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在小鼠杂交瘤的制备、传代过程中,常遇到一些棘手问题;小到影响实验进展,大到细胞丢失:其中常见的是 1.污染,包括支原体、细菌及真菌污染。在杂交瘤未冻存前:这些污染会造成很大的损失。2.有些杂交瘤复苏后不易存活。3.个别情况下杂交瘤增殖不良,不易向24孔板内扩增。腹腔接种在一定程度上可以解决这一问题,但常规方法要求细胞数量较 相似文献
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作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag 14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3~6个片稳定传代,冻存于液氮中.复苏后其分泌抗体的水平末见下降。 相似文献
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一种拯救长时间远距离转送淋巴细胞杂交瘤细胞的方法 总被引:1,自引:0,他引:1
我们采用了先用96孔培养板培养,再经24孔培养板扩大培养至小培养瓶的培养途径,结合饲养细胞的方法成功地拯救了转送时间长达11d的淋巴细胞杂交瘤细胞。同时发现,用本方法拯救杂交瘤细胞时,培养液是否与原先一致天关紧要。 相似文献
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一种简捷的小鼠无麻醉脾内细胞抗原直接免疫法 总被引:2,自引:0,他引:2
本文介绍了一种简捷的小鼠无麻醉脾内细胞抗原直接免疫法。它不用麻醉,也无需切开腹膜暴露脾脏,只在皮肤上剪开0.5cm左右小口。整个操作过程只需1~3分钟。用流式细胞仪检测,免疫后第6天可观察到血清中特异抗体水平桐当于常规免疫第33天的水平,脾脏内单个核细胞数多4倍。它需要的抗原量少,每个小鼠一般只需一次注射2.5×10~5个细胞。 相似文献