分离的胰腺腺泡的机能观察

作者观察了采用化学消化、机械分离和离心提纯法制备的胰腺腺泡的机能。发现该法制备的胰腺腺泡具者较长时间的活性和较敏感的反应性,可用于观察胰酶的释放,跨膜的离心转运以及激素和膜受体的结合,因而可在基础和临床医学的科研中广泛使用。     

一种改进的简便经济的大鼠胰腺腺泡细胞分离提纯方法

目的:探索一种简单、经济和稳定的胰腺腺泡分离纯化的新方法,并探讨其对细胞功能的影响.方法:16只SD大鼠随机分成改进方法组和内灌注方法组,戊巴比妥腹腔麻醉后,其中8只按改进方法迅速切取并剪碎胰腺组织后置于新鲜配制的细胞分离液中,37℃,CO2孵箱中孵育30 min,过滤获得细胞悬液, Hanks液(不含钙离子)清洗后获得胰腺腺泡细胞,另外8只采用内灌注方法获取胰腺腺泡细胞,然后进行细胞计数、活力测定、纯化鉴定和细胞内钙离子测定.结果:改进方法所获得的胰腺腺泡数量[(5.0±0.7)×106]、纯度[(78±6)%]与内灌注方法所获得的胰腺腺泡数量[(4.7±0.9)×106]、纯度[(79±7)%]比较无统计学意义(P＞0.05),而细胞活力[(93±4)%]显著高于内灌注方法[(84±3)%](P＜0.05),细胞内钙离子浓度(3.62±0.54)显著低于内灌注方法(5.31±0.37)组(P＜0.05).结论:改进方法是一种稳定高效且对细胞活力及功能影响较小的胰腺腺泡细胞分离提纯方法.     

胰腺腺泡细胞酶原颗粒超微结构研究

选择胎期、哺乳期及成熟期实验豚鼠24只,观察在食物供给方式不同的条件下,胰腺腺泡细胞超微结构变化的特点,计量分析各期酶原颗粒的数目、直径、体密度的差异(P<0.01).参考 Barta 技术方法,提出腺泡细胞分带方法,比较客观地阐述酶原颗粒在细胞三带分布特点.     

胰腺腺泡细胞癌的CT诊断

目的探讨胰腺腺泡细胞癌的CT诊断,提高对该病的认识及诊疗水平。方法回顾性分析2014年1月至2016年11月在我院由病理学证实的15例胰腺腺泡细胞癌患者的CT诊断,分析其CT影像特征。结果胰腺腺泡细胞癌为一种胰腺外分泌恶性肿瘤,多为单发性肿瘤。CT显示肿瘤位于胰头6例,胰体部4例,胰尾部5例。平扫:肿块为等或者略低于正常胰腺组织密度,增强扫描呈不均匀渐进性强化,界限较清楚。结论胰腺腺泡细胞癌的CT征象具有一定的特异性,对胰腺腺泡细胞癌的诊断有一定的辅助作用。     

胃肠多肽对大鼠胰腺腺泡细胞生长的影响

目的:了解胆囊收缩素(CCK)、蛙皮素(BBS)、生长抑素、肠血管活性多肽和胃泌素对大鼠胰腺腺泡细胞生长的影响.方法:采用大鼠胰腺腺泡细胞原代培养,测定细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入(3H-TdR)以观察细胞生长.结果:培养期间,细胞存活良好,保持腺泡形态,与对照组(251.5±69.1 cpm)比较,CCK、BBS明显增加了大鼠胰腺腺泡细胞的3H-TdR,分别为361.0±57.6和605.5±214.2 cpm,P＜0.05;而VIP组、SST组和胃泌素组则对大鼠胰腺腺泡细胞的3H-TdR无明显影响,P＞0.05.结论:CCK、BBS有促进大鼠胰腺腺泡细胞生长的作用,SST、VIP、胃泌素则不影响胰腺腺泡细胞的生长.     

胰岛素对离体胰腺腺泡淀粉酶分泌的影响

观察胰腺内分泌激素对胰腺外分泌的直接作用,方法采用大鼠离体胰腺腺泡标本,观察胰岛素对腺泡淀粉酶释放的直接影响。结果胰岛素可增强离体胰腺腺泡淀粉酶的分泌并存在剂量反应关系。结论胰素对朱外分泌功能具有局部调节作用。     

实验性急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞超微结构的观察

目的：了解实验性急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞超微结构的改变。并探讨雨蛙素致急性胰腺炎的机理。方法：采用皮下注射超大剂量雨蛙素建立大鼠急生水肿性胰腺炎模型,用透射电镜观察了雨蛙素刺激１ｈ,３ｈ,６ｈ,１２ｈ及２４ｈ后胰腺腺泡细胞的形态学改变。结果：①腺泡细胞质空泡形成。在雨蛙素刺激后１小时即可见到,随着雨蛙素刺激时间的延长,空泡数量显著增加,６ｈ达高峰;体积变显著增大,空泡之间或空泡与酶原颗粒间互相融     

质子泵抑制剂对离体胰腺腺泡淀粉酶分泌的影响

目的探讨质子泵抑制剂(PPI)对胰腺外分泌是否有直接影响。方法首先,参照Williams方法制备离体胰腺腺泡悬液,加入蛙皮素(10-10M)刺激。①加入不同浓度的奥美拉唑(1×10-6M,2×10-6M,4×10-6M,8×10-6M)(10-8M~10-5M),取上清液以碘-淀粉比色法测量淀粉酶量;②将相同浓度的奥美拉唑(10-6M)加入蛙皮素刺激后的胰腺腺泡中作用30,60,90,120,150min后,测定其胰腺腺泡分泌率;③加入不同浓度善宁(10-9M~10-6M),取上清液测定其淀粉酶分泌程度。结果不同浓度善宁作用后的淀粉酶分泌率明显降低,有显著性差异(P<0.05);不同浓度奥美拉唑作用后的淀粉酶分泌率间无显著性差异(P>0.05);奥美拉唑(10-6M)作用30,60,90,120,150min后胰腺腺泡分泌率无显著性差异(P>0.05)。结论奥美拉唑对胰腺腺泡外分泌功能无直接抑制作用。     

胰腺缺血再灌注损伤大鼠胰腺腺泡细胞超微结构的观察

目的　探讨胰腺缺血再灌注 (ischemia -reperfusion ,IR)损伤时胰腺腺泡细胞超微结构的改变及可能机制。方法　 2 4只大鼠随机分为 3组 :假手术组、IR 1h组、IR 6h组。测定血淀粉酶、脂肪酶 ,了解胰腺外分泌功能 ;光镜、电镜观察胰腺组织结构改变。结果　各手术组淀粉酶和脂肪酶含量均较假手术组明显增加 ,6h时增加更显著 (P <0 .0 1)。胰腺组织光镜下IR 1h组呈现急性水肿性胰腺炎表现 ,IR 6h组损伤加重 ,出现出血、坏死 ;电镜下IR 1h组内质网、线粒体、高尔基复合体肿胀 ,IR 6h组细胞器损伤进一步加重 ,可见自噬体和自噬空泡显著增多。结论　胰腺IR 1h时表现为急性水肿性胰腺炎 ,再灌注 6h发展为出血坏死性胰腺炎。胰腺IR 1h电镜下主要表现为细胞器肿胀 ,再灌注 6h特征性改变为自噬小体显著增多。     

胆囊收缩素刺激小鼠胰腺腺泡肽链的延伸及其分子机制

目的：研究胆囊收缩素（cholecystokinin,CCK）、碳酸胆碱（carbachol,CCh）及血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）体外刺激小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸及其作用的分子机制。方法：采用3H-亮氨酸掺入法分别测定基础状态及CCK,CCh及VIP处理后胰腺腺泡细胞肽链延伸率;Western印迹分析基础状态和上述促分泌素处理后真核细胞延伸因子（eEF2）及其激酶磷酸化水平,进一步用MEK抑制剂（PD98059）、SAPK/P38抑制剂（SB202190）、mTOR抑制剂（rapamycin）处理细胞,分别阻断MEK,SAPK/P38和mTOR3种信号通路和磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A预处理再用CCK处理胰腺腺泡,分析eEF2及其激酶eEF2K磷酸化水平。结果：体外除VIP外,其他2种促分泌素均能诱导胰腺腺泡细胞肽链的延伸。CCK和CCh处理后真核细胞延伸因子eEF2Thr56去磷酸化及其激酶Ser366磷酸化水平增加,PD98059,SB202190和rapamycin特异性抑制MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路以及磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A均能部分性逆转CCK诱导的eEF2去磷酸化。结论：CCK可通过MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路诱导真核细胞延伸因子eEF2Thr56去磷酸化,参与小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸调节。     

胆囊收缩素刺激小鼠胰腺腺泡肽链的 延伸及其分子机制

目的：研究胆囊收缩素（cholecystokinin, CCK）、碳酸胆碱(carbachol,CCh)及血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide, VIP）体外刺激小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸及其作用的分子机制。方法：采用3H-亮氨酸掺入法分别测定基础状态及CCK, CCh及VIP处理后胰腺腺泡细胞肽链延伸率; Western 印迹分析基础状态和上述促分泌素处理后真核细胞延伸因子(eEF2)及其激酶磷酸化水平,进一步用MEK抑制剂 （PD98059）、SAPK/P38抑制剂（SB202190）、mTOR抑制剂（rapamycin）处理细胞,分别阻断MEK,SAPK/P38和mTOR 3种信号通路和磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A预处理再用CCK处理胰腺腺泡,分析eEF2及其激酶eEF2K磷酸化水平。 结果：体外除VIP外,其他2种促分泌素均能诱导胰腺腺泡细胞肽链的延伸。CCK和CCh处理后真核细胞延伸因子eEF2 Thr56去磷酸化及其激酶Ser366磷酸化水平增加,PD98059,SB202190和rapamycin特异性抑制MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路以及磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A均能部分性逆转CCK诱导的eEF2去磷酸化。 结论：CCK可通过MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路诱导真核细胞延伸因子eEF2 Thr56去磷酸化,参与小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸调节。     

氧自由基清除剂对离体胰腺组织的保护作用

采用离体实验方法，观察了几种急性胰腺炎的致失因子对大鼠胰腺组织、胰腺腺泡、全血脂质过氧化作用以及氧自由基清除剂SOD、CAT的保护作用。结果表明，胆汁酸盐（胰蛋白酶、内毒素均能不同程度地加强胰腺组织、腺泡及血浆的脂质过氧化作用，SOD和CAT有明显保护作用，减轻致炎因子对胰腺腺泡的损伤。     

Flow cytometric analysis of DNA content in parotid tumor and its contiguous acini

Parotld tumor, which is commonly seen inclinical practice, often affects the function and aesthetics of maxillo--facial region. Because of its variety of histomorphology, complication of biologicalbehavior and recurrence of postoperation, the diagnosis, treatment and prognosis of parotid tumorwill be a highlight for researchers, but the reasonsof postoperative recurrence are still unknown. Is itbecause of uncompletely excised tumor, implantation of tumor cells, or proliferation of surroundedac…     

改良的胶原酶滑膜细胞分离培养法

目的 探讨一种改良的滑膜细胞培养法。方法 修剪、收集关节滑膜层,依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化,100目筛网过滤,D-hanks液洗网后培养,行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定。结果 培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征,免疫组化染色示vimentin阳性、CD68阴性,纯度达98%以上,符合B型滑膜细胞特点。结论 改良的胶原酶消化法是一种有效的滑膜细胞培养方法。     

人胰腺星状细胞分离方法改良

目的:探讨人胰腺星状细胞的两种新分离方法?方法:通过酶消化-密度梯度离心法进行静止态的人正常胰腺星状细胞的分离,分离获得的细胞在含10%FBS的DMEM/F12继续培养?通过组织块外植法获得激活态的人肿瘤相关胰腺星状细胞(CaPSCs),分离获得的细胞在含20%FBS的DMEM/F12继续培养?结果:通过方法改良,1 g人正常胰腺组织能够获得(0.5~5.0)×106个星状细胞,细胞活率约为90%?使用新的组织块外植法后,组织块不易掉落,细胞爬出时间显著缩短,约5~10 d即可获得CaPSCs?所有细胞贴壁良好,细胞倍增时间约为24 h?正常胰腺星状细胞(normal pancreatic stellate cells,NPSCs)培养早期形态符合典型静止态星状细胞特征,细胞为多边形或圆形,内含丰富脂滴,在荧光显微镜下可观察到320 nm激发波长下的蓝绿色自发荧光?NPSCs培养晚期和CaPSCs呈多触角状,胞内无脂滴,细胞增殖速度明显快于静止态细胞?激活态的细胞均表达α-SMA?Desmin?vimentin?GFAP等胰腺星状细胞特征性标记?结论:新的原代培养方法能够满足静止态和激活态两种状态胰腺星状细胞的分离培养,同时能够增加细胞得率?缩短分离培养时间,所获得细胞的活性和纯度符合进一步实验的要求,为胰腺星状细胞的相关研究提供了便利?     

胰十二指肠切除术后胰瘘发生的相关因素

目的 探讨胰十二指肠切除术后胰瘘的发生情况及相关因素分析.方法 回顾性分析解放军总医院2013年1-12月完成的196例胰十二指肠切除术临床资料,并对围术期可能与胰瘘发生相关的因素进行单因素分析和Logistic回归多因素分析.结果 196例胰十二指肠切除术后发生A级胰瘘62例（31.6％）,B级胰瘘53例（27.0％）,C级胰瘘11例（5.6％）,总体胰瘘发生率高达64.3％,有临床意义的胰瘘（即B、C级胰瘘）64例,占32.7％.经单变量及多变量回归分析发现,胰管直径≤3 mm是总体胰瘘发生的独立风险因素,胰管直径≤3 mm和胰液内引流是有临床意义的胰瘘发生的独立风险因素.结论 胰瘘仍然是胰十二指肠切除术后早期主要并发症,胰管直径≤3 mm是胰瘘发生的主要独立风险因素,胰液引流至体外可以降低临床胰瘘的发病率并减轻胰瘘的严重程度.