汉防己甲素对实验性大鼠肝纤维化Ⅳ型胶原及储脂细胞的影响

目的:探讨汉防己甲素防治肝纤维化的机理。方法:用四氯化碳诱导SD大鼠肝纤维化,同时给予汉防己甲素治疗,对照组给予生理盐水。观察不同实验阶段动物肝组织中Ⅳ型胶原及含结蛋白细胞的变化,并用电镜观察储脂细胞的形态变化。结果:治疗组肝纤维化程度明显轻于对照组。治疗组肝组织中储脂细胞增殖及转化受到抑制,Ⅳ型胶原沉积减少,结蛋白阳性细胞数明显少于对照组(P<0.01)。结论:汉防己甲素能有效地治疗肝纤维化,其机理在于抑制储脂细胞的增殖及转化,减少Ⅳ型胶原在肝组织中沉积。     

汉防己甲素对成纤维细胞,人胎肝细胞DNA及胶原合成的影响

以小鼠胚胎３Ｔ３成纤维细胞株及人胎肝细胞株为细胞模型，以＾３Ｈ－氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，观察具有钙拮抗剂作用的汉防己甲素对丙种细胞增殖及胶原合成的影响，结果表明，１０－５０μｇ／ｍｌ浓度范围内，汉防己甲素能显著抑制两种细胞增殖及胶原合成，抑制作用与浓度呈正相关。     

汉防己甲素对慢性缺氧大鼠肺胶原的影响

目的 探讨汉防己甲素（Ｔｅｔ）对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织胶原含量的影响。方法 雄性大鼠３０只，随机分为：（１）对照组１０只，不缺氧处理；（２）单纯缺氧组１０只，每只于低氧前后腹腔注射生理盐水１ｍｌ，共２１天，每天缺氧８小时；（３）汉防己甲素处理组１０只，于每天缺氧前后按７．５ｍｇ·ｋｇ＾－１腹腔注射汉防己甲素，共２１天。应用氯胺Ｔ氧化比色法测定肺组织和肺外肺动脉的羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量和马三     

汉防己甲素对大鼠实验性肝纤维化的防治作用

目的:汉防己甲素(Tet)为中药粉防己根的提取物。本研究的目的为评价其抗肝纤维作用。方法:用40％CCl_41.2ml/kg体重皮下注射,2次/周,共12周,诱发SD大鼠肝纤维化。于初次注射开始,用Tet(治疗组)或盐水(对照组)灌胃,隔日1次共12周。分别于4、8、12、14周处死动物测定血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、肝及血清透明质酸(HA)、胶原、储脂细胞(FSC)及其细胞器。结果:Tet可使血清PCⅢ、HA及肝HA降低,肝内胶原沉积减少。治疗结束时,血清PCⅢ为61.8±21.0ug/L,而对照组为270.2±46.1ug/L(P<0.01);血清HA分别为204.0±70.8ug/L与565.2±161.9ug/L(P<0.01);肝组织HA为86.9±15.3ug/g与186.5±46.2ug/g(P<0.01)。FSC及其内织网与线粒体受抑。结论:我们的实验结果显示Tet能抑制肝内胶原的沉积,可用于治疗慢性肝病之肝纤维化。     

汉防己甲素对胶质瘤细胞的抑制作用

目的探讨汉防己甲素(Tet)对胶质瘤的作用及其机制。方法 MTT实验与接种肿瘤鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测Tet对U87人胶质瘤细胞增殖的影响;流式分析汉防己甲素对U87人胶质瘤细胞凋亡、周期的影响;苏木素-伊红(HE)染色分析汉防己甲素对血管新生的影响;免疫组织化学实验检测Tet对增殖细胞核抗原(PCNA)与信号传导及转录激活因子(p-STAT3)分布表达影响;Western印迹实验分析Tet对U87人胶质瘤细胞STAT3蛋白及与凋亡相关蛋白表达的影响。结果增殖细胞核抗原能够抑制U87人胶质瘤细胞增殖,呈时间、剂量依赖性;Tet能够诱导U87细胞凋亡呈剂量依赖性;Tet抑制血管新生;Western印迹结果表明Tet降低STAT3磷酸化,STAT3下游基因包括Bcl-2,Cyclin D1,HIF-α和VEGFA在Tet处理之后表达减少;PARP、caspase-3、酶切caspase-9蛋白表达增加,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论 Tet抑制胶质瘤细胞增殖,诱导胶质瘤细胞凋亡,抑制血管新生可能与降低STAT3磷酸化有关。     

汉防己甲素对肝纤维化大鼠线粒体的影响

本文以四氯化碳建立大鼠肝纤维化模型，并用不同剂量的汉防己甲素进行早、晚期治疗，发现其小剂量能降低早、晚期治疗组模型线粒体的单胺氧化酶和Ｎ－乙酰β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶的活性；增加线粒体对钙离子的主动摄取，减少其被动释放；增加线粒体内膜表层和中心处的流动性及巯基含量。由於大、中剂量效果不一，故提示小剂量汉防己甲素具有良好的线粒体保护作用和抗纤维化作用。     

汉防己甲素对肝硬变患者血清Ⅲ型前胶原肽及透明质酸影响的研究

于1987年起,对54例肝硬变患者采用口服汉防己甲素50mg每日3次抗肝纤维化的治疗.分别于服药前及服药后6、12、18个月测定血清透明质酸(HA)、血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)     

汉防己甲素对RBL肝细胞及3T6成纤维细胞的影响

采用流式细胞技术观察不同浓度的汉防己甲素(Tet)、CaCl_2、ATP、Tet CaCl_2及Tet CaCl_2 ATP对培养大鼠RBL肝细胞及3T6成纤维细胞生长、增殖的影响。结果表明,随着Tet浓度的增加,RBL肝细胞G_1→S期的进程亦在加速,S期DNA含量及G_1、G_2期蛋白含量均增加,呈正量效关系;3T6成纤维细胞G_1→S期的进程受到抑制,并且S期DNA含量下降,呈负量效关系,但G_1及G_2期蛋白质含量却增加。施加外源性Ca~(1 1)及ATP进一步证明,Tct促进肝细胞生长、增殖及抑制成纤维细胞生长、增殖的作用与阻断Ca~(1 1)内流无关。提示具有钙通道阻断作用的Tet可能通过钙通道以外的作用而使RBL肝细胞呈现平衡生长;使3T6成纤维细胞呈现不平衡生长,它可能有良好的抗肝纤维化作用。     

汉防己甲素对三阴性乳腺癌细胞体外生物学活性的影响及机制

目的 探讨汉防己甲素(Tet)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生物学活性的影响及机制.方法 选取MDA-MB-231细胞,用含10％胎牛血清的DMEM培养基于37℃、5％CO2培养箱中培养.采用CCK-8实验检测不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25μmol/L)汉防己甲素对MDA-MB-231细...     

双防己甲素对肝纤维化大鼠线粒体的影响

本文以四氯化碳建立大鼠肝纤维化模型，并用不同剂量的汉防己甲素进行早、晚期治疗，发现其小剂量能降低早、晚期治疗组模型线粒体的单胺氧化酶和Ｎ－乙酰β－Ｄ氨基葡萄糖的活性；增加线粒体对钙离子的主动摄取，减少其被动释放；增加线粒体内膜表层和中心处的流动性及巯基含量。由於大，中剂量效果不一，故提示不剂量汉防己甲素具有良好的线粒体保护作用和抗纤维化作用。     

四氢呋喃对大鼠贮脂细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究药物溶剂四氢呋喃对体外培养的贮脂细胞增殖及胶原合成的影响。方法 分离培养大鼠肝脏贮脂细胞,以不同浓度的四氢呋喃、二甲基亚砜、乙醇处理、检测[~3H]胸腺核苷酸及[~3H]脯氨酸的掺入值,了解四氢呋喃对贮脂细胞增殖及胶原合成的影响。结果 四氢呋喃与常用药物溶剂二甲基亚砜、乙醇相比,在浓度为0.1％时,对贮脂细胞的增殖及胶原合成无影响。结论 四氢呋喃可作为胡萝卜素等药物溶剂用于贮脂细胞增殖及胶原合成的体外实验研究。     

白细胞介素-1β及其受体拮抗剂对系膜细胞增殖及产生一氧化氮的影响

目的：探讨白细胞介素１β（ＩＬ１β）及其受体拮抗剂（ＩＬ１ｒａ）对系膜细胞增殖及产生ＮＯ的影响。方法：培养的第１０～１２代ＳＤ大鼠肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）用于实验,分别加入ＩＬ１β或ＩＬ１β加ＩＬ１ｒａ,１２ｈ后用化学方法测定培养上清中亚硝酸盐的含量,用３ＨＴＤＲ掺入率测定ＧＭＣ的增殖,狭缝和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交测定细胞ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达。结果：ＩＬ１β组ＧＭＣ出现ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达及亚硝酸盐增多（０５３±０１３ｖｓ０１８±００７ｎｍｏｌ／１０４细胞）,但无明显细胞增殖（４０４６０６±１９１２６ｖｓ３９７７９±２８０４１）;ＩＬ１β加ＩＬ１ｒａ组,无ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达,上清亚硝酸盐含量更高（０９４±０１５ｎｍｏｌ／１０４细胞）,ＧＭＣ增殖被抑制（３１１５５±３１３９８）。结论：ＩＬ１β能刺激ＧＭＣ的ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达和产生亚硝酸盐,ＩＬ１ｒａ虽抑制ＧＭＣ的ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达,但没能减少其亚硝酸盐的产生。     

大鼠肝贮脂细胞Kupffer细胞的分离,培养和鉴定

贮脂细胞是目前肝纤维化研究的热点，本文参考Ｆｒｉｅｄｍａｎ等的不连续密度梯度心法并作改良，建立了一种经济，简便，可靠的分离大鼠肝贮脂细胞，Ｋｕｆｆｅｒ细胞的方法，贮脂细胞得率的１０＾７／大鼠，纯度在９０％以上，Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞纯度约６０％，其培养上清基本适合进一步研究用。本方法的建立，为进一步研究肝贮脂细胞与肝纤维化的关系，尤其是细胞水平及分子生物学水平的研究奠定了基础。     

THE EFFECTS OF DOPAMINE, BROMOCRIPTINE, LERGOTRILE AND METOCLOPRAMIDE ON PROLACTIN RELEASE FROM CONTINUOUSLY PERFUSED COLUMNS OF ISOLATED RAT PITUITARY CELLS

The control of secretion of prolactin was studied using continuous perfusion of a column of isolated rat pituitary cells supported by Bio-Gel polyacrylamide beads. Prolactin secretion was inhibited repeatedly by dopamine and rapidly recovered in its absence. Maximum inhibition was achieved at 5 x 10(-7) M dopamine. Bromocriptine and lergotrile directly inhibited prolactin release from the pituitary cells. Bromocriptine had a longterm action in inhibiting secretion. The dopamine receptor blocking agent, metoclopramide, overcame the inhibitory effect of dopamine but had no effect on prolactin secretion in its absence.     

ADENYL CYCLASE AND HORMONE ACTION, I. EFFECTS OF ADRENOCORTICOTROPIC HORMONE, GLUCAGON, AND EPINEPHRINE ON THE PLASMA MEMBRANE OF RAT FAT CELLS

A large number of hormones, of diverse molecular structure, evoke characteristic responses in target cells via the intermediary 3',5'-AMP, the specificity of hormone action upon cell type being achieved by selective stimulation of adenyl cyclase. In the fat cells of rat adipose tissue, adenyl cyclase is stimulated by a number of hormones of disparate molecular structure, posing the question whether this cell type posesses multiple cyclase systems with distinctive specificities for individual hormones, or a single cyclase with broad specificity to a variety of hormones.Studies of the stimulatory effects of adenocorticotropin, glucagon, and epinephrine upon the adenyl cyclase of the rat fat cell "ghosts" (plasma membrane sacs) have shown that distinctive selectivity sites for each of these hormones can be differentiated. The beta-adrenergic blocking agent K? 592 abolished the stimulatory effect of epinephrine without influencing adenocorticotropin or glucagon; Ca was required for adenocorticotropin action, but not for glucagon or epinephrine. Dose-response curves show that the affinity of hormones to the cyclase system was in the order: glucagon > adenocorticotropin > epinephrine; the magnitude of cyclase activation by maximal doses of hormones had a reversed order. Combinations of maximal doses of hormones failed to produce additive stimulation. The results show that in the membrane of the fat cell a single catalytic unit of adenyl cyclase is coupled to distinctive selectivity sites for three lipolytic hormones.     

DIFFERENTIATION OF MAMMALIAN SOMATIC CELLS: DNA AND HEMOGLOBIN SYNTHESIS IN FETAL MOUSE YOLK SAC ERYTHROID CELLS

The relationship between the synthesis and replication of DNA and the capacity to synthesize specialized protein on a stable messenger RNA has been examined in yolk sac erythroid cells differentiating in vivo in fetal mice. Evidence is presented that by day 11 of gestation, at least 98 per cent of yolk sac erythroid cells are synthesizing hemoglobin. These cells are shown to incorporate (3)H-thymidine and to replicate, with more than twofold increase in cell number between days 10 and 11. Division of these cells continues through day 13. Hemoglobin formation in these cells is resistant to actinomycin D from day 10. During this period, ribosomal content per cell decreases by more than a factor of 2. These data indicate that in yolk sac erythroid cells, hemoglobin formation proceeds independent of continued RNA formation in cells capable of DNA synthesis and replication.     

血小板活化因子对肾小球系膜细胞合成前列腺素E2的影响

目的：探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）对肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）合成前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的影响及其意义。方法：测定ＰＡＦ刺激对ＧＭＣ合成ＰＧＥ２的影响结果：ＰＡＦ刺激ＧＭＣ显著增加ＰＧＥ２的合成并呈剂量依赖性。１０＾－５ｍｏｌ／ＬＰＡＦ在５ｍｉｎ内即刺激ＧＭＣ合成ＰＧＥ２显著增加。刺激ＰＧＥ２合成的ＰＡＦ阈值为１０＾１０ｍｏｌ／Ｌ,刺激半量和最大量ＰＧＥ２合成的ＰＡＦ浓度分别约为１０＾－８ｍｏｌ／     

骨灵丸对原发性骨质疏松症实验模型防治作用的研究

以补肝肾、填精髓的中药骨灵丸进行防治原发性骨质疏松症(OP)的动物实验研究。通过制作原发性OP大鼠模型,并观测骨密度、骨生物力学、骨组织形态计量学指标,以观察骨灵丸疗效并探讨其主要作用机制。结果显示大鼠去势后出现高转换型OP,而骨灵丸能够有效对抗去势大鼠出现的骨丢失,维护鼠骨强度、弹性,保持骨生物力学性能,可使过高的破骨细胞(OC)活性降低,使骨吸收、骨形成二者之间偶联趋于平衡,从而有效地维持了鼠骨密度。研究结果显示骨灵丸是一个有前途的防治OP新药,值得进一步深入研究。