大蒜素联合顺铂对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨大蒜素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法取对数生长期HeLa细胞，设对照组、大蒜素（50 μg/mL）组、顺铂（5 μg/mL）组、联合给药组（大蒜素50 μg/mL+顺铂5 μg/mL）。药物干预48 h后，通过MTT法检测细胞增殖抑制率，运用CompuSyn软件计算大蒜素与顺铂联合指数（CI），流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡水平，Western blotting法检测Cyclin D1、CDK2、P27、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组HeLa细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05、0.01），CI为0.69（提示大蒜素与顺铂具有中度协同效应）。与对照组比较，大蒜素组和顺铂组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1、CDK2、Bcl-2表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2比值显著升高（P<0.01）。与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.01）。结论大蒜素联合顺铂具有协同抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用，可能与调节细胞周期和凋亡相关蛋白表达，进而阻滞细胞周期进程并促进细胞凋亡有关。     

川芎嗪对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究★

目的 探讨川芎嗪（TMP）对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 以DMSO（空白对照组）、不同浓度（50、100、200 μg·mL^-1）的TMP和奥沙利铂（L-OHP，25 μg·mL^-1）干预对数生长期人结直肠癌SW480细胞48 h。采用MTT法和EdU插入实验检测各组SW480细胞增殖率，细胞克隆实验观察SW480细胞克隆形成能力，流式细胞术、Western blotting检测细胞周期、凋亡和蛋白表达。结果 与空白对照组比较，经50、100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显降低SW480细胞增殖率，提高细胞凋亡率；经100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显抑制细胞克隆形成能力，阻滞细胞周期于G₀/G₁期，提高PTEN、Cleaved Caspase-3、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1、Bcl-2表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。与L-OHP 25 μg·mL^-1组比较，经TMP 200 μg·mL^-1干预能够明显降低SW480细胞增殖率、提高凋亡率，提高PTEN、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 TMP可能通过上调PTEN抑制PI3K/Akt通路，进而抑制SW480细胞增殖并促进其凋亡。     

EHD2与HER-2阳性乳腺癌细胞曲妥珠单抗敏感性的关系及作用机制

目的 研究EH结构域蛋白2（EHD2）对HER-2阳性乳腺癌细胞曲妥珠单抗（TZB）敏感性的影响及作用机制。方法 联合分析GEO、Kaplan-Meier plotter及TCGA数据库,筛选出与乳腺癌细胞TZB敏感性密切相关的基因EHD2。体外培养人乳腺癌细胞BT474,将其分为敏感组、抵抗组及干扰组,敏感组用PBS处理12周后转染PX459-Control载体,抵抗组用0.5、1、2、4、8、16 μg·mL^-1 TZB诱导12周后转染PX459-Control载体,干扰组用0.5、1、2、4、8、16 μg·mL^-1 TZB诱导12周后转染PX459-sgEHD2载体。CCK-8实验检测细胞的TZB半抑制浓度（IC₅₀）,实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测EHD2及其潜在下游基因血小板源性生长因子β受体（PDGFRβ）的表达。结果 GEO数据库显示,EHD2在TZB抵抗的乳腺癌细胞中表达显著上调（P<0.05）;Kaplan-Meier plotter数据库分析发现,EHD2高表达与HER-2阳性乳腺癌患者预后不良显著相关（P<0.05）,与HER-2阴性乳腺癌患者生存时间延长显著相关（P<0.05）;TCGA数据库分析显示,乳腺癌组织中EHD2与PDGFRβ表达水平呈正相关（P<0.01）。与敏感组比较,抵抗组与干扰组TZB的IC₅₀显著升高,抵抗组EHD2、PDGFRβ的表达均显著上调,干扰组EHD2表达显著下调,PDGFRβ表达显著上调,差异均有统计学意义（P<0.05）;与抵抗组比较,干扰组TZB的IC₅₀显著降低,EHD2、PDGFRβ的表达均显著下调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 EHD2可促进HER-2阳性乳腺癌细胞的TZB抵抗,其机制可能与上调PDGFRβ表达有关。     

木犀草素逆转宫颈癌细胞对阿霉素耐药性的机制研究

目的 探讨木犀草素（Lut）逆转宫颈癌对阿霉素（Dox）耐药性的效应及其机制。方法 建立Dox耐药的宫颈癌HeLa/Dox细胞株,利用Dox、Lut单独或联合作用于细胞,分为control组、Dox组、Lut组、Dox＋Lut组,检测各组细胞存活率及凋亡率。构建小鼠移植瘤模型,经腹腔注射3 mg·kg^-1 Dox和/或5 mg·kg^-1 Lut,检测小鼠肿瘤生长情况及肿瘤中相关蛋白的表达。结果 （1） CCK-8检测结果显示,Dox+Lut组细胞的生长活性明显受到抑制,存活率显著低于Dox组和Lut组（P<0.01）。细胞克隆形成实验显示出与CCK-8实验相似的细胞生长趋势。流式细胞术检测结果显示,Dox单药对HeLa/Dox细胞的凋亡无明显促进作用,而Lut单药可显著诱导HeLa/Dox细胞凋亡。（2） Dox单药对HeLa/Dox细胞迁移的影响较小（P<0.05）,而Lut单药处理的HeLa/Dox细胞迁移数目明显减少,Dox与Lut联合应用对HeLa/Dox细胞迁移能力的抑制作用最强（P<0.01）。（3）与对照组相比,Dox组、Lut组、Dox+Lut组HeLa/Dox细胞中PI3K、Cleaved caspase-3蛋白表达均显著上调,p-Akt、p-mTOR、p70S6K蛋白表达显著下调（P<0.05）,且Dox+Lut组蛋白表达水平变化最为显著。（4）对照组、Dox组、Lut组、Dox+Lut组小鼠肿瘤体积分别为（1265.8±123.3）mm³、（456.4±68.7）mm³、（479.9±57.2）mm³、（108.1±14.0）mm³,差异具有统计学意义（P＜0.05）。联合应用Dox和Lut后,肿瘤组织中PI3K和Cleaved caspase-3的表达显著上调（P<0.01）,而p70S6K和Ki-67的表达显著下调（P<0.01）。结论 Lut可通过调节PI3K/Akt信号通路的活性逆转宫颈癌细胞对阿霉素的耐药性,从而抑制肿瘤细胞的增殖和转移,并促进其凋亡。     

海莲叶提取物抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移并促进细胞凋亡★

目的 研究海莲叶提取物对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响。方法 将非小细胞肺癌A549细胞分成Control组（0 μg·mL^-1海莲叶提取物处理）、BSLE-L组（10 μg·mL^-1海莲叶提取物处理）、BSLE-M组（20 μg·mL^-1海莲叶提取物处理）、BSLE-H组（30 μg·mL^-1海莲叶提取物处理）、BSLE-M+Jagged1-Fc组（20 μg·mL^-1海莲叶提取物和Notch信号通路激活剂Jagged1-Fc处理）。采用MTT实验检测细胞增殖，平板克隆实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞术检测细胞凋亡变化，Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、vimentin、E-cadherin、MMP-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达变化。结果 与Control组比较，BSLE-L、BSLE-M、BSLE-H组细胞存活率和克隆形成数目依次降低，细胞凋亡率依次升高，细胞侵袭数目、迁移数目依次降低，细胞中Bax、E-cadherin蛋白表达水平依次升高，vimentin、MMP-2、Bcl-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达水平依次降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。与BSLE-M组比较，BSLE-M+Jagged1-Fc组细胞存活率和克隆形成数目显著升高，细胞凋亡率显著降低，细胞迁移和侵袭数目显著升高，细胞中Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著降低，Bcl-2、vimentin、MMP-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达水平显著升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 海莲叶提取物可抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移、上皮间质转化（EMT），诱导细胞凋亡，其作用机制与降低Notch信号通路激活水平有关。     

半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究

目的 研究半枝莲总黄酮（TF-SB）对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制。方法 采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测TF-SB（0、25、50、100、200 μg·mL⁻¹）作用24 h对AGS细胞存活率的影响。将AGS细胞分为对照组、溶剂对照（含相同浓度的甲醇）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）组、质粒空载体（pcDNA,200 nmol·L⁻¹）组、迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）过表达质粒（pcDNA-MIIP,200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋小干扰RNA对照（si-con,200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋MIIP小干扰RNA（si-MIIP,200 nmol·L⁻¹）组,转染质粒后TF-SB处理24 h,CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-xl（Bcl-xl）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cleaved Caspase-3）、MIIP表达;不同照射量X射线（0、2、4、6、8 Gy）照射后,克隆形成实验检测细胞存活率,并绘制单击多靶模型拟合曲线,Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达。结果 与TF-SB 0 μg·mL⁻¹组比较,TFSB 25、50、100、200 μg·mL⁻¹组AGS细胞存活率显著降低（P＜0.05）;与对照组及溶剂对照组比较,TF-SB 100 μg·mL⁻¹组AGS细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）,Bcl-xl蛋白表达显著降低（P＜ 0.05）,cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高（P＜0.05）;放疗后,TF-SB组细胞存活率显著降低（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05）,放疗敏感性增加。与pcDNA组比较,pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加,细胞存活率显著降低,Bcl-xl蛋白表达显著降低,cleavedCaspase-3蛋白表达增加（P＜0.05）;放疗后,pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05）,敏感性增加。与TF-SB＋si-con组比较,TF-SB＋si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低,细胞存活率显著增加,Bcl-xl蛋白表达显著增加,cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低（P＜0.05）;放疗后,TF-SB＋si-MIIP组细胞存活率显著升高（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著降低（P＜0.05）,敏感性降低。结论 TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高其放疗敏感性。     

黄连素以浓度依赖性方式逆转子宫颈癌HeLa细胞上皮间充质转换进程并显著抑制细胞增殖和侵袭

目的 探索黄连素对子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭活性的影响,并探讨传统中药提取物黄连素在子宫颈癌治疗中的潜在价值。方法 采用CCK-8细胞活性检测实验分析不同浓度黄连素对HeLa细胞增殖活性的影响;流式细胞凋亡检测实验及免疫印迹实验分析高浓度（40 μmol·L^-1）黄连素对HeLa细胞凋亡的影响;免疫印迹实验及免疫荧光检测实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞DNA损伤的影响;侵袭及迁移实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞迁移和侵袭能力的影响;免疫印迹实验及免疫荧光检测实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞上皮及间充质表型的影响。结果 黄连素以浓度依赖的方式抑制HeLa细胞的增殖活性（P<0.05）并诱导细胞凋亡（P<0.01）;高浓度黄连素对HeLa细胞DNA损伤无显著影响（P>0.05）;高浓度黄连素可显著抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力（P<0.01）;高浓度黄连素可显著逆转HeLa细胞的上皮间充质转换（EMT）进程。结论 高浓度黄连素可显著逆转HeLa细胞的EMT进程并抑制其增殖和侵袭能力。     

丹参酮ⅡA通过抑制PI3K/Akt通路逆转人喉癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的 研究丹参酮Ⅱ_A对人喉癌细胞顺铂耐药的影响作用及机制。方法 以不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞和人喉癌顺铂耐药细胞（Hep-2/DDP）48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算半数抑制浓度（IC₅₀）和耐药指数（RI）。以不同质量浓度（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L）丹参酮Ⅱ_A干预对数生长期Hep-2细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算IC₅₀;采用丹参酮Ⅱ_A（IC₅₀5.32 mg/L）＋不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期Hep-2/DDP细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算2种药物联用的IC₅₀和逆转倍数（RF）。取对数生长期Hep-2/DDP细胞,设置对照组、顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。各组分别给药干预48 h后,采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞增殖抑制率和凋亡率,Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B（Akt）蛋白表达情况。结果 顺铂对Hep-2细胞的IC₅₀为4.58 mg/L,对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为14.09 mg/L,RI为3.08;丹参酮Ⅱ_A对Hep-2细胞的IC₅₀为5.32 mg/L;丹参酮Ⅱ_A联合顺铂对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为3.34 mg/L,RF为4.22。与对照组比较,顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.01）;与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.05）;与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著升高,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化（p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt）水平显著降低（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著降低（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著升高（P<0.05）。结论 丹参酮Ⅱ_A可逆转人喉癌细胞顺铂耐药,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路活化而促进喉癌细胞凋亡有关。     

芹菜素对顺铂化疗所致肾损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

目的 探索芹菜素（APG）对顺铂（DDP）化疗所致肾损伤大鼠的保护作用及机制研究。方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氨磷汀组（阳性对照组）及APG低、中、高剂量组,每组10只。模型组、氨磷汀组及APG低、中、高剂量组大鼠均采用一次性腹腔注射DDP（7.5 mg·kg^-1）的方法建立DDP致肾损伤大鼠模型,空白组大鼠仅腹腔注射生理盐水（不造模）;然后分别腹腔注射给药（APG低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg^-1 APG,氨磷汀组给予1 mg·kg^-1氨磷汀,空白组和模型组均给予生理盐水）,1次/d,连续给药28 d。测定各组大鼠24 h尿蛋白量和血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量,HE染色法、TUNEL法分别行肾脏病理学检查和细胞凋亡检测,生化分析法检测MDA含量和抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性,ELISA法检测炎症细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）水平,Western blotting检测核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、核因子-κB（NF-κB）、激活型半胱胺酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,APG中、高剂量组和氨磷汀组大鼠24 h尿蛋白量和血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善,凋亡指数（AI）显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD、GSH-Px活性显著升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调而NF-κB、Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.01）。与氨磷汀组比较,APG高剂量组大鼠血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善、AI显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD活性显著升高（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调且Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.05）。结论 APG对DDP所致肾损伤大鼠具有保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路而抑制氧化应激损伤、炎症反应和细胞凋亡有关。     

五味子乙素通过ROS介导内质网应激诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的 研究五味子乙素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 用细胞计数试剂(CCK-8)检测不同浓度五味子乙素对MDA-MB-231细胞存活率的影响;五味子乙素（10、20、40 μmol/L）作用 MDA-MB-231 细胞 24 h,分别用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡情况;用DCFA-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平;用Western blot法检测细胞凋亡及内质网应激相关蛋白（Bcl-2、Bax、CHOP、GPR78、PERK、p-PERK、p-eIF2α、eIF2）的表达。结果 与空白组比较,随着五味子乙素浓度增大,细胞存活率明显降低,其IC₅₀为19.16 μmol/L;与对照组比较,五味子乙素（10、20、40 μmol/L）均能抑制细胞克隆形成(P<0.05),且呈剂量依赖;五味子乙素（10、20、40 μmol/L）均可诱导细胞凋亡（P<0.05）,使抗凋亡蛋白BCL-2的表达显著降低,促凋亡蛋白Bax的表达显著升高(P<0.05);五味子乙素（10、20、40 μmol/L）显著升高细胞内ROS水平(P<0.05),且呈剂量依赖;五味子乙素（10、20、40 μmol/L）能够激发内质网应激,使内质网应激相关蛋白CHOP、GPR78、p-eIF2α表达增多(P<0.05),且呈剂量依赖。结论 五味子乙素可能通过ROS介导内质网应激诱导MDA-MB-231细胞凋亡。     

金粉蕨素通过circ_0136666/miR-370轴对肺癌A549细胞糖酵解、增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨金粉蕨素（ONY）对肺癌A549细胞糖酵解、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 体外培养A549细胞，用不同浓度（5、10、20 μg·mL^-1）ONY作用24 h，转染circ_0136666的小干扰RNA至A549细胞，或将20 μg·mL^-1 ONY作用于转染circ_0136666过表达载体的A549细胞。酶联免疫吸附法检测细胞中的葡萄糖水平及细胞培养上清中的乳酸含量，CCK-8检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western blotting检测Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达，RT-qPCR检测circ_0136666和miR-370表达，双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ_0136666和miR-370的调控关系。结果 经5、10、20 μg·mL^-1 ONY干预后，A549细胞葡萄糖消耗量和乳酸产生量、细胞迁移数和侵袭数、Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平及circ_0136666表达水平明显降低（P<0.05），而细胞增殖抑制率、miR-370表达水平明显升高（P<0.05），且具有剂量依赖性。circ_0136666可靶向负调控miR-370的表达。沉默circ_0136666后，A549细胞葡萄糖消耗量和乳酸产生量、细胞迁移和侵袭数、Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低（P<0.05），而细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）。过表达circ_0136666逆转了ONY对A549细胞糖酵解、增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 ONY可抑制肺癌A549细胞的糖酵解、增殖、迁移和侵袭，其作用机制与调控circ_0136666/miR-370通路有关。     

丁香水提物对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 研究丁香水提物(aqueous extract of clove，AEC)对人胰腺癌细胞Panc-1和Panc-28增殖抑制和凋亡的影响，初步明确其分子机制。方法 Panc-1、Panc-28细胞经AEC作用后，用MTT法检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡情况；克隆形成检测细胞群体依赖性情况；Transwell试验检测细胞迁移和侵袭的情况；Western blotting分析cleaved-PARP、Bax、Bcl-2和E-cadherin蛋白表达情况。结果 MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药72 h时25 μg·mL^–1 AEC就能抑制Panc-1、Panc-28细胞的增殖，抑制率分别为(16.21±3.57)%和(22.44±4.92)%(P<0.01)。流式细胞术检测结果表明，与对照组相比，200 μg·mL^–1 AEC作用Panc-1、Panc-28细胞24 h显著诱导细胞凋亡，早期凋亡率分别为(11.52±0.34)%和(30.88±0.73)%(P<0.01)；晚期凋亡率分别为(23.59±1.04)%和(13.27±0.85)%(P<0.01)。克隆形成试验结果显示，50 μg·mL^–1AEC能显著抑制Panc-1、Panc-28细胞的集落形成(P<0.01)。Transwell试验结果表明100 μg·mL^–1AEC处理Panc-1、Panc-28细胞48 h后，迁移数目分别由对照组(275±7)个减少到(165±15)个，(227±25)个减少到(124±16)个(P<0.01)，侵袭数目分别由对照组(179±19)个减少到(106±7)个，(132±7)个减少到(61±5)个(P<0.01)。Western blotting试验结果表明，100 μg·mL^–1 AEC能显著诱导Panc-1、Panc-28细胞中cleaved-PARP(P<0.01)、E-Cadherin的蛋白表达(P<0.05)，提高Bax/Bcl-2比值(P<0.01)。结论 AEC能诱导Panc-1、Panc-28细胞凋亡，并抑制其增殖、克隆形成、迁移和侵袭的能力，其作用机制可能与细胞内E-cadherin蛋白表达升高及Bax/Bcl-2比值增加有关。     

羌活醇及异欧前胡素对脂多糖诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响

目的 探讨羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响。方法 复制经脂多糖(LPS)诱导的大鼠成纤维样滑膜细胞(CIA-FLS)模型,分别给予不同浓度的羌活醇(25、50、100、200、400 μg·mL^-1)、异欧前胡素(25、50、100、200、400 μg·mL^-1)及阳性药泼尼松龙（400 μg·mL^-1）,另设空白对照组,观察给药前后成纤维样滑膜细胞形态差异;采用噻唑蓝(MTT)法测定不同给药时间、不同给药浓度下成纤维样滑膜细胞的抑制率,计算半数抑制浓度（IC₅₀）;硝酸还原酶法测定羌活醇和异欧前胡素对大鼠成纤维化滑膜细胞中一氧化氮（NO）水平的影响;ELISA测定肿瘤坏死因子a (TNF-a)表达的影响。结果 造模细胞较正常细胞增殖力强,细胞粗大,纤维样,呈层叠状生长;羌活醇组给药后细胞增殖力减弱,生长良好;异欧前胡素给药后细胞增殖力锐减,生长状况不佳。给药12 h,羌活醇未测出半数抑制浓度值,异欧前胡素半数抑制浓度值为160 μg·mL^-1;给药36 h,羌活醇、异欧前胡素半数抑制浓度值分别为190、120 μg·mL^-1;给药60 h,分别为80、45 μg·mL^-1,异欧前胡素的增殖抑制能力强于羌活醇（P＜0.01）。给药羌活醇与异欧前胡素对一氧化氮总体含量和细胞因子肿瘤坏死因子a含量均有显著性降低（P＜0.01）,且异欧前胡素的降低更显著。结论 羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞均有增殖抑制作用(P＜0.05),均使一氧化氮含量和细胞因子TNF-a的含量显著减少（P＜0.01）,二者都有很好的增殖抑制能力,且异欧前胡素的抑制效果优于羌活醇。     

疏肝健脾益肾汤联合化疗对晚期肝郁脾虚型乳腺癌患者血清炎性因子及肿瘤标志物的影响

目的 探讨疏肝健脾益肾汤联合化疗对晚期肝郁脾虚型乳腺癌患者血清炎性因子及肿瘤标志物的影响。方法 选择2017年7月—2018年6月烟台市烟台山医院收治的晚期肝郁脾虚型乳腺癌患者120例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组62例、对照组58例。对照组采用GP方案（吉西他滨+顺铂）化疗,观察组在对照组的基础上联合疏肝健脾益肾汤,两组均治疗18周。比较两组患者中医症状临床疗效、实体瘤临床疗效、血清炎性因子、肿瘤标志物、毒副反应等指标。结果 治疗后,观察组中医证候积分（8.43±1.35）显著低于对照组（12.52±2.45）（P<0.05）,有效率（82.86%）明显高于对照组（60.34%）（P<0.05）,缓解率（58.06%）明显高于对照组（39.66%）（P<0.05）;观察组血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平均显著低于对照组［（28.32±4.34） μg·L^-1 vs. （35.45±5.12） μg·L^-1、（76.45±9.21） pg·L^-1 vs. （82.35±9.54） pg·L^-1、（5.45±0.78） mg·L^-1 vs. （7.12±1.24） mg·L^-1; P<0.05］;观察组血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、CA15-3水平均显著低于对照组［（6.45±1.12） ng·mL^-1 vs. （10.24±1.4） ng·mL^-1、（22.32±4.12） U·mL^-1 vs. （28.65±5.20） U·mL^-1、（18.45±3.65） U·mL^-1 vs. （24.74±4.32） U·mL^-1; P<0.05］;观察组Ⅲ-Ⅳ级白细胞减少、血小板减少、恶心呕吐的发生率（15.52%、9.68%、11.29%）均明显低于对照组（31.03%、24.14%、53.45%）（P<0.05）。结论 疏肝健脾益肾汤联合化疗有助于提高晚期肝郁脾虚型乳腺癌患者的临床疗效,减轻毒副反应,可能与抑制炎症反应、降低血清肿瘤标志物水平等因素有关。     

人参皂苷Rg1对移植性白血病模型小鼠的作用

目的 研究人参皂苷Rg₁对移植性白血病模型小鼠的作用。方法 采用免疫磁性分选法（MACS）从K562细胞中分离、纯化CD34⁺CD38^-人白血病干细胞（CD34⁺CD38^- LSCs）,流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6～8周雌性NOD/SCID小鼠27只随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg₁（200 mg/kg）组,每组9只,模型组和人参皂苷Rg₁组通过尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs构建白血病小鼠模型,ip给药30 d。观察各组小鼠一般情况及腹部包块变化;全自动血常规检测仪检测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板水平;免疫组化法检测肝、脾脏病理学变化;流式细胞仪分析骨髓细胞周期;CCK-8法检测各组骨髓细胞的增殖能力;细胞免疫荧光染色鉴定骨髓细胞CD34阳性表达情况。结果 分选前K562细胞中CD34⁺CD38^- LSCs细胞群百分比为（9.64±1.14）%,分选后CD34⁺CD38^- LSCs纯度可达（96.45±1.63）%;台盼蓝染色显示分选后细胞活性为（95.26±2.16）%。与对照组比较,模型组小鼠腹部包块明显,生存情况较差,体质量显著下降（P<0.05）;白细胞数显著增高,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著下降（P<0.05）;肝、脾脏结构被破坏,有大量白细胞浸润;骨髓细胞周期检测显示G₀/G₁期比例显著下降（P<0.05）,S期比例显著升高（P<0.05）;骨髓细胞增殖活力显著升高（P<0.05）。与模型组比较,人参皂苷Rg₁组小鼠腹部包块明显减小,生存情况好转,体质量显著增加（P<0.05）;白细胞总数显著下降（P<0.05）,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著升高（P<0.05）;肝、脾脏结构明显恢复;骨髓细胞G₀/G₁期比例显著升高（P<0.05）,G₂/M期和S期比例显著下降（P<0.05）。细胞免疫荧光检测显示,模型组和人参皂苷Rg₁组中小鼠的骨髓细胞中存在大量的人源白血病细胞。结论 NOD/SCID小鼠尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs可成功构建急性髓系白血病小鼠模型,人参皂苷Rg₁能有效缓解NOD/SCID小鼠的白血病症状。     

夏枯草提取物对人乳头瘤病毒阳性宫颈癌细胞的凋亡作用

目的 研究夏枯草提取物(EPV)对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的凋亡作用。方法 培养人宫颈癌细胞SiHa、HeLa(HPV阳性)及C-33-A(HPV阴性),与20、40、80 μg/mL的EPV共孵育24 h,对照组加入等体积的DMSO,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡及细胞周期。取对数生长期的SiHa、HeLa细胞,与40 μg/mL EPV共孵育24 h,Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 9、Bcl-2、Bax的表达情况。结果 EPV剂量相关地抑制HPV阳性人宫颈癌细胞SiHa、HeLa活力(P<0.05、0.01、0.001);诱导SiHa、HeLa细胞凋亡(P<0.05、0.01),使SiHa、HeLa细胞周期阻滞在G₀/G₁期,抑制其增殖;对C-33-A细胞无显著作用。显著上调SiHa、HeLa细胞内Cle caspase 3、Cle caspase 9、Bax表达,下调Bcl-2表达(P<0.05、0.01、0.001)。结论 EPV可诱导HPV阳性人宫颈癌SiHa、HeLa细胞凋亡,对HPV阴性C-33-A细胞无显著作用,为夏枯草及其制剂在临床上治疗宫颈癌提供依据。     

地榆鞣质提取物对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞增殖的影响

摘 要 目的： 通过观察地榆鞣质提取物（STE）对生长转化因子（TGF-β₁）诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖的影响,探讨地榆在防治肾间质纤维化方面的作用。方法: 将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,实验分为5组：空白对照组、TGF-β₁组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁）、干预1组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+12.5 μg·mL^-1 STE）、干预2组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+25μg·mL^-1 STE）、干预3组（5 ng·mL^-1 TGF-β₁+50μg·mL^-1 STE）,孵育24 h。在倒置显微镜下观察各组细胞形态的改变,并通过CCK8法测定地榆鞣质对细胞增殖的影响。结果: TGF-β₁ 5 ng·mL^-1能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,并促进其细胞形态向纤维化转变,相比于空白对照组具有显著差异（P<0.05）;但与地榆鞣质提取物（STE）共同作用后,其促进细胞增殖的作用受到一定抑制（P<0.05）,细胞形态也趋于正常,且呈剂量依赖性。结论:地榆鞣质提取物能抑制HK-2细胞的增殖,在一定程度上具有防止肾间质纤维化的作用。     

CEA、CYFRA21-1与免疫治疗NSCLC预后的相关性研究★

目的 探讨临床常用的肺部肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1及CA125在肿瘤免疫治疗中的作用。方法 收集我院收治的82例首次接受纳武利尤单抗（3 mg·kg^-1，每2周1次）免疫治疗的非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床资料。分别记录治疗前及治疗6周后CEA、CYFRA21-1、CA125水平以及治疗前后上述指标的差值。所有患者每3个月随访1次，主要生存评估指标为无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）。结果 治疗前CEA<15.675 ng·mL^-1或CYFRA21-1<10.810 ng·mL^-1、治疗6周后CEA差值<2.485 ng·mL^-1或CYFRA21-1差值<3.750 ng·mL^-1与较长的PFS和OS显著相关（P<0.001）。多因素分析结果表明，ECOG评分0~2分的患者可获得较长的PFS；ECOG评分0~2分、CEA差值<2.485 ng·mL^-1的患者可获得较长的OS。结论 治疗前CEA <15.675 ng·mL^-1、CYFRA 21-1<10.810 ng·mL^-1，治疗6周后CEA差值<2.485 ng·mL^-1、CYFRA21-1差值<3.750 ng·mL^-1可能是预测纳武利尤单抗治疗NSCLC患者预后的较为可靠的生物学指标。     

瑞香素对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的抑制作用及其机制研究

目的 探讨瑞香素对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖、迁移及侵袭的抑制作用及其潜在机制。方法 体外培养MDA-MB-231细胞，随机分为对照组和瑞香素10，20，40 μg·mL^–1组。以MTT法检测细胞的增殖情况；通过克隆形成试验检测各组MDA-MB-231细胞克隆形成情况；划痕试验及Transwell观测细胞迁移和侵袭情况；Western blotting检测Vimentin、MMP9、Cyclin D1、CDK4蛋白表达量。结果 与对照组相比，瑞香素组（10，20，40 μg·mL^–1）显著抑制细胞增殖（P<0.05或P<0.01）；瑞香素组（10，20，40 μg·mL^–1）可以抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的克隆形成（P<0.01）；瑞香素组（20，40 μg·mL^–1）细胞的迁移能力和侵袭能力显著下降（P<0.01）；瑞香素组（20，40 μg·mL^–1）细胞Vimentin、MMP9、Cyclin D1、CDK4蛋白表达量显著降低（P<0.01）。结论 瑞香素可以抑制三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖、迁移及侵袭能力，其作用机制可能与下调Vimentin、MMP9、Cyclin D1、CDK4的表达有关。     

右美托咪定复合舒芬太尼对结肠癌根治术后镇痛及免疫功能与应激反应的影响

目的 探究右美托咪定复合舒芬太尼对结肠癌根治术后镇痛及免疫功能与应激反应的影响。方法 选择2016年7月—2018年7月我院收治的行结肠癌根治术的患者96例为研究对象,按照随机数表法分成对照组（n=48）和观察组（n=48）。两组患者手术麻醉方式相同,术后镇痛对照组采用1.0 μg·kg^-1·d^-1舒芬太尼+8.0 mg托烷司琼;观察组采用1.5 μg·kg^-1·d^-1右美托咪定+1.0 μg·kg^-1·h^-1舒芬太尼+8.0 mg托烷司琼;两组患者均采用自控镇痛。分别评价两组患者术后0 h（T1）、4 h（T2）、8 h（T3）、24 h（T4）的镇痛效果（VAS及Ramsay评分）、免疫功能水平（IgG、IgA、IgM、CD4⁺及CD8⁺ T细胞）、应激水平［促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（Cor）、醛固酮（ALD）］、血清S-100β及神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平、不良反应的发生情况。结果 两组患者镇痛效果存在明显差异,同时间点观察组VAS评分明显低于对照组（P<0.05）,Ramsay评分明显高于对照组（P<0.05）;免疫功能与应激反应方面,T4时间点观察组患者免疫功能指标IgG、IgA、IgM、CD4⁺ T细胞水平均明显高于对照组（P<0.05）,CD8⁺ T细胞水平显著低于对照组（P<0.05）,应激指标ACTH、Cor及ALD水平均明显低于对照组（P<0.05）;T1时间点两组患者血清S-100β、NSE水平均无明显差异（P>0.05）,T4时间点观察组血清S-100β、NSE水平均明显低于对照组（P<0.05）;药物安全性方面,观察组恶心呕吐的发生率明显低于对照组（6.25% vs. 20.83%, P<0.05）,心动过缓的发生率明显高于对照组（20.83% vs. 6.25%, P<0.05）。结论 右美托咪定复合舒芬太尼对结肠癌患者的术后镇痛效果好,可增强免疫功能,减轻应激反应,降低血清S-100β、NSE水平。