人肺癌组织一氧化氮合酶及总RNA表达水平的梯度改变

目的：探讨一氧化氮合酶（NOS）在肺癌组织中的表达与作用机制。方法：按自身配对原则收集人肺癌癌灶组织、癌灶周围组织及远离癌灶的肺组织各26份,作病理组织学检查并制备肺组织匀浆,分析不同肺组织中总癌周围组织＞远离癌灶肺组织的梯度分布;癌组均显著高于癌周及远癌组织（P＜0．001）,癌组织中总RNA水平与NOS浓度呈显著正相关（P＜0．01）;鳞癌组与腺癌组间总RNA和NOS的表达水平未见明显差异（P＞0．05）;分化程度高的肺癌组NOS表达水平较中分化和低分化肺癌组低;癌灶组织中NO浓度明显高于远癌组织（P＜0．05）。结论：肺癌组织中RNA的高度表达说明肿瘤组织中蛋白质合成旺盛,而NOS的过度表达则可能与加速生成NO以杀伤肿瘤细胞有关。     

肺癌中细胞凋亡水平和p73基因的转录表达的研究

目的：通过观察肺癌癌组织,对应癌旁组织和远癌肺组织中细胞凋亡及p73基因转录表达水平的变化,探讨细胞凋亡及P73基因转录表达水平与肺癌发生,发展的关系。方法：采用TUNEL及RT－PCR技术检测32例非小细胞肺癌癌组织,癌旁组织和7例肺良性病变组织,以及对应正常肺组织细胞凋亡和P73 mRNA的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,结果：（1）肺癌组织中的凋亡指数明显高于癌旁肺组织和远癌肺组织（P＜0．01）,细胞凋亡水平与肺癌组织学类型,分化程度和P－TNM分期无明显关系（P＞0．05）;（2）肺癌组织中p73 mRNA表达水平和表达率明显高于癌旁肺组织,远癌肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）;（3）组织中凋亡指数的升高和P73基因转录表达水平的增加呈显著的正相关（P＜0．01）。结论：肺癌组织中存在细胞凋亡水平的升高和P73基因的过度转录表达。     

血清LTA和NSE联检对肺癌诊断的临床价值

目的：评估肺癌相关抗原（LTA）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）联检对肺癌的临床诊断价值。方法：肺癌组68例，对照组35例，分别用乳胶凝集法（LA）和免疫放射分析（IRMA）不测其血清LTA和NSE。结果：LTA＋NSE对肺癌的阳性检出率（80．1％）显著高于LTA（58．8％）（χ^2＝7．9P＜0．01），NSE（41．2％）（χ^2＝22．5P＜0．01）。结论：应用LTA和NSE联检可提高肺癌阳性检出率。     

E-cadherin在肺癌中表达的临床研究

目的：为探讨上皮型钙黏蛋白（E－cadherin,E-cd)基因在评估肺癌生物学行为及预后中的作用。方法：采用免疫组织化学SP方法对46例肺癌和40例癌旁组织中E－cd表达进行研究。结果：E－cd在肺癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织（P＜0．01），且与肺癌TNM分期、病理分级及淋巴结转移呈负相关（P＜0．05、0．01、0．05）。结论：E－cd基因对评估肺癌进展及判断预后具有一定价值。     

非小细胞肺癌PTEN表达与细胞凋亡和增殖关系

目的探讨非小细胞肺癌PTEN蛋白表达与细胞凋亡和增殖的关系及其临床病理意义。方法采用SABC免疫组化法，检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本PTEN蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）表达；用TUNEL法检测细胞凋亡，以增殖指数和凋亡指数表示增殖与凋亡。结果肺癌组织PTEN蛋白的表达显著低于癌旁正常肺组织（X^2=13．609，P＜0．01），PTEN蛋白的表达与肺癌病人的组织类型及临床分期无关，而与肺癌组织的分化程度、淋巴结转移以及病人的预后密切相关（X^2=5．310～8．503，P＜0．05、0．01）；肺癌组织细胞凋亡指数明显高于癌旁正常肺组织（t=8．279，P＜0．01），细胞凋亡与肺癌的组织类型、临床分期以及淋巴结转移无关，而与病人的预后及组织分化程度相关（t=2．827、3．114，P＜0．05、0．01）；肺癌组织细胞增殖指数明显高于癌旁正常肺组织（t=9．620，P＜0．01），细胞增殖与肺癌的组织类型、组织的分化程度以及淋巴结转移无关，而与病人的临床分期、预后密切相关（t=1．993、2．800，P＜0．05、0．01）；细胞凋亡指数随肿瘤PTEN的表达水平增高而增高，细胞增殖指数随PTEN表达水平增加而降低。结论PTEN具有诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖的双重作用，肺癌PTEN蛋白的低表达及由此导致的细胞凋亡、增殖失衡在肺癌发生发展过程中起重要作用。     

肺癌组织增殖细胞核抗原的表达及血清可溶性Fas水平

目的：研究肺癌患者血清中可溶性Fas（sFas）水平及增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用双抗体心ELISA方法检测血清sFas含量，免疫组织化学链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（SABC）法检测肺癌组织中PCNA的表达，并探讨二者与肿瘤发生及恶性行为之间的关系。结果：与正常人相比，肺癌患者血清sFas水平明显升高（P＜0．01），血清sFas含量和肺癌组织PCNA标记指数均随组织学分级和病理分期的增高而增高（P＜0．01），有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高（P＜0．01）。结论：血清sFas含量和肿瘤组织中PCNA的表达与肿瘤的发生及恶性行为密切相关。     

CXC 趋化因子受体5及其配体 CXCL13在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：研究 CXC 趋化因子受体5（CXCR5）及其配体 CXCL13在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ －PCR）和蛋白印记法（Western blot）检测37例 NSCLC患者癌组织及癌旁组织和21例非炎性正常肺组织 CXCR5及其配体 CXCL13 mRNA 及蛋白的表达。结果FQ －PCR 及 Western blot 结果显示,癌组织中 CXCR5及其配体 CXCL13 mRNA 及蛋白表达水平均明显高于相应癌旁组织（mRNA：2．92±0．31 vs．1．16±0．18 和2．46±0．28 vs．1．07±0．20,P ＜0．01;蛋白：1．93±0．21 vs．0．93±0．11和2．13±0．33 vs．1．07±0．21,P ＜0．01）。 CXCR5与 CXCL13 mRNA 及蛋白的表达呈正相关（mRNA：r ＝0．648,P ＜0．01;蛋白：r ＝0．669,P ＜0．01）。癌组织 CXCR5与 CXCL13 mRNA 及蛋白阳性表达率显著高于相应癌旁组织（P ＜0．01）,且癌组织 CXCR5及 CXCL13 mRNA 和蛋白的表达与肿瘤类型、肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移和肿瘤 TNM分期有关（P ＜0．05）;而正常肺组织中均无 CXCR5与 CXCL13 mRNA 及蛋白的表达。结论CXCR5与 CXCL13在NSCLC 患者癌组织、癌旁组织中均高表达,其协同作用可能参与 NSCLC 的发生及发展过程。     

血清CYFRA21—1、NSE、CEA的测定在肺癌诊断中的意义

目的：探讨在肺癌诊断中血清CYFRA21－1,NSE,CEA含量的变化,敏感程度及联合检测的意义。方法：应用ELISA法测定81例肺癌及18例肺良性病变的患者血清CYFRA21－1,NSE,CEA浓度及阳性率,着重探讨其与肺癌病理类型,肺癌分期,分化程度的关系。结果：NSCLC组和鳞癌组的CYFRA21－1浓度高于浓度高于其他病理类型和对照组（P＜0．05）。CEA不同组别间无统计学差异（P＞0．05）,但联合检测可提高敏感性。NSCLC和鳞癌组中,CYFRA21－1检测肺癌的敏感性高于NSE和CEA（P＜0．05）。SCLC组NSE的敏感性高于CYFRA21－1,CEA（P＜0．05）,对大细胞肺癌,NSE的敏感性亦较高（100％）,随临床TNM分期的增加,CYFRA21－1,NSE浓度增加,Ⅰ-Ⅱ期与ⅢA－Ⅳ期之间有统计学差异（P＜0．05）,敏感性也增加,随肿瘤分化程度的降低,CYFRA21－1和NSE的浓度有增高的趋向,但各组间无明确的统计学差异（P＞0．05）,联合检测可提高检测肺癌的敏感性。结论：血清CYFRA21－1,NSE,CEA的联合检测对肺癌诊断有较高的临床参考价值。并有助于肺癌的病理类型,分化程度,分期评估。     

增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究增殖细胞核抗原（PCNA）和p53在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学SABC法检测肺癌患者肿瘤组织中PCNA和p53的表达，并探讨其与肿瘤发生及恶性行为之间的关系。结果 肺癌组织中p53蛋白阳性表达率为70％，较正常组有显著性差异（P＜0．01），p53蛋白阳性表达率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P＜0．01），在不同组织学分级和病理分期的肺癌组织间p53的表达无差异性。肺癌组织PCNA标记指数随组织学分级和病理分期的增高而增高（P＜0．01），有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高（P＜0．01），p53阳性表达者PCNA标记指数显著高于p53表达阴性者（P＜0．01）。结论 p53蛋白表达与肺癌的发生和淋巴结转移密切相关；PCNA与肺癌的生长及恶性行为有关。     

P53蛋白及EGFR在肺癌中的表达及其意义

应用S－P免疫组化法对85例肺癌及25例肺良性疾病标本进行了P53蛋白及EGFR的检测。结果：P53蛋白在肺癌中的阳性率为50．6％（43／85）。鳞癌及大细胞癌阳性率显著高于腺癌及小细胞癌的阳性率（P＜0．05）。肺良性疾病标本均阴性。P53蛋白阳性者的淋巴结转移率（79．1％，34／43）显著高于P53蛋白阴性者的转移率（57．1％，24／42）（P＜0．05）。提示P53蛋白在肺癌的发生发展及转移中起重要作用。EGFR在肺癌中的阳性率为72．9％（62／85），而在肺良性病变中为12％（3／25），两者阳性率差异显著（P＜0．05）。EGFR过度表达与肺癌病理类型及是否发生转移均无相关性。肺癌癌旁组织EGFR阳性率65．3％（62／95）。增生组癌旁组织阳性率（81．0％，47／58）显著高于无增生组阳性率（40．5％，15／37）（P＜0．05），无增生组癌旁组织阳性率显著高于肺良性疾病阳性率（P＜0．05）。提示EGFR过度表达与癌旁组织的增生密切相关，可能是肺癌发生的早期事件，在肺癌的发生中起重要作用。P53蛋白及EGFR共同表达者淋巴结转移率（85．3％，29／34）显著高于非共同阳性者的转移率（48．8％，21／43）（P＜0．01）。因此，P53蛋白及EGFR共同阳性提示肺癌具有高度转移潜能，预后可能较差。     

lncRNA HOTAIR及肿瘤标志物联合检测与肺癌病理分期的相关性研究

目的 观察肺癌不同病理分期lncRNA HOTAIR及肿瘤标志物变化水平,探讨lncRNA HOTAIR联合肿瘤标志物诊断肺癌分期的临床价值。 方法 将2019年1—9月蚌埠医学院第一附属医院收治的50例肺癌患者作为肺癌组,50例健康志愿者为对照组,根据肺癌T、N分期可分为T1、T2、T3期组和N0、N1、N2期组。荧光原位杂交检测癌组织和癌旁组织lncRNA HOTAIR水平;免疫荧光法检测受试者血清NSE、CEA、CYFRA21-1的水平。 结果 癌旁组织中lncRNA HOTAIR浓度[(0.98±0.04)ng/mL]低于肺癌组织[(3.56±0.15)ng/mL,t=13.706,P<0.001];肺癌组血清NSE、CEA、CYFRA21-1水平均高于对照组(均P<0.05);肺癌T、N分期分组中,临床期数越高,lncRNA HOTAIR、NSE、CEA和CYFRA21-1表达水平均随之升高(均P<0.05);lncRNA HOTAIR表达与NSE、CEA、CYFRA21-1表达呈正相关(均P<0.05);肺癌患者组织lncRNA HOTAIR和血清NSE、CEA、CYFRA21-1表达水平与肺癌T分期均呈正相关(均P<0.05),与肺癌N分期均呈正相关(均P<0.001);联合检测的灵敏度、约等指数和阳性预测值均高于单一指标。 结论 lncRNA HOTAIR和血清NSE、CEA、CYFRA21-1表达水平与肺癌病理分期密切相关,lncRNA HOTAIR联合血清肿瘤标志物判断肺癌病理分期可提高结果的准确性。      

卵泡抑素相关基因在结肠癌中的表达及其临床意义

  目的  探讨卵泡抑素相关基因（follistatin related-gene, FLRG）在结肠癌中的表达及其与结肠癌临床病理特征的关系。  方法  选取2018年12月—2019年12月收治的行根治性手术的结肠癌患者的肿瘤组织、癌旁及正常组织各80例,采用免疫组织化学染色及实时荧光定量PCR方法检测FLRG的表达,并分析其表达水平与结肠癌病理特征的关系。  结果  FLRG在结肠癌组织中的表达高于癌旁组织及正常组织,在癌旁组织中的表达高于正常组织,差异均有统计学意义（P<0.05）。FLRG的表达在结肠癌患者不同性别、不同年龄、不同肿瘤生长位置及分化程度间无明显差异（P>0.05）,结肠癌伴远处转移的患者FLRG表达水平高于无远处转移患者（P<0.05）,临床分期较晚的患者FLRG表达水平高于临床分期较早的患者（P<0.05）。  结论  FLRG在结肠癌组织中表达上调,可能参与肿瘤发生发展的调控,是潜在的预后靶点。     

结直肠癌患者血浆与组织中微小RNA表达水平的临床研究

目的　探讨结直肠癌（CRC）患者术前、术后血浆微小RNA（miRNA）表达水平变化,以及术前血浆与癌组织miRNA表达水平的相关性。方法　选取2014年6月—2016年8月同济大学附属上海第十人民医院胃肠外科就诊的CRC患者32例,另选取同期体检健康者33例。采集健康者及CRC患者术前、术后1个月外周静脉血,留取CRC患者癌及癌旁组织。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血浆、癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b、miR-150表达水平。结果　与健康者比较,CRC患者术前血浆miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调（P<0.05）;与术前比较,CRC患者术后1个月血浆miR-21、miR-17、miR-15b表达水平下调（P<0.05）;与癌旁组织比较,CRC患者癌组织中miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平上调,miR-150表达水平下调（P<0.05）。相关性分析显示,CRC患者术前血浆与癌组织miR-21（r=0.516,P=0.002）、miR-15b（r=0.526,P=0.001）表达水平呈正相关。结论　CRC患者血浆和癌组织miR-21、miR-17、miR-145、miR-15b表达水平失调,其中血浆miR-21、miR-15b有望成为CRC新型非侵袭性诊断标志物。     

真核生物胞质伴侣素6A在非小细胞肺癌中的异常表达及临床意义

目的：本研究旨在评估真核生物胞质伴侣素6A(chaperonin containing TCP1 subunit 6A,CCT6A)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)癌组织中的异常表达,以及其与NSCLC患者临床病理特征和预后的关联。方法：本研究回顾性纳入160例经手术切除的NSCLC患者,采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测癌组织和癌旁组织CCT6A表达水平。 结果：CCT6A主要表达在细胞质和细胞膜上,其表达水平在癌组织中显著高于癌旁组织(P<0.001)。癌组织CCT6A表达水平与高的东部肿瘤协作组体力状态(Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status,ECOG PS)评分(P=0.038)、差的肿瘤分化(P=0.014)、以及淋巴结转移相关(P=0.018),而与患者其他临床病理特征不相关,例如：年龄、性别、吸烟、饮酒、慢性合并症、肿瘤细分类型、肿瘤大小等(均P>0.050)。此外,无病生存期(disease-free survival,DFS)(P<0.001)和总体生存期(overall survival,OS)(P=0.036)在癌组织CCT6A高表达患者中均显著短于癌组织CCT6A低表达患者。进一步采用多因素Cox回归分析患者的独立预后因素,发现癌组织CCT6A高表达可以独立预测患者差的DFS(P=0.001),然而不可以独立预测患者OS。结论：CCT6A在NSCLC组织中高表达,其高表达与NSCLC患者差肿瘤分化、淋巴结转移、ECOG PS评分及不良预后相关,表明CCT6A有作为NSCLC标记物的潜能。     

人、鼠肝癌形成过程中GGT活性变化及其诊断意义

为了探讨γ -谷氨酰转移酶 (GGT)在人、鼠肝癌形成过程中活性变化对肝癌的诊治意义 ,对 30例肝癌病人肝癌组织及鼠肝癌模型肝组织GGT活性进行了检测和分析比较。结果 :组织中GGT活性表现为人肝癌组织较癌周组织明显升高 (P <0 .0 1) ;鼠化学诱癌过程中从正常到癌前病变到癌变的肝组织依次明显升高 ,三种不同组织间的比较差异均有显著性(P <0 .0 1)。结论 :人、鼠肝癌形成过程中GGT活性呈同步升高趋势 ,GGT为反映肝细胞癌变的标志酶。动态观察GGT活性变化有助于肝癌的早期诊断     

肺癌组织α3(Ⅳ)基因表达及其临床研究

目的利用Taqman技术,建立荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,对肺癌组织中Ⅳ型胶原α3链[α3(Ⅳ]]mRNA表达进行定量及蛋白表达水平检测,评价其临床应用价值。方法在α3(Ⅳ)基因NC1结构域编码序列设计一对引物和一条Taqman探针;优化反应体系的条件,以不同质粒DNA含量为标准品和其循环阈值(Ct值)制作标准曲线,检测肺癌组织中α3(Ⅳ)mRNA含量;并对本方法进行方法学评价。Western blot法检测tumstatin蛋白表达情况。结果成功建立了α3(Ⅳ)基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,检测灵敏度为800拷贝/μl;在103～108拷贝/μl之间与Ct值具有很好的线性关系;PCR扩增效率为99.4%;肺癌组织中α3(Ⅳ)mRNA表达定量检测发现,48例肺癌患者肺癌组织α3(Ⅳ)mRNA组含量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01),肺癌组织中tum-statin蛋白表达下调/缺失率显著高于癌旁组织(P<0.01)。临床监测发现肺癌患者癌组织α3(Ⅳ)mRNA含量检测和TNM分期程度具有相关性(P<0.05)。结论α3(Ⅳ)与肺癌的发生发展关系密切,FQ-RT-PCR检测α3(Ⅳ)mRNA的表达为肺癌转移、预后判断、临床治疗等奠定良好基础。     

肺癌组织中FHIT蛋白的表达及其与MDR1的关系

目的:观察肺癌组织中FHIT的表达及其与MDR1蛋白的关系,探讨其表达变化的临床意义.方法:免疫组化S-P法检测肺癌组织及其癌旁组织(n=60)中FHIT蛋白以及肺癌组织中MDR1蛋白的表达,分析在肺癌不同临床病理指标下FHIT蛋白的表达情况,并分析其在肺癌组织中与MDR1表达的关系.结果:FHIT在癌旁组织中的阳性表达率明显高于癌组织(76.7% vs 50%,P＜0.01);癌组织中FHIT阳性表达率与患者性别、年龄、吸烟状况、大体分型、TNM分期、组织学分类、淋巴结转移与否等指标均无显著相关性(P＞0.05);FHIT蛋白阳性表达的癌组织中MDR1的阳性率明显高于阴性表达者(83.3% vs 60%,P＜0.01).结论:肺癌组织中FHIT蛋白表达明显下调;FHIT蛋白表达与MDR1表达有一定的相关性,在应用FHIT基因作为基因治疗手段时应考虑到其可能具有的耐药潜能.     

葡萄糖转运蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨葡萄糖转运蛋白（Glucose transporter，Glut）的两种异构体Glutl、Glut3及缺氧诱导因子-1（Hypoxia induciblefactor-1，HIF-1）的亚基HIF—1α，在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法：选取34例手术切除非小细胞肺癌（包括癌组织和癌旁组织）和17例肺良性病变标本，用免疫组织化学法测定Glutl、Glut3及HIF-1α在肺组织中的表达；用RT—PCR半定量检测Glutl、Glut3及HIF-1α的mRNA表达；用Western Blot检测Glutl、Glut3及HIF-1α蛋白的表达，并测两者相关性。结果：Glutl、Glut3及HIF-1α在肺癌组织中mRNA相对含量为0．689&#177;0．245、0．506&#177;0．246、0．693&#177;0．248，对应癌旁组织为0．338&#177;0．157、0．482&#177;0．238、0．351&#177;0．184，Glutl和HIF-1α在肺癌组织中显著升高（P〈0．001），而Glut3差别无显著性（P〉0．05）。Glutl、Glut3、HIF—1α在癌组织中蛋白相对含量为0．582&#177;0．247、0．551&#177;0．251、0．525&#177;0．246，癌旁组织为0．288&#177;0．151、0．436&#177;0．224、0．261&#177;0．135，在肺良性病变中为0．291&#177;0．142、0．402&#177;0．206、0．271&#177;0．176，Glutl和HIF-1α在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织（P〈0．001）和肺良性病变组织（P〈0．001）；而Glut3差别无显著性（P〉0．05）。Glutl和HIF-1α在低分化组明显高于中高分化组（P〈0．05），Ⅲ期明显高于Ⅰ和Ⅱ期（P〈0．05），且HIF-1α的表达与Glutl明显相关（r=0．854，P〈0．01）。结论：在非小细胞肺癌中，Glutl和HIF-1a存在高表达，其表达与细胞分化程度、TNM分期密切相关，且Glutl和HIF-1α具有相关性。