海蜇多肽的制备工艺及体外抗氧化活性的研究

用胰蛋白酶酶解提取海蜇多肽,探索不同的酶解条件对酶解工艺的影响,并从还原体系、羟自由基清除体系、DPPH自由基清除体系等三个方面,对海蜇酶解多肽的提取制备工艺及体外抗氧化活性进行研究。结果表明:海蜇不同部位酶解物具有不同的最佳酶解条件。当处于最佳酶解条件时,海蜇头和海蜇皮的氨基氮含量最高值分别为15.25%和48.13%,对羟基自由基的清除率分别为77.95%和78.72%,其中DPPH自由基的清除率分别为52.41%和59.24%,其还原力大小用吸光值表示分别为0.459和0.507。     

蟒蛇活性寡肽的分离及其抗氧化活性研究

目的对蟒蛇活性寡肽分离及纯化,并对单体寡肽进行抗氧化活性研究。方法以蟒蛇活性肽为原料,采用Sephadex LH-20凝胶柱色谱法,反相硅胶C8柱色谱法,ODS-C18高效液相制备柱色谱法进行分离纯化,得到蟒蛇单体寡肽,以羟基自由基清除率作为评价指标,对蟒蛇单体寡肽进行抗氧化性能考察。结果得到蟒蛇单体寡肽MS-A和MS-B,测得MS-A的清除羟基自由基的IC50值为6.52 mg/m L,MS-B的清除羟基自由基的IC50值为8.39 mg/m L,同法测得Vc的IC50值为0.35 mg/m L。结论蟒蛇单体寡肽具有良好的抗氧化活性。     

海洋生物酶解多肽活性功能研究进展

本文对近几年来采用酶解方法从海洋生物蛋白中获取生物活性肽的相关研究进行了综述,介绍了该类生物活性肽抗氧化、抗高血压、抗肿瘤、抗血栓形成等活性功能的研究现状,描述了各研究的蛋白来源、酶的选择及生物活性肽的分离纯化手段等,并对该研究领域提出展望,旨在为以后的相关研究提供参考。     

牡蛎酶解液的抗氧化活性研究

目的探讨牡蛎酶解液的抗氧化活性。方法用普鲁士蓝反应法测定牡蛎酶解液还原能力,在DPPH体系、Fenton体系和邻苯三酚自氧化体系中分别检测牡蛎酶解液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子(O2-.)的能力,并考察牡蛎酶解液在Fe2 诱发卵黄脂蛋白过不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系中的抗氧化作用。结果牡蛎酶解液清除DPPH.和.OH的EC50分别为7.313和1.330 mg/ml;牡蛎酶解液(17.800 mg/ml)对超氧自由基和卵黄脂蛋白脂质过氧化的抑制率分别为19.86%和82.97%。结论牡蛎酶解液具有显著的清除DPPH.和.OH作用,且活性与剂量呈正相关,并对卵黄脂蛋白脂质过氧化也显示出了较强的抑制作用。     

菲律宾蛤仔酶解寡肽的分离及体外抗氧化作用研究

目的:研究菲律宾蛤仔酶解寡肽的制备方法及其抗氧化活性。方法:选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶等4种蛋白酶分别对菲律宾蛤仔进行酶解,通过对羟自由基的清除作用来考查各酶解物的抗氧化活性;经超滤、DEAE-SepharoseFF阴离子交换、反相高效液相色谱C18分离制备寡肽,并测定其羟自由基清除率和氧化还原力。结果:胰蛋白酶酶解寡肽清除羟自由基能力最强;经超滤后,3KDa以下的组分羟自由基清除率最高;将该组分纯化后,最终得到1个寡肽,该肽的分子量为607.6KDa,氨基酸序列为:Asp-Trp-Pro-His。在2.5mg/mL时的羟自由基清除率、DPPH自由基清除率和还原力均高于Vit C。结论:菲律宾蛤仔酶解寡肽具有抗氧化活性,经超滤、阴离子交换和反相高效液相色谱可以对该肽进行纯化。     

土鳖虫多肽的分离纯化及溶栓活性

目的:对土鳖虫多肽进行分离纯化,并对其溶栓活性进行研究.方法:采用仿生酶解工艺制备土鳖虫复合多肽,以溶栓活性为指标,采用Sephadex G-25,SP Sephadex C-25凝胶柱和RP-HPLC C18半制备色谱柱对复合多肽进行分离纯化,并测定目标多肽组分(Peak b)的溶栓活性、肽含量和相对分子质量.结果:目标多肽组分的溶栓活性为814 430 U·mg-1,肽含量为95.7％,相对分子质量分布在3 211～3 547.结论:利用仿生酶解制备的土鳖虫多肽,经分离纯化后,可得到具有较强溶栓活性的多肽组分.     

麦冬水溶性多糖OPA的分离纯化及其抗氧化活性研究

目的对麦冬水溶性多糖OPA的分离纯化及其抗氧化活性进行研究。方法从麦冬中提取出水溶性粗多糖OP,粗多糖经DEAE Sepharose CL-6B柱层析分离纯化得到OPA。结果经HPLC和醋酸纤维素薄膜电泳法检验是均一组分多糖,GC分析表明OPA的单糖组成是葡萄糖。超氧阴离子清除实验和羟自由基清除实验鉴定其抗氧化能力。结论表明OPA有较强的羟自由基抑制作用。     

蝮蛇抗氧化酶解活性肽的ESI-MSn分析研究

目的:采用ESI-MSn,对蝮蛇蛇肉蛋白质抗氧化酶解活性肽的化学成分进行了系统的分析鉴定研究,从而研究蝮蛇抗氧化活性部位的物质基础.方法:采用电喷雾质谱对蝮蛇蛇肉蛋白质抗氧化酶解活性肽进行分析,得到了混合组分的一级质谱图及代表性组分的二级质谱图.结果:利用质谱工作站所能提供的离子信息,共鉴定了三个具有代表性的二肽,分别是H2N-亮氨酸-天冬酰胺-COOH、H2N-赖氨酸-谷氨酸-COOH和H2N-天冬酰胺-谷氨酸-COOH.结论:蝮蛇抗氧化酶解肽以二肽为主,为蝮蛇进一步合理的开发奠定了基础.     

土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析

目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。     

鹿角盘蛋白酶解工艺优化及其水解物抗氧化活性研究

目的 优化鹿角盘蛋白酶解工艺,测定其酶解物抗氧化活性.方法 以水解度为指标通过正交实验,优化鹿角盘蛋白酶解工艺.选取具有代表性的羟自由基、DPPH·、超氧阴离子3种自由基体系,以不同浓度水解物的抗氧化作用为指标,评价酶水解物的抗氧化活性.结果 酶解的最优工艺为温度50℃,pH 8.5,酶与底物比([E/S])4％,水解时间5h.胰蛋白酶水解物对羟自由基的半抑制浓度( IC50)为0.38mg/ml,对DPPH·的IC50为1.89 mg/ml,对超氧阴离子的IC50为0.70 mg/ml.结论 筛选出鹿角盘蛋白酶解最优工艺,其酶解物具有较好的抗氧化活性.     

酶解泥鳅蛋白免疫调节活性的研究

根据推荐的人群日摄入量（0．02g.kg^-1）扩大5、10、20倍,剂量分别为0．1、0．2、0．4g.kg^-1,给昆明种小鼠连续灌胃酶解泥鳅蛋白一个月后,分别采用常规方法测试小鼠的各种免疫指标,观察酶解泥鳅蛋白对小鼠的免疫调节活性。结果表明：与空白组比较,低、中、高剂量组明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、二硝基氟苯诱导的小迟发型变态反应、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能、抗体生成细胞能力和碳粒廓清能力,并能够显著升高小鼠血清血素含量。按照免疫调节作用评价程序规定,酶解泥鳅蛋白具有免疫调节作用。     

肉苁蓉酶解提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取肉苁蓉的工艺;比较传统水提、醇提与酶解后水提、醇提,正丁醇萃取物抗氧化活性。方法以肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷作为评价指标,选择酶用量、酶解温度、酶解时间为主要因素,通过正交试验确定复合酶提取肉苁蓉的最佳工艺条件,并在此基础上,比较不同提取方法下提取物抗氧化活性。结果复合酶强化提取肉苁蓉最佳工艺参数为复合酶0.2%、酶解温度60℃,酶解时间2.5 h;等量药材同体积肉苁蓉提取液,抗氧化活性依次为:酶解后醇提﹥酶解后水提﹥传统醇提﹥传统水提。结论在所得的复合酶提取肉苁蓉工艺条件下,肉苁蓉抗氧化活性可以显著提高。     

海洋贝类活性肽生物活性及酶解制备研究进展

综述海洋贝类活性肽的主要生物活性、酶水解制备以及分离纯化手段,并展望其研究趋势和市场前景。     

蟒蛇活性肽抗氧化作用的研究

目的:考察蟒蛇活性肽抗氧化作用,为其深入开发提供科学依据.方法:以蟒蛇蛋白水解肽为原料,以Vc为对照,采用清除羟自由基作为抗氧化性的评价指标,研究蟒蛇活性肽的体外抗氧化活性.结果:随着蟒蛇活性肽浓度的增加,其羟自由基的清除能力增大,半数清除率质量浓度为4.82 mg/mL.结论:蟒蛇活性肽具有较好的抗氧化能力.     

虾蛄多肽的酶解工艺及其抗肿瘤活性的初步研究

目的:通过正交试验优化酶解条件,提取分离虾蛄软体组织,根据其体外抗肿瘤活性,筛选最佳酶解条件。方法:采用L16(45)正交试验设计方法,通过探索其抗前列腺癌作用,优化胰蛋白酶酶解虾蛄多肽的提取条件。结果:虾蛄多肽酶解最佳条件为:料液比1∶2,pH为7.5,加酶量为1000u/g,温度40℃,时间为4h,其对前列腺癌PC-3细胞株的体外抑制率为60.9%。结论酶解所得的虾蛄多肽对前列腺癌细胞具有一定的抑制生长作用。     

白簕多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的提取、分离和纯化白簕多糖(ATP),测定单糖组成和相对分子质量(M)分布,并进行体外抗氧化活性检测。方法通过水提醇沉、Sevage法、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-50柱色谱法分离、纯化ATP。采用HPLC和高校凝胶渗透色谱(HPGPC)法对多糖的单糖组成和相对分子质量分布进行测定。通过体外清除DPPH·、ABTS~+·、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O_2~-·)自由基的方法,评价ATP的抗氧化活性。结果获得1个量较高的中性均一多糖(ATP1-1)以及2个酸性多糖组分ATP2、ATP3。ATP1-1主要由葡萄糖和少量半乳糖、甘露糖、鼠李糖组成。ATP2主要由葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和少量甘露糖、鼠李糖组成。ATP3主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成。ATP1-1的重均相对分子质量(Mw)为2 310。抗氧化实验表明ATP1-1对DPPH·、ABTS~+·、·OH和O_2~-·自由基均有明显的清除作用,半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.042 4、0.007 9、2.313 6、1.753 0 mg/m L。结论 ATP1-1有较好的抗氧化活性并呈现出良好的量效关系。     

芦根化学成分及其抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性

目的 研究芦根Phragmites communis Trin.的化学成分及其抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性.方法 芦根乙醇提取物采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20、反相ODS柱色谱,制备液相色谱等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.采用DPPH法评价其抗氧化活性,PNPG法评价其α-...     

鹿茸冻干粉的酶解及其酶解产物性质的研究

目的:通过研究鹿茸冻干粉酶解产物的促成骨细胞增殖活性,抗氧化性以及血管紧张素转化酶Ⅰ(angiotensin Ⅰ-converting enzyme,ACE,EC3.4.15.1)抑制活性,为阐明鹿茸强筋健骨的机制以及揭示鹿茸体内生理功能发挥的机制提供研究线索.方法:采用体内常见的消化酶胃蛋白酶和胰蛋白酶分别和同时对鹿茸冻干粉进行酶解,确定酶解完全的条件,收集相对分子质量小于1万的多肽混合物,对其抗氧化性,ACE抑制活性以及促成骨细胞增殖活性进行研究.结果:鹿茸冻干粉的不同酶解产物对羟自由基的清除效果非常明显,其IC50均低1 g·L-1,远低于维生素C的5.5 g·L-1,同时胃蛋白酶和双酶酶解产物对ACE抑制效果极佳,胰蛋白酶酶解产物对大鼠成骨细胞(UMR-106细胞)的促增殖作用达73.43%.结论:本实验进一步验证了鹿茸强筋健骨以及强身抗老等传统功效,对于ACE抑制活性的试探性研究也表明鹿茸酶解产物具有潜在的高血压防治功能;本实验结果也为进一步分离提取鹿茸酶解产物中的抗氧化性多肽,ACE抑制活性肽以及促成骨细胞活性肽提供强有力的依据.     

核桃粕蛋白提取工艺优化及其酶解产物活性研究

[目的]利用响应面法优化核桃粕蛋白提取工艺,并评价其木瓜蛋白酶解物的体外抗氧化活性,为核桃粕后续开发利用提供参考价值。[方法]采用碱溶酸沉法,以蛋白提取率为响应值,结合单因素及响应面实验探讨氢氧化钠（NaOH）浓度、液料比、提取温度及时间对核桃粕蛋白提取率的影响,优化核桃粕蛋白提取工艺,并利用体外抗氧化实验评价了木瓜蛋白酶解物的活性。[结果]响应面法优化的核桃粕蛋白提取工艺为：80∶1的0.04% NaOH溶液、65℃下提取1 h,平行实验的结果为36.01%,与预测值35.27%较接近,说明该工艺真实可靠、简单可行。核桃蛋白木瓜蛋白酶解物具有一定的清除DPPH、OH自由基及还原能力,可为后续的核桃粕保健食品开发与工业化生产提供方法及参考意义。[结论]优化了一种核桃粕蛋白提取工艺,并为核桃粕的综合开发及利用提供了重要的参考价值。     

地锦草提取物对体外α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

目的研究地锦草(Euphorbia humifusa Willd.)提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及其体外抗氧化活性。方法从地锦草40%、70%、95%乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性中选择最适乙醇体积分数,再对该提取物用乙醚、氯仿、水饱和正丁醇和水相进行萃取分离,比较对α-葡萄糖苷酶的抑制活性、自由基清除能力、铁离子还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力。结果地锦草95%乙醇提取物的抑制活性较优,再经乙醚萃取获得萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性最强,IC_(50)值为78.8μg/m L,化学成分分析显示其含有较多的酚性成分。乙醚萃取物具有较好的抗氧化能力,其自由基清除能力EC_(50)值为132.9μg/m L,铁离子还原能力EC_(50)值为76.9μg/m L,羟自由基清除能力EC50值为182.7μg/m L,超氧阴离子清除能力EC_(50)值为31.3μg/m L。结论地锦草95%乙醇提取物的乙醚萃取物具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,同时具有一定的抗氧化活性。