脑胶质瘤p16基因CPG岛高甲基化与基因失活的研究

目的探讨脑胶质瘤中p16基因5'端CPG岛高甲基化与该基因失活的相关性.方法应用免疫组化检测50例脑胶质瘤中P16蛋白的表达;应用PCR技术检测脑胶质瘤中p16基因第1、2外显子缺失及第1外显子5'CPG岛高甲基化.结果免疫组化结果显示50例脑胶质瘤组织中27例恶性胶质瘤P16蛋白缺失,23例低级别胶质瘤P16蛋白阳性;9例恶性胶质瘤p16基因纯合性缺失;P16蛋白阴性的恶性胶质瘤中7例显示p16基因CPG岛高甲基化.结论恶性脑胶质瘤中P16蛋白缺失而没有p16基因纯合性缺失,是由于p16基因5'端CPG岛高甲基化后抑制该基因的转录所致.p16基因高甲基化也是该基因失活的重要机制之一.     

p16基因甲基化与脑腔质瘤的关系

抑癌基因 p16位于人类染色体 9p21,由3个外显子和2个内含子组成。脑胶质瘤中,p16基因5’CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关。本文总结了p16基因5’CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考。     

p16基因甲基化与脑胶质瘤的关系

抑癌基因p16位于人类染色体9p21,由3个外显子和2个内含子组成.脑胶质瘤中,p16基因5'CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关.本文总结了p16基因5'CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考.     

EGFR、p53与Ki-67在国人胶质瘤中表达研究

表皮生长因子受体（epidermal grotwth factor receptor，EGFR）的过表达或扩增、激活以及抑癌基因p53的缺失、突变失活均是导致胶质瘤的主要分子事件。本文应用免疫组化方法对50例国人脑胶质瘤中表皮生长因子受体EGFR、p53蛋白及胶质瘤恶性程度的标志Ki-67标记指数（Ki-67 LI）联合检测，对胶质瘤分子生物学行为进行探讨，为基因治疗在胶质瘤中的应用提供理论依据。     

人脑胶质瘤中p16,p15基因分子的病理学研究

目的:探讨p16、p15基因改变、蛋白表达与脑胶质瘤组织病理的相互关系。方法:应用PCR、银染PCR-SSCP及免疫组化技术检测68例脑胶质瘤中p16、p15基因变化和蛋白表达情况。结果:显示脑胶质瘤中p16、p15基因缺失和P16蛋白丢失主要见于Ⅱ~Ⅳ级肿瘤中,而PCR-SSCP分析未见p16、p15基因点突变。结论:表明脑胶质瘤中p16、p15基因改变是以缺失为主,该基因功能的丧失促进了肿瘤细胞由良性向恶性的演进过程;P16蛋白表达状态可作为判断脑胶质瘤恶性程度及预后的指标。     

有自杀意念的儿童青少年双相障碍抑郁发作患者SLC6A4 基因甲基化研究

目的 探讨儿童青少年双相障碍（PBD）抑郁发作患者自杀意念与SLC6A4基因甲基化 的关系。方法 选取 2020 年 12 月至 2022 年 12 月于新疆维吾尔自治区人民医院临床心理科住院的 43 例 PBD 抑郁发作患者为研究对象。采用自杀意念自评量表（SIOSS）评估患者的自杀意念，将总分≥ 12 分且掩饰因子得分＜ 4 分的患者纳入有自杀意念组（n=29），将总分＜ 12 分的患者纳入无自杀意念组 （n=14）。采用 Methprimer 软件对SLC6A4基因启动子区进行甲基化岛预测和甲基化引物设计，将提取好 的DNA经亚硫酸盐转化后进行PCR扩增和焦磷酸盐测序，确定甲基化的CpG位点和甲基化率。比较两组 患者SLC6A4基因不同位点甲基化的差异，采用 Spearman 相关分析基因甲基化与自杀意念的相关性。 结果 基因甲基化检测结果显示，两组患者SLC6A4基因甲基化的位点包括 CpG1、CpG2.3、CpG4、 CpG5.6位点。有自杀意念组与无自杀意念组患者CpG1、CpG2.3、CpG4位点的基因甲基化率比较［48.28% （14/29）比 8/14、96.55%（28/29）比 14/14、20.69%（6/29）比 6/14］，差异无统计学意义（χ2 =0.297、0.494、2.306； P＞ 0.05）。有自杀意念组患者的 CpG5.6 位点基因甲基化率高于无自杀意念组［68.97%（20/29）比 5/14］， 差异有统计学意义（χ2 =4.289，P＜ 0.05）。相关分析结果显示，PBD 抑郁发作患者的 SIOSS 得分与 SLC6A4基因甲基化CpG1位点、CpG2.3位点、CpG4位点不存在相关性（r=-0.244、-0.210、-0.281；P＞0.05）； 与甲基化 CpG5.6 位点呈正相关（r=0.312，P＜ 0.05）。结论 PBD 抑郁发作患者的自杀意念与SLC6A4基 因甲基化 CpG5.6 位点有关，为明确其自杀意念的发生原因提供了基础。     

低级别胶质瘤复发再次术后癫痫预后危险因素分析

目的 探讨首次术后诊断为低级别胶质瘤复发并再次手术治疗后癫痫预后的危险因素。方法 回顾性分析2012年4月至2015年4月收治的复发并再次手术治疗的81例胶质瘤的临床资料。结果 81例中,43例再次术后病理诊断仍为低级别胶质瘤（无恶性转变组）,38例进展为高级别胶质瘤（恶性转变组）。再次术后12个月,无恶性转变组29例（35.8%）完全无癫痫发作（EngelⅠ级）,恶性转变组为26例（32.1%）。多因素Logistic 回归分析结果表明,肿瘤全切除是恶性转变组癫痫预后的良好指标（OR=0.171,95% CI为0.031~0.941,P=0.042）,肿瘤全切除（OR=0.09,95% CI为0.013~0.613;P=0.014）和Ki-67低表达（OR=0.064,95% CI为0.007~0.610;P=0.017）是无恶性转变组癫痫预后良好指标,而年龄≤38岁（OR=8.899,95% CI为1.615~60.667;P=0.013）是无恶性转变组癫痫预后不良指标。结论 肿瘤全切除、年龄>38岁以及Ki-67低表达是预测复发性低级别胶质瘤术后癫痫完全控制的良好因素,而在进展为高级别的胶质瘤中,仅有肿瘤全切除有助于癫痫完全控制。     

人脑胶质瘤中Skp2的表达与肿瘤恶性程度及预后关系的研究

目的探讨人脑胶质瘤中Skp2蛋白的表达与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法收集胶质瘤石蜡标本52例，其中低恶性度胶质瘤25例，高恶性度胶质瘤27例，采用免疫组化法检测瘤组织内Skp2、Ki-67的表达情况。同时，对病人的生存时间进行随访。结果①skp2在低、高恶性度肿瘤表达的阳性率分别为56％和81．5％。两组间差异显著（P〈0．01）。②skp2和Ki-67在胶质瘤中的表达呈显著正相关（r=0．818．P〈0．01），在Skp2表达阳性的胶质瘤细胞中其Ki-67的标记指数明显高于相应Skp2表达阴性者（P〈0．05）。③Kaplan—Meier生存分析显示，skp2高表达组（skp2LI〉15％）累积生存率显著降低（P〈0．05）。结论Skp2蛋白的过表达可能参与了胶质瘤的恶性进程。检测胶质瘤的Skp2蛋白水平可能有助于评价肿瘤的生物学行为和预后。     

胶质瘤MGMT基因启动子甲基化研究及应用进展

O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)是一种DNA修复酶,MGMT基因启动子CpG岛甲基化是近年研究较多的胶质瘤相关分子标志,既是评价胶质瘤对烷化剂是否敏感的重要分子标志,也是胶质瘤患者预后评价及复发与假性进展鉴别的重要参考指标。尤其是老年恶性胶质瘤患者,MGMT基因启动子CpG岛甲基化是指导其分子分型和制定个性化治疗方案的重要参考依据。本文对MGMT蛋白功能,以及MGMT基因启动子CpG岛甲基化在指导胶质瘤治疗、判断预后及鉴别复发与假性进展中的应用进行概述。     

缝隙连接蛋白43和胰岛素样生长因子Ⅰ与脑胶质瘤恶性程度的相关性研究

目的 探讨缝隙连接蛋白43（cx43）、胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和细胞核相关抗原Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及相关性。方法 采用免疫组织化学SP法检测45例胶质瘤组织和10例正常脑组织中Cx43、IGF-Ⅰ、Ki-67的表达。结果 Cx43在Ⅰ-Ⅱ级脑胶质瘤中阳性表达率为87．5％，Ⅲ-Ⅳ级中的阳性表达率为42．9％，两者间的差异有显著性（P〈0．01），且随Ki-67表达升高而降低（r=-0．893，P〈0．01）；IGFⅠ在Ⅰ-Ⅱ级脑胶质瘤中的表达（阳性率58．3％）与在Ⅲ-Ⅳ级（阳性率85．7％）中的表达差异有显著性（P〈0．05），且与Cx43的表达呈明显负相关（r=-0．688，P〈0．01）。结论 Cx43表达水平的下调或缺失不是胶质瘤发生的始动因素，可能是胶质瘤恶性演进过程中的一个重要分子事件，促使肿瘤细胞恶性增殖程度增加。     

脑胶质瘤中ppENK基因启动子区的甲基化状态研究

目的 检测脑胶质瘤组织中候选抑癌基因ppENK基因启动子区的甲基化状态,探讨ppENK基因启动子的异常甲基化水平在脑胶质瘤发生发展中的作用以及与临床病理资料之间的关系.方法 采用巢式聚合酶链反应(nested polymerase chain reaction nPCR)方法和亚硫酸氢盐修饰后测序法(Bisulfite sequence polymerase chain reaction BSP),检测32例脑胶质瘤组织和10例正常脑组织中ppENK基因启动子区CpG岛的甲基化状态.结果 脑胶质瘤组织中ppENK基因启动子甲基化率为40.6％(13/32),明显高于正常脑组织中ppENK基因启动子甲基化率0％(0/10),两者差异存在统计学意义(P=0.015).在低级别(Ⅰ-Ⅱ级)组和高级别(Ⅲ- Ⅳ级)组脑胶质瘤中ppENK基因启动子甲基化率分别为21.1％(4/19)和69.2％ (9/13),通过分析表明两者差异存在统计学意义(P=0.006).结论 ppENK基因启动子的CpG岛在脑胶质瘤中存在高甲基化现象,可能与胶质瘤发生有关.ppENK基因启动子的甲基化状态与胶质瘤病理分级有关,与年龄、性别、病理分型无关.     

人脑胶质瘤中Survivin、Ki-67的表达及其临床意义

目的探讨Survivin和Ki-67抗原在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测10倒正常脑组织和68例人脑胶质瘤中Survivin和Ki-67的表达。结果Survivin和Ki-67在正常脑组织中均不表达,而在各级别的人脑胶质瘤中均有表达,差异极显著（P％0.01）,Survivin和Ki-67的表达在高级别胶质瘤中显著高于低级别胶质瘤（P％0．01）,且Survivin和Ki-67的表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论Ki-67可以作为评估胶质瘤细胞增殖的良好指标,Survivin和Ki-67的表达可以判断胶质瘤的恶性程度,为临床病理分级提供有意义的依据。     

人脑胶质瘤中CD15、Ki-67的表达及其临床意义

目的研究细胞粘附分子CD15及Ki-67抗原在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测例正常脑组织和858例人脑胶质瘤组织中CD15和Ki-67的表达。结果CD15和Ki-67在正常脑组织中均不表达,而在各级别的人脑胶质瘤中均有表达差异极显著,(P<0.01)。CD15和Ki-67的表达在高级别胶质瘤中均显著高于低级别胶质瘤(P<0.01),且CD15和Ki-67的表达呈显著正相关(P<0.05,r=0.462)。结论Ki-67可以作为评估胶质瘤细胞增殖的良好指标,CD15和Ki-67的表达可为判断胶质瘤的恶性程度和临床病理分级提供有意义的依据。     

人脑胶质瘤中PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F的表达研究

目的 检测PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F在人脑胶质瘤的表达,探讨它们与胶质瘤恶性生物学行为的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测70例不同病理分级、不同组织学分型人脑胶质瘤和24例非肿瘤脑组织中PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F的表达.结果 (1)70例脑胶质瘤标本中,PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F的增殖标记指数(LI)分别为(44.02±29.37)%、(17.01±17.68)%和(36.80±27023)%;对照组24例非肿瘤脑组织中Ki-67不表达,PCNA LI和Mitosin/CENP-F LI为(12.11±19.81)%和(9.06+8.27)%,两组比较具有显著差异(P<0.01).(2)PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F的表达与胶质瘤患者的年龄、性别无关,与病理分级和组织学分型相关(P<0.05).结论 人脑胶质瘤中PCNA、Ki-67和Mitosin/CENP-F的LI与胶质瘤的病理分级和病理分型密切相关,均可作为判断胶质瘤恶性程度的重要指标.     

胶质瘤中EGFR扩增、过表达及其与肿瘤增殖关系的研究

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）在胶质瘤中扩增、过表达及其在肿瘤增殖中的作用机制。方法应用SP免疫组化法、RT—PCR、Southern印迹法检测6例正常脑组织、50例不同级别胶质瘤及2个体外胶质瘤细胞系中在EGFR蛋白水平、mRNA水平、DNA水平的表达及扩增情况，以及与肿瘤增殖活性的相关性。结果不同级别的胶质瘤中，表达与扩增程度不同，Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级肿瘤之间比较具有显著性差异：EGFR过表达与Ki-67在胶质瘤中的表达呈正相关．而EGFR过表达与扩增并不一致。结论EGFR过表达与胶质瘤的增殖活性增高有密切相关性，推测EGFR过表达是肿瘤进展中的早期事件而非进展期事件。     

胶质瘤bFGF基因表达与增殖活性的相关性研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的异常表达与胶质瘤的恶性程度和增殖活性的关系。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和免疫组化法对５７例人脑胶质瘤进行ｂＦＧＦ基因表达及Ｋｉ－６７标记指数检测及相关性分析。结果各组胶质瘤均有ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达，且表达水平以恶性胶质瘤为高。Ｋｉ－６７标记指数在胶质瘤中升高显著。ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达水平与胶质瘤恶性度及Ｋｉ－６７标记指数呈正相关。结论ｂＦＧＦ与胶质瘤的恶性进展有关，可作为判定胶质瘤恶性度的指标之一。     

β-catenin和Ki-67在脑干胶质瘤中的表达及意义

目的探讨β-catenin和Ki-67在脑干胶质瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测30例低级别脑干胶质瘤和10例高级别脑干胶质瘤中β-catenin和Ki-67的表达情况。结果β-catenin和Ki-67在不同级别脑干胶质瘤中均有表达。随着病理级别的升高,β-catenin和Ki-67表达均逐渐增强,差异有统计学意义（P〈0.01）,且二者表达呈正相关（r=0.332,P〈0.05）。结论β-catenin蛋白的异常表达可能参与脑干胶质瘤的恶性进展,检测β-catenin蛋白的表达水平有助于评价脑干胶质瘤的恶性程度和生物学行为。     

Cullin7蛋白在人脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的 探讨Cullin7蛋白在人脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法 选取2013年1月至2018年12月手术切除脑胶质瘤标本60例,其中WHO分级Ⅰ级12例,Ⅱ级18例,Ⅲ级14例,Ⅳ级16例。另选取重型颅脑损伤内减压术切除正常脑组织10例作为对照组。采用免疫组化染色、免疫印迹法法检测Cullin7蛋白表达情况。51例随访46个月,9例失访;采用Kaplan-Meir法分析和Log-rank检验分析生存曲线。结果 高级别胶质瘤Cullin7蛋白阳性表达率（66.7%）明显高于低级别胶质瘤（36.7%;P<0.05）,而低级别胶质瘤Cullin7蛋白阳性表达率明显高于对照组（0%;P<0.05）。Cullin7高表达病人生存期较低表达病人明显缩短（P<0.05）。结论 Cullin7蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤恶性程度呈正相关,与病人生存期呈负相关。     

共刺激分子B7-H3和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及相关性

目的 研究共刺激分子B7-H3和Ki-67在脑胶质瘤中的表达及二者的相关性.方法 选取聊城市人民医院神经外科自2008年3月至2010年1月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤液氮冻存标本46例,其中低级别21例、高级别级25例,另取同期10例脑外伤或脑出血患者在手术非功能区入路过程中必须切除的正常脑组织作为对照.应用免疫组织化学染色检测各标本中B7-H3和Ki-67的表达.结果 正常脑组织中B7-H3、Ki-67不表达,胶质瘤组织中B7-H3、Ki-67表达阳性率分别为65.22%、89.13%.与正常脑组织比较差异均有统计学意义(P＜0.05).低、高级别脑胶质瘤之间B7-H3、Ki-67表达阳性率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).脑胶质瘤中B7-H3与Ki-67的表达呈正相关关系(r=0.417,P=0.014).结论 B7-H3和Ki-67是参与脑胶质瘤恶性发展的重要分子生物学因素,且两者可能存在协调作用.

Abstract：

Objective To study the expressions of costimulatory molecule B7-H3 and Ki-67 in human glioma and explore their correlation. Methods Forty-six human brain gliomas, collected in our hospital from March 2008 to January 2010, including 21 with low grade and 25 with high grade, were chosen;and 10 normal tissues, collected from patients with cerebral trauma or cerebral hemorrhage at the same period, were chosen. Immunohistochemistry with SABC and SP methods were employed to detect the expressions of B7-H3 and Ki-67. Results B7-H3 and Ki-67 did not express in the normal brain tissues, but their expressions were detected in all glioma tissues of different grades (positive rate of B7-H3: 65.22%, that of Ki-67: 89.13%), which had significant differences (P<0.05). High-grade gliomas showed no significant differences on B7-H3 and Ki-67 expressions as compared with low-grade gliomas (P>0.05);and a positive correlation was noted between B7-H3 and Ki-67 expressions (r=0.417, P=0.014).Conclusion Being the important molecular biological factors, B7-H3 and Ki-67 participate in the development of human glioma and exhibit a synergic effect in this process.