单克隆抗体夹心斑点免疫金银染色法诊断恶性症的...

In this report, the blood samples from 30 falciparum malaria patients with parasitemia 0.015-0.58% and the blood samples from 30 healthy persons were examined by monoclonal antibody (McAb) sandwich dot-immunogold silver staining assay (Dot-IGSSA). When the McAb 11G5, 13A2 and 13A1 were used for sandwich Dot-IGSSA with McAb 14D9 labeled with colloidal gold respectively, the 0.0001% of parasitemia could be detected and the McAb 11G5, 13A1 and 14D9 labeled with colloidal gold could also be used to detect the antigens of asexual blood stages of Yunnan and Anhui isolates of Plasmodium falciparum cultured in vitro. These McAbs did not cross-react with the antigens of Plasmodium knowlesi and Plasmodium berghei, however, the McAbs 13A1 and 14D9 weakly cross-reacted with the antigens of Plasmodium cynomolgi and the antigens in the infected blood samples from patients with vivax malaria.     

免疫金银染色法、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法检测华支睾吸虫病人血清中抗体的研究

用免疫金银染色法(IGSS)、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)三种方法,同时检测40份华支睾吸虫病人血清,阳性率分别为100％、90％和95％,检测40份正常人血清,阴性率分别为100％、97.5％和97.5％,显示三种方法均有较高的敏感性和特异性。     

快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较

将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜，经预作用和封闭后，依次加入待检血清和金标记二抗，建立快速、敏感、特异性强，操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法——陕速斑点免疫金染色法(R-Dot-IGS)，该法无需银显影，检测过程仅为15min。用(R-Dot-IGS)、快速微量斑点免疫金银染色法(RM-Dot-IGSS?A)和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)同步检测55份日本血吸虫病患血清，三种方法的阳性率分别为98．18％(54／55)，98．18％(54／55)和100％；检测50例健康人血清均为阴性；检测10例肝吸虫病人和10例肺吸虫病人血清，仅有1份肝吸虫病人血清在RM-Dot-IGSS?A反应为阳性。检测结果证明R-Dot-IGS具有敏感特异、快速简便实用的特点，适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。     

金标SPA斑点免疫金及免疫金银染色法检测恶性疟原虫抗原的研究

应用自行制备的直径15nm 的胶体金标记 SPA,以斑点免疫金/银染色法(Dot-IGS/IGSS)检测恶性疟原虫抗原,同时作 Dot-ELISA 进行比较。结果表明,Dot—IGS 和 Dot—IGSS 的抗原最低检出限分别为100ng/ml 和50ng/ml,优于 Dot—ELISA 的400ng/ml。     

免疫金银染色法诊断班氏丝虫病的初步研究

应用免疫金银染色法（ＩＧＳＳ）检测１２３份班氏丝虫病人血清，５０份非流行区健康人血清和３２份流行区健康人滤纸于血液，阳性符合率为９８．３７％，阴性符合率分别为１００％和９６．８８％。非流行区健康人的阴性符合率显著高于ＩＦＡＴ的８６．００％（Ｐ＜０．０１）。与蛔虫病的交叉反应，１５例中１例出现阳性反应。用ＩＧＳＳ检测马来丝虫沙鼠血清抗体结果，阳性符合率与阴性符合率均为１００％。用班氏丝虫病人和健康人血清进行重复试验，结果均一致。表明ＩＧＳＳ敏感性高，特异性强，结果稳定，可用于班氏丝虫病的诊断。     

斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。     

斑点免疫金银染色诊断华支睾吸虫病的应用研究

用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)检测35例华支睾吸虫病人血清抗体,阳性率为100％,血清平均效价为1:1656,35份正常对照血清全部阴性。在一中学进行的流行病学调查中,血清抗体阳性率为16.99％(142/836)。抗体阳性者粪便虫卵检出率为76.09％(105/138)。抗体反应强度为1+、2+3+、4+的粪便虫卵检出率分别为57.14％(28/49)、75.68％(28/37)、94.74％(36/38)和92.86％(13/14)。该法敏感、简便、实用。     

单克隆抗独特型抗体NP30用于日本血吸虫病血清学诊断的研究

本研究用单克隆抗独特型抗体NP30与日本血吸虫肠相关抗原(GAA)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测了702份不同病期及正常人群中的血清抗体,结果显示,在急性感染时,NP30抗体的检出率为98％,与GAA(94％)和SEA(98％)的无差别。在慢性感染时NP30抗体的检出率为87％,与GAA(86％)的无差别,但低于SEA(98％)的。在正常人群中,上述3种的抗体假阳性率均为3％左右,无差别。NP30的抗体滴度几何均数在急性血吸虫感染时高于GAA的,低于SEA的,在慢性感染时低于后两者,提示NP30的抗体在血吸虫感染期间出现比较早,消退较快。上述结果提示,NP30可以替代虫源性抗原,用于日本血吸虫病诊断。     

（Dig）—DNA探针检测恶性疟病人的研究

采用异羟基洋地黄毒苷配基(Digoxigenin,(Dig)-11-dUTP),以随机引物法标记含有恶性疟原虫(P.f.)DNA的重组质粒片段(酶切克隆pPF14),制成pPF14-F-Dig探针。用此探针,以斑点杂交试验检测提纯的P.f.DNA及海南地区疟疾病人。结果显示,pPF14-F-Dig探针至少可检出40pg的P.f.DNA和低至0.005％原虫血症。38例P.f.病人中,检出阳性33例。3例恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染者中,2例阳性。4例间日疟病人中,阴性3例,可疑1例。21例正常人血皆为阴性。     

单克隆抗体和药物协同杀伤日本血吸虫的初步研究

本文报道了将保护性单克隆抗体SSj14和吡毗喹酮、菲诺贝特应用于抗日本血吸虫感染试验的初步结果:其中,单抗SSj14提纯物高剂量免疫昆明系小鼠后诱导的减虫率和减雌率分别为68.59%和70.33%;单抗SSj14和低剂量吡喹酮协同组在小鼠及兔体内诱导的减虫率和减雌率分别为82.36%和80.81%及40.72%、42.01%;菲诺贝特组的减虫率和减雌率分别为16.42%和24.66%;单抗、吡喹酮和菲诺贝特协同组的减虫率和减雌率分别为88.04%和90.73%.结果表明,保护性单抗SSj14可被应用于日本血吸虫病免疫预防的研究.     

单克隆抗体鉴别日本血吸虫感染性钉螺的初步研究

在筛选McAb与受检钉螺样本的基础上，建立了McAb－ELISA，鉴别钉螺体内日本血吸虫抗原。每只受检钉螺．事先镜检作为对照，感染血吸虫钉螺36只，血吸虫抗原阳性检出率97.22％（35／36）。合并感染其他寄生生钉螺7只，其阳性检出率为100％（7／7）。感染其他寄生虫钉螺8只，无感染钉螺22只，血吸虫抗原阴性符合率均为100％。以上结果表明，McAb－ELISA与镜检法所得的结果是一致的，这为现场检测钉螺感染血吸虫与否将提供一种简便、有效的方法。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30保护性免疫力持续时间的研究

目的确定日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫诱导保护性免疫力的持续时间.方法实验组昆明种小鼠腹腔注射NP30 10 μg/鼠,主动免疫3次,每次间隔2周,对照组腹腔注射生理盐水.末次免疫后8、12、16、20、24周感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条,尾蚴感染后40 d行足垫试验.结果 NP30末次免疫后8、12、16周感染日本血吸虫尾蚴的减虫率为21.43%～41.16%,分别与对照组相比差异有显著性;足垫试验结果显示8、12周实验组与对照组差异有显著性.结论 NP30主动免疫诱导的保护性免疫力持续约4个月;足垫试验结果与细胞免疫有关.     

单克隆抗体早期鉴别阳性钉螺效果的研究

以多只毛蚴感染多只钉螺后，逐周取样３０只，以抗血吸虫卵的ＭＧ２ＭｃＡｂ，应用ＥＬＩＳＡ检测螺体内血吸虫抗原，并同时以镜检为对照。结果表明，感染３周阳性钉螺体内血吸虫抗原的阳性检出率为７０％，以后逐周提高，５周为９０％，８周为９６．６７％。提示该法似有早期鉴别阳性钉螺的效能。在ＥＬＩＳＡ检测不同数量毛蚴感染钉螺体内血吸虫抗原阳性率的比较中，感染后期（８周），多只毛蚴感染组螺体内抗原阳性检出率为９６．６７％；单只毛蚴感染组为１００％，两组基本相似。结果表明，不论单只毛蚴或多只毛蚴感染钉螺，在感染后期，用ＥＬＩＳＡ检测螺体内血吸虫抗原的阳性率无差异。     

双重免疫色谱技术检测恶性疟和间日疟的初步观察

用双重免疫色谱技术 ( ICT)对疟区门诊的“四热”病人进行疟疾检测 ,以镜检结果为对照 ,评价 ICT诊断疟疾的效果。检测 93例 ,敏感度和特异性恶性疟为 91.7%和 94.7% ,间日疟为 88.2 %和 10 0 % ,两者之间无交叉反应。显示双重 ICT检测疟疾快速简便 ,准确性高 ,且能区分虫种 ,具有广阔的应用前景     

单克隆抗体影响利什曼原虫侵入吞噬细胞的扫描电镜观察

用扫描电镜观察在体外培养条件下利什曼原虫与小鼠腹腔吞噬细胞的相互关系。实验证明,前鞭毛体在抗杜氏利什曼单克隆抗体处理后,形态发生很大变异,部分原虫呈溶解现象,部分原虫仍可粘附于吞噬细胞外,但单克隆抗体经 56℃灭活后,则原虫形态无改变,且粘附在吞噬细胞周围,有些原虫的鞭毛及虫体前端已进入细胞内,认为其机制可能与前鞭毛体外膜上的配基与吞噬细胞受体的结合有关。