内毒素性急性肺损伤小鼠肺组织中P38MAPK的表达

目的探讨内毒素性急性肺损伤(ALI)过程中P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)的表达。方法腹腔注射脂多糖(LPS)20mg/kg建立小鼠ALI模型。心脏穿刺查血气分析,并获取肺脏标本,观察肺组织形态学改变。采用免疫组织化学法和Western blot技术检测小鼠肺组织中磷酸化P38MAPK的表达。结果与对照组比较,ALI组各时相点小鼠肺组织中磷酸化P38MAPK阳性表达明显增加,且在2h达到峰值,主要分布于浸润的炎症细胞、上皮细胞、血管内皮细胞。结论内毒素性ALI过程中启动了P38MAPK信号传导通路。     

米屈肼对小鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的:探讨米屈肼(mildronate,MIL)对脂多糖(lipopolysacharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及机制?方法:将50只小鼠按随机数字表法分为5组?其中4组为脂多糖诱导的急性肺损伤模型组(气管内滴注0.1ml LPS 2 mg/kg),分别为单纯模型组(LPS组)?低剂量米屈肼干预组(MIL 50 mg/kg组)?中剂量米屈肼干预组(MIL 100 mg/kg组)和高剂量米屈肼干预组(MIL 200 mg/kg组),每组10只;造模前6 d,后3组小鼠分别腹腔注射2%的米屈肼50?100?200 mg/kg,LPS组腹腔注射等体积的生理盐水,每天1次,连续6 d?另一组为正常对照组(NS组,10只),同时间按同样方法注射等体积生理盐水?各组于气道内滴注LPS后4 h时,处死小鼠,取肺组织,测量肺组织湿干重比(W/D);采用免疫组织化学方法,测定肺组织细胞中NF-?资Bp65的表达;采用ELISA方法测定肺组织中IL-1β?IL-6的水平;光镜下观察肺组织病理变化?结果:模型组的肺组织湿干重比?肺组织细胞中NF-?资Bp65表达和肺组织中IL-1β?IL-6的水平高于对照组(P < 0.01);各干预组的上述指标均高于对照组(P < 0.01),但是低于模型组(P < 0.05),3个干预组间差异无统计学意义?模型组肺泡充血水肿?炎性细胞浸润明显;3个干预组,上述现象减轻?结论:米屈肼能减轻小鼠内毒素性急性肺损伤?可能与下调NF-?资Bp65的表达,减少炎性细胞因子IL-1β?IL-6的生成有关?     

甲泼尼龙对内毒素性急性肺损伤大鼠炎症介质的影响

目的探讨应用甲泼尼龙对内毒素所致急性肺损伤大鼠的防治作用及可能机制。方法静注脂多糖（6 mg/kg）制成ALI模型,54只大鼠随机分为生理盐水对照组、内毒素损伤组、甲泼尼龙组（内毒素＋甲泼尼龙）。采用放射免疫（ELISA）方法检测大鼠血清TNF-α、IL-8和IL-10水平,并进行肺湿/干重比（W/D）测定。结果与对照组比较,ALI组各时相点大鼠肺组织中3种炎症因子水平及W/D值均明显上升,差异有统计学意义（P〈0.05）,表达峰值时间：TNF-α为4 h,IL-8为2 h,而IL-10为8 h。结论甲泼尼龙可降低内毒素致大鼠ALI血清TNF-α、IL-8和IL-10水平,对大鼠ALI有防治作用。     

炎性介质与重症急性胰腺炎肺损伤

急性肺损伤是重症急性胰腺炎最常见的并发症之一,其病理生理机制尚未明确。近年来的研究发现白介素、肿瘤坏死因子α、氧自由基、磷脂酶A2、血小板活化因子、血栓素A2、内皮素、高迁移率族蛋白B1、白血病抑制因子、一氧化氮等炎性介质,通过彼此的相互作用和影响,在重症急性胰腺炎相关肺损伤进程中起着重要作用。这方面的研究进展为制定有效的防治措施提供了可靠的理论依据。     

水通道蛋白1、3、4、5在内毒素性急性肺损伤小鼠肺组织中的表达

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白(AQP)1、3、4、5的表达变化,探讨水通道蛋白1、3、4、5表达与急性肺损伤的关系.方法:40只健康雄性的C57BL/6小鼠随机分为LPS 4 h组、LPS 6 h组、LPS 8 h组、LPS 10 h组(以LPS诱导ALI模型)和对照组,每组8只.采用实时定量PCR测定小鼠AQP-1、AQP-3、AQP-4和AQP-5 mRNA表达,免疫组化和Western印迹法观察AQP-1、AQP-3、AQP-4和AQP-5蛋白表达,同时进行肺湿/千重比值测定以及肺组织病理染色.结果:LPS 4 h、6 h、8 h、10 h组肺湿/干重比值(4.39±0.19、4.58±0.17、4.87±0.21、5.28±0.16)明显高于对照组(3.99±0.25,P＜0.05).LPS灌注后4 h AQP-1蛋白量减少至对照组的(74.1±5.2)%,AQP-5降至对照组的(70.3±7.1)%;LPS灌注后8 h AQP-1蛋白量减少至对照组的(45.2±4.4)%,AQP-5降至对照组的(38.6±8.9)%.AQP-3和AQP-4的表达没有明显变化.结论:AQP-1和AQP-5可能参与ALI液体的异常转运,可能与肺水肿的发病机制有关.AQP-3和AQP-4可能不参与ALI肺水肿的形成过程.     

高容量血液滤过对内毒素诱导犬急性肺损伤肺组织炎症介质的影响

目的探讨高容量血液滤过（HVHF）对内毒素诱导犬急性肺损伤（ALI）肺组织炎症介质的影响。方法选择健康杂种雄性犬16条,经中心静脉注入内毒素,建立急性肺损伤模型,成模后将16只犬随机分为对照组和治疗组,每组8只。对照组行机械通气治疗＋体外循环;治疗组行机械通气＋HVHF治疗。测定实验4h后2组肺组织上清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）的水平。结果治疗组治疗4h后肺组织上清中TNF-α、IL-6、IL-10水平均较对照组下降（均P〈0.01）。结论HVHF能降低内毒素诱导ALI犬肺组织中TNF-α、IL-6、IL-10的水平,减轻肺内炎症反应,提示HVHF有望成为治疗ALI的新手段。     

内毒素急性肺损伤大鼠肺组织survivin表达研究

目的探讨内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中survivin表达情况及其与肺损伤发生发展关系。方法建立内毒素急性肺损伤大鼠模型,应用苏木精．伊红染色、免疫组化及RT-PCR方法,观察内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中是否存在survivin阳性表达,且在注射内毒素后不同时间：量上表达水平的变化,分析该变化与肺损伤程度的关系。结果与对照组比较,内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中存在survivin阳性表达（P〈0．05）。注射内毒素2h时,survivn在肺组织中出现表达,6h表达水平达顶峰,之后逐渐下降趋势,各时间组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论内毒素急性肺损伤时,survivin在肺组织中存在阳性表达,且表达水平与肺损伤程度密切相关,提示survivin可能参与了内毒素急性肺损伤早期的病理生理过程。     

银杏叶提取物注射液对实验性急性肺损伤大鼠炎症介质的影响

目的通过观察银杏叶提取物注射液(金纳多)对脂多糖(LPS)导致的急性肺损伤大鼠炎症介质释放的影响,从而探讨金纳多对急性肺损伤的保护作用。方法63只大鼠随机分成对照组(尾静脉注射生理盐水)、肺损伤组(尾静脉注射LPS,5mg/kg),治疗组(尾静脉注射LPS5mg/kg 金纳多17.5mg/kg),每组21只。注射后2、6、10h各组分别取7只大鼠获得肺泡灌洗液和血液标本以及肺组织切片,进行检测。结果损伤组中肺系数(0.345±0.031)、肺泡灌洗液总蛋白含量(242±3.97)ng/ml,肺通透指数(2.86±0.85)以及血液中肿瘤坏死因子-α[TNF-α,(2.48±0.12)]g/ml、白介素-6[IL-6,(0.546±0.099)ng/ml]、一氧化氮([NO,(72.9±5.3)mmol/L]均较对照组0.252±0.027,(65.04±2.57)ng/ml,0.75±0.13,(0.88±0.04)ng/ml,(0.078±0.004)ng/ml,(21.8±1.5)mmol/L明显上升(均P<0.05),肺组织病理切片显示肺泡结构破坏严重,而应用金纳多后治疗组各项指标为0.271±0.03、(143.19±13.04)ng/ml,1.67±0.97,(1.64±0.24)ng/ml,(0.18±0.055)ng/ml,(39.7±5.6)mmol/L有明显下降(P<0.05),并且肺泡结构破坏程度减轻。结论应用金纳多LPS导致的实验性肺损伤大鼠的炎症介质释放过程有抑制作用,肺泡破坏减轻,提示银杏叶提取物注射液可以减轻大鼠实验性肺损伤的程度,可以保护肺组织。     

急性肺损伤小鼠核转录因子-kB表达意义

研究ＮＦ－ｋＢ在肺多糖诱发的急性肺损伤中的动态表达，证实ＮＦ－ｋＢ参予炎症反应中的信号转导过程，方法纯种雄性昆明小鼠３６只随机分６组，正常对照及不才病组，致病组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测正常鼠及致病发鼠肺组织中ＮＦ－ｋＢ的总蛋白含量，进行统计学处理。     

急性肺损伤小鼠NF-κB的表达

目的：研究核转录因子-κB(nuclearflactor-κB，NF-κB)在急性肺损伤的动态改变，以期找到NF-κB在肺损伤中的作用。方法：25只雄性小鼠随机分为5组，正常对照及不同时间点致伤组，致伤组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模型，采用免疫印迹和免疫组化法检测正常鼠及致伤鼠肺组织中NF-κB的表达。结果：脂多糖注射后1hNF-κB即开始增高，3h达高峰，随后开始下降。结论：NF-κB可能是急性肺损伤发病中的一个关键性因子。     

积雪草苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的观察积雪草苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的保护效应。方法56只Balb/c小鼠随机分为对照、假手术、模型、溶媒、积雪草苷(5、15、45 mg/kg)7组,每组8只。LPS(2.5 mg/kg)气管滴注造ALI模型,24 h后HE染色观察小鼠肺组织病理改变,计算肺湿质量/干质量值;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)后行白细胞计数和分类,BCA法检测其蛋白的量;化学法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性减轻LPS所致ALI模型肺组织病变情况,减轻肺水肿,减轻中性粒细胞的浸润,抑制蛋白渗出。抑制肺组织中MPO活性。结论积雪草苷对LPS诱导ALI有保护效应。     

水通道蛋白-1在急性肺损伤中的表达及意义

[目的]探讨水通道蛋白1(AQP-1)在脂多糖(LPS)所致的急性肺损伤(ALI)中的作用.[方法]根据是否腹腔注射脂多糖(LPS)将实验动物分为脂多糖组(LPS组)及生理盐水对照组(Con组),对比两组动物组织病理学改变、动脉血气、肺湿/干重比及AQP-1表达的差异.[结果]光镜下见LPS组肺组织水肿,大量炎性细胞浸润;LPS组P02(55.07±17.02)mmHg明显低于Con组(97.35±9.37) mmHg,差异有显著性意义,P＜0.05;LPS组肺湿/干重比(4.93±0.16)明显高于Con组(4.11±0.69),差异有显著性意义,P＜0.05;免疫组化染色显示:LPS组的AQP-1蛋白表达减弱,荧光实时定量PCR证实LPS组的AQP-1 mRNA表达较对照组明显下降(P＜0.01).[结论] AQP-1参与了急性肺损伤的形成.     

桃叶珊瑚苷减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的：探讨预防性给予桃叶珊瑚苷(aucubin,AU)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤 (acute lung injury,ALI)的作用。方法：以成年雄性BABL/c小鼠为研究对象,随机分为对照组、ALI组和AU处理组,每 组16只。气管注射LPS(5 mg/kg)复制ALI小鼠模型,AU处理组于造模前30 min腹腔注射AU(10 mg/kg)。LPS注射6 h后处 死小鼠,采用HE染色检测肺组织形态学改变,并进行损伤评分;采用real-time PCR法检测小鼠肺组织炎症因子肿瘤坏 死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)的mRNA表达;收集小鼠支气管肺泡灌洗 液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)进行细胞计数、检测BALF中的总蛋白量、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH) 活性以及TNF-α和IL-10的蛋白含量。结果：与ALI组小鼠相比,AU处理组小鼠肺组织病理损伤明显减轻、损伤评分降 低,BALF总细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数目显著减少,LDH活性和总蛋白含量亦明显降低(均P<0.01)。同时,AU 可减少ALI小鼠肺内TNF-α mRNA和蛋白的表达,增加IL-10 mRNA和蛋白的表达(均P<0.01)。结论：AU可减轻LPS诱导 的小鼠ALI。     

递增剂量脂多糖致伤对大鼠SIRS-肺损伤的影响

目的 梯级剂量脂多糖（LPS）致伤对大鼠全身炎症反应综合征（SIRS）-肺损伤严重程度的影响。方法 经Wistar大鼠尾静脉注射梯级剂量LPS（2、4、6、8mg/kg）致伤,观察呼吸频率、死亡率,检测PaO2、观察外周血WBC计数及分类大白细胞构成比、观察肺W/D值以及病理学检查。结果 ①LPS致伤,可以导致大鼠呼吸困难,PaO2降低,外周血WBC计数异常（LPS）小剂量使其升高,大剂量使其降低）,外周血大白细胞构成升高,肺组织W/D值升高,肺病理改变加重;②LPS≥6mg/kg致伤,上述变化非常显著。结论 ①LPS致伤,可以诱发大鼠发生SIRS-肺损伤;②LPS 6mg/kg是导致大鼠SIRS-肺损伤失控,发生ARDS的临界剂量。     

法舒地尔对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致小鼠败血症继发急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及机制?方法:C57BL/6小鼠随机分为对照(Control)组?LPS模型组?LPS+fasudil(10 mg/kg)组?LPS + 地塞米松(dexamethasone,Dex,5 mg/kg)组?造模后观察不同时间点各组生存率,6 h处死小鼠收集血清?支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)?肺组织,ELISA测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)?白细胞介素(IL)-1β?IL-10水平,检测BALF中细胞计数和蛋白浓度,HE染色观察各组肺组织病理改变,湿干重比评估肺含水量,ELISA测定肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量?结果:fasudil可显著改善动物生存率?延长生存时间;缓解肺组织炎性损伤及肺水肿程度,降低MPO含量,下调血清中促炎细胞因子IL-1β?TNF-α水平,上调抗炎细胞因子IL-10表达?结论:fasudil可有效缓解LPS所致的小鼠ALI,其作用可能与减轻受累肺组织炎症反应相关?     

己酮可可碱对内毒素肺损伤大鼠炎性细胞因子变化的干预作用

目的　观察内毒素性肺损伤大鼠肺组织及外周血炎性细胞因子的变化 ,探讨己酮可可碱 (pentoxifylline ,PTX)的干预作用。方法　 72只雄性Wistar大鼠分为 :①内毒素 1h组 (n =6) ,②内毒素 2h组 (n =6) ,③内毒素 4h组 (n =6) ,④内毒素 6h组 (n =12 ) ,⑤生理盐水对照组 (n =12 ) ,⑥PTX 1h组 (n =6) ,⑦PTX 2h组 (n =6) ,⑧PTX 4h组 (n =6) ,⑨PTX 6h组(n =12 )。采用静脉注射LPS的方法复制内毒素性肺损伤模型 ,PTX组致伤后立即静脉注射PTX 2 0mg/kg ,并以 6mg·kg-1 ·h-1 维持。各组动物于设定的时相点放血活杀 ,用ELISA法或胸腺细胞增殖法测定血清TNF α、IL 6、IL 8含量及IL 1活性 ;斑点杂交检测肺组织中TNF α、IL 1β、IL 6、IL 8mRNA表达。 结果　①内毒素致伤后各组肺组织内TNF α、IL 1β、IL 6、IL 8mRNA的表达强度 ,均非常显著高于生理盐水对照组 (P <0 0 1)。PTX治疗后 ,内毒素致伤大鼠肺组织内TNF α、IL 1β、IL 6、IL 8mRNA的相对含量较未接受PTX治疗大鼠有一定程度的减少。②内毒素致伤后各组血清中TNF α、IL 1、IL 6、IL 8含量或活性均非常明显高于生理盐水对照组 (P <0 0 1)。PTX 6h组血清中TNF α、IL 1、IL 6、IL 8含量或活性 ,明显低于内毒素 6h组(P <0 .0 1)。结论　内毒素肺     

急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作

目的：复制急性重症胆管炎(ACST)引发的急性肺损伤(ALI)的动物模型。方法：通过胆总管远端结扎,近端注入菌液并封闭的方法,造成大鼠ACST后观察肺功能及病理形态改变。结果：实验组PaO2／FiO2下降;肺系数升高,肺含水量增加;光镜可见充血、水肿、粒细胞浸润和透明膜。结论：此模型符合ALI诊断标准及动物模型的考察指标,说明本模型是成功可靠的。     

巨噬细胞炎症蛋白-2和细胞凋亡在内毒素诱导急性肺损伤发病中的作用探讨

目的探讨巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)和细胞凋亡在小鼠内毒素诱导急性肺损伤发病机制中的作用。方法以脂多糖气管内注射建立小鼠急性肺损伤模型,进行肺组织病理、肺水含量、支气管肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞分类计数、TNF-α和MIP-2浓度检测,并作肺组织凋亡细胞计数。结果气管内注射LPS后,肺水含量、肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞分类计数、TNF-α和MIP-2浓度及肺组织凋亡细胞计数均明显升高,且随时间推移呈逐渐变化的趋势。结论MIP-2是炎症早期的促炎性细胞因子,其在早期短期急剧释放可趋化和激活中性粒细胞并诱导肺组织细胞凋亡,从而启动与维持炎症反应。     

1-羟基-2，3，5-三甲氧基[口山]酮对脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨1-羟基-2,3,5-三甲氧基■酮(QGS)对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法采用ipLPS的方法建立小鼠急性肺损伤模型。检测肺脏指数,酶法检测支气管及肺泡灌洗液(BALF)中NO水平,Western blotting法检测核转录因子κB抑制蛋白IκB-α,诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及环氧合酶Ⅱ(COX-2)等蛋白的表达,HE染色观察肺组织病理学改变。结果QGS500mg/kg组能显著降低LPS引起的小鼠的肺脏指数(P<0.05)。QGS250、500mg/kg组均能显著降低LPS致伤小鼠BALF中NO水平,抑制率分别达到了37%和48.1%。同时QGS500mg/kg组还能够明显增加肺组织中IκB-α蛋白表达量并下调iNOS及COX-2蛋白表达量。结论QGS对LPS引起的小鼠急性肺损伤有保护作用,该作用与其增加IκB-α蛋白表达而抑制iN-OS和COX-2蛋白的表达有关。