小檗碱对链脲菌素和高糖高脂饲料诱导糖尿病大鼠骨骼肌CDK9和cyclin T1表达的影响

目的观察小檗碱对2型糖尿病大鼠骨骼肌病理结构改变及CDK9和cyclin T1蛋白表达的影响。方法腹腔注射链脲菌素(35 mg·kg~(-1))加高糖高脂饲料喂养16 wk建立2型糖尿病大鼠模型,随后16 wk每天分别拌食给予低中高剂量小檗碱(75、150、300 mg·kg~(-1))、非诺贝特(100 mg·kg~(-1))和罗格列酮(4 mg·kg~(-1)),用HE染色检查骨骼肌结构病变和免疫组化检测CDK9和cyclin T1的表达。结果骨骼肌纤维在各组大鼠中仍正常分布,中高剂量小檗碱部分地改善糖尿病肌纤维的萎缩;中高剂量小檗碱和罗格列酮都能明显恢复糖尿病大鼠骨骼肌中表达降低的CDK9和cyclin T1至正常水平(P<0.01)。结论小檗碱调控骨骼肌CDK9和cyclin T1蛋白的表达可能是其改善糖尿病骨骼肌纤维萎缩的机制之一。     

小檗碱对2型糖尿病大鼠视网膜PPARα/δ/γ表达的影响

糖尿病视网膜病是最常见的糖尿病并发症之一，是导致失明的主要原因，因此有必要寻找新的治疗药物。给大鼠腹腔注射链脲菌素(35 mg·kg^-1) 2周后用高糖高脂饲料喂养14周，之后连续16周每天分别拌食给予小檗碱75、150及300 mg·kg^-1、非诺贝特100 mg·kg^-1和罗格列酮4 mg·kg^-1。用HE染色检查视网膜结构和免疫组化检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs) α/δ/γ的表达。结果发现，正常对照组大鼠的视网膜厚度大于其他各组，经小檗碱(150及300 mg·kg^-1)和罗格列酮(4 mg·kg^-1)的治疗能增加糖尿病大鼠视网膜的厚度，但视网膜的结构在各组间无差别；小檗碱(150及300 mg·kg^-1)和罗格列酮(4 mg·kg^-1)能明显降低糖尿病大鼠视网膜中PPARγ蛋白表达，小檗碱(150及300 mg·kg^-1)和非诺贝特(100 mg·kg^-1)能显著增加糖尿病大鼠视网膜中PPARα和PPARδ的表达。小檗碱调控视网膜PPAR α/δ/γ蛋白表达可能是其改善糖尿病视网膜病的机制之一，可能成为比罗格列酮和非诺贝特更有效的用于治疗糖尿病视网膜病的药物。     

罗格列酮对糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）配体罗格列酮对糖尿病大鼠血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）浓度和外周血单核细胞mRNA表达的影响。方法：30只SD大鼠随机分为三组，对照组、糖尿病组和罗格列酮组，每组10只。糖尿病组和罗格列酮组腹腔注射链脲霉素制作糖尿病大鼠模型后，罗格列酮组以罗格列酮灌胃，5mg·kg^-1·d^-1，共28d，对照组和糖尿病组以等量0.9％氯化钠溶液灌胃，比较治疗前、后的血清MMP-9浓度的变化，分离外周血单核细胞，RT-PCR检测MMP-9mRNA的变化。结果：处理28d后血清MMP-9浓度明显降低（P〈0.01），外周血单核细胞MMP-9mRNA表达量明显降低。结论：罗格列酮可以降低糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA袁达．提示冀可能通过抑制MMP-9表达稳定动脉粥样锺化斑块．     

小檗碱对葛根素在大鼠体内药动学的影响

目的观察小檗碱对葛根素在大鼠体内药动学的影响。方法建立高效液相色谱（HPLC）法测定大鼠血浆中葛根素的浓度。大鼠灌胃给予葛根素（100 mg·kg^-1）及葛根素和小檗碱混合物（100 mg·kg^-1＋50 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1＋100 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1＋200 mg·kg^-1）,用HPLC法测定大鼠给药后不同时间血浆葛根素的浓度,DAS ver1.0数据处理软件计算药动学参数。结果葛根素在0.10-10.00 mg·L^-1范围内线性良好（r=0.999 5）。合用小檗碱前后葛根素的主要药动学参数Cmax分别为（0.54±0.05）、（0.59±0.03）、（0.67±0.02）、（0.73±0.03）mg·L^-1;AUC0-∞分别为（4.90±2.91）、（4.63±2.11）、（3.42±2.44）、（6.18±2.57）mg·L^-1·h^-1;CL分别为（26.92±16.24）、（25.94±13.36）、（44.58±30.36）、（18.82±8.47）L·h-1·kg^-1。结论高剂量小檗碱可提高葛根素在大鼠体内的吸收。     

小檗碱调节AMPK/NF-κB信号通路对自身免疫性前列腺炎大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的 探讨小檗碱调节腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/核因子-κB(NF-κB)信号通路对自身免疫性前列腺炎（EAP）大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞（Treg）平衡的影响。方法 将90只SD雄性大鼠随机分为对照组（正常饲养）、模型组、小檗碱低剂量组（25 mg/kg）、小檗碱高剂量组（50 mg/kg）、阳性对照组（40 mg/kg塞来昔布）、抑制剂组（50 mg/kg小檗碱+0.2 mg/kg AMPK抑制剂compound C），每组15只。除对照组外，其余组大鼠均采用盆腔区域及双侧肩胛皮下多点注射完全弗式佐剂与前列腺组织混合悬液构建EAP大鼠模型，建模成功后进行药物处理，每天灌胃给药1次，持续4周。HE染色观察各组大鼠前列腺组织病理情况；免疫组织化学法检测大鼠前列腺组织视黄酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头蛋白3(Foxp3)表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清中白细胞介素（IL）-17、IL-10水平；流式细胞仪检测大鼠外周血中Th17/Treg细胞比值；通过Western blot法检测大鼠前列腺组织中AMPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达...     

小檗碱对去卵巢大鼠骨量丢失的保护作用

目的：研究小檗碱对去卵巢大鼠骨量丢失的作用.方法：以去卵巢诱导大鼠骨质疏松症,3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢组（空白组）、阳性对照组（尼尔雌醇组）及低（10mg· kg^-1）、中（30 mg· kg^-1）、高（90 mg· kg^-1）剂量小檗碱组,每组10只.12周后,取胫骨近端行不脱钙制片,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨中段皮质骨动、静态学参数.双能X射线骨密度仪测量股骨骨密度.结果：与空白组比较,小檗碱能显著增加大鼠胫骨中段松质骨骨小梁面积百分比和骨小梁厚度（P＜0.01）,减少骨小梁分离度（P＜0.05）;增加骨形成参数：矿化沉积率（MAR）、骨形成率（BFR/BS、BFR/BV、BFR/TV）（P＜0.05或0.01）;同时,显著增加去卵巢大鼠股骨骨密度（P＜0.05）.对胫骨干骺端松质骨破骨细胞数目及体质量差异无统计学意义.结论：小檗碱对去卵巢大鼠骨量丢失有保护作用,主要是通过促进骨形成、抑制骨吸收、提高骨密度.     

非诺贝特抑制兔脂肪组织纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的机制

目的：观察非诺贝特对高胆固醇喂养兔脂肪组织纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）mRNA表达的影响，并阐明其可能机制。方法：15只兔随机分为对照组、高胆固醇血症组和非诺贝特治疗组。实验的第12周末取兔皮下脂肪组织，并分离培养脂肪细胞，应用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定脂肪组织和细胞PAI-1、PPAR7和PPARα mRNA的表达。结果：高胆固醇血症组脂肪组织PAI-1 mRNA表达高于对照组（P〈0．01）。非诺贝特治疗后脂肪组织PAI-1 mRNA表达明显低于高胆固醇组（P〈0．01）。高胆固醇组脂肪组织PPARγmRNA表达高于对照组（P〈0.05），非诺贝特能降低高胆固醇饲养兔脂肪组织PPARγmRNA表达（P〈0．05），并呈剂量依赖性的降低脂肪细胞PAH和PPARγmRNA表达。3组兔脂肪组织PPARαmRNA表达差异无显著性。结论：非诺贝特能抑制高胆固醇饲养兔脂肪组织PAI-1 mRNA表达，其机制可能与下调脂肪细胞PPARγRNA表达有关。     

小檗碱对2型糖尿病大鼠肾组织细胞周期蛋白依赖激酶9和细胞周期蛋白T1表达的影响(英文)

目的观察2型糖尿病大鼠肾组织细胞周期蛋白依赖激酶9(Cdk9)和细胞周期蛋白(cyclin )T1蛋白的表达及小檗碱的影响。方法小剂量注射链佐星(链脲菌素)加高糖高脂饲料喂养16周建立2型糖尿病大鼠模型,随后16周每天分别给予小檗碱75,150及300 mg·kg-1、非诺贝特100 mg·kg-1和罗格列酮4 mg·kg-1。处死大鼠后用HE染色检查肾组织结构和免疫组化技术检测Cdk9和cyclin T1的表达。结果糖尿病模型大鼠肾小球体积增大,部分系膜细胞增生和系膜区扩张,肾小球及肾小管基底膜增厚,肾重/体重比值增加;150及300 mg·kg-1小檗碱和罗格列酮能部分改善糖尿病性肾组织病变和降低肾重/体重比值。150及300 mg·kg-1小檗碱和罗格列酮都能明显恢复糖尿病肾组织中降低了的Cdk9和cyclin T1表达至接近正常水平。结论小檗碱通过调控肾组织Cdk9和cyclin T1的表达能部分改善实验性糖尿病大鼠肾组织病变。     

小檗碱对2型糖尿病性神经痛大鼠疼痛的影响

目的：探讨不同剂量的小檗碱（Berberine，Ber）对2型糖尿病性神经痛（DEN）大鼠疼痛及血糖的影响。方法：实验采用高脂高果糖饲料喂养1个月，再用小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导的方法建立2型糖尿病性神经痛大鼠模型，且随机将实验动物分为正常对照组、糖尿病对照组、低剂量组、高剂量组。正常对照组不予任何处理，糖尿病对照组以磷酸盐缓冲液（PBS）1ml／kg、低剂量组以小檗碱100m异，kg、高剂量组以小檗碱187.5mg／kg体重灌胃，整个治疗持续8周（w）。用热板法测定大鼠舔后足的潜伏期即痛阔，用血糖仪测空腹血糖（FBG）。结果：（1）建模成功后，模型大鼠FBG〉113．8mmol／L，痛阈值明显降低（P〈0．05）。（2）用小檗碱治疗后，低剂量组、高剂量组的FBG均较糖尿病对照组明显降低（R=0．05）；高剂量组的痛阈值较糖尿病对照组显著升高（P〈0．01）。（3）实验还发现，在用小檗碱治疗的后期能使明显消瘦的2型糖尿病性大鼠体重回升。结论：小檗碱可明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖，且大剂量时对DPN大鼠的神经性疼痛有一定的改善作用。     

小檗碱及其衍生物对2型糖尿病大鼠骨骼肌PTP1B蛋白表达的影响

目的:观察小檗碱及其衍生物对2型糖尿病大鼠骨骼肌蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)蛋白表达的影响。方法:采用尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)和高脂高热卡饮食喂养的方法建立大鼠2型糖尿病模型。随机分为模型组、小檗碱组、8-羟基二氢小檗碱(Hdber)高、中、低剂量组和二甲双胍组,另设正常对照组。干预8周后,检测各组大鼠血糖、血脂、空腹胰岛素(FINS)水平及骨骼肌PTP1B、胰岛素受体β(InsRβ)亚基蛋白及其酪氨酸磷酸化水平的差异。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖升高,血脂代谢紊乱,FINS及骨骼肌PTP1B蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),而InsRβ亚基蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组代谢紊乱均得到明显改善、FINS降低(P<0.05,P<0.01),但骨骼肌组织PTP1B蛋白表达水平无明显差异;与小檗碱组比较,Hdber中高剂量组对各指标的改善程度相接近。结论:小檗碱及Hdber均可改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,其机制可能与增加骨骼肌组织InsRβ亚基蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平有关,而未观察到其对PTP1B蛋白表达水平的显著影响。     

罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害防护作用的机制研究

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害防护作用的机制。方法用链脲佐菌素(STZ)将39只10周龄雄性Wistar大鼠诱导成糖尿病大鼠模型,分为胰岛素治疗组、罗格列酮治疗组、未治疗组(每组13只),并以13只正常大鼠作对照。于第16周末抽取各组大鼠心脏血测定TNF-α、IL-6、C-反应蛋白、SOD、P物质水平,并处死取股二头肌进行病理学观察;用免疫组织化学染色观察骨骼肌中晚期糖基化终末产物(AGEs)与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)含量的变化。结果未治疗组血清IL-6、TNF-α、C-反应蛋白水平均明显高于正常组(P<0.05),胰岛素组和罗格列酮组则与正常对照组比较无差异;未治疗组血清SOD、SP水平与正常组相比明显降低(P<0.01),胰岛素组和罗格列酮组的SOD和P物质二者显著高于糖尿病组(P<0.01,P<0.05)。组织学观察:糖尿病组骨骼肌普遍萎缩,肌纤维横截面积明显缩小;部分肌纤维变性,间质水肿,炎细胞浸润;胰岛素组和罗格列酮组骨骼肌有部分轻度萎缩,间质轻度水肿,少量淋巴细胞浸润。免疫组织化学显示:AGEs蛋白、PPAR-γ蛋白均呈棕黄色颗粒状,弥漫或斑片状沉积于骨骼肌细胞胞浆中;在糖尿病组AGEs最高,PPAR-γ最低。结论糖尿病大鼠受损的骨骼肌中有AGEs蓄积和血清炎症因子增高,罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害具有防护作用。     

Chronic effects of berberine on blood, liver glucolipid metabolism and liver PPARs expression in diabetic hyperlipidemic rats

Berberine is one of the main alkaloids of Rhizoma coptidis which has been used as a folk medicine to treat diabetes mellitus for more than 1400 years in China. To investigate the chronic effect of berberine on diabetic hyperlipidemic rats, fasted rats were intraperitoneally injected 35 mg/kg streptozotocin. Diabetic rats were admitted after 2 weeks and given a high-carbohydrate/high-fat diet to induce hyperlipidemia. The rats were divided into 7 groups at the end of week 16: normal and diabetic rats received no drug, 5 treatment groups were administered with either 75, 150, 300 mg/kg berberine, 100 mg/kg fenofibrate or 4 mg/kg rosiglitazone per day for 16 weeks, respectively. The blood glucose, hemoglobin A1c, lipid metabolic parameters and hepatic glycogen and triglyceride were measured, and histopathology and peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) alpha/delta/gamma expression of liver were determined by hematoxylin eosin and immunohistochemical staining. Berberine reduced diabetic rats' body weight, liver weight and liver to body weight ratio. Berberine restored the increased blood glucose, hemoglobin A1c, total cholesterol, triglyceride, low density lipoprotein-cholesterol, apolipoprotein B and the decreased high density lipoprotein-cholesterol, apolipoprotein AI levels in diabetic rats to near the control ones. Berberine alleviated the pathological progression of liver and reverted the increased hepatic glycogen and triglyceride to near the control levels. Berberine increased PPARalpha/delta expression and reduced PPARgamma expression in liver of diabetic rat to near the control ones. Berberine improved glucolipid metabolism both in blood and liver in diabetic rats possibly through modulating the metabolic related PPARalpha/delta/gamma protein expression in liver.     

Dual acting and pan-PPAR activators as potential anti-diabetic therapies

The thiazolidinedione PPAR-γ activator drugs rosiglitazone and pioglitazone suppress insulin resistance in type 2 diabetic patients. They lock lipids into adipose tissue triglyceride stores, thereby preventing lipid metabolites from causing insulin resistance in liver and skeletal muscle and β-cell failure. They also reduce the secretion of inflammatory cytokines such as TNFα and increase the plasma level of adiponectin, which increases insulin sensitivity in liver and skeletal muscle. However, they have only a modest effect on dyslipidaemia, and they increase fat mass and plasma volume. Fibrate PPAR-α activator drugs decrease plasma triglycerides and increase HDL-cholesterol levels. PPAR-δ activators increase the capacity for fat oxidation in skeletal muscle.Clinical experience with bezafibrate, which activates PPAR-δ and -α, and studies on the PPAR-α/δ activator tetradecylthioacetic acid, the PPAR-δ activator GW501516, and combinations of the PPAR-α activator fenofibrate with rosiglitazone or pioglitazone have encouraged attempts to develop single molecules that activate two or all three PPARs. Most effort has focussed on dual PPAR-α/γ activators. These reduce both hyperglycaemia and dyslipidaemia, but their development has been terminated by issues such as increased weight gain, oedema, plasma creatinine and myocardial infarction or stroke. In addition, the FDA has stated that many PPAR ligands submitted to it have caused increased numbers of tumours in carcinogenicity studies.Rather than aiming for full potent agonists, it may be best to identify subtype-selective partial agonists or compounds that selectively activate PPAR signalling pathways and use these in combination. Nutrients or modified lipids that are low-affinity agonists may also have potential.     

罗格列酮对类胰蛋白酶诱导的大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原及过氧化物酶体增殖物活化受体γ表达的影响

目的观察罗格列酮对类胰蛋白酶诱导的大鼠肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原及过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨罗格列酮抑制肝纤维化的作用机制。方法将大鼠HSC-T6进行体外培养,取对数生长期细胞分为空白对照组,1、10、100 ng/ml类胰蛋白酶组,10 ng/ml类胰蛋白酶+(5、10、20μmol/L)罗格列酮组。用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HSCⅠ型胶原及PPARγ的表达。结果类胰蛋白酶可以诱导大鼠HSCⅠ型胶原表达并使HSC PPARγ表达减少(P<0.05),罗格列酮可以不同程度抑制类胰蛋白酶的上述效应,且各组Ⅰ型胶原的表达水平均低于10 ng/ml类胰蛋白酶组(P<0.05),各组PPARγ的表达水平均高于10 ng/ml类胰蛋白酶组(P<0.05),并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论罗格列酮能够上调PPARγ表达并抑制类胰蛋白酶诱导的HSCⅠ型胶原的表达,抑制肝纤维化的发生。     

氯氮平对雄性C57BL／6小鼠血糖和骨骼肌过氧化物酶体增殖物激活受体-γ mRNA表达的影响

目的研究不同剂量氯氮平对雄性C57BL／6小鼠血糖及其骨骼肌过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）mRNA表达的影响。方法60只雄性C57BL／6小鼠随机平分成空白对照组、2．0mg·kg^-1氯氮平组和10．0mg·kg^-1氯氮平组;各组小鼠每日腹腔注射空白溶媒或氯氮平注射液1次,连续注射28d。于给药后第29d采血分别测定各组小鼠的空腹血糖（FBG）、葡萄糖耐量及胰岛素水平;随后处死小鼠,提取出小鼠股四头肌,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）的方法检测PPAR-γ mRNA在骨骼肌中的表达水平变化。结果与空白对照组相比,腹腔注射给药28d后,10．0mg·kg^-1氯氮平组FBG、葡萄糖耐量、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数（IRI）明显增加（P〈0．05）,2．0mg·kg^-1氯氮平组各指标稍有变化,但差异无统计学意义;氯氮平各剂量组小鼠骨骼肌PPAR-γ mRNA表达量均有减少,但各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论氯氮平可慢性升高雄性C57BL／6小鼠的FBG、胰岛素水平及使糖耐量受损和诱发胰岛素抵抗;但不降低PPAR-γ mRNA的表达,表明氯氮平升高血糖,导致糖代谢障碍的原因可能与PPAR-γ无关。     

氧化低密度脂蛋白对细胞滋养细胞浸润能力的影响

目的:探讨不同浓度氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对细胞滋养细胞浸润能力的影响.方法:采用蛋白印迹法和RT-PCR技术检测不同浓度oxLDL(0.01,0.02,0.05,0.1 mg/mL)刺激下细胞滋养细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白及其mR-NA的表达:并检测相应浓度oxLDL对细胞滋养细胞能力的影响.结果:(1)不同浓度oxLDL(0.01,0.02,0.05,0.1mg/mL)刺激下细胞滋养细胞中PPAR-γ蛋白表达水平(15.0±2.0,18.4±2.8,21.3±2.4,25.8±3.0)与对照组(13.3±2.2)比较差异有统计学意义(P<0.01),各组分别比较差异亦有统计学意义P<0.01;(2)不同浓度oxLDL(0.01,0.02,0.05,0.1 mg/mL)刺激下细胞滋养细胞PPARγmRNA表达水平(14.9±3.1,17.2±4.0,19.4±3.2,21.7±3.0)与对照组(12.1±3.3)比较差异有统计学意义P<0.01,各组分别比较差异亦有统计学意义P<0.01;(3)不同浓度oxLDL(0.01,0.02,0.05,0.1mg/mL)刺激下细胞滋养细胞浸润指数(0.66±0.04,0.58±0.03,0.46±0.04,0.32±0.05),与对照组(0.69±0.05)比较差异有统计学意义P<0.01,各组分别比较差异亦有统计学意义P<0.01;(4)oxLDL浓度与细胞滋养细胞的浸润指数呈负相关,(r=-0.98,P<0.01);与细胞滋养细胞PPARγmRNA表达水平呈正相关(r=0.93,P<0.01).结论:oxLDL浓度升高可上调细胞滋养细胞中PPARγ的表达,从而影响细胞滋养细胞的浸润能力.