17例急性丙型病毒性肝炎临床观察

目的：研究分析急性丙型病毒性肝炎的临床症状。方法选取我院2012年2月~2013年6月收治的17例急性丙型病毒性肝炎患者,观察患者入院、内科护肝对症治疗2、4 w及出院3、6、12月肝功能、HCV RNA、HCV血清学标志物和临床症状动态变化。结果17例急性丙型病毒性肝炎患者HCV血清学标志物和HCV RNA的动态变化为院入院时抗-HCV阳性的有15例,所有患者的HCV RNA均>1.0×103 IU/mL。出院后3个月时,抗-HCV阳性的有17例,HCV RNA均>1.0×103 IU/mL的有15例。出院后6个月时抗-HCV阳性的有17例,HCV RNA均>1.0×103 IU/mL的有14例。出院后12个月的情况和出院后6个月的情况相似。通过治疗2 w后,所有患者的临床症状均消失,其中肝功能恢复正常的有14例,占82.4%。治疗4 w后,所有患者的肝功能均恢复正常。但在随访1年后发现,有6例患者出现肝功能异常的现象,占35.3%。结论在治疗前期对患者进行肝功能、病毒的血清学标志物和HCV RNA检测,观察病毒的血清学标志物和HCV RNA动态变化,有利于根据患者的实际情况制定出个性化的有效治疗方案。急性丙型病毒性肝炎的主要发生因素是输血或血制品,对输血或血制品进行有效地控制是预防急性丙型病毒性肝炎的关键所在。     

丙型病毒性肝炎患者血清瘦素的检测

研究丙肝患者血清leptin水平的变化。采用RIA检测65例丙肝组患者,80名对照组血清leptin水平,以及各种生化指标,比较各组的leptin水平以及leptin与各生化指标的相关性。结果显示慢性丙肝患者血清leptin水平较对照组明显升高(P<0.01);血清leptin水平与谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)呈显著性正相关(P<0.05);而与血糖(Glu)、总胆固醇(TC)无明显相关性(P>0.05)。慢性丙肝患者血清leptin水平升高且与肝脏炎症病变严重程度有关,leptin可以作为一个判断肝脏炎症严重程度的指标。     

丙型病毒性肝炎研究进展

丙型病毒性肝炎（简称丙肝）由丙型肝炎病毒（HCV）感染所致,据估计全球HCV感染者至少1.3亿.在病毒性肝炎中,丙肝的发病率虽较甲型肝炎和乙型肝炎为低,但易发展成慢性,约80%丙型肝炎病人可发展成慢性肝炎,甚至肝硬化和肝癌,严重威胁着人民的健康和生命.本文仅就丙型病毒性肝炎的研究进展作一综述.     

慢性丙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗前后自然杀伤细胞CD100表达水平变化

目的观察慢性丙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗前后外周血中NK细胞、NK细胞亚群百分率及活化因子CD100表达水平变化。方法流式细胞术检测慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血中NK细胞、NK细胞亚群频率及膜型CD100表达水平;ELISA检测血清中可溶性CD100水平;采用Spearman相关检验分析CD100与谷丙转氨酶(ALT)、HCV-RNA之间的相关性。结果与健康对照组相比,慢性HCV感染患者CD56dimNK亚群百分率降低,而CD56neg亚群比率升高(P0.05);抗病毒治疗后获得早期病毒学应答(EVR)者,CD56bright亚群百分率升高,CD56neg亚群比率显著降低(P0.05);停药后获得持续性病毒学应答(SVR)者,总NK细胞及亚群频率恢复正常。与健康对照组相比,慢性HCV感染患者血清中sCD100水平显著降低(P0.05);膜型CD100表达轻度降低,但无统计学差异;经抗病毒治疗获得EVR者,sCD100及膜型CD100水平均显著升高(P0.05),获得SVR者又降至正常水平。Spearman相关性分析发现,NK细胞CD100表达与ALT水平呈正相关,与HCV-RNA滴度呈负相关(P0.05)。结论 CD100表达降低与HCV持续感染有一定关系,并参与NK细胞对HCV清除。     

2006—2015年乌鲁木齐市丙型病毒性肝炎流行特征分析

目的 了解乌鲁木齐市2006—2015年丙型病毒性肝炎的流行病学特征,为其防控工作提供科学依据,提高网络直报数据质量.方法 2006—2015年中国疾病预防控制信息系统中丙型肝炎的资料,采用描述性流行病学方法对乌鲁木齐市丙型肝炎发病趋势开展分析.结果 2006—2009年乌鲁木齐市丙肝疫情呈现上升趋势,至2014年维持在较高发病水平(71/10万),2015年全市疫情则呈现下降趋势(43/10万).丙肝发病没有明显的季节性.市区内人口密集区域较人口稀少区域发病率高.男性发病率高于女性,20~44岁组发病率呈现小高峰,65以上老年组发病率急剧上升.跨年重复报告情况较高,筛检剔除重复病例9%.结论 新疆乌鲁木齐地区仍属于丙肝高发区,应加强青壮年丙肝病情监测和健康教育宣传工作,提高网络直报数据准确率.     

颗粒溶素重组表达载体的构建和原核表达

目的：构建人颗粒溶素（Granulysin,GNLY）基因的表达载体并在大肠杆菌中表达。方法：抽提体外培养的单个核细胞总RNA,通过RT-PCR的方法获得含有222bp的颗粒溶素cDNA,克隆到pMD18-T载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a（＋）中,构建重组表达质粒pET28a（＋）-GNLY,在大肠杆菌中诱导表达并经Ni亲和层析纯化。用SDS-PAGE和Westernblot对表达产物进行鉴定。采用MTT法检测GNLY融合蛋白的生物学活性。结果：酶切结果证实,成功地构建了GN-LY原核表达载体,并在大肠杆菌中获得稳定的表达,表达产物的相对分子质量（Mr）同预期值相一致。结论：成功构建了重组表达质粒pET28a（＋）-GNLY,并在大肠杆菌BL21（DE3）plysS中表达,获得了具有良好的抗原性和特异性的GNLY融合蛋白,为下一步研究人GNLY的功能奠定了基础。     

程序性死亡受体-1与丙型病毒性肝炎

死亡受体-1 ( PD-1)可导致病毒特异性CD8+T细胞的功能耗竭,在HCV感染过程中PD-1表达增强,阻断PD-1信号通路可恢复CD8+T细胞的免疫功能,有助于病毒清除。     

干扰素联合中药方剂治疗丙型病毒性肝炎的临床观察

目的观察重组人干扰素α-2b(天津华立达生物工程有限公司)、利巴韦林联合中药方剂(自拟增效白升汤)治疗慢性丙型病毒性肝炎的临床治疗效果、安全性及不良反应。方法选取58例丙型肝炎患者,其中男性30例,女性28例;年龄18~69岁,平均年龄39.4岁。病程均在6个月以上。随机分为对照组和观察组(各29例)。对照组只进行常规治疗,观察组在常规治疗的基础上使用中药方剂进行治疗,观察两组的临床效果及肝功能恢复情况。结果观察组总有效率(93.1%)明显高于对照组(62.1%),差异有统计学意义(P0.05);对照组有3例患者因白细胞下降不耐受而终止抗病毒治疗,观察组没有出现。两组患者经过治疗后,病情较治疗前都有所好转,观察组肝功能恢复情况明显优于对照组(P0.01)。结论干扰素、利巴韦林联合中药方剂治疗慢性丙型病毒性肝炎不但能有效抑制病毒的复制,使肝组织的病变得到缓解,还能减少干扰素的各种副作用,提高了患者对抗病毒治疗的耐受性,进而提高了抗病毒治疗的效果,值得临床上进一步推广应用。     

152例重症病毒性肝炎中丙型肝炎病毒感染及其临床分析

１５２例重症病毒性肝炎中丙型肝炎病毒感染及其临床分析胡国龄，谭德明，张铮，任培上有马晖勝丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是肠道外传播的非甲非乙型肝炎的主要病原之一。ＨＣＶ感染易致肝炎慢性化和肝硬化。ＨＣＶ和ＨＡＶ或ＨＢＶ重叠感染可使病情加重，促使重症肝炎的发生...     

乙型病毒性肝炎合并丙型、丁型病毒性肝炎患者血清NPT水平

新蝶呤（NPT）是鸟嘌呤核苷三磷酸生物蝶呤代谢途径中的一种产物,是细胞介导免疫防御系统激活的敏感标志物．不少与异常免疫相关疾病的患者中均可检测到NPT。本文报道混合嗜肝病毒感染的肝炎患者血清NPT水平。     

荧光定量RT-PCR测定人颗粒溶素基因表达水平

目的:通过建立荧光定量RT-PCR的方法,检测颗粒溶素(Granulysin,GNLY)mRNA在人外周血单个核细胞(PBMCs)中基因表达的水平。方法:基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD18-T-GNLY,建立荧光定量RT-PCR方法,并检测了40名正常健康献血者外周血中GNLY的表达水平。结果:内参18SrRNA的动态检测范围为103～108拷贝/μgRNA;而40名正常健康人外周血的PBMCs中均有GNLYmRNA的表达,范围为3.12×106～4.32×107拷贝/μgRNA,均值为[(2.0±1.3)×107]拷贝/μgRNA。结论:建立了人GNLY基因表达水平的荧光定量PCR检测方法,结果准确可靠,为今后进一步研究GNLYmRNA表达水平与感染性疾病免疫机制的相关性研究打下了基础。     

系统性红斑狼疮病人外周血白细胞TNFRSF12mRNA表达的研究

目的 :了解肿瘤坏死因子受体超家族成员 12 (TNFRSF12 )mRNA在系统性红斑狼疮 (SLE)外周血白细胞中的表达是否异常 ,初步判断TNFRSF12是否为SLE的易感基因。方法 :采用TaqManone stepRT PCR方法 ,分别对SLE病人、正常人和类风湿性关节炎 (RA)病人外周血白细胞TNFRSF12mRNA的表达进行检测。结果 :SLE病人TNFRSF12mRNA的表达形式与表达量和正常人相比均存在差异 ,SLE病人白细胞存在TNFRSF12mRNA的两类形式剪切体 ,分别为编码膜结合蛋白形式和分泌形式的TNFRSF12 ,而正常人只有后者 ,在PHA刺激后才开始同时表达前者。并且TNFRSF12mRNA在SLE病人中的表达量与病情活动度和肾脏累及相关。结论 :提示TNFRSF12在SLE的发病机制中起一定作用 ,因此可能是SLE的易感基因。     

丙型肝炎病毒核心蛋白在患者外周血单个核细胞内的核表达检测

目的　检测和研究丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus,HCV)核心蛋白在患者外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBMC)内核表达的意义 ,并探讨其与临床的关系。方法　对 6 6例慢性丙型肝炎患者PBMC标本进行免疫组化检测 ,并将HCV蛋白抗原定位分布情况与患者临床状况进行比较分析 ,对其中 2 7例患者PBMC进行HCVRNA和HCVAg的平行检测和分析。结果　免疫组化结果显示 ,慢性丙型肝炎患者PBMCHCVAg(core +NS3)阳性检出率为 77 2 7% (5 1 6 6 )。结果还证实 ,HCV核心蛋白均定位于胞核内 ,且呈强表达 ;NS3蛋白主要定位于胞质内 ,呈弱表达。当进行HCVAg在PBMC内定位情况与患者临床状况比较分析时显示 ,病情较重患者PBMC内核心蛋白表达阳性率 (35 2 9% )明显高于病情较轻者 (5 88% ) (P <0 0 0 1)。结论　HCV核心蛋白在PBMC内核表达与患者临床状况相关 ,提示其可能是丙型肝炎慢性化的一个指标 ,并可能在肝硬化和肝癌发生上起一定作用     

Detection of lymphocytes with increased DNA-Synthesis in the peripheral blood of patients with active chronic hepatitis

Journal of Molecular Medicine - The first observation of “in vivo activated lymphocytes” [IVAL] in cases of active chronic hepatitis is reported. Lymphocytes with an elevated metabolism...     

多发性硬化患者外周血单个核细胞SP3基因mRNA表达缺失研究

目的 研究我国多发性硬化(multiple sclerosis,Ms)患者外周血单个核细胞基因SP3(specificprotein 3)mRNA表达缺失的特点及其与临床表型的关系.方法 采集56例MS患者外周血单个核细胞,提取总RNA,设计SP3特异性引物,采用逆转录PCR方法观察SP3基因mRNA表达情况,并与其他疾病组、健康对照组进行比较.结果 56例MS患者中23例SP3为阴性结果,SP3表达缺失率为41.1%;健康对照组35例有5例为阴性结果,缺失率为8.6%;其它疾病对照组27例有4例为阴性结果,缺失率为14.3%.MS组与两对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.01).SP3表达缺失组与表达组急性期的改良残废程度量表评分差异无统计学意义,稳定期则差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过对MS患者SP3基因mRNA表达的研究,观察到中国人MS存在该基因mRNA表达缺失.SP3与MS临床表现及其免疫学发病机制之间可能存在一定的相关性.     

Quantitation of hepatitis C virus in liver and peripheral blood mononuclear cells from patients with chronic hepatitis C virus infection

Since the natural history of hepatitis C virus-associated liver disease and the therapeutic responsiveness might vary according to liver and blood mononuclear cells viral levels, it may be important to quantitate viral RNA in liver, blood mononuclear cells and serum, and to compare these data with genotype, biochemical and histologic data. A polymerase chain reaction-based assay available for serum hepatitis C virus RNA quantitation has been optimized to quantitate viral genomes in liver and peripheral blood mononuclear cells from 47 chronic hepatitis C patients. The procedure permitted hepatitis C virus RNA quantitation in freshly isolated mononuclear cells and in total RNA extracted from frozen mononuclear cells and liver tissue. The intrahepatic viral amount (median: 2.6 × 10³ copies/μg RNA; range: 0 to 3.6 × 10⁴ copies/μg RNA) correlated significantly with the hepatitis C virus RNA concentration in serum (r = 0.76, P < .001) but not in mononuclear cells. Viral RNA concentrations in liver (P < .001), serum (P < 0.01) and PBMC (P < 0.05) were significantly higher in hepatitis C virus genotype 1 patients (essentially type 1b) than in non-1 type cases, but were unrelated to biochemical or histologic indexes of disease activity. In conclusion, the optimized assay permit HCV RNA quantitation in liver and peripheral blood mononuclear cells, suggesting that serum viral level is an accurate measurement of intrahepatic viral burden. J. Med. Virol. 54:265–270, 1998. © 1998 Wiley-Liss, Inc.     

外周血单个核细胞中mRNA表达与类风湿关节炎活动度的相关性研究

目的 以28个关节疾病活动度评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)为基础对不同活动度群组的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)病人和健康人群进行分析,挑选出RA活动度相关基因,为RA的诊断治疗提供新思路与线索。方法 收集苏州大学附属第一医院风湿免疫科门诊28个不同活动度的RA病人和18个健康人的基本信息并对它们外周血单个核细胞中mRNA水平进行检测,通过生物信息学分析寻找活动度相关基因。结果 筛选出80个单纯与RA活动度相关的基因,36个与RA活动度和发病都有关系的基因。在这些基因中,12个单纯与活动度相关的基因(SOCS3、C12orf44、KIFC1、MRPS18A、GYG1、RAB35、B4GALT5、LRRC41、LILRB4、LILRA5、CR1、PDIA6)与DAS28显著相关(r值分别为0.55、0.53、0.52、0.49、0.44、0.42、0.42、0.41、0.41、0.41、0.40、0.39,P值均<0.05)且呈趋势性下降,与发病和活动度都与相关基因PPIH与DAS28显著相关(r=-0.38,P<0.05)且呈趋势性上升。生物功能聚类发现有四项功能和甲基化相关,一项功能和应激反应相关。蛋白质关联分析显示HIST1H3E、HIST1H4I、HIST1H4F、HIST1H3D和HIST1H3F这五个基因不仅出现在与甲基化相关的功能中,而且在实验、文本挖掘和共表达三个方面都存在相互关系。结论 以DAS28为基础挑选出80个单纯与RA活动度相关的基因,功能分析表明他们大多受到甲基化调控作用,部分与免疫应激反应有关。     

Fluorescent "in situ" hybridization of hepatitis C virus RNA in peripheral blood mononuclear cells from patients with chronic hepatitis C

Although the liver is the main target for hepatitis C virus (HCV) infection, HCV RNA of positive and negative polarity has also been detected in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) by polymerase chain reaction. However, no data have been published on the relationship between the number of HCV-infected PBMCs and serum viremia levels. To address this issue, PBMC samples from 20 patients with chronic hepatitis C were examined by fluorescent "in situ" hybridization. Serum viremia levels and viral load in infected PBMC were measured using the Amplicor Monitor test. HCV was detected in all PBMC samples corresponding to the HCV-positive patients. Fluorescent signals were found mainly in the cytoplasm of the cell. The percentage of positive cells ranged from 0.08% to 4%, with a statistical correlation with the viral load in PBMC (r = 0.69; p =. 001) but not with the serum viremia levels (r = 0.23). It was demonstrated that HCV infection of PBMCs is a common feature of HCV chronic carriers. The results suggest that HCV infection of PBMCs does not contribute significantly to HCV viremia.     

Explorative study on the expression of neuregulin-1 gene in peripheral blood of schizophrenia

Neuregulin-1 (Nrg-1)¹ gene has been considered as a schizophrenia susceptibility gene. In order to observe the association of Nrg-1 gene with schizophrenia, the study was designed to investigate the effect of anti-psychotic treatment on the Nrg-1 mRNA expression in peripheral blood lymphocytes of the patients with a diagnosis of schizophrenia. The Nrg-1 mRNA expression in peripheral blood lymphocytes (PBLs) was measured by using semi-quantitative RT-PCR in 31 first-onset schizophrenia patients, 16 sibling controls and 31 no-sibship controls. Results showed that Nrg-1 mRNA expression in PBLs of patients was lower than that in other two control groups (F = 6.722, P = 0.002). However, as follow-up time extended, from the second week, Nrg-1 mRNA expression of PBLs in antipsychotic treated patients gradually increased and has obvious statistical significance compared the efficacy of taking anti-psychotic before and after therapy. These results demonstrated that Nrg-1 gene has association with schizophrenia. It is possible to select Nrg-1 mRNA expression of PBLs in schizophrenia patients as a potential therapeutic marker.