三叶青乙酸乙酯提取物诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡

目的:评价三叶青乙酸乙酯提取物(ethyl-acetate fraction of extracts from Tetrastigma hemsleyanumDiels et.Gilg,EAFT)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。FITC标记annexinⅤ/PI染色流式细胞术分析细胞凋亡率。ELISA法测定细胞组蛋白/DNA碎片。Western Blotting分析细胞Bax蛋白和细胞色素C的表达。结果:EAFT以浓度依赖方式诱导annexinⅤ染色阳性细胞百分率和组蛋白/DNA碎片增加(P<0.01)。10.0 mg/L EAFT分别作用HeLa细胞6 h、12 h和24 h,细胞色素C和Bax蛋白表达上调。结论:EAFT具有诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用,其作用机制与激活线粒体途径有关。     

三叶青乙酸乙酯提取物对肝癌细胞HepG2凋亡的影响及机制

目的:研究三叶青乙酸乙酯提取物对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响,并探究其作用机制。方法:HepG2细胞体外培养,在不同浓度三叶青提取物的作用下,采用CCK8法检测细胞增殖,应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,运用Western Blot法检测蛋白表达情况。结果:三叶青乙酸乙酯提取物能显著抑制HepG2细胞增殖和诱导凋亡(P<0.05);上调Caspase-3和Bax表达量,下调Bcl-2表达,但细胞周期结果不显著。结论:三叶青乙酸乙酯提取物对HepG2细胞有抑制增殖作用,其机制可能与调控细胞信号通路诱导凋亡有关。     

芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响

目的研究芹菜素对人肺癌NCI-H460 细胞增殖及凋亡的影响。方法应用10~80 μmol/L 芹菜素处理NCI-H460 细胞,
MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色
法检测细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关信号分子Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达水平。结果芹菜素对NCI-H460
细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;芹菜素处理组细胞出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征;
NCI-H460细胞凋亡率随着芹菜素浓度增加逐渐增高;芹菜素处理组细胞Bax和caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低。
结论芹菜素能够抑制人肺癌NCI-H460细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax
比值下降,caspase-3活化有关。
     

丹参酮ⅡA对Lewis肺癌小鼠Bcl-2及Bax表达的影响

目的通过研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织Bcl-2及Bax的影响,探讨TanⅡA抗肿瘤机制。方法建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水（NS）组、TanⅡA组、TanⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和CTX组共四组。腹腔连续注射给药。10d后计算各组的抑瘤率。用免疫组化方法测定Bcl-2及Bax表达水平。所有数据用SPSS13.0处理。结果各用药组对Lewis肺癌小鼠肿瘤均有不同程度的抑制作用：TanⅡA＋CTX组抑瘤率最高。盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋CTX组、CTX组各组Bcl-2阳性表达率分别为（59.83±3.38）%、（45.89±5.31）%、（25.26±4.09）%和（30.93±4.13）%。各组Bax阳性表达率分别为（31.96±8.50）%、（39.66±3.81）%、（52.24±5.25）%和（46.58±4.10）%。各项指标以TanⅡA＋CTX组效果最好。结论 TanⅡA通过上调Bax、下调Bcl-2的表达诱导肿瘤细胞凋亡来抑制肿瘤生长,与环磷酰胺有协同作用。     

丹参酮ⅡA对小鼠Lewis肺癌Bax/bcl-2比值的影响

目的：观察丹参酮ⅡA（TanⅡA）对肺癌组织Bax/bcl-2比值的影响,进而对丹参酮ⅡA的抗癌机制进行探讨。方法：建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和CTX组共四组。腹腔连续注射给药。用免疫组化方法测定Bax、Bcl-2的表达水平,计算Bax/bcl-2比值。所有数据用SPSS13.0处理。结果：盐水组、TanⅡA组、TanⅡA＋CTX组、CTX组各组Bcl-2阳性表达率分别为（59.83±3.38）%、（45.89±5.31）%、（25.26±4.09）%和（30.93±4.13）%。各组Bax阳性表达率分别为（31.96±8.50）%、（39.66±3.81）%、（52.24±5.25）%和（46.58±4.10）%。各组Bax/bcl-2比值分别为0.54±0.16、0.87±0.13、2.12±0.42、1.53±0.25。与盐水对照组比较,各组结果具有统计学差异,其中TanⅡA＋CTX组各项指标均优于单纯TanⅡ组及CTX组。结论：TanⅡA通过上调Bax、下调Bcl-2的表达、诱导肿瘤细胞凋亡,且TanⅡA与CTX合用具有协同的作用,机制可能与TanⅡA可增强Bax表达、下调Bcl-2表达,提高Bax/Bcl-2比值而增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性有关。     

五味子提取物对脑胶质瘤神经球细胞增殖的抑制作用

目的：探讨五味子提取物对脑胶质瘤神经球细胞生长的作用,并初步探讨其可能的机制。方法：培养脑胶质瘤SHG-44细胞,将其置入干细胞培养液［神经培养基加入B27添加物、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF）］中进行培养,3代以后用于实验。将脑胶质瘤SHG-44细胞分为对照组,50、100和200 mg•L^-1 五味子提取物组,MTT法检测各组神经球细胞的增殖抑制率,酶联免疫吸附实验检测五味子提取物作用后神经球培养上清中Bcl-2、Bax和caspase-3 蛋白表达水平。结果：MTT法检测,与对照组比较,50、100和200 mg•L^-1 五味子提取物组SHG-44神经球细胞24、48和72 h时增殖抑制率均升高（P<0.01）;酶联免疫吸附实验,不同浓度五味子提取物作用神经球48 h后,培养上清中Bcl-2和Bax蛋白表达水平均下降,以Bcl-2蛋白表达水平下降更为明显,与对照组比较,100和200 mg•L^-1 五味子提取物组Bcl-2蛋白表达水平明显下降（P<0.05或P<0.01）;与对照组比较,不同浓度五味子提取物组Bax/Bcl-2值均升高（P<0.05或P<0.01）,50 mg•L^-1 五味子提取物组培养上清中caspase-3蛋白水平较对照组明显升高（P<0.01）。结论：五味子提取物可能是通过上调Bax/Bcl-2值后促凋亡因素占优势,使神经球细胞凋亡而抑制胶质瘤神经球细胞的生长。     

槲皮素诱导人肺癌GLC-82细胞凋亡及机制

目的：探讨黄酮类中药成分槲皮素（Quercetin）对人肺癌GLC-82细胞生长抑制和凋亡的影响.方法：采用细胞培养技术,用不同浓度的槲皮素作用GLC-82细胞48 h,用Hoechst33258染细胞核,在荧光显微镜下观察凋亡细胞核形态变化,用QWin图像分析软件测量细胞核面积和凋亡率.采用MTT法测定细胞的生长能力.采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法检测Mdm2、p53、Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达,用QWin图象分析软件测定Mdm2、p53、Bax、Bcl-2和caspase-3荧光强度值.结果：槲皮素剂量依赖性的抑制GLC-82细胞生长,呈现典型的凋亡形态学特征,胞核缩小,核质浓集,呈斑块状,有凋亡小体.上调凋亡抑制因子Mdm2和Bcl-2蛋白表达,下调凋亡促进因子Bax和Caspase-3的蛋白表达,对p53蛋白表达量没有明显影响.增加Mdm2、p53、Bax、Bcl-2的阳性表达率,降低caspase-3阳性表达率.结论：槲皮素能够抑制肺癌GLC-82细胞生长并诱导细胞凋亡,而Mdm2的蛋白表达增加,可能抑制了p53发挥促凋亡作用,使部分GLC-82肺癌细胞逃避死亡.     

白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌小鼠肿瘤抑制作用及机制研究

目的:白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌小鼠肿瘤抑制作用及机制研究.方法:选取C57BL/6J小鼠,建立Lewis肺癌模型,随机分为空白组、模型组、顺铂组(6 mg.kg -1 )、白花蛇舌草多糖高、中、低剂量(200 mg ? kg-1、100 mg ? kg-1、50 mg ? kg-1)组,各组小鼠给予相应药物灌胃,...     

文冠果花提取物对良性前列腺增生具有抑制作用

目的 探究文冠果花提取物对良性前列腺增生的抑制作用及可能的机制。方法 通过MTT法检测文冠果花提取物对良性前列腺增生细胞（BPH-1）增殖能力的影响、Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡、流式细胞仪测定细胞周期、免疫印迹法检测BPH-1细胞Bcl-2/Bax/Caspase3、PI3K/AKT蛋白表达水平。通过皮下注射丙酸睾酮建立大鼠良性前列腺增生（BPH）模型,文冠果花提取物给药28 d后取大鼠前列腺组织,通过HE染色观察组织病理变化,免疫印迹法检测前列腺组织中Bcl-2/Bax/Caspase3、PI3K/AKT的蛋白表达水平。结果 文冠果花提取物在125～1000μg/mL的浓度范围内抑制BPH-1细胞的增殖（P<0.05）;在G0/G1期产生周期阻滞,细胞的凋亡率与文冠果花提取物给药浓度正相关;文冠果花提取物处理后的细胞Bcl-2蛋白表达水平明显下调,Bax和Caspase3蛋白表达水平显著提升,PI3K/AKT蛋白磷酸化水平显著下调（P<0.05）;在动物实验中,与模型组相比,文冠果花提取物中剂量组和高剂量组p-AKT、Bcl-2表达水平降低,Bax表达水...     

苦瓜核糖体失活蛋白诱导HL-60细胞发生凋亡及其分子机制的研究

目的　探讨苦瓜核糖体失活蛋白 (Ribosomalinactivatingprotein ,RIP)诱导HL 60细胞凋亡的活性 ,以及对HL 60细胞Bcl 2、Bax、caspase 3表达变化的影响及其分子机制。方法　以一定浓度苦瓜RIP处理HL 60细胞 2 4～ 72h ,用TUNEL法检测细胞凋亡。运用RT PCR和Westernblot免疫印记法检测Bcl 2、Bax、caspase 3mRNA和蛋白表达的变化。结果　苦瓜RIP在一定作用浓度下可使HL 60细胞发生凋亡 ,且随着作用时间的延长凋亡细胞比例逐渐升高。在此过程中 ,HL 60细胞的caspase 3mRNA的表达及其胞内活性亚单位水平显著升高 (P <0 .0 5 ) ,Bcl 2mRNA表达变化虽不显著 ,但其蛋白水平明显降低 (P <0 .0 5 ) ,与此同时 ,BaxmRNA和蛋白表达均有所上调。结论　在苦瓜RIP诱导的HL 60细胞凋亡中 ,caspase 3发挥了极为重要的作用 ,而Bcl 2和Bax可能通过其表达量的变化、转录后调节等方式对细胞凋亡发挥重要的调控功能     

人参及人参皂甙对荷瘤小鼠血清中表皮生长因子含量的影响

给Ｃ５７ＢＬ／６小鼠移植Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（２×１０＾７）２周后，以放射免疫法测定其血清中表皮生长因子（ＥＧＦ）含量，肿瘤组为０．２８±０．０９μｇ／Ｌ，正常鼠组为０．１８±０．１１μｇ／Ｌ，移植肿瘤后服用人参煎剂组（人参组）为０．１６±０．１０μｇ／Ｌ，移植肿瘤后服用人参皂甙组（人参皂甙组）为０．２９±０．１１μｇ／Ｌ。肿瘤组鼠的ＥＧＦ含量明显高于正常鼠，人参组明显低于肿瘤组鼠，人参皂甙组与肿瘤     

蒿甲醚与顺铂联用对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制探讨

目的探讨蒿甲醚与顺铂联用对小鼠Lewis肺癌抑瘤效应及其作用机制.方法 C57BL/6J小鼠皮下接种3LL细胞（4×105/只）60只,随机分为六组,分别为1：生理盐水（NS）组;2：单用蒿甲醚（ARE）组;3：单用顺铂（DDP）组;4：先给蒿甲醚后给顺铂组;5：先给顺铂后给蒿甲醚组;6：蒿甲醚与顺铂同时给药组.观察各组小鼠的体重、瘤体积变化和抑瘤率,并评价两药联用的抑瘤作用.探讨蒿甲醚与顺铂联用时,不同给药顺序下抑瘤率的变化.瘤组织进行TUNEL和检测凋亡相关基因的表达.结果联合给药组肿瘤体积较生理盐水组瘤体积增长明显缓慢,而且明显慢于单用蒿甲醚或顺铂组;与生理盐水组比较,蒿甲醚组与顺铂组瘤体积增长速度较缓慢.蒿甲醚组与顺铂组抑瘤率分别为36.44%及50.29%,联合用药时（先用蒿甲醚组、先用顺铂组、同时用药组）抑瘤率分别为62.15%、65.54%、66.67%,与单用蒿甲醚或顺铂组比较有差异有统计学意义（P〈0.05）.在联合用药组之间抑瘤率差异无统计学意义（P〉0.05）.应用金氏公式评价蒿甲醚与顺铂联用对小鼠Lewis肺癌的抑制作用：联合给药时三种给药方式下其q值均：0.85〈q〈1.15,表明蒿甲醚与顺铂联用对小鼠Lewis肺癌有相加抑制作用.流式细胞术TUNEL检测结果显示,蒿甲醚与顺铂联用可通过诱导细胞凋亡来抑制Lewis肺癌小鼠瘤体积的生长.FCM法分析其对瘤组织凋亡相关基因检测表明蒿甲醚与顺铂联用能上调Fas、FasL、P53等凋亡基因,下调Bcl-2抑制凋亡基因.结论蒿甲醚与顺铂联用对小鼠Lewis肺癌有相加抑制作用,能促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关.     

山仙颗粒对Lewis肺癌瘤株转染C57BL/6小鼠NK细胞和IL-1活性影响实验研究

目的 探究山仙颗粒（SXG）对Lewis肺癌瘤株转染的C57BL／6小鼠NK细胞和IL-1活性的影响。方法 将40只C57BL／6小鼠随机取出10只作为空白对照组（A组）,把LEWIS肺癌细胞接种于剩余30只小鼠右腋皮下,再将它们随机分为荷瘤对照组（B组）、金龙胶囊组（C组）、山仙颗粒组（D组）等3组。接种24h后,A、B组用生理盐水灌胃。C、D组分别以金龙胶囊和山仙颗粒混悬液灌胃,造摸21天处死小鼠,检测移植瘤重、肺转移灶数、出瘤时间、NK细胞及IL-1活性。结果 与对照组比较,SXG组小鼠出瘤时间显著延长（P〈0．01）,瘤重减轻、肺转移灶数减少、NK细胞及IL-1活性升高（P〈0．01）。结论 SXG能显著抑制LEWIS肺癌的生长与转移,其机制可能与提高IL-1及NK活性有关。     

肿瘤与表皮生长因子的关系研究

目的通过观察肿瘤病人唾液和荷瘤动物血清中表皮生长因子(EGF)的含量,研究肿瘤与EGF的关系.方法采用125Ⅰ放射免疫分析法(RIA).结果152例肿瘤病人唾液中EGF含量为(4.070±1.0)μ/L,明显高于正常人的(3.071±1.7)μ/gL(P＜0.01);荷瘤小鼠血清中EGF含量为(0.28±0.09)μg/L,明显高于正常小鼠的(0.18±0.11)μg/L(P＜0.05).结论EGF含量升高与肿瘤生长密切相关.     

C57BL/6小鼠和C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠行为学实验研究

目的:通过水迷宫实验、自主活动实验、听源性惊厥实验和悬尾实验来研究C57BL/6小鼠和C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠的行为学差异.方法:通过胚胎复苏获得3只雌性杂合的C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠后与C57BL/6小鼠进行繁殖,最终得到纯合的雌性和雄性C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠各10只进行行为学实...     

Sca-1+Lewis肺癌细胞成瘤实验的研究

目的 探讨小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma, LLC)细胞株中Sca-1 细胞的成瘤特性.方法 以Sca-1作为磁珠分选细胞的表面标志,从LLC细胞中分离Sca-1 细胞,流式细胞仪鉴定分离的纯度.将分选的Sca-1 细胞、Sca-1-细胞及未分选细胞分别以1×106、5×105、1×105、5×104、2×104密度接种于C57BL/6小鼠腋窝下,观察成瘤时间,4 周后处死小鼠,统计成瘤率、平均瘤重及体积.结果 分选前Sca-1阳性细胞百分比为(8.06±1.03)%,分选后Sca-1阳性细胞百分比为(93.92±1.07)%.Sca-1 细胞组在2×104个细胞时可以成瘤,而Sca-1-细胞组最少需要5×105个细胞.相同接种量(1×106),4周后处死小鼠,Sca-1 细胞组的瘤重及体积均大于Sca-1-细胞组(P<0.01).结论 Sca-1 细胞的成瘤性较Sca-1-细胞强.     

不同浓度H22肝癌细胞株对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模差异的影响

目的:使用H22肝癌细胞株建立C57BL/6J小鼠原位肝癌模型,比较不同浓度H22肝癌细胞悬液对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模成瘤率、肿瘤病理学特征及其体重变化情况的影响。方法:将66只C57BL/6J小鼠随机分为4个组,分别对应1×10~6、1×10~8、1×10~(10)、1×10~(12)4个细胞浓度。在无菌条件下,将不同浓度的H22肝癌细胞悬液注入60只C57BL/6J小鼠的肝左叶。从注射之日起,连续21 d测量小鼠体重,于第21 d时脱颈椎处死,测肝脏的重量,并行肝脏外观及病理组织学观察。结果:1×10~6、1×10~(10)、1×10~(12)组成瘤率40%(6/15),1×10~8组为27%(4/15)。病理检查证实为肝细胞性肝癌。结论:不同浓度H22肝癌细胞株对成瘤影响差异不明显,造模中可根据实际情况自行选择。     

美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用的研究

目的探讨美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠抑制效应及其作用机制．方法Lewis肺癌小鼠分为生理盐水组、美洲大蠊提取物高、低剂量组。检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率，瘤组织HE染色观察病理学变化。应用流式细胞术进行瘤细胞DNA倍体分析．结果美洲大蠊提取物高、低剂量组体重没有生理盐水组增加明显。其抑瘤率分别为41．24％及81．08％；肿瘤组织HE染色发现：美洲大蠊提取物高、低剂量组较NS组瘤细胞坏死增多、瘤组织内及其周围微血管少见；流式细胞术检测美洲大蠊提取物能诱导肿瘤细胞凋亡，随着药物剂量的增高，其凋亡率也升高，并能影响肿瘤的细胞周期，肿瘤细胞S期及G2／M期细胞数大量减少，细胞被阻滞在G0／G1期．结论美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠瘤组织的生长具有一定的抑制作用，可促进肿瘤细胞凋亡．     

乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学观察

目的 观察乙型肝炎病毒（HBV）ayw亚型转基因小鼠的肝、肾等组织的病理改变。方法 选取15只5-48周龄的清洁级C57BL/6J-HBV转基因小鼠及15只C57BL/6J小鼠为对照进行病理大体观察，并取心、肝、脾、肺、肾、肠等组织，切片HE染色和免疫组化特殊染色后进行光镜观察。结果 C57BL/6J-HBV转基因小鼠肝脏产生局部明显的炎症反应；肝细胞肿胀，毛玻璃样变性，灶性坏死伴淋巴样细胞浸润，可见肝细胞质内嗜酸性小体，局部可见巨核肝细胞，偶见多核肝细胞，心，脾、肺、肾、肠等脏器未见明显的病理改变，免疫组化分析说明，血清HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原）为阳性的15只小鼠肝组织有HBsAg的存在，且HBsAg的分布呈胞质型，但不存在于脾、肺、心等组织中，血清HBsAg为阴性的15只小鼠其心、肺，肝，脾，肾，肠等组织中均未见HBsAg的存在；发现两只48周龄C57B羁J-HBV转基因小鼠患肝细胞癌。