青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1的影响

目的:观察青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)影响.方法:60只大鼠分为青蒿琥酯干预组、模型组及正常对照组.各组动物于造模后第7、14、21、28天分别处死5只.收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本,光镜下行BALF中炎性细胞计数和分类,测定肺组织匀浆中TGF-β1和羟脯氨酸(HYP) 的浓度;通过HE染色、Masson染色观察肺组织形态的变化.结果:①BALF中白细胞总数、巨噬细胞和淋巴细胞比例在第7、14天模型组高于对照组和干预组(P＜0.01).②干预组肺组织HYP含量较模型组明显下降(P＜0.01);③各时间点模型组肺组织匀浆TGF-β1含量均较正常对照组及干预组明显增高(P＜0.01);各时间点干预组肺组织匀浆TGF-β1含量高于正常对照组,但两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).④干预组肺泡炎第7天、14天比模型组减轻,且纤维化程度在第21、28天亦轻于模型组.结论:青蒿琥酯通过抑制TGF-β1的表达来缓解肺泡炎,减轻大鼠肺纤维化程度,从而起到了保护肺组织的作用.     

沉默热休克蛋白5可增敏青蒿琥酯诱导肝癌细胞铁死亡

目的: 探讨热休克蛋白5(heat shock protein family A member 5,HSPA5)对青蒿琥酯诱导人肝癌SMMC 7721细胞株化疗敏感性的影响。方法: 用不同浓度青蒿琥酯处理SMMC-7721细胞,CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳实验浓度。将SMMC-7721细胞按以下分组处理：对照组、青蒿琥酯组、青蒿琥酯+去铁胺组,用流式细胞术检测细胞内脂质来源活性氧水平;试剂盒检测细胞内丙二醛水平。用包装HSPA5干扰或过表达质粒的慢病毒感染SMMC 7721细胞,qRT PCR和蛋白质印迹法分别测定转染后HSPA5 mRNA和蛋白表达;CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测细胞内丙二醛水平。结果： 青蒿琥酯浓度为20 μmol/L时,SMMC-7721细胞达到半数致死量,为最佳实验浓度;流式细胞术结果显示,青蒿琥酯处理的细胞内脂质来源活性氧水平、丙二醛水平明显升高,去铁胺可抑制青蒿琥酯导致的细胞内脂质来源活性氧和丙二醛升高(均P<0.05);经过青蒿琥酯处理的HSPA5干扰组细胞活性水平明显低于未干扰组,丙二醛水平明显高于未干扰组(均P<0.05)。结论： 干扰HSPA5可能增强人肝癌SMMC-7721细胞株对青蒿琥酯的化疗敏感性。     

青蒿琥酯对小鼠免疫功能的影响

本文观察蒿琥酯对正常小鼠免疫器官重量、血清溶菌酶水平、红细胞免疫粘附功能及ＩＬ－２产生的影响，结果表明青蒿琥酯能减轻胸腺重量，降低血清溶菌酶水平，增加红细胞Ｃ３ｂ受体花环率及抑制ＣｏｎＡ诱导的脾细胞ＩＬ－２产生。青蒿琥酯抑制ＩＬ－２产生可能是其免疫抑制的重要机制。     

青蒿琥酯对大鼠皮肤移植排斥反应的影响

目的：进一步研究青蒿琥酯的免疫作用，采用动物实验方法同琥酯对皮肤移植斥反应的影响。方法将动物随机分为对照组和青琥酯组，供皮鼠受皮鼠均用药，分别为７ｄ和１２ｄ。Ｗｉｓｔｅｒ株大鼠作为供皮鼠，将其圩ＳＤ株大鼠，结果：对照组和青蒿琥酯组移植皮肤平均存活时间分别为１２．１±２．０８８ｄ和１６．８±３．６３３ｄ（Ｐ〈０．０１）。结论：青蒿琥酯组可显延长大鼠皮肤移植排斥反应，进一步证实青贡琥酯的免疫作用     

青蒿琥酯对豚鼠气管平滑肌的影响

表蒿琥酯能松驰豚鼠气管平滑肌，并能非竞争性拮抗乙酰胆碱，组织胺的缩气管作用，β肾上腺素受体阻断剂噻吗洛尔不能阻断青蒿琥酯的松驰气管作用；青蒿琥酯对豚鼠气管组织腺苷酸环化酶活性呈药物浓度依赖性明显的激活作用，在一定剂量范围内，药物浓度与酶的激活作用呈明显的线性关系，提示青蒿琥酯松气管作用与激活腺苷酸环化酶有关。     

青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠肾组织MCP-1及其mRNA表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其mRNA表达的影响.方法 40只大鼠随机分为4组,其中一组为正常对照组,另外三组在建立IgA肾病模型后分别为模型对照组、青蒿琥酯小剂量组、青蒿琥酯大剂量组.采用免疫组化和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测MCP-1的表达.结果 模型对照组的MCP-1 mRNA表达(0.4726±0.086)与正常对照组比较(0.1445±0.095)明显增加(P<0.05),但与模型对照组比较,青蒿琥酯小剂量组(0.2844±0.065)和青蒿琥酯大剂量组(0.2184±0.058)受到抑制(P均<0.05).IgA肾病模型大鼠的血尿、蛋白尿及肾组织病理改变在青蒿琥酯组都有显著改善.结论 青蒿琥酯能够下调肾组织MCP-1的表达,这可能是青蒿琥酯治疗IgA肾病的作用机制之一.     

青蒿琥酯免疫作用的研究

１青蒿琥酯的药理作用青蒿琥酯（Ａｒｔｅｓｕｎａｔｅ，简称Ａｒｔ）是我国发现的一种新抗疟药，１９８７年经卫生部批准。它是从中药青蒿中提纯的有效化合物青蒿素的衍生物之一，为二氢青蒿素的半琥珀酸酯，分子式为Ｃ１９Ｈ１８Ｏ８，分子量为３８４．４３。临床使用的...     

青蒿琥酯和青蒿琥酯-盐酸阿莫地喹序贯治疗南苏丹恶性疟疾疗效观察

目的观察注射用青蒿琥酯和青蒿琥酯-盐酸阿莫地喹片序贯治疗南苏丹恶性疟疾的临床效果。方法选择2016年4月至2017年7月南苏丹朱巴中国维和步兵营一级医院收治的恶性疟疾患者31例,均肌肉注射青蒿琥酯注射液(首剂120 mg,4 h后再次肌肉注射60 mg,然后每日肌肉注射60 mg)1~3 d,体温恢复至正常范围后24、48、72 h口服青蒿琥酯-盐酸阿莫地喹片2片,共6片;观察治疗效果。结果 31例疟疾患者的总治愈率为100.0%(31/31),其中3 d治愈率为90.3%(28/31),3~6 d治愈率为9.7%(3/31)。4例(12.9%)患者发生恶心、呕吐、食欲减退、腹胀、腹泻、头晕等轻度不良反应,治疗结束后均自行消失。结论注射用青蒿琥酯和青蒿琥酯-盐酸阿莫地喹片序贯治疗南苏丹恶性疟疾疗效显著,且患者耐受性好。     

浅论青蒿琥酯对糖尿病大鼠视网膜病变的形态学影响

目的：探讨青蒿琥酯对糖尿病大鼠视网膜病变的形态学影响。方法：将12只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病治疗组,利用链脲菌素诱导构建1型糖尿病大鼠模型3个月。随后,为正常对照组大鼠和糖尿病组大鼠注射生理盐水,为糖尿病治疗组大鼠注射青蒿琥酯。连续注射10天后,分别摘取各组大鼠的眼球并分离视网膜,进行HE染色,以观察其形态学的变化。结果：糖尿病治疗组大鼠视网膜病变的形态学改变优于糖尿病组大鼠。结论：青蒿琥酯对糖尿病视网膜病变的形态学改变具有一定的改善作用。     

青蒿琥酯对大鼠肾小球系膜细胞细胞周期的影响

目的 观察青蒿琥酯（An）对大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cells,GMC）细胞周期的影响。方法 用不同浓度的青蒿琥酯刺激多糖诱导增殖的大鼠肾小球系膜细胞,流式细胞仪检测其细胞周期的变化。结果 青蒿琥酯使细胞有丝分裂被阻滞于G0期,S期细胞比例下降,G0期细胞比例增加。结论 青蒿琥酯能够抑制脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖,这种作用可能是通过其抑制细胞分裂、复制实现的。     

慢性肾脏病患者肾组织热休克蛋白47的表达及意义

目的探讨热休克蛋白47(Heat shock protein 47,HSP47)在慢性肾病患者肾组织中的表达及其与肾组织纤维化的关系.方法选择50例慢性肾脏病患者,根据肾组织纤维化程度积分为3组:轻度损害组20例,中度损害组15例,重度损害组15例.对照组5例,为肾肿瘤患者,取其切除肾脏远离肿瘤部分经病理检查结果正常的肾组织为对照研究对象.应用免疫组织化学方法检测4组受试对象肾组织中HSP47、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的表达,并将HSP47分别与肾脏纤维化损害程度、COL-Ⅳ、血清肌酐、内生肌酐清除率等进行相关分析.结果 (1)在纤维化病变肾组织中,HSP47主要表达于病变区小管上皮细胞、肾间质细胞及肾小球内系膜细胞、上皮细胞内,且其表达量随肾脏纤维化程度加重而增加(P＜0.01);(2)HSP47表达分别与COL-Ⅳ表达、肾组织纤维化积分、血清肌酐成正相关(P＜0.01),与内生肌酐清除率成负相关(P＜0.01).结论随着慢性肾脏病患者纤维化病变程度加重,HSP47表达量逐渐增加,它可能通过促进胶原合成增加,参与肾脏纤维化的发生、发展.     

青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的:研究青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝组织中基质金属蛋白酶(MMPs)及Ⅰ型胶原表达的影响,探讨青蒿琥酯对大鼠肝纤维化的治疗作用.方法:Wistar大鼠随机分为6组:正常组、模型对照组、青蒿琥酯低、中、高剂量组(3.2 mg/kg、9.6 mg/kg、28.8mg/kg)及马洛替酯阳性对照组(53.1 mg/kg),每组10只大鼠.牛血清白蛋白(BSA)免疫性大鼠肝纤维化模型制备成功后,各组按相应药物剂量分别开始治疗,正常组和模型组给予同体积蒸馏水,每日1次,连续2个月至实验结束.酶谱法测定肝组织MMP-2,MMP-9的表达;Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原与MMP-13的表达.结果:(1)肝组织Ⅰ型胶原的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织Ⅰ型胶原含量增高(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Ⅰ型胶原含量均降低(P＜0.05).(2)肝组织基质金属蛋白酶的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9表达增高(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9表达均降低(P＜0.01),MMP-13表达升高(P＜0.01).结论:青蒿琥酯可能通过降低肝组织MMP-2、MMP-9的表达,增加MMP-13的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用.     

热休克蛋白47在2型糖尿病肾病中的表达及其意义

目的:探讨热休克蛋白47( heat shock protein 47,HSP47)在2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的表达及其意义.方法:45例2型DN患者分为DN组25例和轻微病变性肾病(MCD)组20例.使用常规病理组织学方法观察肾小球、肾小管间质和血管的病变程度,免疫组织化学染色法观察各实验组肾组织内HSP47、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)的表达,并进行免疫双染共定位分析.结果:与MCD组比较,DN组肾小球内HSP47、α-SMA、Vimentin及Col Ⅳ表达明显增加(P＜0.05);肾小管间质纤维化区域内HSP47、α-SMA及Col Ⅳ表达亦明显增加(P＜0.05),Vimentin则在肾小管间质内表达显著性增加(P＜0.01).免疫双染结果显示,DN组在增生硬化的肾小球系膜区及肾小管间质纤维化处,HSP47表达阳性细胞内同时有α-SMA阳性表达,并且HSP47表达阳性细胞同时具有Vimentin阳性表达.结论:HSP47过度表达或许通过帮助前胶原分子细胞内处理及加工,参与2型DN肾小球硬化及肾小管间质纤维化的形成.     

HSP47在TGF-β1诱导肝星形细胞合成I型胶原蛋白中的作用

目的：探讨热休克蛋白47对转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）所诱导的肝星形细胞合成Ⅰ型胶原蛋白的影响。方法：以重组人1ng/mL和10ng/mL TGF-β1作用于培养的肝星形细胞株HSC-T6,采用热休克反应（heat shock response,HSR）（42℃孵育1h,37℃分别恢复6h,12h,24h,48h）和HSP47反义寡核苷酸分别诱导或抑制HSP47的表达,采用免疫印迹技术检测HSP47及Ⅰ型胶原蛋白的合成。采用MTT法检测细胞存活力。结果：正常状态下,HSC-T6细胞均表达一定量的HSP47和Ⅰ型胶原蛋白;1ng/mL和10ng/mL TGF-β1处理24h均能诱导Ⅰ型胶原蛋白表达,其中以10ng/mL的作用最为明显,同时TGF-β1刺激后也能诱导HSP47的表达。HSR在诱导HSP47表达的同时虽然不能改变Ⅰ型胶原蛋白的合成,却能促进TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原蛋白合成。HSP47反义寡核苷酸在不影响细胞存活力的情况下,能显著抑制HSR诱导的HSP47的表达以及TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原蛋白的表达。结论：HSP47的高表达能增强TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原蛋白合成,可能在肝纤维化的发生发展过程中发挥重要作用。     

特发性肺纤维化患者血清热休克蛋白47和血管内皮生长因子的动态变化及其临床意义

目的 探讨特发性肺纤维化（IPF）患者血清热休克蛋白47（HSP47）和血管内皮生长因子（VEGF）的动态变化及其临床意义。方法 选取2017年1月—2019年8月天津市胸科医院收治的加重期IPF患者、稳定期IPF患者及同期该院体检的健康者共141例为研究对象,分别纳入加重期组、稳定期组及健康对照组,每组47例。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清HSP47、VEGF水平及肺功能,采用高分辨率CT（HRCT）评分法评价各组肺纤维化程度,分析血清HSP47、VEGF、肺功能及HRCT评分之间的相关性。结果 加重期组、稳定期组及健康对照组的血清HSP47、VEGF水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,加重期组血清HSP47、VEGF水平高于稳定期组,稳定期组高于健康对照组;加重期组动脉血二氧化碳分压（PaCO₂）、HRCT评分高于稳定期组（P <0.05）;加重期组动脉血氧分压（PaO₂）水平低于稳定期组（P <0.05）。加重期组第1秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值（FEV₁%）、一氧化碳弥散量占预计值百分比（DLCO%pred）低于稳定期组。Pearson相关性分析显示,HSP47与FEV₁、FVC、FEV₁%、DLCO%pred、PaO₂呈负相关（r =-0.735、-0.579、-0.612、-0.642和-0.636,均P <0.05）,与PaCO₂、HRCT评分呈正相关（r =0.683和0.517,均P <0.05）;VEGF与FEV₁、FVC、FEV₁%、DLCO%pred、PaO₂呈负相关（r =-0.757、-0.583、-0.644、-0.656和-0.663,均P <0.05）,与PaCO₂、HRCT评分呈正相关（r =0.597和0.525,均P <0.05）;HSP47与VEGF呈正相关（r =0.685,P<0.05）。结论 IPF患者血清HSP47、VEGF水平随着病情的加重而升高,检测血清HSP47、VEGF水平有利于辅助评估IPF患者的病情。     

严重烧伤大鼠肾脏热休克蛋白72基因表达的研究

目的：研究严重烧伤和热休克处理大鼠肾脏热休克蛋白７２（ＨＳＰ７２）基因表达，并讨论其作用和意义。方法：采用ＨＳＰ７２特异性引物，利用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位杂交技术观察肾脏ＨＳＰ７２ｍＲＮＡ变化；用免疫印迹观察蛋白质表达的变化。结果：①烧伤早期大鼠肾脏热休克蛋白表达是逐渐增加的，到２４ｈ，其ｍＲＮＡ和蛋白质均处于高表达水平。②热休克预处理后大鼠肾脏热休克蛋白表达峰值在６ｈ￣１２ｈ     

HSP70在严重烧伤大鼠心肌中的表达及其保护作用的研究

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在严重烧伤大鼠心肌中的表达变化规律，并观察诱导热休克反应对烧伤后心肌损害的保护作用。方法 72只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(B组)、亚砷酸钠预处理组(SA组)，于致伤前及30％TBSAⅢ度烫伤后3、6、12、24、48h检测血清心肌钙蛋白Ⅰ含量变化，Western blot检测心肌组织HSP70蛋白表达情况。结果 大鼠严重烧伤后3h心肌组织HSP70蛋白表达显著升高，伤后48h达高峰。大鼠烫伤后3h血清心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量即开始明显升高，伤后12h达高峰。亚砷酸钠预处理可显著诱导机体的热休克反应，SA组伤后多数时相点血清cTnⅠ含量显著低于B组，且波动幅度较小。结论 严重烧伤早期即可引起心肌组织HSP70蛋白表达显著增强，HSP70蛋白可能在烧伤后早期心肌损害中发挥其内源性抗损伤机制。     

热休克蛋白70对大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡的影响

目的:研究热休克蛋白70(HSP 70)对大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡的影响,探索HSP对脑复苏的可行性。方法:将46只成年Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组与干预组,假手术组不进行模型制作及治疗干预;模型组仅制作心搏骤停(SCA)并心肺复苏动物模型,不进行治疗干预;干预组大鼠在SCA并心肺复苏模型制作后静脉注射HSP 70。分别于6、12 h后检测各组大鼠脑海马区神经细胞凋亡数目、Bcl-2蛋白表达量,对比分析各组大鼠神经细胞凋亡情况的差异,验证HSP 70对大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡的保护作用。结果:HSP 70对大鼠心肺复苏后神经细胞具有保护作用,能减少神经元细胞凋亡数目,增加Bcl-2蛋白表达。结论:HSP 70对大鼠心肺复苏后神经细胞有保护作用,对脑复苏具一定的治疗前景。     

强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响

目的 观察强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响,探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法 选择15只SD大鼠,每只选3个部位用强脉冲光照射,采用同一照射参数,能量密度34J/cm²,分为3个脉冲,脉宽各为4、5、6ms,脉冲延时为20及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于治疗及非治疗部位切取皮肤样本,免疫组化染色,观察。结果 照射部位第1天皮肤表皮、皮脂腺细胞、毛细血管内皮细胞均呈阳性染色,第7天达高峰,第15天染色渐弱,第30天染色基本消失,非治疗部位染色阴性。结论 强脉冲光照射皮肤后可引起热休克蛋白70表达的增加,提示热休克蛋白70在光子嫩肤过程中起一定作用。