荷丹片对APOE~(-/-)小鼠氧化应激的影响及对动脉粥样硬化的干预

目的观察荷丹片对APOE~(-/-)小鼠血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、一氧化氮(NO)、白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及主动脉ICAM-1表达的影响。方法将50只APOE~(-/-)小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、荷丹片低剂量组、荷丹片高剂量组、辛伐他汀组。给药12周后全部处死,检测5组血清ox-LDL、NO、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平及主动脉ICAM-1表达。结果与对照组相比,模型组血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平明显升高,NO水平明显降低,主动脉ICAM-1表达上调(P0.01);与模型组相比,荷丹片低剂量组、荷丹片高剂量组、辛伐他汀组血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平明显降低,NO水平明显升高,主动脉ICAM-1表达下调(P0.01,P0.05)。结论荷丹片可降低APOE~(-/-)小鼠血清ox-LDL、IL-6、MCP-1、ICAM-1水平,升高血清NO水平,下调主动脉ICAM-1表达,从而干预动脉粥样硬化的发生、发展。     

丹蒌片抗动脉粥样硬化模型小鼠主动脉平滑肌细胞增殖的机制研究

目的研究丹蒌片对动脉粥样硬化(AS)模型ApoE~(-/-)小鼠血清抵抗素水平、血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 32只ApoE~(-/-)小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、他汀组及丹蒌组,每组8只。正常组ApoE~(-/-)小鼠喂饲基础饲料12周,余各组均采用高糖高脂饲料连续喂饲12周制备AS模型。正常组不予灌胃干预,模型组、他汀组及丹蒌组于第5周时分别给予生理盐水、阿托伐他汀片混悬液(1.5 mg/mL)、丹蒌片混悬液(0.34 g/mL)连续灌胃干预8周。干预结束后,ELISA检测血清抵抗素水平,免疫组化染色观察主动脉细胞增殖核抗原(PCNA)阳性表达,透射电镜观察VSMC表型改变,Real-time PCR、Western Blot检测ApoE~(-/-)小鼠主动脉ERK1、ERK2 mRNA和ERK1/2、pERK1/2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组血清抵抗素水平升高(P0.05),PCNA阳性表达增加(P0.01),血管内ERK1、ERK2 mRNA和ERK1/2、pERK1/2蛋白表达上升(P0.01,P0.05),透射电镜下可见主动脉VSMC胞浆内肌丝减少,粗面内质网、线粒体等细胞器增多,有较多的吞噬大量脂质形成的空泡,呈典型合成型改变。与模型组比较,他汀组与丹蒌组血清抵抗素水平降低(P0.05),PCNA阳性表达减少(P0.01),血管内ERK1、ERK2 mRNA和ERK1/2、pERK1/2蛋白表达下降(P0.05,P0.01),透射电镜下主动脉合成型VSMC明显减少。结论丹蒌片可明显抑制VSMC异常增殖,其作用机制可能是通过降低血清抵抗素水平,抑制抵抗素对ERK信号通路的激活,减缓VSMC的增殖效应,从而达到抗VSMC增殖作用。     

荷丹片对动脉粥样硬化ApoE(-/-)小鼠血清IL-1β和TNF-α表达的影响

目的观察荷丹片对载脂蛋白E基因敲除[ApoE(-/-)]小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨荷丹片防治动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法 48只8周龄ApoE(-/-)小鼠分为正常对照组(12只,给予普通饲料室温饲养),高脂饲料复合气候箱干预组(36只)。喂养12周后,成功复制ApoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化秽浊痰阻证模型后,分为3组:模型组、荷丹片组、阿托伐他汀组。12周后处死各组小鼠,采集标本,HE染色光镜下观察主动脉病理学变化,并测定斑块面积(PA)与管腔面积(LA)之比;酶联免疫双抗夹心(ELISA)法检测血清中IL-1β和TNF-α含量。结果模型组主动脉PA/LA比值大于正常对照组(P0.01),荷丹片组、阿托伐他汀组PA/LA比值则小于模型组(均P0.01),荷丹片与阿托伐他汀组比较,差异无统计学意义(P0.05)。模型组血清中IL-1β和TNF-α表达水平均高于正常对照组(均P0.01),荷丹片组、阿托伐他汀组血清中IL-1β和TNF-α表达水平均低于模型组(均P0.01),荷丹片组与阿托伐他汀组比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论荷丹片具有防治AS的作用,其机制可能与其降低炎症因子IL-1β和TNF-α的表达,抑制炎症反应有关。     

麦冬皂苷D对高脂饲养ApoE~(-/-)小鼠血脂及肠道菌群的影响

目的研究麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OP-D)对高脂饲养ApoE~(-/-)小鼠血脂及肠道菌群的影响。方法选取6周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠24只,随机均分为对照组、模型组、OP-D组[0.5 mg/(kg·d)]和辛伐他汀组[5 mg/(kg·d)];雄性C57BL/6小鼠6只为空白组。造模12周后,连续给药12周。给药结束后收集小鼠新鲜粪便,检测菌群情况;分离小鼠血清检测血脂水平,制备肝脏切片染色观察损伤情况。结果 OP-D能够降低小鼠因高脂饮食引起的体质量增加,抑制总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)升高,改善肝脂肪变性,并多种水平上调控肠道菌群失调。结论 OP-D可能通过改善高脂饲养的ApoE~(-/-)小鼠肠道菌群失调影响其血脂水平和肝脂肪变性。     

补肾降脂方通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的效应机制

目的探讨补肾降脂方通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路干预ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的效应机制。方法采用高脂饮食喂饲ApoE~(-/-)小鼠复制AS模型,随机分为ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲组(模型组)、ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲+补肾降脂方组(补肾组)、ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲+阿托伐他汀组(他汀组),同品系、同周龄雄性C57BL/6小鼠为正常对照组(正常组),每组25只。各组给予相应干预12周。HE、油红O染色法分别检测小鼠主动脉窦、肝脏组织病理形态及脂质蓄积,Filipin染色法检测小鼠主动脉窦游离胆固醇;ELISA法检测小鼠外周血血清脂质(TC、TG、LDL-C、HDL-C)含量;Western blot法检测小鼠主动脉、肝脏组织PPARγ、LXRα及ABCA1蛋白表达。结果高脂饮食喂饲的ApoE~(-/-)小鼠呈典型的AS病变,主动脉窦可见大面积AS斑块及红染脂质,游离胆固醇增多;肝脏组织可见肝细胞结构紊乱,红染脂质蓄积;血清TC、LDL-C含量升高,HDL-C含量降低;主动脉及肝脏组织PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达降低。与模型组比较,补肾组小鼠主动脉窦AS斑块面积、红染脂质、游离胆固醇均减少;肝脏组织肝细胞结构大部分清晰可见,红染脂质减少;血清TC、LDL-C含量降低;主动脉及肝脏组织PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达上调。结论补肾降脂方可能通过调控PPARγ-LXRα-ABCA1通路进而有效干预治疗动脉粥样硬化。     

定心方降低脂质运载蛋白-2表达抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的研究

目的探讨定心方对动脉粥样硬化(AS)小鼠的防治作用及其机制。方法 50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠喂食高脂饲料并随机分为5组:定心方低、中、高剂量组分别给予定心方(DXR)9.375,18.75,37.5 g/(kg·d)灌胃;辛伐他汀组予辛伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃;模型组予等剂量生理盐水。另设10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料为对照组。14周后测小鼠血清脂质运载蛋白-2(LCN-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察主动脉组织病理形态学改变;Western blot检测主动脉LCN-2蛋白表达。结果DXR中、高剂量组及辛伐他汀组小鼠血清LCN-2、TNF-α、MCP-1及IL-6水平、主动脉LCN-2蛋白表达及主动脉AS斑块面积均显著低于模型组(P0.05或P0.01)。结论 DXR可能通过降低LCN-2表达,抑制炎症反应,显著减轻ApoE~(-/-)小鼠AS病变。     

丹蒌片通过PI3K/Akt信号通路抗动脉粥样硬化机制研究

目的：观察丹蒌片对动脉粥样硬化兔血脂、炎症因子及PI3K/AKT信号通路的影响,并探讨丹蒌片抗动脉粥样硬化的机制。方法：雄性日本大耳白兔24只,随机分为正常对照组、模型组、丹蒌片组,每组8只。正常对照组饲喂普通饲料,其余各组高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型;除高脂饲料喂养外,丹蒌片组（0.5 g·kg^-1·d^-1）胃饲相应药物。连续给药9周后处死,测各组血脂、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的含量;HE染色观察主动脉病理学改变;Western blot检测主动脉中PI3K和p-AKT的蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较,模型组中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL）及IL-6、TNF-α的浓度均显著升高（P<0.01）,主动脉组织中PI3K、p-AKT的蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组相比,丹蒌片组血脂及IL-6、TNF-α水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,PI3K、p-AKT的蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论：丹蒌片具有降低兔血脂、炎症因子,抗动脉粥样硬化的作用,其作用机制可能与激活PI3K/AKT信号通路相关。     

丹蒌片降低db/db小鼠肝脏脂肪生成及炎症反应改善胰岛素抵抗的作用研究

该文旨在研究丹蒌片(Danlou Tablets, DLT)对2型糖尿病db/db小鼠胰岛素抵抗的作用及潜在机制。将db/db雄性小鼠随机分成模型对照组、二甲双胍组(盐酸二甲双胍片100 mg·kg^-1)和丹蒌片组(丹蒌片1 g·kg^-1),另取C57BL/6J小鼠作为正常对照组。二甲双胍组和丹蒌片组小鼠灌胃给予相应剂量药物,每日1次,连续给药16周。通过检测小鼠空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量及胰岛素耐量评价丹蒌片对糖尿病小鼠血糖及胰岛素抵抗的影响;通过检测血清游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,评价丹蒌片对糖尿病小鼠血脂的影响;通过检测小鼠肝脏指数及肾周脂肪指数评价丹蒌片对非脂肪组织与脂肪组织中脂质蓄积的影响;基于IRS-1/PI3K/Akt胰岛素信号通路,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠肝脏组织中胰岛素受体β(IRβ)、磷酸化胰岛素受体β(p-IRβ)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、胰岛素受体底物-1 (IRS-1)蛋白表达水平,探讨丹蒌片改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用机制;基于SREB...     

丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化小鼠脂质运载蛋白-2表达的干预研究

目的:探讨丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化(AS)小鼠脂质运载蛋白-2(LCN-2)表达的干预作用。方法:将50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠喂食高脂饲料并随机分为5组:丹参酮ⅡA低、中、高剂量组分别给予丹参酮ⅡA灌胃(7.5,15,30 mg·kg~(-1)·d~(-1));辛伐他汀组予辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃;模型组予等剂量生理盐水。另设10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料为对照组。14周后测小鼠血清LCN-2、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察主动脉组织病理形态学改变;Western blot检测主动脉LCN-2蛋白表达。结果:各给药组小鼠血清LCN-2、IL-6、MCP-1及TNF-α水平、主动脉LCN-2蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05),辛伐他汀组、丹参酮ⅡA中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积显著低于模型组(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可通过降低LCN-2表达,抑制炎症反应,显著减轻ApoE~(-/-)小鼠AS病变。     

丹蒌片对Aβ1-40 致脑微血管内皮细胞损伤保护作用的机制研究

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体组(RAGE-Ab),24 h后使用Western Blot法检测各组血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、趋化因子受体-5(CCR5)的表达。(2)用丹蒌片制备含药血清,实验分为正常组(10%空白血清培养)、模型组、低浓度用药组(10%丹蒌片低浓度含药血清+Aβ1-40)、高浓度用药组(10%丹蒌片高浓度含药血清+Aβ1-40),24 h后用Western Blot法测定各组细胞上述因子的表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达显著增加(P<0.01),RAGE-Ab组各因子表达水平显著降低(P<0.01);(2)与空白血清组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达增加(P<0.001),与模型组相比,丹蒌片含药血清组各因子的表达显著降低(P<0.01)。结论丹蒌片含药血清具有保护Aβ1-40诱导的BMEC损伤的作用,其机制可能与抑制Aβ和RAGE诱发的BMEC趋化反应有关。     

从心论治方对ApoE~(-/-)小鼠血脂和肠道菌群的影响

目的探讨从心论治方对APOE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠血脂和肠道菌群的影响。方法将36只雄性ApoE-/-小鼠随机分为6组:模型组、对照组、辛伐他汀组,从心论治方高、中、低组。高脂饲料喂养12周制备高脂血症小鼠模型,进行药物处理;检测小鼠血脂水平;油红染色观察肝脏组织学变化;16s rDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群组成和结构。结果模型组小鼠血脂水平明显升高,肝脏出现明显脂肪变性,肠道菌群结构紊乱。给药组小鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均降低(P0.01,P0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平升高(P0.05),肝脏脂肪变性情况缓解。从心论治方组小鼠肠道菌群中厚壁菌门与拟杆菌门的比例降低,菌群多样性增加,肠道菌群失调得到改善。结论从心论治方能调节高脂喂养ApoE-/-小鼠血脂水平,改善肝脏脂肪变性情况,改变肠道菌群组成结构。     

双参芎连颗粒对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用

目的:研究双参芎连颗粒对高脂饲料喂养的Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用。方法:采用C57BL/6小鼠做为正常组(BLA),ApoE~(-/-)小鼠随机分为4组:动脉粥样硬化模型组(MOD),普罗布考治疗组(PRO,216 mg·kg~(-1)),双参芎连颗粒高剂量治疗组(SSXL-H,1.6 g·kg~(-1))以及双参芎连颗粒低剂量治疗组(SSXL-L,0.8 g·kg~(-1))。各组ApoE~(-/-)小鼠均给予高脂饲料喂养2周后采用生化法进行血脂测定,并灌胃相应的药物。给药8周后再次进行血脂检测。同时采用超声法检测主动脉弓内膜厚度;采用油红O染色的方法分析主动脉斑块面积进行计算斑块面积/血管内表面积;采用流式高通量多因子检测技术检测血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白细胞介素(interleukin,IL)-1α,IL~(-1)0,以及单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1等炎症细胞因子的表达。结果:双参芎连颗粒能够减少ApoE~(-/-)小鼠主动脉中-内膜厚度,降低主动脉斑块面积/血管内表面积,抑制TNF-α和MCP-1炎症因子表达,但是对血脂水平无明显的影响。结论:双参芎连颗粒可以通过对炎症反应的抑制作用而防治动脉粥样硬化,且不依赖与血脂水平的变化。     

丹萎片对动脉粥样硬化模型大鼠抵抗素和血管内皮 的影响

目的:观察丹蒌片对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型大鼠血清抵抗素(Resistin)和血管内皮的影响,探讨丹蒌片对AS模型大鼠血管内皮的保护作用及可能机制。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组,每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余各组均采用高糖高脂饮食+维生素D3腹腔注射方法复制AS模型。模型组、他汀组、丹蒌组,分别给予生理盐水、阿托伐他汀片混悬液、丹蒌片混悬液灌胃干预8周。干预结束后,行ELISA法检测大鼠血清Resistin、内皮素-1(ET-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的水平。结果:1与正常组比较,模型组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.05),NO水平下降(P<0.05);2与模型组比较,他汀组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),NO水平上升(P<0.01);丹蒌组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-a水平降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01),NO水平上升(P<0.01);3他汀组与丹蒌组之间大鼠血清resistin、ET-1、IL-6、TNF-α和NO之间水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1丹蒌片可降低AS模型大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平,升高NO水平,减轻AS模型大鼠血管内皮的损伤,作用与他汀类药物相似。2丹蒌片可保护血管内皮,其作用机制可能是通过降低血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平,增加NO的分泌,从而保护血管内皮细胞结构的完整和功能的完善。     

丹蒌片对ApoE-/-小鼠肝脏脂质沉积自噬及脂质代谢的调节作用

目的 探讨丹蒌片对肝脏脂质沉积小鼠脂质代谢及自噬的影响，为临床治疗动脉粥样硬化提供新的靶点与理论基础。方法 将小鼠分成正常对照组、模型组、给药组。利用全自动生化分析仪检测小鼠的血脂水平；HE染色判断肝脏病变程度；RT-qPCR、Western Blot方法检测PPAR-γ、LXR、ULK1、Beclin-1、LC3mRNA及蛋白的表达情况；免疫组化检测PPAR-γ表达。结果 经丹蒌片治疗后，下调了小鼠血清的TC、TG及LDL-c水平(P<0.05),上调了HDL-c水平(P<0.05);脂质代谢相关基因与蛋白PPAR-γ与LXR-α/β水平升高(P<0.05);促进LC3、ULK1、Beclin-1、PPAR-γ等自噬相关基因与蛋白高表达(P<0.05)而缓解高脂饮食引发的肝脏脂质沉积。结论 丹蒌片可能通过改善脂质代谢，提高自噬流，防治动脉粥样硬化。     

冠心康对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠血清血脂及炎性微环境的影响

目的观察冠心康对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠的血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨冠心康抗动脉粥样硬化的作用机制与炎性因子之间的关系。方法以ApoE~(-/-)小鼠给予高脂饲料建立动脉粥样硬化模型。30只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、冠心康组、辛伐他汀组;10只同遗传背景的C57BL/6J小鼠作为正常组。冠心康组以冠心康煎剂灌胃,辛伐他汀组以辛伐他汀水溶液进行灌胃。各组干预12周时取材。每周检测小鼠体质量;生化仪检测血清血脂;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测血清IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的表达情况。免疫组化法检测小鼠主动脉CD68蛋白的检测。结果干预12周后,用药组的小鼠体质量均低于模型组(P0.05)。与模型组比较,冠心康组与辛伐他汀组的血清TC、TG、LDL-C下降(P0.05),HDL-C升高(P0.05)。用药组的血清IL-8、TNF-α表达比模型组均下降,差异有统计学意义(P0.05);IL-6表达则升高(P0.05)。与模型组比较,用药组的CD68蛋白表达下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论冠心康可能通过调节血清血脂及炎性因子的表达,降低血管内皮细胞的损伤,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

人参茎叶总皂苷对急性肺损伤小鼠肠道菌群和短链脂肪酸代谢的影响北大核心CSCD

该研究旨在探讨人参茎叶总皂苷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的生物学效应及潜在的作用机制。60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,人参茎叶总皂苷正常给药组(61.65 mg·kg^(-1)),人参茎叶总皂苷低、中、高剂量组(15.4125、30.825、61.65 mg·kg^(-1)),小鼠连续给药1周后开始造模,造模后24 h,处死小鼠获取肺组织,并计算肺湿/干比;观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞数目,检测BALF中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;检测肺组织中IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平,以及髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织病理变化;16S rRNA高通量测序检测小鼠粪便中的肠道菌群;气相色谱-质谱分析检测血清中短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)的含量。结果显示,人参茎叶总皂苷能降低LPS诱导的ALI小鼠肺系数、肺湿/干比和肺组织损伤,减少BALF中炎性细胞的数量,抑制BALF炎症因子的水平,抑制肺组织中炎症因子mRNA、MPO和MDA的水平,升高肺组织中GSH-Px和SOD的活力;改善ALI小鼠肠道菌群紊乱,恢复肠道菌群的多样性,提升有益菌Lachnospiraceae和Muribaculaceae的相对丰度,降低有害菌Prevotellaceae的相对丰度,提高血清中SCFAs(乙酸、丙酸、丁酸)的含量。上述研究表明人参茎叶总皂苷能通过调节肠道菌群和SCFAs代谢改善ALI小鼠肺组织水肿、炎症反应和氧化应激。     

景虎通脉方抗ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

目的探讨景虎通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块及炎性因子的作用及机制。方法 SPF级ApoE~(-/-)小鼠高脂饲养8周后建立AS模型,随机分为模型组、阳性药物组及景虎通脉方高、中、低剂量组(18.20、9.10、4.55 g/kg),C57BL/6/J小鼠为正常组。给药8周后HE和Masson染色观察主动脉斑块情况;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6及检测血脂4项;免疫组化和Western blot检测主动脉Toll样受体4(TLR4)和核受体77(Nur77)表达;基因芯片杂交技术筛选差异基因进行KEGG通路富集分析。结果与模型组比较,景虎通脉方各剂量组能不同程度减低血清TC、TG、LDL-C水平,增加HDL-C水平(P0.05,P0.01);HE和Masson染色观察景虎通脉方各剂量组显著减少斑块面积,增加斑块内胶原纤维表达(P0.01);ELISA检测景虎通脉方各剂量组可减低IL-1β、TNF-α、IL-6水平(P0.01);免疫组化和Western blot显示景虎通脉方各剂量组降低TLR4表达,增加Nur77表达;miRNA芯片结果显示49个miRNA差异显著,经KEGG分析显示其作用与包括Axon guidance及TLR4下游在内的多条通路相关。结论景虎通脉方可明显减少AS小鼠主动脉斑块面积,其机制可能与其调节血脂、减低炎症因子、干预Nur77和TLR4蛋白及包括Axon guidance在内的多条通路相关。     

散结通脉方对ApoE-/-小鼠AS斑块逆转和消退的作用机制研究

目的探讨散结通脉方对动脉粥样硬化模型小鼠主动脉斑块逆转、消退及血清中炎症因子含量的影响。方法以ApoE~(-/-)小鼠为实验对象,高脂饮食诱导建立AS模型,灌胃予散结通脉方混悬液治疗12周。测量计算小鼠主动脉斑块面积、血管横截面面积、脂质空泡面积、斑块相对面积;检测血清中TNF-α、ox-LDL、ET-1和IL-10含量。结果散结通脉方13.5 g·kg~(-1)、6.75 g·kg~(-1)和3.40 g·kg~(-1) 3个给药组具有明显降低模型动物主动脉斑块面积和血清TNF-α、IL-10含量的作用(P0.01或P0.05);13.5 g·kg~(-1)、6.75 g·kg~(-1) 2个剂量组主动脉脂质空泡面积、斑块相对面积及血清中ET-1含量均明显低于模型组(P0.01或P0.05);13.5 g·kg~(-1)给药组血清ox-LDL水平明显低于模型组(P0.05)。结论散结通脉方可以通过逆转、消退AS斑块,下调异常升高的血清炎性因子TNF-α、ox-LDL、ET-1和IL-10水平。     

丹蒌片对动脉粥样硬化模型大鼠抵抗素和血管内皮的影响

目的:观察丹蒌片对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型大鼠血清抵抗素(Resistin)和血管内皮的影响,探讨丹蒌片对AS模型大鼠血管内皮的保护作用及可能机制。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、他汀组、丹蒌组,每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余各组均采用高糖高脂饮食+维生素D3腹腔注射方法复制AS模型。模型组、他汀组、丹蒌组,分别给予生理盐水、阿托伐他汀片混悬液、丹蒌片混悬液灌胃干预8周。干预结束后,行ELISA法检测大鼠血清Resistin、内皮素-1(ET-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的水平。结果:1与正常组比较,模型组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平升高(P0.05,P0.01,P0.05,P0.05),NO水平下降(P0.05);2与模型组比较,他汀组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P0.01,P0.01,P0.01,P0.05),NO水平上升(P0.01);丹蒌组大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-a水平降低,差异有统计学意义(P0.01,P0.01,P0.01,P0.01),NO水平上升(P0.01);3他汀组与丹蒌组之间大鼠血清resistin、ET-1、IL-6、TNF-α和NO之间水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:1丹蒌片可降低AS模型大鼠血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平,升高NO水平,减轻AS模型大鼠血管内皮的损伤,作用与他汀类药物相似。2丹蒌片可保护血管内皮,其作用机制可能是通过降低血清Resistin、ET-1、IL-6和TNF-α水平,增加NO的分泌,从而保护血管内皮细胞结构的完整和功能的完善。     

定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响

目的:观察定心方(DXR)在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化(AS)过程中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs)表达调控的影响。方法:50只载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气,随机分为5组,DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29,18.59,37.18 g·kg~(-1)·d~(-1);辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组。16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)及转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞法检测脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠主动脉AS斑块形成,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显升高,IL~(-1)0及TGF-β水平明显降低,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显减少,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,辛伐他汀组,DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显降低,IL~(-1)0及TGF-β水平明显升高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显增加,Foxp3蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:DXR可通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效。