学法和细胞化学法。结果：发现肾小管细胞内Ｃａ２＋浓度升高在烫伤后６０ｍｉｎ达到高峰，Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性在６０或１２０ｍｉｎ为最低，并与亚细胞结构的损伤程度显著相关。烫伤后３０ｍｉｎ肾皮质间质毛细血管及肾小球毛细血管壁出现Ｈ２Ｏ２细胞化学阳性沉积物，６０ｍｉｎ时消失。以上变化在观察时间内（５ｈ）具有可恢复性。结论：严重烫伤时肾缺血，皮质毛细血管内皮细胞受氧自由基损伤，改变了血管通透性，引起组织水肿，继而Ｃａ２＋泵活性下降，Ｃａ２＋过载，进一步影响细胞结构和功能。     

神经降压素的肝细胞保护作用与Ca~（2＋）的关系

观察了神经降压素（ＮＴ）的肝细胞保护作用与Ｃａ２＋的关系。结果显示，醋氨酚使肝细胞Ｃａ２＋内流和肝脏钙含量增加，但对于线粒体Ｃａ２＋摄取及其钙含量无明显影响，表明细胞可能出现胞质Ｃａ２＋超载。若在醋氨酚之前给予ＮＴ则使肝细胞Ｃａ２＋内流明显减少，肝脏Ｃａ２＋含量有降低趋势，但线粒体钙含量显著增加。这些结果提示，ＮＴ通过减少Ｃａ２＋内流，增强线粒体贮存Ｃａ２＋的能力，部分缓解醋氨酚所致胞质Ｃａ２＋超载从而减轻细胞损伤。     

ATP－氯化镁对脑缺血再灌流损伤后胞浆内Na~＋，K~＋，Ca~（2＋），Mg~（2＋）及SOD的影响

采用四条血管阻断方法制成家兔急性全脑缺血再灌流模型，观察家兔脑组织胞浆内ＳＯＤ及Ｎａ＋，Ｋ＋，Ｃａ（２＋），Ｍｇ（２＋）含量变化，结果发现家兔脑组织单纯缺血时ＳＯＤ活力明显下降（与正常对照组相比Ｐ＜０．０１），缺血再灌流后ＳＯＤ活力又较单纯缺血组进一步下降（Ｐ＜０．０１），Ｎａ＋，Ｃａ（２＋）在单纯缺血时含量增高（与正常对照组相比Ｐ＜０．０１），而Ｋ＋，Ｍｇ（２＋）则减少（Ｐ＜０．０１）；缺血再灌流后Ｎａ，Ｃａ（２＋）含量较单纯缺血组进一步增高（Ｐ＜０．０１），Ｋ＋，Ｍｇ（２＋）减少（Ｐ＜０．０１）．应用ＡＴＰ－氯化镁治疗后，上述指标与正常对照组相比无显著差异。     

脑缺血时神经细胞死亡机制的研究进展

脑缺血是危害人类健康的常见病、多发病 ,可发病于各年龄段 ,因而一直受到广大基础和临床工作者的重视。近年关于脑缺血的发病机理、病理变化及其防治的实验研究越来越多[1,2 ] ,研究发现不同脑区的神经元对缺血有不同的敏感性 ,脑组织在缺氧 4～ 5ｍｉｎ后即发生不可逆损伤。关于脑缺血神经元不同损伤敏感性或耐受性的机制尚不完全清楚 ,可能与神经元本身的特性、兴奋性氨基酸毒性及钙超载有关[3] 。研究脑缺血神经元受损、死亡机制对防治此类疾病有重要意义 ,本文仅就几个方面进行回顾和总结。1　兴奋性氨基酸的神经毒作用兴奋性氨基酸及…     

大鼠宫内缺血缺氧后c—fos的表达与神经细胞凋亡的关系

目的：探讨大鼠围产期缺血缺氧脑损伤发病机制。方法：结扎Ｗｉｓｔａｒ孕鼠子宫血管，建立胎鼠缺血缺氧脑损伤模型。用原位杂交及原位末端标记法检测剖宫产产后存活不同时间鼠大脑ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达及神经元凋亡的情况。结果：缺血后即刻大脑皮层和海马出现ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达，缺血后１－２ｈ和２４ｈｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ出现两次高表达；而对照组仅在生后１ｈ海马有较少量的表达。缺血后２ｄ神经细胞凋亡数明显多于对     

神经元缺血坏死与细胞外液中不同Ca^＋浓度的关系

目的 探讨缺血时细胞外不同Ｃａ＾２＋浓度对神经细胞坏死程度的影响。方法 使用体外培养１２－１４天大鼠大脑皮神经细胞,随机分为正常对照组（８例）;单纯缺血组（８例）;较高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）。检测各组神经细胞内总钙（ＴＣＡ＾２＋）,游离钙（Ｃａ＾２＋ｉ）及细胞外液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）浓度变化。结果 单纯缺血组,较高Ｃａ＾２＋浓度组,高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液中ＬＤＨ均高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,同时高Ｃａ＾２＋浓度组,较高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液ＬＤＨ浓度均高于缺血组。结论 脑缺血时,随着细胞外液中Ｃａ＾２＋浓度增设,神经细胞内钙沉积增加,从而加速神经细胞死亡。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的动态变化

目的：观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化。方法：采用健康雄性大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型，阻断大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注，在0．5h，6h，12h，24h和48h不同时间点断头取脑，连续取脑进行TUNEL染色。结果：①假手术组、缺血再灌注组非缺血侧大脑半球未见阳性的凋亡细胞。②脑缺血再灌注早期部分神经细胞发生了凋亡。随着再灌注时间的延长，凋亡细胞数目逐渐增多，12h～24h达到高峰。③凋亡细胞主要分布在梗死灶的边缘区，梗塞灶中心区和正常区无凋亡细胞。结论：神经细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤时起着重要作用。     

聪圣胶囊对拟缺血再灌注大鼠原代培养皮层神经细胞的保护作用

目的：研究聪圣胶囊对大鼠原代培养皮层神经细胞拟缺血再灌注损伤的影响。方法：采用血清药理学和流式细胞仪的方法，观察聪圣胶囊含药血清对缺糖缺氧（3h）拟缺血再灌注（0，3，6，18h）损伤神经细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出及神经细胞凋亡率的影响。结果：聪圣胶囊含血清（2，4，8g/kg）可抑制缺糖-缺氧3h再灌（0，3，6和18h）引起的神经细胞内LDH的释放。降低缺糖-缺氧3h再灌18h导致的凋亡细胞率。结论：聪圣胶囊可减轻缺血性脑损伤。     

脑缺血性疾病的临床研究进展（五）

神经细胞内的Ca^2+与神经递质的释放和中枢神经系统基本电活动和脑的高级功能密切相关，对神经细胞生长、演变和再生过程具有调节作用。但细胞内钙超载是细胞损伤级联反应的重要环节，是细胞死亡的主要原因（坏死与凋亡），细胞外钙离子主要通过电压门控性钙通道，受体门控性钙通首和机械激活性（又称牵张活化性）钙通道进入细胞内。钙通道的开启和关闭构成通道的门控过程，此过程具有激活态、失活态和静息态三种状态。静息状态时通道大多关闭，此时膜外Ca^2+几乎不能通过。     

Fura－2荧光测定中药有效成分对神经细胞内Ca~（2＋）浓度的变化

将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育，应用新型钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定神经细胞内游离Ｃａ２＋浓度变化。结果表明，上述中药有效成分均能影响胞内Ｃａ２＋释放和胞外Ｃａ２＋内流。从而有效地保护神经元免受兴奋性毒性作用     

益气活血片对脑缺血神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

[目的]研究益气活血片(主要由黄芪、川苛、当归、石菖蒲、全竭、益毋草、冰片等组成)对不完全性脑缺血后大鼠海马和额叶皮层细胞凋亡及相关基因blc—2表达的影响。[方法]建立不完全性脑缺血大鼠模型，治疗组在建立模型后每天灌服益气活血片至实验结束。应用流式细胞仪测定细胞群中细胞凋亡的比例和blc—2蛋白的含量，并结合常规病理观察组织学改变。[结果]模型组大鼠组织学可见早期凋亡的形态学改变，并且海马、额叶神经细胞凋亡以及blc—2蛋白含量较假手术组升高；益气活血片治疗后凋亡细胞减少，但海马区仍高于假手术组，blc—2蛋白水平有所下调，接近假手术组。[结论]不完全性脑缺血可引起神经细胞凋亡，益气活血片对此有一定的治疗作用。     

脑损伤后神经细胞Ca~（2＋）通道变化及其对BBB和脑水肿的影响

通过检测脑皮质神经元突触体胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），研究大鼠脑损伤后神经细胞Ｃａ２＋通道变化，及其对血脑屏障（ＢＢＢ）和脑水肿的影响。结果表明，脑损伤后突触体［Ｃａ２＋］ｉ显著升高，分别为对照值的１０～１７倍，证实了神经细胞ｃａ２＋超载可能是引起ＢＢＢ通透增加，加剧脑水肿的重要因素。钙通过阻断剂尼莫地平可阻止Ｃａ２＋通道开放，有利于脑水肿防治。     

外源性神经节苷脂GM_3对Ca~（2＋）－ATP酶及红细胞胞浆Ca~（2＋）－浓度的影响

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ２＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节即浓度为１～６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性；ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＣＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ２＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６９μｍｏｌ／Ｌ时［Ｃａ２＋］有不同程度升高，浓度大于６０μｍｏｌ／Ｌ时则降低［Ｃａ２＋］。     

健康人红细胞Na~＋－K~＋ATP酶、Ca~（2＋）－Mg~（2＋）ATP酶活性

用生物化学法及荧光法测定了成年人、老年人的红细胞Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活性及胞浆游离Ｃａ２＋。结果显示：老年前期组Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶及Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活性均显著低于成年人组（Ｐ＜０．０５），而胞浆游离Ｃａ２＋浓度明显高于成年人组（Ｐ＜０．０５）。老年组的两个ＡＴＰ酶活性均较老年前期组低，胞浆游离Ｃａ２＋浓度高于老年前期组。上述三个指标的随龄性变化以老年前期组最明显，特别是女性。