细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察

目的 动态观察细牲棘球绦虫(Eg)转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫Balb/c小鼠后脾细胞因子的变化.方法 88只Balb/c小鼠按体质量随机分为两组,用转基因苜蓿叶蛋白提取液(20 s/L)100 μl口服灌胃和10μl鼻腔黏膜接种分别免疫小鼠,每3天1次,连续2个月.在末次免疫后0(对照)、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20周各组剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,体外经Eg粗抗原(EgAg)或刀豆蛋白A(ConA)刺激培养48 h,诱生白细胞介素(IL)-12、γ干扰素(IFN-γ)和IL-10;经EgAg或脂多糖(LPS)刺激培养72 h,诱生肿瘤坏死因子α(TNF-α).收集脾细胞培养上清液,常规ELISA法检测IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平.结果 口服灌胃组的IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后4～6、2～8、2～6、4～12周升高,分别在免疫后4、2、2、8周达最高水平,其值分别为(25.0±5.8)、(575.0±28.9)、(50.0±11.5)、(42.5±2.9)ng/L,与0周[(11.3±2.5)、(125.0±28.9)、(11.3±2.5)、(12.5±2.9)ng/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.01);鼻腔黏膜接种组的IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后4～6、2～10、4～10、6～16周升高,分别在免疫后6、4、6、6周达最高水平,其值分别为(25.0±5.8)、(725.0±28.9)、(27.5±2.9)、(60.0±11.5)ng/L,与0周[(11.3±2.5)、(125.0±28.9)、(11.3±2.5)、(12.5±2.9)ng/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.01).EgAg、ConA、LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的脾细胞悬液组(P<0.05或<0.01),ConA或LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的EgAg刺激组(P<0.05或<0.01).结论 细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗在免疫早期(2～10周)可诱导小鼠产生Th1和Th2混合型免疫应答.     

多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ/3疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究

目的 探讨多房棘球绦虫(Em)重组BCG-EmⅡ/3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化.方法 将Balb/c小鼠按体质量随机分为3组:疫苗皮下注射组、疫苗鼻腔内接种组、对照组.免疫后8周用Em原头节进行攻击感染,感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,分别用原液、Em抗原(EmAg)、刀豆蛋白A(ConA)或植物血凝素(PHA)培养,酶联免疫吸附(ELISA)法检测脾细胞培养上清液中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-β)、白细胞介素4(IL-4)水平.结果 疫苗皮下注射组原液培养条件下IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平分别为(34.6±2.7)、(34.5±2.8)、(265.0±0.0)、(9.8±2.6)ng/L,与对照组[(25.0±1.9)、(30.0±0.0)、(10.0±0.0)、(12.5±2.7)ng/L]比较差异均有统计学意义(P＜0.01或＜0.05);疫苗鼻腔内接种组原液培养条件下上述4种指标分别为(32.5±2.2)、(33.6±2.7)、(130.0±0.0)、(10.4±2.7)ng/L.与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01或＜0.05);疫苗皮下注射组原液培养条件下TNF-α水平明显高于疫苗鼻腔内接种组(P＜0.01).EmAg、ConA(或PHA)刺激培养条件下,上述4种指标明显高于相同组别的原液培养(P＜0.01),且ConA(或PHA)刺激培养条件下,上述4种指标明显高于相同组别的EmAg刺激培养条件(P＜0.01).结论 多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ/3疫苗诱导小鼠产生辅助T淋巴细胞(Th)1型免疫反应,从而对抗Em原头节攻击感染.     

细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿叶蛋白提取液诱导小鼠细胞因子的变化

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)Eg95-EgA31融合基因苜蓿叶蛋白提取液免疫小鼠被Eg原头节攻击感染后体内棘球蚴囊重减少率及细胞因子的变化。方法热絮凝法提取转基因苜蓿叶蛋白,同时提取转空质粒(pBI121)苜蓿叶蛋白和正常苜蓿叶蛋白作对照。32只雌性BALB/c小鼠随机均分4组,A和B组分别用转基因苜蓿叶蛋白提取液100μl灌胃和10μl滴鼻免疫小鼠,C组用转空质粒苜蓿叶蛋白提取液10μl滴鼻免疫小鼠,D组用正常苜蓿叶蛋白提取液100μl灌胃免疫小鼠。各组小鼠每3d免疫1次,连续免疫2个月。末次免疫后第8周,各组小鼠用Eg原头节腹腔注射攻击感染(50个/只),感染后第24周剖杀小鼠,分离并称重细粒棘球蚴囊,计算囊重减少率;取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)、伴刀豆球蛋白A(ConA)或脂多糖(LPS)刺激培养,收集脾细胞培养上清液,常规ELISA法检测脾细胞培养上清液中白介素-12(IL-12)、白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果A、B、C和D组小鼠的棘球蚴囊重分别为(28.0±36.0)、(41.0±33.0)、(72.0±36.0)和(78.0±57.0)mg,A组低于D组(P0.05),囊重减少率为64.1%。A组的IFN-γ、1L-12和TNF-α水平高于D组(P0.01),分别为(925.0±88.6)、(22.5±2.7)和(82.5±11.7)pg/ml,IL-10水平低于D组(P0.01),为(125.0±26.7)pg/ml;B组小鼠脾的IFN-γ和TNF-α水平高于D组(P0.01),分别为(750.0±100.0)和(80.0±13.1)pg/ml,IL-12和IL-10水平与D组相比差异无统计学意义(P0.05);C组小鼠脾细胞因子水平与D组相比,差异无统计学意义(P0.05)。当用EgAg、ConA或LPS刺激时,刺激组的细胞因子水平高于相应的未刺激组(P0.05或P0.01),ConA或LPS刺激组的细胞因子水平高于EgAg刺激组(P0.05或P0.01)。结论转细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿叶蛋白提取液可诱导免疫鼠产生Th1型细胞免疫应答以对抗Eg原头节的攻击感染。     

多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察

目的 动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化. 方法 将混合疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,测定IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平.试验设有PBS对照. 结果 疫苗接种组小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后2～10周、4～8周、6～10周和4～6周升高,分别在免疫后6、6、8和4周达最高水平,含量分别为10.0 pg/ml、(75.0±6.6) pg/ml、(245.0±83.0) pg/ml和(187.5±16.5) pg/ml. 结论 多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗在免疫早期(2～8周)即可诱导小鼠产生TH1和TH2混合型免疫反应.     

胃肠道肿瘤癌性贫血患者血清Hepcidin和IL-6、IFN-γ、TNF-α表达及意义

目的:探讨胃肠道肿瘤癌性贫血患者外周血铁调素(Hepcidin)水平变化的意义及其与白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度变化的相关性。方法:采用双抗夹心生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)法检测94例胃肠道恶性肿瘤患者的血清Hepcidin、IL-6、IFN-γ和TNF-α浓度,其中29例伴有癌性贫血,分析Hepcidin与贫血、IL-6、IFN-γ、TNF-α之间的相关性。结果:①胃肠道肿瘤癌性贫血患者血清Hepcidin和IL-6水平均显著高于无贫血患者[(50.89±32.78)μg/L∶(30.06±30.40)μg/L、(30.77±34.44)ng/L∶(11.61±28.13)ng/L,均P0.05],而IFN-γ和TNF-α无明显差异[(138.96±70.23)ng/L∶(135.00±59.06)ng/L、(7.20±3.81)ng/L∶(9.20±8.19)ng/L,均P0.05];②胃肠道肿瘤癌性贫血患者的Hepcidin与IL-6呈正相关(r=0.375,P0.05),而与IFN-γ和TNF-α无相关性(r=-0.167和0.01,均P0.05);③胃肠道肿瘤癌性贫血患者的Hepcidin和IL-6、IFN-γ、TNF-α均与血红蛋白无相关性(均P0.05)。结论:胃肠道肿瘤癌性贫血患者外周血清Hepcidin和IL-6显著升高,且Hepcidin浓度与IL-6水平呈正相关,Hepcidin和IL-6在胃肠道肿瘤癌性贫血的发生发展过程中起重要的作用。     

粒细胞集落刺激因子对慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞产生细胞因子的影响

目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)产生细胞因子的影响.方法 收集15例慢性重型肝炎患者和10例健康志愿者的外周静脉血,分离PBMC,分为空白对照组、G-CSF预处理加脂多糖(LPS)刺激组和LPS刺激组.体外培养48 h后分别用放射免疫法和酶联免疫吸附测定法检测各组培养上清液中的TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-10水平;并用反转录(RT)-PCR法检测PBMC中的TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-10 mRNA表达水平.数据行t检验和方差分析.结果 慢性重型肝炎患者和健康志愿者的PBMC在体外经LPS刺激后,培养上清液中的TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10水平均明显高于空白对照组,而经G-CSF预处理的PBMC上清液中的TNF-α水平显著低于LPS单独刺激组[慢性重型肝炎:(2.56±1.28)μg/L比(5.30±4.27)μg/L,F=8.365,P=0.006;健康对照:(2.11±1.01)μg/L比(3.93±1.84)μg/L,F=16.346,P=0.003],IFN-γ水平亦显著低于LPS刺激组[慢性重型肝炎:(520.76±201.66)ng/L比(735.85±263.83)ng/L,F=41.799,P=0.005;健康对照:(264.74±100.21)ng/L比(410.51±191.78)ng/L,F=23.021,P=0.016],IL-6水平显著高于LPS刺激组[慢性重型肝炎:(982.35±387.06)ng/L比(733.00±278.69)ng/L,F=16.190,P=0.019;健康对照:(793.99±214.71)ng/L比(620.65±222.57)ng/L,F=47.921,P=0.015],IL-10水平亦显著高于LPS刺激组[慢性重型肝炎:(655.13±324.12)μg/L比(441.85±200.23)μg/L,F=22.986,P=0.012;健康对照:(491.52±139.46)μg/L比(355.90±154.02)μg/L,F=34.139,P=0.019].PBMC中的TNF-α、IL-6、IFN-γ、11710的mRNA水平变化与培养上清液相同.结论 G-CSF对慢性重型肝炎患者和健康志愿者的PBMC功能均有调节作用,G-CSF预培养可抑制PBMC在LPS刺激下TNF-α和IFN-7的释放,同时促进IL-6、IL-10的释放.     

心力衰竭患者血浆细胞因子变化与心功能的关系

目的:分析心力衰竭患者血浆细胞因子变化与心功能的关系。方法:选择2011年8月至2013年8月我院收治的58例心力衰竭患者为心衰组,另选同期来我院进行体检的58名健康人群作为健康对照组,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Th1/Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平,并进行比较。结果:与健康对照组比较,心衰组NYHAⅡ级、NYHAⅢ级、Ⅳ级患者的CRP[(3.57±1.15)mg/L比(6.21±1.89)mg/L、(6.89±2.02)mg/L、(7.57±2.11)mg/L]、TNF-α[(4.31±2.09)ng/L比(13.97±3.24)ng/L、(16.23±3.59)ng/L、(18.55±3.61)ng/L]、IL-6[(8.25±1.2)ng/L比(19.27±4.26)ng/L、(25.78±4.89)ng/L、(34.44±6.12)ng/L]水平均明显升高;外周血IFN-γ水平[(48.21±7.52)pg/ml比(68.63±8.24)pg/ml、(73.91±10.14)pg/ml、(82.44±11.58)pg/ml]、IFN-γ/IL-4[(1.07±0.12)比(1.73±1.26)、(2.09±1.31)、(2.38±1.40)]均显著升高(P均0.05);NYHAⅢ级、Ⅳ级患者的外周血IL-4[(45.11±6.97)pgl/ml比(35.31±5.47)pgl/ml、(34.56±4.92)pgl/ml]水平显著降低(P均0.05)。NYHAⅢ级、Ⅳ级患者的外周血IFN-γ、IFN-γ/IL-4显著高于NYHAⅡ级组患者,且NYHAⅣ级组患者又显著高于Ⅲ级组的(P均0.05)。结论:心力衰竭患者血浆细胞因子与心功能密切相关。     

pIL-12质粒DNA对细粒棘球蚴感染小鼠免疫应答的影响

目的探讨pIL-12质粒DNA免疫对细粒棘球蚴感染小鼠免疫应答的影响。方法将pIL-12质粒DNA肌肉注射免疫BALB/c鼠,免疫后8w用Eg原头节进行攻击感染,感染后18w剖杀小鼠,计算减蚴率;取脾并分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的百分比;用EgAg或ConA刺激培养脾细胞,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平;流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,同时设有BCG和PBS对照。结果pIL-12质粒DNA免疫组的减蚴率为44.85%,脾CD4+和CD8+T细胞亚群显著增加,IL-2、IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低,脾细胞凋亡发生率明显低于PBS对照组。结论pIL-12质粒DNA可诱导细粒棘球蚴感染小鼠产生一个保护性的免疫反应。     

慢阻肺合并肺结核患者血清细胞因子水平变化与意义研究

目的分析慢阻肺合并肺结核患者血清细胞因子水平变化情况。方法选择四川省眉山市仁寿县人民医院2011年1月—2016年12月中的50例慢阻肺合并肺结核患者视作观察组,另外选取50例单纯慢阻肺患者视作对照1组,50例健康受检者视作对照2组,均进行白介素(IL-6)、干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)各项血清细胞因子水平测定,分析结果。结果观察组患者血清细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6指标水平分别为(89.58±32.46)ng/L、(37.48±15.69)ng/L、(70.15±32.46)ng/L,均高于单纯慢阻肺的对照1组、健康者对照2组,单纯慢阻肺的对照1组各项指标水平也明显高于健康者的对照2组(P0.05);观察组痰菌阳性患者的细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6水平均明显高于痰菌阴性患者,P0.05;观察组治疗后血清细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6指标水平分别为(60.38±15.48)ng/L、(22.35±10.46)ng/L、(48.42±16.92)ng/L,明显低于治疗前(P0.05)。结论慢阻肺合并肺结核患者血清细胞因子水平会有明显升高,通过测定血清细胞因子水平有助于帮助临床辅助诊断慢阻肺合并肺结核,有重要应用价值。     

弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达和细胞免疫水平的影响

目的 探讨弓形虫感染对大鼠大脑组织神经丝(NF)mRNA表达和细胞免疫水平的影响.方法 将4周龄雄性SD大鼠分成两组(每组10只):弓形虫感染组腹腔感染2×10~(10)个/L弓形虫速殖子悬液2 ml;对照组腹腔注射灭菌生理盐水2 ml.9周后,应用RT-PCR法检测大鼠大脑组织中高相对分子质量NF(NF-H)、中相对分子质量NF(NF-M)和低相对分子质量NF(NF-L)mRNA表达水平:流式细胞术检测大鼠外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞;酶联免疫吸附试验测定其血清γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平.结果 大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF-L、NF-H mRNA表达量(0.51±0.06、0.68±0.05)较对照组(0.79±0.03、0.76±0.05)明显下降(t值分别为3.41、2.17,P<0.01或<0.05);NF-M mRNA表达量(0.69±0.02)与对照组(0.72±0.03)比较.差异无统计学意义(t=2.09,P>0.05).弓形虫感染组大鼠的CD4~+T细胞[(32.19±5.01)%]和CD8~+T细胞[(20.06±2.28)%]与对照组[(35.82±3.71)%、(22.06±3.90)%]比较,差异均无统计学意义(t值分别为1.69、1.88,P均>0.05).弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ[(6.03±0.16)ng/L]、TNF-α[(18.05±1.93)ng/L]、IL-4[(15.76±1.59)ng/L]水平均高于对照组((4.77±0.13)、(9.54±1.57)、(5.67±0.42)ng/L,t值分别为2.81、2.74、2.63,P均<0.05].结论 弓形虫感染可导致大鼠大脑组织中NF亚单位mRNA表达水平下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平升高.     

流行性乙型脑炎血清和脑脊液细胞因子的测定及意义

目的 检测流行性乙型脑炎脑脊液及血清中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-α水平,探讨其在发病中的作用机制.方法 同时留取24例乙型脑炎患者急性期血清和脑脊液标本各2 mL,20例健康对照者血清2 mL,ELISA法检测血清和脑脊液中的细胞因子.多样本均数比较用方差分析,两样本均数比较用t检验.结果 乙型脑炎患者脑脊液TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IFN-α水平分别为(24.5±6.6)、(7.8±2.4)、(16.0±5.7)、(17.6±4.8)、(130.2±33.6)和(45.2±10.8)ng/L,血清中分别为(25.3±11.2)、(7.1±3.2)、(14.5±6.2)、(16.0±6.5)、(82.0±27.8)和(42.5±16.2)ng/L,均高于健康对照组血清中的(12.7±7.9),(2.64±1.0)、(6.2±2.2)、(9.6±3.3)、(71.4±12.8)和(30.0±14.0)ng/L(F值分别为14.10、29.46、23.38、14.78、32.59、7.52,P＜0.05),IL-2、IL-12升高则不明显.乙型脑炎组脑脊液中的IL-1β、IL-6,IL-8、IL-10、IL-12和IFN-α水平较血清上升,TNF-α、IL-2水平则下降.重型患者脑脊液中IL-6为(18.8±5.4)ng/L、IL-8为(20.7±2.7)ng/L,高于普通型的(12.1±3.0)和(13.3±3.3)ng/L(t=3.50,t=5.96,P＜0.05),IL-2则降低.结论 细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-α的分泌过度,参与乙型脑炎炎性反应损伤的发病过程;而IL-2和IL-12的分泌不足,可能参与细胞免疫.     

白细胞介素-23对炎症性肠病患者外周血自然杀伤细胞的免疫调节作用

目的 研究白细胞介素(IL)-23对炎症性肠病(IBD)患者外周血中自然杀伤(NK)细胞促炎细胞因子分泌和细胞毒作用的影响,探讨其在IBD发病中的意义.方法 利用免疫磁珠分离12名健康人、16例克罗恩病(CD)患者和25例溃疡性结肠炎(UC)患者外周血NK细胞.体外培养NK细胞,并予空白刺激、IL-23刺激、IgG刺激或IL-23+IgG联合刺激.酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-αa和干扰素(IFN)-γ分泌水平.流式细胞仪检测经不同刺激培养的NK细胞对K562细胞的细胞毒作用.结果 正常对照组的NK细胞经人IgG和IL-23单独刺激后TNF-α、IFN-γ的分泌水平未明显增高(P值均＞0.05),二者联合刺激则能显著促进TNF-α、IFN-γ分泌(P值均＜0.05).单独应用IgG刺激CD和UC患者NK细胞分泌TNF-α、IFN-γ的效果不明显(P值均＞0.05).单独应用IL-23则具刺激作用(P值均＜0.05),二者联合应用的刺激作用更明显(P值均＜0.01).IL-23单独刺激和联合刺激均不能增强正常对照组NK细胞的细胞毒作用(P值均＞0.05).但单独应用IL-23可增强UC和CD患者NK细胞的细胞毒作用(分别为51.5%±7.1%和50.2%±8.7%,P值均＜0.05),且联合刺激可进一步增强该作用(分别为65.3%±6.6%和62.4%±5.5%,P值均＜0.01).结论 IL-23能刺激IBD患者NK细胞分泌TNF-α和IFN-γ,并能增强NK细胞的细胞毒作用,可能直接参与了IBD的发病过程.     

麝香保心丸对心力衰竭大鼠Th1和Th2型细胞因子水平的影响

目的 探讨麝香保心丸对心肌梗死后心力衰竭大鼠血清Th1型细胞因子、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)、白介索-10(IL-10)水平的影响.方法 结扎大鼠左冠状动脉前降支制作心肌梗死后心力衰竭模型,54只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、心力衰竭模型对照组(模型组)、麝香保心丸小剂量组(小剂量组)、麝香保心丸大剂量组(大剂量组)和阳性药物对照组(阳性对照组),采用灌胃法给药.超声心动图检测用药前后大鼠心功能,放射免疫法测定血清TNF-α、IL-10水平,酶联免疫吸附法测定血清IFN-γ、IL-4水平.结果 用药前,假手术组与正常对照组左心室射血分数(LVEF)比较,差异无统计学意义;与正常对照组和假手术组比较,模型组、小剂量组大剂量组和阳性对照组大鼠LVEF降低(均P＜0.01);用药后,与假手术组比较,模型组的TNF-α和IFN-γ水平升高(P＜0.01);IL-4和IL-10水平降低(P＜0.01);与模型组比较,大剂量组的LVEF改善(P＜0.05),TNF-α和IFN-γ水平降低(P＜0.05,P＜0.01),IL-4和IL-10水平升高(P＜0.05),小剂量组的IL-10水平升高(P＜0.05),IFN-γ水平下降(P＜0.01);阳性对照组IL-10水平升高(P＜0.05),TNF-α和IFN-γ水平下降(P＜0.05,P＜0.01);小剂量组和阳性对照组的IL-4水平有升高趋势,LVEF有下降趋势,但差异均无统计学意义.结论 麝香保心丸治疗改善了心肌梗死后心力衰竭大鼠的左心功能,大鼠血清IL-4、IL-10水平升高,TNF-α、IFN-γ降低.

Abstract：

Objective To investigate the effects of Shexiangbaoxin pills (SXBXP) on the serum levels of T helper type 1 (Th1) cytokines including tumor necrosis factor-a (TNF-α),interferon-γ(IFN-γ) and T helper type 2 (Th2) cytokines incloding interleukin-4 (IL-4),interleukin-10 (IL-10)in rats with chronic heart failure (CHF).Methods The CHF models were established by left anterior descending coronary artery ligation.Fifty-four Wistar rats were randomly divided into six groups:control group,sham operation group,CHF model group,small dose SXBXP group,large dose SXBXP group and positive medicine group.Heart function was examined by echocardiography before and after therapy,the TNF-α and IL-10 levels were measured by radioimmunoassay,IFN-γ and IL-4 levels were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).Results (1) Before therapy,there was no significant difference between control group and sham operation group in ejection fraction of left ventricle (LVEF).Compared with control group and sham operation group,the levels of LVEF were significantly decreased in CHF model group,small dose SXBXP group,large dose SXBXP group and positive medicine group (all P＜0.01).(2) After therapy,compared with sham operation group,the serum levels of TNF-α and IFN-γ were markedly increased,and IL-4 and IL-10 were significantly decreased in CHF model group (all P＜0.01 ).Compared with CHF model group,LVEF was significantly improved,serum levels of TNF-α and IFN-γ were markedly decreased,IL-4 and IL-10 were markedly increased in large dose SXBXP group (all P＜0.05).In small dose SXBXP group,serum levels of IFN-γ were markedly decreased and IL-10 were markedly increased (all P＜0.05).In positive medicine group,serum levels of TNF-α and IFN-γ were markedly decreased and IL-10 were markedly increased (all P＜0.05).In small dose SXBXP group and positive medicine group,serum levels of IL-4 increased and LVEF decreased,even though there was no significant difference compared with CHF model group.Conclusions The SXBXP therapy of rats with CHF induced by myocardial infarction improves the heart function,decreases the serum levels of TNF-α and IFN-γ,and increases serum levels of IL-4 and IL-10.     

(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯对类风湿关节炎的免疫调节机制研究

目的 ①研究(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对类风湿关节炎(RA)患者外周血和滑液中T细胞增殖的影响及对RA相关细胞因子的免疫调节作用.②观察EGCG对RA滑膜成纤维细胞(FLS)增殖的影响.方法 ①取RA患者外周血(30份)、滑液(23份)分离单个核细胞,并分设空白对照组,阴性对照组,甲氨蝶呤阳性对照组,EGCG低、中、高剂量组,通过同位素(3H)掺入法,在体外研究EGCG对RA患者外周血及滑液中T细胞增殖的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测EGCG对RA外周血及滑液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素-γ、白细胞介素(IL)-1、IL-6和IL-17A的影响.②取RA患者滑膜组织(8例)进行原代培养,并分设空白对照组,甲氨蝶呤组(阳性对照),EGCG低、中、高剂量组,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在体外研究EGCG对RA患者FLS增殖的影响.统计学处理采用方差分析和SNK-q检验.结果 ①RA患者外周血及滑液中EGCG高剂量组每分钟脉冲数(cpm)值[分别是(15 136±2910),(11587±3135)],较阴性对照组(42 856±2127)(35 748±4512)下降,差异均有统计学意义(P均＜0.01);外周血中ECCG高剂量组TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A吸光度值分别是[(321±13)、(298±20)、(132±12)、(197±7)、(59±8)pg/ml],均较阴性对照组[(458±28)、(505±26)、(346±28)、(405±25)、(109±13)pg/ml]下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);滑液中EGCG高剂量组TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A吸光度值分别是[(41.4±2.9)、(182±16)、(56.3±11.0)、(34.2±1.9)、(44±8)pg/ml],均较阴性对照组[(388.3±19.3)、(469±20)、(104.2±17.8)、(114.5±4.8)、(104±11)pg/ml]下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).②EGCG高剂量组FLS吸光度值(0.080±0.017),较空白对照组(0.274±0.041)下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EGCG可体外抑制RA患者外周血和滑液中T细胞增殖,抑制TNF-α、干扰素-γ、IL-1、IL-6和IL-17A分泌;可体外抑制RA FLS增殖.     

细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法 56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,A组和B组分别皮下和肌肉注射5×106蛋白克隆形成单位(CFU)疫苗悬浮于100μl双歧杆菌液体培养基(MRS)、C组鼻腔内接种5×105CFU+10μlMRS、D组经口灌胃5×108CFU+100μlMRS、E组(空载体对照组)5×106CFUBb(pGEX-1λT)+100μlMRS、F组为双歧杆菌(Bb)对照组和G组为双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组。免疫后8周各组鼠攻击感染50个Eg原头节,感染后25周剖杀小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)刺激培养,同时设伴刀豆球蛋白A(ConA)或脂多糖(LPS)刺激对照和非刺激组。收集脾细胞培养上清液,ELISA法检测脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-10水平。结果 A、B、C和D组小鼠脾细胞培养上清液中,IFN-γ水平分别为(137.5±23.2)、(162.5±23.2)、(250.0±53.5)和(215.0±37.4)pg/ml,均高于MRS对照组(50.0±10.7)pg/ml(P0.01);IL-12水平分别为(27.5±4.6)、(32.5±4.6)、(45.0±5.4和(35.0±5.4)pg/ml,均高于MRS对照组(15.0±5.4)pg/ml(P0.01);TNF-α水平分别为(275.0±46.3)、(325.0±46.3)、(450.0±53.5)和(350.0±53.5)pg/ml,均高于MRS对照组(150.0±53.5)pg/ml(P0.01);IL-10水平分别为(37.5±4.6)、(35.0±5.4)、(25.0±5.4)和(32.5±4.6)pg/ml,均低于MRS对照组(45.0±5.4)pg/ml(P0.05或P0.01)。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生Th1型保护性免疫应答。     

还原型谷胱甘肽对重症急性胰腺炎患者IL-6、IL-8及TNF-α的影响

目的 研究还原型谷胱甘肽(GSH)对SAP患者血清IL-6、IL-8及TNF-α含量的影响.方法 32例SAP患者按随机数字法分成GSH组及常规治疗组,各16例,选择年龄匹配的16名健康志愿者作为对照组.患者入院24 h内以及治疗7 d后采血检测血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平.结果 SAP患者治疗前IL-6、IL-8和TNF-α水平分别为(81.34±5.99)ng/L、(97.81±15.61)ng/L和(28.21±1.53)ng/L,显著高于对照组的(16.69±2.86)ng/L、(26.42±1.59)ng/L和(15.89±1.41)ng/L(P＜0.05).治疗7 d后,GSH组的IL-6、IL-8和TNF-α水平分别为(31.21±3.88)ng/L、(35.51±1.27)ng/L和(16.15±1.31)ng/L,常规治疗组为(53.88±6.21)ng/L、(51.91±9.88)ng/L和(17.88±1.51)ng/L,均较治疗前显著下降(P＜0.05),GSH组下降程度显著大于常规治疗组(P＜0.05).结论 GSH能降低SAP患者血清炎症细胞因子水平,对治疗SAP有一定疗效.