呼吸道合胞病毒感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的观察

【】 目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力变化的影响。方法 6～8周龄雄性BalB/c小鼠30只,每组10只,随机分为空白组、OVA组(哮喘模型组)、OVA/RSV组(RSV+哮喘模型组)3组。OVA组用卵清蛋白(OVA)致敏和激发;OVA/RSV组在OVA 致敏后,隔日用RSV滴鼻,连续3次,复制急性病毒感染哮喘模型;空白组予等量PBS。末次激发24h后,用小鼠动物呼吸机(Buxco RC系统)检测小鼠气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析;留取肺组织,进行HE染色、PAS染色、VG染色,观察肺组织炎症反应。结果 OVA组肺功能和BALF嗜酸粒细胞比例(EOS％)与正常组相比差异有显著性 (P<0.05);OVA/RSV组肺功能和BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％) 与正常组相比有极显著性差异(P<0.01);OVA/RSV组气道反应性及BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％)与哮喘组相比差异有显著性 (P<0.05)。OVA组小鼠肺组织有炎性细胞浸润,气道可见粘液分泌物,气道周围可见胶原增生。OVA/RSV组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,肺泡腔明显狭窄,毛细血管扩张充血,气道可见明显粘液分泌物,气道周围胶原增生明显。结论 呼吸道合胞病毒感染能明显增加重哮喘模型小鼠肺部组织炎症反应同时气道阻力明显增高。     

盐酸氨溴索对慢性哮喘大鼠气道炎症及杯状细胞增生的影响

目的 :观察药物盐酸氨溴索对慢性哮喘大鼠气道炎症及杯状细胞增生 (GCH)的影响 ,探讨在哮喘防治中的作用 .方法 :用卵白蛋白致敏、激发建立大鼠哮喘模型 ,5 4只Wistar大鼠随机分为 3组 :正常对照组、哮喘组、盐酸氨溴索治疗组(简称治疗组 ) ,每组 18只 .激发哮喘后测定气道内压的变化 ;支气管肺泡灌洗液 (BALF)内细胞计数、分类计数 ,HE染色及AB PAS染色观察肺组织病理改变及杯状细胞增生状况 .结果 :治疗组气道内压增加的百分数明显低于哮喘组 (P<0 .0 1) ;治疗组BALF细胞总数及炎症细胞数明显低于哮喘组 (P <0 .0 1) ;哮喘组大鼠肺组织病理可见明显支气管收缩征象及其周围炎症细胞浸润 ,AB PAS染色显示哮喘组大鼠气道杯状细胞广泛及显著增生 ,并可见气道粘液潴留 ;治疗组大鼠气道炎症及GCH较哮喘组均明显减轻 ,GCH仅存在于大气道 ,未见粘液潴留 .结论 :盐酸氨溴索可抑制哮喘大鼠气道GCH ,改善哮喘气道炎症 ,对哮喘的防治有一定作用     

两种气道高反应大鼠模型的建立与比较

目的:从气道失稳态机制出发,臭氧应激大鼠,建立非变异气道高反应性模型,与经典变异性哮喘大鼠模型比较,寻找一种简易、可行的方法来建立气道高反应性模型。方法:24只SD大鼠随机分为4组:正常对照a组;臭氧应激组;正常对照b组;卵蛋白致敏组,每组6只。分别检测两种动物模型的呼气相气道阻力,支气管肺泡灌洗液中细胞计数、分类,总蛋白含量测定,粘蛋白总量测定,肺、支气管病理切片等指标比较两种气道高反应大鼠模型的稳定性和可靠性。结果:外源性损伤因子臭氧攻击支气管上皮细胞形成的非变异气道高反应性模型,与经典变异性哮喘大鼠模型比较,各项指标(气道反应性,总蛋白含量,粘蛋白总量,肺、支气管病理切片)的测定都证实了气道高反应性的存在。结论:臭氧吸入制备非变异性气道高反应性大鼠模型的方法简易并可行。     

水通道蛋白1对气道高反应大鼠粘液高分泌的影响

目的:本实验观察臭氧应激后大鼠肺组织AQP1的表达对气道粘液的量和质影响。方法:30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组;臭氧应激组;臭氧应激+地塞米松治疗组;每组10只。分组检测支气管分泌粘蛋白总量、肺组织粘蛋白基因MUC5AC表达改变和臭氧应激后肺组织AQP1的量,分析它们之间的相关性。结果:大鼠肺组织有MUC5AC表达,臭氧应激数天后,大鼠气道粘液分泌量明显增加,且MUC5AC表达随之增多,两者呈现正相关趋势。随着AQP1的表达下降,气道高反应大鼠粘液分泌量明显增多,MUC5AC的表达也增多。提示AQP1的表达与气道粘液分泌总量呈现负相关的趋势;AQP1的表达与粘液中的MUC5AC表达呈现负相关的趋势。结论:在气道高反应性过程中,粘液高分泌状态与MUC5AC的表达水平有关,AQP1的表达下调可增加支气管粘液的分泌量和MUC5AC的表达。     

慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞性炎症及气道高反应性的影响

目的探讨慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的募集活化及气道反应性的影响。方法使用卵白蛋白腹腔注射后雾化吸入法制备Wistar大鼠哮喘模型,采用雾化吸入孢子悬液的方式模拟慢性烟曲霉暴露,并设置相应的生理盐水对照组。测定反映大鼠气道反应性的指标Penh值,ELISA法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素5（IL-5）、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）浓度,肺组织切片HE染色观察气道炎症性病理改变,测定嗜酸粒细胞浸润程度。瑞士姬姆萨复合染色计数BALF中嗜酸粒细胞比例。结果烟曲霉可引起哮喘大鼠气道反应性升高及气道嗜酸粒细胞增多,加重哮喘大鼠气道过敏性炎症。烟曲霉暴露组中气道嗜酸性细胞增加与IL-5、Eotaxin水平升高相一致。但烟曲霉对生理盐水对照组大鼠的气道反应性、嗜酸粒细胞及IL-5、Eotaxin水平改变无显著作用。结论烟曲霉孢子雾化吸入可促进IL-5、Eotaxin的生成从而加重哮喘大鼠气道的嗜酸粒细胞性炎症,并可加重气道高反应性。     

白杨素对哮喘模型小鼠肺组织核因子-κB表达的影响

目的:观察白杨素对急性哮喘模型小鼠肺组织核因子(nuclear factor,NF)-κB表达的影响?方法:24只雌性BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组?哮喘组?白杨素组?布地奈德组,每组6只?使用卵白蛋白腹腔注射致敏,气道激发制备哮喘模型,白杨素组小鼠给予白杨素50 mg/kg灌胃,布地奈德组小鼠给予布地奈德雾化液雾化吸入?肺功能测定评价小鼠气道阻力,HE染色评价小鼠气道炎症,酶联免疫吸附(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素(IL)-4?IL-13和血清总IgE的水平,Western blot检测肺组织NF-κB蛋白表达?结果:哮喘组小鼠气道炎症和气道高反应性明显加重,白杨素能够显著抑制哮喘模型小鼠的气道炎症和气道高反应性,白杨素能够抑制哮喘小鼠 BALF中IL-4?IL-13和血清总IgE水平?哮喘组小鼠肺组织高表达的NF-κB水平,经白杨素治疗后显著降低?结论:白杨素能够抑制哮喘小鼠的气道炎症和气道高反应性,其机制可能与抑制肺组织NF-κB的表达有关?     

烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道炎症、气道反应性及血清总IgE水平的影响

目的探讨烟曲霉孢子雾化吸入对哮喘大鼠气道炎症、气道反应性以及血清总IgE水平的影响。方法将18只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、哮喘组和烟曲霉暴露组。以卵白蛋白致敏、激发的方法构建大鼠哮喘模型。烟曲霉暴露组在哮喘模型构建成功后,给予慢性烟曲霉雾化吸入。测定每组大鼠对乙酰甲胆碱(Mch)的气道反应性,采集标本,观测血清总IgE水平以及气道内炎症的变化情况。结果烟曲霉孢子吸入进一步加重了哮喘气道炎症反应及气道高反应性(Mch12.5、25及50 mg/m L浓度下P均0.05),IgE水平也有显著的提升(P0.05)。各组大鼠血清总IgE水平与气道反应性指标PC100(Penh值升高基础水平2倍时的Mch浓度定为PC100)密切相关(r=-0.873,P0.01),与支气管肺泡灌洗液内嗜酸粒细胞百分比也呈现明显的相关性(r=0.937,P0.01)。结论烟曲霉孢子吸入能够显著促进哮喘大鼠肺部嗜酸粒细胞性炎症及气道高反应性的恶化,而气道高反应性及嗜酸粒细胞炎症的加重可能与血清总IgE水平的升高密切相关。     

柴油废气颗粒吸入对哮喘大鼠迟发相反应的影响

[目的]探讨哮喘大鼠吸入不同时程柴油废气颗粒(DEP)后哮喘迟发相反应的变化情况,即DEP吸入对哮喘大鼠的影响.[方法]取雄性Wistar大鼠随机分为6个组,A组给予生理盐水攻击,B组给予卵蛋白攻击,C,D,E,F组先给予卵蛋白攻击,再分别吸入DEP 1,2,3,4周.攻击结束1周后用生理盐水激发A组大鼠30 min,用卵蛋白激发其余各组大鼠30 min,24 h后行乙酰胆碱激发试验,测定气道阻力,比较每组大鼠被乙酰胆碱激发后最终气道阻力与基础气道阻力比值的变化,即气道反应性的变化,并观察肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数的变化,检测血清IgE水平和肺组织中IL-5,IFN-γ水平并观察病理变化等.[结果]A组未发生气道高反应性,其余各组大鼠气道阻力比值均较A组增高,且E,F组较B组明显增高,差异均有统计学意义;DEP的吸入时程与气道阻力比值呈正相关(r=0.886).B,C, D,E,F组肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数、血清IgE及肺组织IL-5水平均显著高于A组,且E,F组嗜酸性粒细胞数显著高于B组,D,E,F组肺组织中IL-5水平明显高于B组.差异均有统计学意义,DEP的吸入时程与IL-5水平呈正相关(r=0.583);B,C,D,E,F组肺组织IFN-γ水平与A组比较明显降低,E, F组较B组明显降低,差异均有统计学意义,DEP的吸入时程与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.550).肺组织病理观察表明,A组大鼠气道上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化;随着DEP吸入时程的延长,大鼠气道逐渐出现上皮细胞的坏死、中断及脱落,杯状细胞增生,气道周围炎症细胞浸润及基底膜纤维化等改变.[结论]柴油废气颗粒的吸入通过促进Th2淋巴细胞活性,加重哮喘大鼠迟发相反应.     

通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症的影响

目的 观察通光散对小鼠哮喘模型气道反应和气道炎症的影响.方法 35只6周龄BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组、正常对照组和药物实验组.模型组和药物组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏、激发;药物组在最后一次致敏后每天灌胃给予通光散汤0.72 mL(相当于0.04 g生药);对照组以等体积的NS代替OVA致敏、激发.末次激发48 h后处理小鼠:无创法测定小鼠的气道高反应性,观察气道阻力变化;支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类;观察肺组织的病理变化.结果 ①药物组小鼠气道阻力的变化与模型组相比明显下降,差异显著(P＜0.05);②药物组BALF白细胞总数和Eos(％)与模型组相比明显降低(P＜0.05).③模型组小鼠肺脏组织支气管、血管黏膜下和周围肺组织有明显的炎症细胞浸润,大量炎症细胞向支气管和血管迁移,上皮细胞部分有脱落,部分可见黏液栓,血管壁明显水肿;治疗组小鼠肺组织炎性细胞浸润和管腔黏液分泌情况较模型组明显减轻,气道粘液的分泌量得到明显的控制.结论 通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症有显著抑制作用.     

薄荷醇下调肺组织P物质改善哮喘气道炎症及气道高反应性的研究

目的 探讨雾化吸入薄荷醇对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的作用及其对肺组织P物质(substance P,SP)含量的影响.方法 按随机数字表法将30只6～8周龄BALB/c雌鼠分为对照组、哮喘组及薄荷醇治疗组,哮喘组和薄荷醇治疗组用鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏激发建立哮喘模型,薄荷醇治疗组于每次雾化激发前给予1.6％薄荷醇溶液5 mL雾化吸人30 min,连续10 d,对照组用PBS替代.于末次雾化24 h内行肺功能检测小鼠气道高反应性;48 h内灌取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)计数细胞总数及细胞分类;肺组织HE染色观察肺部病理改变;ELISA检测血清总免疫球蛋白E(IgE)水平及肺匀浆SP含量;免疫组化染色检测肺组织SP的表达.结果 哮喘组气道高反应性明显高于对照组(P＜0.05),而薄荷醇治疗组较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞绝对计数均较对照组明显增加(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组显著减少(P＜0.01);HE染色显示,哮喘组支气管和血管周围炎症细胞浸润明显,薄荷醇治疗组较哮喘组明显减轻;ELISA结果显示,哮喘组血清总IgE水平及肺匀浆SP含量均较对照组升高(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组减轻(P＜0.05);免疫组化染色结果显示,哮喘组肺组织SP在气道上皮细胞及血管周围强阳性表达,薄荷醇治疗组中度阳性表达.结论 雾化吸入薄荷醇能减轻哮喘小鼠气道炎症及降低气道高反应性,可能与减少SP含量进而减轻肺部神经源性炎症相关.