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乳腺癌组织P21WAF1基因多态性与蛋白表达的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探讨乳腺癌组织p2 1WAF1DNA多态性与蛋白表达的关系。方法 :分别采用聚合酶链反应单链构象多态性技术 (PCR -SSCP)和免疫组化S -P法检测 10 0例乳腺癌石蜡包埋组织和 4 0例乳腺良性病变组织p2 1WAF1DNA多态性和蛋白表达。结果 :18% (18/ 10 0 )的乳腺癌组织和 5 % (2 / 4 0 )对照组组织分别出现两种p2 1WAF1DNA多态性 ,前者明显高于后者 ,组间有显著差异 (χ2 =3 94 ,P <0 0 5 ) ;5 0 % (5 0 / 10 0 )的乳腺癌组织和 12 5 % (5 / 4 0 )对照组组织表达p2 1WAF1蛋白 ,前者明显高于后者 ,组间有显著差异 (χ2 =16 84 ,P <0 0 1) ;10 0 % (18/ 18例 )的具有p2 1WAF1DNA多态性的乳腺癌组织p2 1WAF1蛋白表达阳性 ,39% (32 / 82 )的无p2 1WAF1DNA多态性乳腺癌组织蛋白表达阳性 ,p2 1WAF1DNA多态性组明显高于无多态性组 ,组间有显著差异 (χ2 =2 1 95 ,P <0 0 1) ;p2 1WAF1DNA多态性与p2 1WAF1蛋白表达呈正相关 (r =0 5 76 ,P <0 0 1)。结论 :乳腺癌组织p2 1WAF1DNA多态性可能产生不同的转录本并生成相应的蛋白质分子。 相似文献
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胃癌中survivin、PTEN、cyclinD1和p53基因的表达及其相关性 总被引:31,自引:2,他引:31
目的 探讨survivin基因表达与胃癌生物学行为及PTEN、cyclinD1、p5 3和凋亡指数 (AI)的相关性。 方法 用免疫组化EnVision法检测 15 6例胃癌组织、4 6例正常胃黏膜和 4 6例癌旁不典型增生组织中survivin、PTEN、cyclinD1和 p5 3的表达以及AI。结果 survivin、PTEN、cyclinD1和p5 3的阳性检测率分别为 6 5 %、4 1%、6 1%和 5 8%。survivin未见核内表达。survivin、cyclinD1和 p5 3表达与胃癌的组织学类型相关 (P <0 0 1,P <0 0 5和P <0 0 1) ;survivin和cyclinD1表达与胃癌的浸润深度相关 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ;4种基因蛋白表达均与淋巴结转移相关 ,survivin的表达与p5 3和cyclin阳性表达呈正相关 ,与PTEN的阳性表达呈负相关 ;survivin、p5 3和cyclinD1高表达均有患者术后 <3年生存期相关 (P <0 0 5 ,P <0 0 1和P<0 0 1) ;survivin阳性组的平均AI为 0 6 1,明显低于survivin阴性组 (P <0 0 1) ;PTEN阳性组明显高于阴性组 (P <0 0 1)。结论 survivin、PTEN、p5 3和cyclinD1基因在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用 ,它们的检测对胃癌恶性度的判定、预后和进一步治疗提供有效的依据。survivin、p5 3和cyclinD1的过表达可作为判断肿瘤术后差的指标 相似文献
3.
目的 探讨p5 3蛋白和p2 7蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化S -P法检测 6 7例乳腺癌中p5 3蛋白和p2 7蛋白的表达情况。结果 6 7例乳腺癌中p5 3蛋白和p2 7蛋白的阳性表达率分别为 5 8 3%和 5 9 7% ,p5 3蛋白的表达与乳腺腋窝淋巴结转移有相关性 (P <0 0 1) ,p2 7蛋白的表达也与乳腺腋窝淋巴结转移有关 (P <0 0 5 ) ,乳腺癌p2 7和p5 3蛋白表达之间无明显相关。结论 p5 3蛋白的过表达和p2 7蛋白的失表达均与乳腺癌发生发展相关 ,二者可作为判断乳腺癌预后的有用指标 相似文献
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目的通过观察人乳腺癌组织中凋亡调节蛋白p53、bcl-2和caspase-3表达,探讨bcl-2、p53和caspase-3在乳腺癌发生、发展过程中的作用及其相互关系,为乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法和图像分析技术对21例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中bcl-2蛋白阳性表达率(52.4%,11/21)明显高于相对正常乳腺组织(19.0%,4/21);乳腺癌组织中p53蛋白阳性表达率(57.1%,12/21)也明显高于相对正常乳腺组织(0%);而乳腺癌组织中caspase-3蛋白阳性表达率(38.0%,8/21)明显低于相对正常乳腺组织(76.1%,16/21)。结论p53、bcl-2和caspase-3蛋白在乳腺癌发生、发展过程中发挥着既独立又协同的作用。 相似文献
5.
大肠癌中survivin基因的表达及相关性研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 探讨survivin凋亡抑制基因的表达变化与大肠癌生物学行为及cyclinD1、bcl 2、p5 3和凋亡指数 (AI)的相关性。方法 利用免疫组织化学EnVision法检测 98例大肠癌、2 4例正常大肠黏膜和 2 9例大肠息肉组织中survivin、bcl 2、cy clinD1,并用TUNEL法测定AI。结果 survivin、bcl 2、cyclinD1和 p5 3在 98例大肠癌组织中的阳性表达率分别为 6 8 37%、6 0 2 %、4 0 8%和 5 2 %。survivin表达在癌细胞胞质内 ,核内未见表达 ,bcl 2表达在细胞质内 ,cyclinD1和 p5 3均在核内表达。survivin的表达与组织学类型和淋巴结转移密切相关 (P均 <0 0 5 ) ,其阳性表达组的AI显著低于阴性组 (P <0 0 1) ,其阳性表达者术后 5年复发转移率均较阴性者显著增高 (P <0 0 1) ,而 5年生存率则显著降低 (P <0 0 5 ) ,survivin表达与bcl 2、p5 3无相关性 ,与cyclinD1表达呈正相关 (P <0 0 5 )。bcl 2和cyclinD1的阳性表达与组织学类型关系密切 (P均 <0 0 5 ) ,bcl 2阳性组的AI明显低于阴性组 (P <0 0 5 ) ,cyclinD1的阳性表达与 5年生存率明显相关 (P <0 0 5 )。 结论 survivin、bcl 2、cy clinD1和p5 3基因在大肠癌的发生、发展中起着不同程度的作用 ,它们的检测对大肠癌恶性程度的判定 ,预后分析和进一步治疗提 相似文献
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Bcl-2和nm23的表达与乳腺癌生物学行为的关系 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究乳腺癌中bcl-2与nm23基因表达的生物学意义及它们之间的相互关系对乳腺癌生物学行为的影响.方法应用免疫组织化学S-P方法对65例乳腺癌石蜡包埋组织进行检测,分析bcl-2与nm23基因表达与乳腺癌病理参数的关系.结果 bcl-2和nm23阳性表达率分别为57.4%、63.1%.bcl-2基因阳性表达与组织学类型、患者年龄、有无淋巴结转移以及肿瘤大小无关(P>0.05);与乳腺癌组织学分级呈正相关(P<0.05),nm23阳性表达与肿瘤大小、组织学类型和患者年龄无关(P>0.05);与乳腺肿瘤的组织学分级和淋巴结转移呈负相关(P<0.05);bcl-2与nm23的表达有相关性(P<0.05).结论 bcl-2阳性表达和nm23阴性的乳腺癌患者细胞恶性程度高,bcl-2与nm23基因共同参与了乳腺癌的发生和发展. 相似文献
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目的探讨B7-H4基因rs10754339、rs10801935和rs3738414等单核苷酸多态性(SNP)位点多态性与黑龙江省妇女乳腺浸润性导管癌预后的相关性。方法取280例乳腺浸润性导管癌患者的外周血提取基因组DNA,利用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR.RFLP)技术进行B7.H4单核苷酸多态性检测,引用统计学软件分析基因多态性与患者临床指标(包括肿瘤大小,淋巴结转移,以及雌激素受体、孕激素受体和P53基因的表达)间的关系(卡方检验计算P值),进而确定该基因与黑龙江省汉族妇女乳腺癌预后的相关性。结果B7-H4基因的rs10754339中,AA和AG基因型发生频率在雌激素受体表达阳性和阴性患者中有统计学差异(Х^2=4.06,P〈0.05;Х^2=3.97,P〈0.05),AA基因型和G等位基因发生频率在孕激素受体表达阳性和阴性患者中有显著差异(Х^2=4.74,P〈0.05;Х^2=5.30,P〈0.05)。rs10801935中,AA基因型和C等位基因发生频率在孕激素受体表达阳性和阴性患者中有显著差异(Х^2=5.36,P〈0.05;Х^2=5.90,P〈0.05),而AC基因型发生频率在P53基因表达阳性和阴性患者中有显著差异(Х^2=5.82,P〈0.05)。结论B7-H4基因多态性与乳腺浸润性导管癌患者雌激素受体,孕激素受体及P53基因的表达有关联,与乳腺癌患者的预后有一定相关性。 相似文献
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bcl-2和p53表达在结直肠癌预后评估中的价值 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨bcl 2和 p5 3表达水平与结直肠癌肿瘤生物学特征及其预后的关系。 方法 应用免疫组化S P法 ,检测93例结直肠癌标本中bcl 2与p5 3蛋白的表达 ,并与临床病理特征进行相关分析。结果 bcl 2蛋白在结直肠癌的阳性表达率为 5 7 0 % (5 3/ 93) ,与淋巴结转移呈负相关 (P <0 0 1) ,p5 3表达阳性率为 4 3% (4 0 / 93) ,与淋巴结转移无相关 (P >0 0 5 ) ,但p5 3表达阳性患者的预后差于 p5 3阴性组 (P =0 0 1)。当分析bcl 2和 p5 3联合表达时 ,Dukes分期及淋巴结转移各组间有差异 (P <0 0 5 )。其中bcl 2 (+) / p5 3(- )表达形式多见于DukesA和B期肿瘤 (4 1 0 % ,2 3/ 5 6 )。经Cox模型多因素分析结果表明 ,淋巴结转移 (P <0 0 1)和 p5 3表达 (P <0 0 1)是结直肠癌独立预后影响因素。其他指标 ,包括bcl 2和 p5 3联合表达情况等均未显示出统计学意义。结论 bcl 2和p5 3表达水平可提示结直肠癌的生物学行为 ,但bcl 2的表达与淋巴结转移状况相关不是一个单独作用的预后指标 ,而 p5 3虽与其它生物学特性关系不大 ,却是一个相对独立的结直肠癌预后指标。 相似文献
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目的 探讨乳腺癌中 p2 7和c erbB 2表达情况和意义。 方法 用免疫组化S P法检测 4 0例乳腺癌中 p2 7和c erbB 2的表达。结果 正常乳腺组织c erbB 2表达阴性 ,癌组织中阳性率为 37 5 % (15 / 4 0 ) ,两者差异有显著性 (P <0 0 0 1)。 4 0例乳腺癌组织中 p2 7高表达率为 32 5 % (13/ 4 0 ) ,正常乳腺组织高表达为 80 % ,两者差异有显著性 (P <0 0 0 1)。p2 7高表达与癌组织分化、淋巴结转移和复发有关 (P <0 0 5 )。结论 基因p2 7和c erbB 2表达异常是乳腺癌产生的机制之一 ,与乳腺癌的发生及发展有关。p2 7可能是乳腺癌的一个重要预后指标 相似文献
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用显微切割技术定点检测诱发大鼠肺癌发生发展各阶段p53、K-ras基因突变与表达 总被引:11,自引:1,他引:11
目的 探讨p5 3、K ras基因突变、蛋白表达在 3 甲基胆蒽 (3 methylcholanthrene ,MCA)和二乙基亚硝胺 (diethylinitrosamine ,DEN)诱发大鼠肺鳞癌发生演进中的作用 ,及其突变与蛋白表达的关系。方法 将大鼠诱发肺癌石蜡标本连续切片 ,切片用于HE染色确定肺癌发生发展的病变阶段 ,及免疫组织化学 (SP法 )检测各阶段p5 3、K ras蛋白表达 ,并用于显微切割 ,定点对位分别切割由正常支气管黏膜上皮细胞演变成癌细胞 ,癌浸润、转移各阶段病灶的主质 ,提取DNA ,用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)检测各阶段p5 3、K ras基因的突变。结果 30例正常支气管黏膜上皮未检测到p5 3、K ras基因突变及其蛋白表达。在 32例支气管黏膜增生和鳞状化生、2 1例不典型增生、12例原位癌、4 3例浸润癌及 17例转移癌组织中 ,p5 3基因突变率分别为 3 1% ,2 8 6 % ,30 0 % ,5 1 2 % ,5 2 9% ;p5 3蛋白阳性表达率分别为 0 ,4 2 9% ,5 0 0 % ,6 0 5 % ,6 4 7% ;不典型增生阶段与增生、鳞状化生阶段相比 ,p5 3基因突变率及蛋白表达率增高 ,差异均有显著性意义 (P <0 0 2 5 ,P <0 0 0 5 ) ,p5 3基因突变及蛋白阳性表达高度相关 (P <0 0 0 5 ,Pearson′sR =0 5 996 )。K ras基因突变率分别为 0 ,4 8% ,8 3% ,9 3 相似文献
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本文报道用化学法全合成降钙素的基因。基因全长113碱基对。采用大肠杆菌偏爱密码子。整个基因分为6个片段合成。用T~4DNA连接酶一次连接成功,序列分析证明合成的基因序列与设计的一致。 相似文献
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目的研究宫颈癌组织中survivin、BCL-X的表达及其相关性。方法用免疫组化SP法检测survivin、BCL-X在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达。结果Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关。Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中BCL-X表达正相关。结论Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良。宫颈癌组织中survivin的表达与BCL-X的表达呈正相关。 相似文献
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目的 分析眼皮肤白化病(oculocutaneom albinism,OCA)患者酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因和P基因的基因突变.方法 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction ,PCR)和变性高效液相色谱(de-naturing high-perfomanee liquia chromatography,DHPLC)技术对3例患者的眼皮肤白化病Ⅰ、Ⅱ型相关基因(TYR和P基因)的外显子进行突变检测,并对DHPLC检出的突变样本进行测序和限制性内切酶分析以验证该突变.针对未见报道的新突变,筛查100名表型正常的无关个体,排除多态的可能.结果 在3例患者中检测出两种P基因突变,未检测到TYR基因突变.其中,患者1的P基因第13外显子发生杂合突变T450M;患者2的P基因发生两个杂合突变,分别是第13外显子T450M和第23外显子G775R;患者3的P基因第23外显子发生杂合突变G775R.P基因第13外显子限制性内切酶分析显示,患者1、2均出现杂合突变T450M导致的Oli I酶切位点部分消失,100名表型正常的无关个体未检出该突变;经检索,T450M为一未见报道的新突变.结论 联合应用PCR、DHPLC、DNA测序和限制性内切酶分析的方法可有效的对白化病进行基因诊断. 相似文献
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目的 探讨 RIT1基因突变和扩增在肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)的发生情况及其与发病的关系。 方法 采用 PCR直接测序法检测 5 0例原发性 HCC患者的肝癌组织和非癌肝组织RIT1基因在所包含的 6个外显子的全序列寻找突变位点 ;并用荧光定量 PCR法检测 RIT1基因的扩增情况。 结果 在 5 0例肝癌组织中 1例出现第 5外显子编码区 2 4 1位核苷酸 G/ C变异 ,其对应密码子改变为GAG81CAG,编码氨基酸改变为 Glu81Gln,该氨基酸变异位于 GTP结合的保守功能域内 ,该病例的非癌肝组织以及其余 4 9例的肝癌组织和非癌肝组织均未发生此种改变 ;在 5 0例肝癌组织和非癌肝组织中均出现 5′- UTR(起始密码子前 2 1位核苷酸 ) G/ C变异 ;在获得有效扩增数据的 4 3例肝细胞癌患者中 ,11例有 2~2 97倍的 RIT1基因扩增 ,扩增率为 2 5 .6 %。 结论 基因扩增是 RIT1基因在肝细胞癌的激活方式之一 ,可能与肝细胞癌的发病有关 ,而点突变方式可能意义不大。 相似文献
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目的通过分析DC-SIGN和DC-SIGNR的基因多态性分布及基因频率在健康人群、HIV-1感染者和HIV-1长期暴露不感染人群(ES)的差别,探讨这两个基因与HIV-1长期暴露不感染的关系。方法纳入三组研究对象,包括健康对照组(160例),HIV-1感染者组(267例),ES组(37例)。扩增DC-SIGN和DC-SINGR基因的颈区重复序列进行分析。结果三组人群DC-SIGN基因型以7/7为主,等位基因呈低度多态性。DC-SIGNR基因型以7/7为主,等位基因呈高度多态性,出现了较多的非7/7基因型,其中等位基因6在三组间以及在HIV-1感染者和ES之间分布的差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 DC-SIGN基因多态性变异很低,对人群HIV-1易感性的研究意义不大;DC-SIGNR基因呈高度多态性,其低频率等位基因6可能是人群对HIV-1不易感的保护因素。 相似文献
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The retinoblastoma (RB) gene was the first tumor suppressor gene identified.It encodes a nuclear phosphoprotein which is differentially phosphorylated during the cell cycle.And the RB gene apparently plays a key role in cell growth regulation.Mutations in RB are seen in virtually all cases of retinoblastoma,and loss of RB gene function has been implicated in the progression of many common human cancers.A number of studies have indicated that replacement of the normal RB gene in RB-defective tumor cells could suppress their tumorigenic activity in nude mice.Preclinical studies also demonstrated that treatment of established human xenograft tumors in nude mice by recombinant adenovirus vectors expressing RB protein resulted in regression of the treated tumor.These studies make the emerging RB gene therapy even more attraction. 相似文献
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目的探讨AEG-1在大肠癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化的方法检测60例正常大肠粘膜、22例大肠腺瘤和60例大肠腺癌中AEG-1的表达。结果大肠腺癌和腺瘤中AEG-1的阳性率分别为91.7%和90.9%,明显高于正常大肠粘膜组织的23.3%,两者之间差异有统计学意义(P〈0.001),其中大肠腺癌的中度阳性率和强阳性率分别为31.7%和60%,而大肠腺瘤分别为63.6%和27.3%,两者差异具有统计学意义(P=0.019);对大肠腺癌中AEG-1表达与肿瘤临床病理特征做相关性分析,结果表明,AEG-1表达强度与肿瘤T、N分期显著正相关(P〈0.05)。结论 AEG-1在大肠癌和大肠腺瘤中表达增强,在大肠腺瘤恶变、大肠癌发生发展过程中发挥重要作用,可作为诊断大肠癌新的生物标记物。 相似文献
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Efficient in-vitro transfer of a 60-Mb mammalian artificial chromosome into murine and hamster cells using cationic lipids and dendrimers 总被引:1,自引:0,他引:1
Non-integrating artificial chromosomes represent a potentially promising approach to ex-vivo and in-vivo gene therapy applications. These large vectors require an efficient means for delivery to target cells. We have evaluated a panel of twenty-one commercially available transfection agents for their ability to mediate the in-vitro transfer of a 60-Mb murine artificial chromosome consisting of mouse major satellite DNA and a payload including a marker gene (hygromycin B) and a reporter gene (lacZ). A rapid screening procedure utilizing iododeoxyuridine-incorporated artificial chromosomes facilitated the assessment of different transfection conditions. The results were confirmed by cytogenetic analysis of positively transfected clones.By transfecting both hamster lung fibroblast cells (V79-4) and murine connective tissue cells [L-M(TK-)], the best results were obtained using either Superfect (cationic dendrimer) or LipofectAMINE 2000 (cationic lipid) with protocols adapted for metaphase chromosome preparation. Transfection efficiencies of 10–4–10–2 (0.01–1%) were routinely observed, and recipient cells were able to maintain expression of the reporter gene over the total length of the experiment. This represents a significant advance over our previous attempts at mass-transfection of artificial chromosomes using microcell fusion, where we routinely achieved efficiencies at least two orders of magnitudes less than reported here. These data are particularly noteworthy given that lipid-mediated gene transfer typically involves transfecting millions of plasmids (1 g of DNA from a 5 kb plasmid is approximately 1.2 × 1011 copies) to each cell whereas the much larger artificial chromosomes comprise only a one-to-one ratio, yet achieve transfection efficiencies of (10–2–10–1), that is, comparable to our results. These data suggest that artificial chromosomes containing therapeutic genes can be successfully delivered to target cells in vitro using well-established transfection agents. 相似文献