实时定量逆转录聚合酶链反应检测大肠癌患者术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的表达及其临床意义。方法采用实时定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术,对68例大肠癌患者及30例健康志愿者（对照组）术前外周血CK20 mRNA和CEA mRNA水平进行检测。结果在对照组中CK20 mRNA和CEA mRNA均无表达,而在大肠癌组中CK20 mRNA阳性表达率为45．6％,CEA mRNA阳性表达率为39．7％,二者联合检测阳性率为55．9％,较单项检测阳性率高（P〉0．05）,二者的表达与性别、肿瘤部位和肿瘤分化程度无明显相关,与肿瘤临床分期、淋巴结转移和肝脏转移明显相关。结论CK20 mRNA和CEA mRNA可作为大肠癌细胞血行播散的标志,联合检测有助于提高肿瘤微转移的检出率及判断预后。     

VEGF和CK20mRNA联合检测在大肠癌病人中的意义

目的探讨大肠癌病人外周血细胞角蛋白(CK20 mRNA)和肿瘤组织VEGF蛋白作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法检测63例大肠癌术中抽取的外周血CK20 mRNA和手术切除肿瘤组织中VEGF蛋白的表达,并对所测结果进行分析和比较。结果高、中分化和低、未分化大肠癌病人的CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为30.0%、50.0%和84.6%、92.3%,均有非常显著性差异(P<0.01)。DukesA、B期和C、D期大肠癌病人CK20 mRNA和VEGF的阳性率分别为32.4%、56.8%和53.8%、61.6%,无显著性差异(P>0.05)。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定的阳性率分别为41.3%和58.3%,联合检测时阳性率升至69.8%,有非常显著性差异(P<0.01)。结论大肠癌病人外周血CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF可作为衡量术后复发转移的有效指标;两者联合检测时,敏感性显著提高。     

定量RT-PCR检测结肠癌患者门静脉血CK20 mRNA的表达

目的 检测结肠癌患者门静脉血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达水平,并探讨其临床价值。方法 采用实时荧光定量RT-PCR检测31例病理学确诊的结肠癌患者门静脉血和20例健康对照者外周血CK20mRNA的表达水平。结果 结肠癌患者中CK20mRNA阳性率为25.81%,而对照组阳性率为5%,两者相比差异有统计学意义（P〈0.025）。随着临床分期的具体化,患者门静脉血中CK20mRNA表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义（P〉0.05）。DukesLC期与D期患者中〉10拷贝/ml者高于A期与B期患者。结论 术中检测结肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达水平,对判断肝脏微转移有一定的提示意义。     

荧光定量聚合酶链反应检测大肠癌外周血角蛋白19、20的联合表达

目的研究大肠癌患者外周血CK19、CK20mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术,检测大肠癌患者术前外周血CK19、CK20mRNA,并将其与临床、病理各项指标进行统计学分析。结果45例大肠癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性率31.11%(14/45);CK20mRNA阳性率15.56%(7/45);联合检测CK19、CK20mRNA阳性率37.78%(17/45),较单项检测有明显提高。统计结果显示联合检测CK19、CK20mRNA与临床分期(χ2=4.54,P<0.05)、病理类型(χ2=5.66,P<0.05)、外周血CEA值(χ2=9.94,P<0.01)相关,差异有显著性。结论CK19、CK20mRNA是检测大肠癌微转移的标志物,对有外周血CK19、CK20RNA升高的患者应给予有效的免疫治疗、化疗和手术,并加以密切随访,以阻止微转移向转移灶的转变。     

结直肠癌患者血液中CK20mRNA的表达

目的探讨结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法检测61例结直肠癌患者术前外周血和术中门静脉血以及20例健康自愿者与10例结直肠息肉患者外周血中CK20 mRNA表达。结果 61例结直肠癌患者术前外周血CK20 mRNA表达阳性率为41.0%(25/61),术中门静脉血中CK20mRNA表达阳性率为45.9%(28/61),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结直肠癌患者外周血和门静脉血中CK20 mRNA表达均与肿瘤TNM分期?浸润深度?远处转移和区域淋巴结转移有关(P<0.05)。20例健康自愿者和10例结直肠息肉患者外周血中均无CK20 mRNA表达。结论 CK20是结直肠癌患者血液中反映微转移较为特异的肿瘤标志物,结直肠癌患者血液中CK20 mRNA表达与肿瘤的分期、浸润和转移有关。     

鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达和临床意义

目的 研究大肠癌患者外周血鸟苷酸环化酶C的表达,探讨其临床意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测大肠癌患者术前外周血鸟苷酸环化酶C的表达,并分析临床、病理各项指标.结果 8例非肠管肿瘤患者外周血中GC-C mRNA检测均为阴性(0/8),52例大肠癌患者外周血中GC-C mRNA检测阳性率为50%(26/52),外周血GC-C mRNA的表达与肿瘤浸润深度、脉管瘤栓的差异有统计学意义(P＜0.05),而与外周血CEA无统计学意义,联合检测外周血CEA和GC-C mRNA,可提高大肠癌患者血液微转移检测的阳性率.DukesA、B、C和D期大肠癌患者GC-C mRNA的阳性率分别为0(0/3)、47.06%(8/17)、52.38%(11/21)、63.63%(7/11),随临床分期的增加,大肠癌患者外周血中GC-C mRNA的阳性表达率有上升的趋势,但是二者之间的差异无统计学意义.结论 GC-C在大肠癌患者外周血中有不同程度的表达,是大肠癌微转移的诊断和术后随访监测中有较高临床应用价值的新的肿瘤标记物,并可用于肠源性肿瘤的来源判定.     

手术操作对胃癌细胞外周血播散的影响及其危险因素

目的研究手术操作对胃癌细胞外周血播散的影响及其危险因素。方法45例胃癌患者于胃癌根治手术前后即刻分别取外周血,采用RT-PCR的方法测定外周血中癌胚抗原(CEA) mRNA的表达情况。10例健康体检者和3例因胃溃疡而行胃大部切除术者为对照组。结果胃癌患者手术后CEA mRNA阳性率[48.9%(22/45)]显著高于手术前[8.9%(4/45)](P=0.000);对照组外周血CEA mRNA的表达皆阴性。手术后CEAmRNA阴性组手术时间(2.46±0.51)h,阳性组则为(3.19±0.48)h,P=0.000;早期胃癌组CEA mRNA阳性率10.0%(1/10),进展期胃癌组CEA mRNA阳性率54.8%(17/31),P=0.034;差异均有统计学意义。多因素Logistic回归分析显示,手术时间和肿瘤侵犯深度为手术后CEA mRNA阳性率升高的危险因素。结论手术操作可导致胃癌肿瘤细胞播散进入血液循环,手术时间和肿瘤侵犯深度为重要的危险因素,随着手术时间的延长和肿瘤侵犯深度的增加,肿瘤细胞播散入血的可能性增加。     

联合检测大肠癌组织中血管内皮生长因子与门静脉血细胞角蛋白20mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌病人肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和门静脉血细胞角蛋白20（cytokeratin,CK20）mRNA作为血行播散标志物的临床意义。方法RT-PCR技术检测63例大肠癌病人门静脉血CK20mRNA表达阳性率,免疫组织化学方法检测肿瘤标本VEGF蛋白的表达。结果随着病情由Dukes A、B期向Dukes C、D期进展,门静脉血CK20 mRNA表达的阳性率由64．9％升高到96．2％（P〈0．01）。高、中分化肿瘤组织VEGF蛋白阳性率为50．0％,低、未分化时升高到92．3％（P〈0．01）。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定时,阳性率分别为77．8％和58．7％,联合检测时阳性率显著升高（92．1％）。结论大肠癌病人门静脉血中CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF作为衡量大肠癌浸润能力的指标,二者表达分别与Dukes分期和肿瘤恶性程度的关系密切。联合检测二者时,敏感性显著提高,可弥补单项指标检测的不足,值得在临床上推广。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测食管癌患者循环肿瘤细胞及其意义

目的 探讨实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(fqRT-PCR)技术评价食管癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的临床价值.方法 以43例病理确诊的食管鳞癌及10例胸部良性疾病患者为研究对象,将癌胚抗原(CEA)作为检测标志物,应用fqRT-PCR方法定量检测其外周血CEA mRNA表达及拷贝数,评价食管鳞癌患者CTCs状况.结果 食管鳞癌患者外周血CEA mRNA阳性表达率为46.51%(20/43),胸部良性病变患者外周血未见阳性表达;其阳性率随肿瘤TNM分期增高;Ⅲ、Ⅳ期患者CEA mRNA阳性率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.05),但Ⅰ、Ⅱ期患者之间及Ⅲ、Ⅳ期患者之间差异无统计学意义(P＞0.05);外周血CEA mRNA拷贝数在Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者(P＜0.01);但在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者间其拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05).CEA mRNA表达与癌细胞分化程度无明显相关.随访结果:外周血CEA mRNA阳性表达者其转移预测特异性为81.25%(13/16).结论 fqRT-PCR检测食管癌患者外周血CEA mRNA有较高的敏感性和特异性,是监测食管癌CTCs较为可靠的一种方法.     

大肠癌患者外周血中癌胚抗原mRNA的表达及意义

目的 探讨癌胚抗原（CEA） mRNA在大肠癌患者外周血的表达及临床意义.方法 应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CEA mRNA的表达.结果 健康人、大肠良性腺瘤患者中CEA mRNA均不表达,大肠癌患者中有48例表达,表达率为53.3%,前两组与大肠癌组比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）;大肠癌患者中CEA mRNA表达率与肿瘤分期、肿瘤转移及复发有显著相关性（P值均＜0.05）.结论 CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性,同时CEA mRNA可作为判断大肠癌患者预后的指标.     

门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测对早期诊断结直肠癌肝转移的意义

目的动态检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况，探讨其对早期诊断结直肠癌肝转移的临床意义。方法40例结直肠癌患者随机分为两组（各20例），实验组术中留置门静脉埋植式给药装置（implantable drug delivery system，IDDS），术后常规随访加用荧光定量RT—PCR方法动态检测门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况；对照组常规术后随访。结果两组病例术后发生肝转移的时间和比例无显著性差异，发生肝转移的病例中，在影像学检查检出病灶的同时，几乎均有外周血CEA的增高，3例未发生肝转移的病例也可见外周血CEA的增高，实验组发生肝转移的病例则在影像学检查检出病灶之前3-9月即有门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达阳性。结论门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测比外周血CAE检测和影像学检查更敏感、特异性更高，是早期诊断结直肠癌肝转移的有效方法。     

联合检测大肠癌患者外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的临床意义

目的　探讨同时检测两种肿瘤标志物与大肠癌预后的关系。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法联合检测 10 2例行根治性手术的大肠癌患者外周血中细胞角蛋白 (CK)2 0mRNA和癌胚抗原 (CEA)mRNA ,并随访 3年。结果　大肠癌组CK2 0mRNA、CEAmRNA的阳性表达率分别为 60 .78% (62 /10 2 )和 64 .71% (66/10 2 ) ,均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;CK2 0mRNA和CEAmRNA均阳性表达组患者的 3年复发率和死亡率分别为 5 5 .0 0 %和 5 0 .0 0 % ,显著高于CK2 0mRNA和CEAmRNA均阴性表达组及单一阳性表达组 (P <0 .0 1)。结论　CK2 0mRNA和CEAmRNA均阳性表达是大肠癌患者外周血存在癌细胞的重要证据 ,提示预后不良。     

检测细胞角蛋白19和20对结直肠癌微转移的诊断意义

目的探讨检测细胞角蛋白19（CK19）和CK20的表达对结直肠癌微转移的诊断意义。方法采用RT-PCR方法检测44例结直肠癌患者（结直肠癌组）及18例非恶性病变腹部手术患者（良性病变组）门静脉血和外周血CK19和CK20的表达。结果良性病变组患者门静脉血和外周血均无CK19或CK20阳性表达。结直肠癌组患者外周血和门静脉血中CK19和（或）CK20均阳性表达者34例（77．3％）。与良性病变组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组外周血CK19和CK20的阳性表达率分别为36．4％和52．3％．门静脉血则分别为59．1％和72．7％,高于外周血的阳性表达率（P〈0．05）：Ⅲ期结直肠癌患者CK19和（或）CK20的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）。外周血CK19和（或）CK20阳性表达者术后转移或复发率61．5％,明显高于仅在门静脉血中CK19和（或）CK20阳性者的25．0％（P〈0．05）。结论外周血和门静脉血中CK19和CK20的RT—PCR检测是判断结直肠癌患者有无血行微转移的敏感和特异性诊断方法之一。     

结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA检测的临床意义

目的:检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA的表达情况,探讨其临床意义.方法:用实时定量荧光逆转录聚合酶链(FQ-PCR)方法,检测了72例结直肠癌患者门静脉及周围静脉血CK20mRNA的表达.结果:结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达的阳性率72%(52/72)高于周围静脉血43%(31/72)(P＜0.001),结直肠癌DukesC、D期门静脉血CK20mRNA高于A、B期(P＜0.001).结论:门静脉血CK20mRNA表达的检测比周围静脉血检测更准确、敏感,是判断体内隐性播散和愈后的可靠方法.     

CK19/20检测对结直肠癌微转移的诊断意义

目的 探讨 CK19/20mRNART-PCR检测对结直肠癌微转移的诊断意义。方法 采用RT-PCR逆转录多聚酶链反应）方法检测42例结、直肠癌患者及对照组6例非恶性病变腹部手术患者骨髓血、门静脉血和外周血CK19mHNA及 CK20 mRNA的表达。结果 对照组6例患者无 CK19及 CK20阳性表达,CK19及CK20在42例结、直肠癌患者骨髓血、门静脉血及外周血中阳性表达分别为24/42、21/42、11/42及27/42、18/42、11/42,两间无显著差异（P>0.05）,骨髓和门静脉中表达比外周血高（P<0.01）,Dukes　C 期患者表达高于Dukes A、B期（P<0.05）。结论 CK19、CK20的RT-PCR检测是较敏感和特异的结、直肠癌微小转移指标,阳性表达患者有较高发生远处转移的危险。     

Carcinoembryonic antigen (CEA) levels of peripheral and portal blood and tumor histopathology in colorectal cancer

Correlation between CEA levels of peripheral and portal blood and 9 histopathologic variables were examined in 66 patients with colorectal cancer. CEA levels of portal blood (mean 26.6ng/ml and positive rate more than 5ng/ml, 59.1%) were significantly higher than those (8.1ng/ml and 33.3%) of peripheral blood. Elevation of CEA levels in portal and peripheral blood were most highly correlated with the grade of vein invasion and its location in the layer of colorectal wall, although the levels were related to the other 8 histopathologic variables such as tumor size, the grade of node metastases, Dukes stage and so on. CEA levels of portal blood elevated from 19.4ng/ml and 40% to 43.6ng/ml and 90.2% respectively following operative stimuli to cancer lesions with vein invasion, but the levels did not elevated in the lesions without its invasion. CEA levels of peripheral blood were as low as 5ng/ml in 3 out of 8 patients with liver metastases. However, the levels in portal blood were much higher than 5ng/ml in all the patients. These results suggested that CEA might be hematogenously drained by portal system from cancer cells in the invasive veins, but not by thoracic duct of lymphatic system, and also that the measurement of CEA in portal blood might be available to predict the vein invasion of cancer lesions and liver metastases in patients with colorectal cancer.     

大肠癌患者门静脉血癌细胞的检测及临床意义

目的 探讨门静脉血管癌细胞与大肠癌肝转移的关系。方法 以非核素ＲＴ－ＰＣＲ方法,对５４例大肠癌患者门静脉血中结肠癌细胞的标志物细胞角质蛋白２０（ＣＫ２０）进行了检测。结果 ５４例中,４１例门静脉血中检出ＣＫ２０阳性表达,阳性率７５．９％,ＣＫ２０阳性检出与Ｄｕｋｅｓ分期,肝转移存在显著性相关,随着Ｄｕｋｅｓ分期的进展ＣＫ２０阳性率显著增加,随访发现,门静脉血ＣＫ２０扩增阳性者,术后发生肝转移机会增