Survivin、Bcl-2在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织中Survivin、Bcl-2的表达及其与临床病理特征的关系。方法 收集2018年5月—2019年9月间我院收治的86例胃癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织石蜡标本,采用免疫化学染色法检测标本中Survivin与Bcl-2的表达,分析Survivin与Bcl-2与胃癌临床病理特征的关系以及胃癌组织中Survivin与Bcl-2表达的相关性。结果 Survivin与Bcl-2在胃癌组织中的阳性率（80.23%、63.95%）显著高于癌旁正常组织（43.02%、20.93%）,差异均有统计学意义（P<0.001）。Survivin表达阳性与组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（P<0.05）,而与性别、年龄、侵袭深度、肿瘤直径无关（P>0.05）。Bcl-2蛋白表达阳性与淋巴结转移有关（P<0.05）,而与性别、年龄、侵袭深度、组织分化程度、肿瘤直径及TNM分期无关（P>0.05）。Survivin与 Bcl-2共同阳性表达率为58.14%,共同阴性表达率为13.95%,二者在胃癌组织中的表达水平呈正相关（P<0.05）。Survivin与Bcl-2在胃癌组织中同时阳性表达的敏感度、特异度及Youden index均明显高于单项阳性表达（P<0.05）。Survivin与 Bcl-2在胃癌组织中同时阳性表达与单项阳性表达时,患者总生存期和无进展生存期的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 Survivin与Bcl-2在胃癌组织中均呈高表达,均与胃癌的发生发展密切相关,检测其表达水平可为胃癌的临床诊断及治疗提供一定的指导依据,从而改善患者预后。     

胃癌组织中自噬相关蛋白与上皮间质转化的关系及意义★

目的 探讨胃癌组织中自噬蛋白微管相关蛋白轻链3B（LC3B）和上皮间质转化（EMT）标志物的表达及其临床意义。方法 随机选取2018年1月—2019年12月我院收治的胃癌患者术后癌组织110例和癌旁组织40例，采用免疫组织化学法检测LC3B、E-cadherin和vimentin的表达，并分析这些标志物与胃癌患者临床病理特征的关系。结果 与癌旁正常组织相比，胃癌组织中LC3B和vimentin蛋白表达水平显著升高，E-cadherin表达水平显著降低（P<0.05）；LC3B、E-cadherin和vimentin表达水平与肿瘤分化程度、T分期、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05），与年龄、性别和肿瘤大小无关（P>0.05）；LC3B表达与vimentin呈正相关（r=0.320， P=0.001），与E-cadherin呈负相关（r=-0.484， P<0.001）。结论 胃癌组织中LC3B、vimentin表达上调，E-cadherin表达下调，且三者与肿瘤分化程度、T分期、TNM分期及淋巴结转移密切相关，可能作为预测胃癌的潜在生物标志物。     

miR-10b-5p通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性★

目的 探讨miR-10b-5p在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用及相关机制。方法 采用qPCR和Western blotting检测正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231中miR-10b-5p mRNA、SUFU mRNA和蛋白的表达。在MDA-MB-231细胞中转染miR-10b-5p inhibitor对miR-10b-5p进行敲减，6 Gy ⁶⁰Co γ-射线照射2 h，分别采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡水平；双荧光素酶报告实验验证靶基因SUFU，回补实验验证miR-10b-5p是否通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性。结果 3种乳腺癌细胞系中miR-10b-5p的表达均显著高于正常乳腺细胞MCF-10A（P<0.05）。与miR-NC组相比，miR-10b-5p inhibitor组细胞增殖水平明显下降（P<0.05），凋亡水平显著上升（P<0.05）。敲减miR-10b-5p可增加野生型SUFU 3''UTR的荧光强度（P<0.05），而对突变型SUFU 3''UTR的荧光强度无明显影响（P>0.05）。此外，miR-10b-5p inhibitor组SUFU蛋白表达水平显著高于miR-NC组（P<0.05）。与miR-NC+si-NC组相比，miR-10b-5p inhibitor+si-NC组细胞增殖水平显著降低（P<0.05），miR-10b-5p inhibitor+si-SUFU#2组细胞增殖水平明显回升，且高于miR-10b-5p inhibitor+si-NC组（P<0.05）。结论 乳腺癌细胞中miR-10b-5p呈高表达，敲减miR-10b-5p可增强乳腺癌细胞对放疗的敏感性，其机制可能与靶向抑制SUFU相关。     

组织中IL-26表达水平对原发性肝细胞癌肝切除患者预后的预测价值

目的 探讨组织中白细胞介素-26（IL-26）表达水平对原发性肝细胞癌（HCC）肝切除患者预后的预测价值。方法 回顾性分析2011年1月—2014年12月中南大学湘雅医学院附属海口医院行肝切除术的120例HCC患者的临床资料。采用免疫组织化学染色（IHC）方法检测患者癌组织中IL-26的表达，根据IL-26表达水平将患者分为IL-26低表达组（n=62）和IL-26高表达组（n=58）。分析IL-26表达水平与HCC患者临床病理特征及预后的关系；采用Cox比例风险模型对HCC患者术后预后的影响因素进行单因素、多因素分析。结果 HCC患者组织中IL-26表达水平与肿瘤直径>5 cm、微血管侵犯、TNM Ⅲ-Ⅳ期有关（χ²=11.100， P=0.001； χ²=11.257， P=0.001； χ²=6.541， P=0.011）。单因素Cox回归分析结果显示，IL-26高表达、AFP>50 μg·L^-1、肿瘤直径>5 cm、大血管侵犯、微血管侵犯与HCC患者无复发生存时间（RFS）和总体生存时间（OS）有关（P<0.05）；多因素Cox回归分析结果显示，IL-26高表达、肿瘤直径>5 cm、微血管侵犯是HCC患者RFS的独立危险因素（P<0.05），IL-26高表达、微血管侵犯是HCC患者OS的独立危险因素（P<0.05）。Kaplan-Meier法生存曲线显示，IL-26低表达组患者5年RFS和OS高于IL-26高表达组，差异均有统计学意义（χ²=11.002， P=0.001； χ²=8.832， P=0.007）。结论 组织中IL-26高表达的HCC术后患者预后较差，IL-26或许可作为HCC患者一种新的预后指标和抗血管治疗靶点。     

Fibronectin 1促进胃癌细胞耐药及其作用机制研究

目的 探讨纤连蛋白1（FN1）促进胃癌细胞耐药及其作用机制。方法 选择胃癌细胞系MKN45、MKN45/DDP、MKN45/VCR进行pLV-FN1、pLV-NC、FN1 siRNA慢病毒和脂质体3000瞬时转染,将转染pLV-FN1的设为FN1过表达组（FN1）,转染pLV-NC的为阴性对照组（Vector）,转染FN1 siRNA慢病毒的为FN1敲低组（si-FN1）,转染脂质体3000的为空白对照组（si-control）。分别采用qRT-PCR、MTT、克隆形成实验、Western blotting检测FN1 mRNA和蛋白的表达,MKN45/DDP细胞增殖、凋亡、集落形成情况及耐药相关蛋白的表达。结果 FN1 mRNA和蛋白在MKN45和MKN45/VCR细胞中的表达水平均显著低于MKN45/DDP细胞（P<0.05）;FN1敲低组细胞增殖能力显著低于空白对照组（P<0.001）,FN1过表达组细胞增殖能力明显高于阴性对照组（P<0.001）;FN1敲低组细胞凋亡率明显高于空白对照组（P<0.001）,FN1过表达组细胞凋亡率显著低于阴性对照组（P<0.05）;FN1敲低组细胞集落形成能力明显低于空白对照组（P<0.001）,FN1过表达组细胞集落形成能力显著高于阴性对照组（P<0.001）;FN1敲低组MRP-1、p-STAT3、STAT3、p-AKT蛋白表达水平均明显低于空白对照组（P<0.001）。结论 FN1的高表达可能参与胃癌化疗耐药的相关过程,下调FN1表达有助于恢复耐药胃癌细胞对化疗的敏感性,有望为改善胃癌化疗疗效提供新的思路和方法。     

Cofilin1及其Ser3位点磷酸化与老年非小细胞肺癌患者放疗敏感性的相关性研究

目的 探讨Cofilin1及其Ser3位点磷酸化水平与老年非小细胞肺癌（NSCLC）患者放疗敏感性的相关性。方法 选取2013年6月—2015年4月于我院行手术切除、经病理确诊并接受术后放疗的老年NSCLC患者102例,根据疗效分为放疗敏感组（55例）和放疗抵抗组（47例）,检测Cofilin1及其Ser3位点磷酸化蛋白Cofilin1（phospho S3）的表达,并记录患者的生存时间和生存率。结果 放疗抵抗组Cofilin1阳性表达组织的TNM分期和淋巴结转移率均显著升高,而Cofilin1（phospho S3）阳性表达组织显著降低（P<0.05）。放疗抵抗组的Cofilin1阳性表达率显著高于放疗敏感组,而放疗敏感组的Cofilin1（phospho S3）阳性表达率显著高于放疗抵抗组（P<0.05）。淋巴结转移、Cofilin1高表达、Cofilin1（phospho S3）低表达是放疗抵抗的独立预测因素（P<0.05）。放疗敏感组、Cofilin1阴性患者、Cofilin1（phospho S3）阳性患者的无进展生存时间（PFS）较长、5年生存率较高（P<0.05）;放疗敏感组中,Cofilin1阴性和Cofilin1（phospho S3）阳性患者PFS最长、5年生存率最高（P<0.05）;放疗抵抗组中,Cofilin1阳性和Cofilin1（phospho S3）阴性患者PFS最短、5年生存率最低（P<0.05）。结论 老年NSCLC患者的放疗敏感性与Cofilin1表达呈明显负相关,与Cofilin1的Ser3位点磷酸化水平呈显著正相关。Cofilin1及其Ser3位点磷酸化是放疗敏感性的独立预测因素,对老年NSCLC患者的预后评估具有重要意义。     

芹菜素对顺铂化疗所致肾损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

目的 探索芹菜素（APG）对顺铂（DDP）化疗所致肾损伤大鼠的保护作用及机制研究。方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氨磷汀组（阳性对照组）及APG低、中、高剂量组,每组10只。模型组、氨磷汀组及APG低、中、高剂量组大鼠均采用一次性腹腔注射DDP（7.5 mg·kg^-1）的方法建立DDP致肾损伤大鼠模型,空白组大鼠仅腹腔注射生理盐水（不造模）;然后分别腹腔注射给药（APG低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg^-1 APG,氨磷汀组给予1 mg·kg^-1氨磷汀,空白组和模型组均给予生理盐水）,1次/d,连续给药28 d。测定各组大鼠24 h尿蛋白量和血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量,HE染色法、TUNEL法分别行肾脏病理学检查和细胞凋亡检测,生化分析法检测MDA含量和抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性,ELISA法检测炎症细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）水平,Western blotting检测核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、核因子-κB（NF-κB）、激活型半胱胺酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,APG中、高剂量组和氨磷汀组大鼠24 h尿蛋白量和血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善,凋亡指数（AI）显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD、GSH-Px活性显著升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调而NF-κB、Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.01）。与氨磷汀组比较,APG高剂量组大鼠血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善、AI显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD活性显著升高（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调且Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.05）。结论 APG对DDP所致肾损伤大鼠具有保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路而抑制氧化应激损伤、炎症反应和细胞凋亡有关。     

藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究

目的 探索藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞的协同抑制作用及相关调控机制。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,设置空白对照组（DMSO）、藏红花素组（400 μg·mL^-1）、顺铂组（5 μg·mL^-1）、联合组（藏红花素400 μg·mL^-1+顺铂5 μg·mL^-1）。干预48 h后,CCK-8检测HeLa细胞增殖抑制率,采用CompuSyn软件计算藏红花素与顺铂的联合指数（CI）,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting检测激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期蛋白依赖激酶2（CDK2）的表达。结果 与顺铂组比较,联合组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,CI为0.68,具有中度协同效应;细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞比例显著升高（P<0.05）,而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.05）,Cyclin D1、CDK2蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与空白对照组比较,藏红花素组G₀/G₁期细胞比例显著升高而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.01）,Cyclin D1、CDK2表达水平显著降低（P<0.05）。结论 藏红花素联合顺铂可协同抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和生长,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白的表达从而促进细胞凋亡、阻滞细胞周期进程有关。     

miR-101 miR-384在喉癌患者中的表达情况及意义

目的 探讨喉癌患者癌组织微小RNA-101（miR-101）、miR-384表达水平及临床意义。方法 选取2013年10月至2014年12月南阳市中心医院院收治的经手术病理证实的104例喉癌患者,采集患者癌组织及癌旁正常黏膜组织标本,采用荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测组织标本中miR-101、miR-384的表达水平。分析喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量与患者TNM分期、淋巴结转移等临床病理参数的相关性,随访至2019年6月,统计喉癌患者生存时间。结果 喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量分别为（0.66±0.21）、（0.54±0.17）,均高于癌旁正常黏膜组织的（1.18±0.36）、（1.34±0.41）,差异有统计学意义（P<0.05）。喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量与TNM分期、淋巴结转移呈负相关（P<0.05）,与性别、年龄、分型及分化程度均无明显相关性（P>0.05）。miR-101、miR-384高表达患者术后5年生存率为83.6%、84.1%,分别高于低表达患者的64.8%、65.3%,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-101、miR-384在喉癌组织中的低表达与肿瘤发展及转移密切相关,二者表达量的差异可能对患者预后产生影响。     

子宫内膜癌患者人附睾蛋白4含量变化及其与肿瘤组织中凋亡分子表达的相关性

目的 探讨子宫内膜癌患者血清人附睾蛋白4（HE4）含量变化及其与肿瘤组织中凋亡分子表达的相关性。方法 收集2015年9月至2016年9月安徽医科大学第二附属医院收治的子宫内膜癌患者38例,根据病理分期将其分为早期子宫内膜癌组（Ⅰ期）30例、中晚期子宫内膜癌组（Ⅱ~Ⅳ期）8例;另取同期在安徽医科大学第二附属医院门诊接受诊刮治疗的良性疾病患者50例作为对照组。采用电化学发光法测定HE4含量;采用荧光定量PCR法检测肿瘤组织促凋亡基因、抗凋亡基因mRNA表达量。结果 早期子宫内膜癌组和中晚期子宫内膜癌组患者血清HE4含量分别为（125.64±15.82） pmol/L、（243.25±46.83） pmol/L,均高于对照组的（57.38±6.91） pmol/L（P<0.05）。早期子宫内膜癌组、中晚期子宫内膜癌组患者肿瘤组织中促凋亡基因XAF1、ITLN-1 mRNA表达量及Caspase-3蛋白表达量低于对照组,中晚期子宫内膜癌组患者以上分子mRNA表达量低于早期子宫内膜癌组（P<0.05）;早期子宫内膜癌组、中晚期子宫内膜癌组患者肿瘤组织抗凋亡基因Survivin、c-myb、Bax、RLIP76、PTP1B mRNA表达量高于对照组患者,中晚期子宫内膜癌组患者以上分子的mRNA表达量高于早期子宫内膜癌组患者（P<0.05）。经Pearson检验,子宫内膜癌患者血清HE4含量与肿瘤组织促凋亡基因及Caspase-3蛋白表达量呈负相关,与肿瘤组织抗凋亡基因表达量呈正相关。结论 子宫内膜癌患者血清中存在异常高表达的HE4,且其表达量与肿瘤恶性程度直接相关。     

STAT-3及其相关蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨STAT-3与Bcl-2在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 选择2015年1月—12月在我院接受切除手术的胃癌患者100例,收集其癌组织及对应的癌旁组织石蜡标本。采用免疫组织化学染色法检测标本中STAT-3和Bcl-2的表达,分析STAT-3和Bcl-2与临床病理特征的关系,分析STAT-3和Bcl-2对预后的影响。结果 STAT-3和Bcl-2在胃癌组织中的阳性率（73.00%、62.00%）均高于癌旁组织（12.00%、20.00%）,差异有统计学意义（P<0.001）。STAT-3的阳性表达与胃癌患者的侵袭深度、组织学分型、TNM分期及淋巴结转移有关（P<0.05）,与性别、年龄及肿瘤大小无关（P>0.05）;Bcl-2的阳性表达与胃癌患者的侵袭深度、TNM分期、淋巴结转移有关（P<0.05）,与性别、年龄、组织学分型、肿瘤大小无关（P>0.05）。STAT-3与Bcl-2在胃癌组织中的表达水平呈正相关（P<0.05）。STAT-3的阳性表达与胃癌患者的生存时间有关（P<0.05）,Bcl-2的阳性表达与胃癌患者的...     

RAD51基因在结直肠癌中的表达及与预后的关系

目的 探讨RAD51基因在结直肠癌（CRC）中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法 收集72例CRC患者的病理标本（CRC组,n=72）,以及经病理证实无癌细胞存在、距肿瘤边缘>3 cm的肠黏膜组织（癌旁对照组,n=72）。采用qRT-PCR和Western blotting技术对CRC与癌旁组织的RAD51 mRNA和蛋白表达水平进行检测。影响CRC患者预后的因素采用Cox比例风险模型分析。预后分析采用Kaplan-Meier和Log-rank法。结果 CRC组RAD51 mRNA和蛋白相对表达量均高于癌旁对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。CRC组织中RAD51表达水平与TNM分期有关（P<0.05）。RAD51高表达是影响CRC患者5年无瘤生存率和5年总体生存率的危险因素（P<0.05）。RAD51低表达的CRC患者5年总体生存率和5年无瘤生存率均高于RAD51高表达患者（P<0.05）。结论 RAD51在CRC组织中高表达,与TNM分期有关。RAD51高表达的CRC患者预后差,RAD51可能是临床上预测CRC患者预后的一个潜在指标。     

姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制研究

目的 探讨姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测乳腺癌患者癌组织及细胞系中miR-7641表达情况;使用Kaplan-Meier方法作乳腺癌患者生存曲线;采用不同浓度的姜黄素处理细胞,或转染miR-7641 mimic、Anti-miR-7641及pcDNA-PTPN14载体,采用qRT-PCR检测miR-7641表达情况,MTT实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭,western blotting检测Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达水平,采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-7641与PTPN14靶向调控关系。结果 与癌旁组织或乳腺正常上皮细胞比较,miR-7641在乳腺癌患者癌组织及乳腺癌细胞系中高表达（P<0.01、0.001）,且miR-7641能够明显促进乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.05、0.01、0.001）,并促进Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、caspase-3、caspase-8蛋白表达;miR-7641与PTPN14 3''-UTR靶向结合,姜黄素通过miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.01、0.001）,并抑制Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax蛋白表达,促进Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结论 姜黄素可通过下调miR-7641促进PTPN14表达,进而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

The expression of miR-181b,CYLD, CBX-7, BCL2, and p53 in osteosarcoma patients and correlation with clinicopathological factors

Osteosarcoma is a common human malignancy with a high mortality rate worldwide. Recent studies have been focused on understanding the involvement of microRNA (miRNAs) in the pathogenesis of osteosarcoma. Therefore, the present study aimed to measure the expression levels of miR-181a, cylindromatosis (CYLD), chromo box homolog 7 (CBX7), B-cell lymphoma 2 (BCL2), and tumor protein p53 in tumor tissue and adjacent normal tissues in patients with osteosarcoma and its relationship with clinicopathological factors. The expression levels of miR-181a, CYLD, CBX7, BCL2, and p53 were measured in 60 patients with osteosarcoma using quantitative real-time polymerase chain reaction. Finally, we compared the relationship between these gene levels and clinicopathological factors in tumor and healthy tissues. Our results showed that the expression levels of miR-181a, BCL2, and p53 were significantly higher in osteosarcoma tissue in comparison with normal tissues (p < .05). On the contrary, CYLD and CBX7 were downregulated in osteosarcoma tumor tissues compared to adjacent healthy tissues (p < .05). In addition, the expression levels of miR-181a in tumor tissues were strongly correlated with patients' age, tumor size, clinical stage, cancer grade, and lymph node metastasis (p < .05). Our findings highlight new insights into understanding the role of miR-181a in the pathogenesis of osteosarcoma. However, further studies are needed to elucidate miRNA as therapeutic targets for osteosarcoma.     

TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响

目的 探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体（LV11-TUSC3）及对照载体（LV11-NC）,选取过表达TUSC3的SiHa细胞作为LV11-TUSC3组,感染对照载体的SiHa细胞作为LV11-NC组,未感染慢病毒的SiHa细胞作为Con组。采用qRT-PCR检测各组细胞中TUSC3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测TUSC3、E-cadherin、N-cadherin、GRP78、ATF6的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 宫颈癌组织中TUSC3 mRNA表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）。TUSC3表达水平与宫颈癌患者的年龄、肿瘤体积、宫颈浸润深度无关（P>0.05）,而与FIGO分期、淋巴结转移有关（P<0.05）。与Con组和LV11-NC组相比较,LV11-TUSC3组细胞TUSC3 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达上调,N-cadherin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,内质网应激水平降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 TUSC3在宫颈癌组织中表达下调,上调其表达可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭、内质网应激。TUSC3可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。     

circ-LRP6调控miR-515-5p/IL-6通路影响卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨环状RNA低密度脂蛋白受体相关蛋白6（circ-LRP6）对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法 选取44例卵巢癌患者的癌组织及癌旁组织,培养正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3、A2780,采用实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织和细胞中circ-LRP6、微小RNA-515-5p（miR-515-5p）的表达水平;双荧光素酶报告实验检测miR-515-5p与circ-LRP6之间的靶向关系;将circ-LRP6干扰表达载体、miR-515-5p过表达载体、miR-515-5p抑制表达载体与circ-LRP6干扰表达载体转染至卵巢癌细胞SKOV3中,蛋白质印迹法（Western blotting）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9、白细胞介素6受体（IL-6R）蛋白的表达;CCK-8法检测SKOV3细胞活性;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭。结果 与癌旁组织及HUM-CELL-0088细胞相比,卵巢癌组织和SKOV3、OVCAR3、A2780细胞系中circ-LRP6表达水平显著升高,miR-515-5p表达水平显著降低（P<0.05）。双荧光素酶报告实验证实circ-LRP6可靶向负调控miR-515-5p的表达。低表达circ-LRP6或过表达miR-515-5p均可抑制Cyclin D1、MMP2、MMP9、IL-6R的表达,降低细胞活性,抑制细胞迁移和侵袭（P<0.05）。同时,抑制circ-LRP6和miR-515-5p表达可上调SKOV3细胞中Cyclin D1、MMP2、MMP9、IL-6R的表达,增强细胞活性,促进细胞迁移和侵袭（P<0.05）。结论 抑制circ-LRP6表达可能通过上调miR-515-5p抑制IL-6,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭。     

恶性肿瘤干细胞标记物CD44在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的研究恶性肿瘤干细胞标记物CD44在鼻咽癌组织中的表达及与放、化疗疗效之间的关系。方法通过纤维鼻咽镜取30例鼻咽癌组织和10例声带息肉,通过Trizol法提取总RNA后,进行逆转录,SYBR方法进行实时荧光定量PCR反应检测各组织中CD44的表达,对20例初治鼻咽癌病人予诱导化疗加同步放、化疗治疗。结果鼻咽癌组织和声带息肉组织中均表达CD44;鼻咽癌组织CD44表达均高于声带息肉组织;CD44在鼻咽癌组织和声带息肉组织中表达具有明显差异(P<0.05)。鼻咽癌组织CD44表达与N分期的关系有明显差异(P<0.05);CD44表达和T分期、病理类型、性别、年龄、及近期疗效间的关系均无明显差异(P>0.05)。结论鼻咽癌肿瘤组织中有CD44表达,且高于声带息肉组织;CD44的表达与N分期相关;还需扩大病例数,进一步研究加以证明。     

5-对氟苄氧基杨梅醇对人肺腺癌A549-Homo BIRC5体内增殖的抑制作用及机制研究

目的 研究5-对氟苄氧基杨梅醇(myricanol 5-fluorobenzyloxy ether,5FEM)对人肺腺癌A549-Homo BIRC5体内增殖的抑制作用及机制。方法 构建A549-Homo BIRC5裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、溶剂(聚乙二醇400,2.5 mL·kg^-1)组和5FEM低、中、高剂量(20,40,80 mg·kg^-1)组,每组8只。各组每日腹腔注射给药,连续5周,每周测量移植瘤体积用于绘制肿瘤生长曲线,实验结束后处死裸鼠,剥离瘤体并称重。TUNEL法检测移植瘤组织细胞凋亡情况;RT-qPCR测定移植瘤组织中Caspase-9、PARP、Bax、Bcl-2和Survivin的mRNA表达水平;ELISA法检测瘤组织中Caspase-9、Survivin和PARP蛋白含量;免疫组化法检测瘤组织中Survivin、Caspase-9、Cleaved caspase-9、PARP和Cleaved PARP蛋白水平。结果 与模型组相比,5FEM(20,40,80 mg·kg^-1)能够显著减小移植瘤体积和减轻瘤重,呈一定剂量依赖性。TUNEL染色结果显示5FEM干预后肿瘤细胞凋亡较模型组明显增多。RT-qPCR结果显示,5FEM(20,40,80 mg·kg^-1)可以诱导瘤组织中Caspase-9和Bax的mRNA表达显著升高,并诱导Bcl-2、PARP和Survivin的mRNA表达降低。ELISA结果显示,5FEM(40,80 mg·kg^-1)可以显著增加瘤组织中Caspase-9蛋白表达量,并显著降低瘤组织中PARP和Survivin蛋白的表达量。免疫组化结果显示,5FEM(80 mg·kg^-1)处理后瘤组织中Caspase-9、Cleaved caspase-9和Cleaved PARP蛋白表达均显著升高,而PARP和Survivin蛋白表达被不同程度抑制。结论 5FEM可下调Survivin表达,促进Caspase-9和PARP活化,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肺腺癌A549-Homo BIRC5裸鼠移植瘤生长。