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本文采用绿脓杆菌国际标准产毒株PA-103株,纯化绿脓杆菌外毒素A,免疫BALB/c小鼠。免疫鼠血清效价经ELISA法检测达1:80万。取脾脏混悬细胞10^8与10^7Sp2/0细胞,用50%oPEG(MW4,000)融合。取有克隆生长孔上清液用ELISA法筛选分泌抗体阳性孔。 相似文献
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用淋病球菌菌体抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得4A5,4C2,5C0.6B6四个持续分泌抗淋病球菌菌体抗原单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系。其产生的抗体与同抗原经酶联免疫吸附试验(ELISA),测知培养上清抗体滴度为1:16—1:128,接种同系小鼠腹腔诱生的腹水, 相似文献
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作者用人γ球蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0细胞系融合,并以猪γ球蛋白作ELISA进行筛选,获得两株抗γ球蛋白种间交叉反应抗原的McAb杂交瘤细胞系(1B11和2A4)。用有限稀释法对1B11和2A4进行了克隆化。阳性率达到100%。特异性试验结果表明:1B11能识别人IgG、芊γ球蛋白和兔γ球蛋白;2A4所识别的抗原存在于人Ig和猪γ球蛋白上,但未测出对兔γ球蛋白结合活性。 相似文献
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西尼罗(West Nile)病毒是黄病毒属中经蚊传播的成员,广泛分布于非洲、亚洲及欧洲的部分地区,主要引起地方性和流行性人类感染。亚尼罗病毒体为单链RNA基因组,含有表面囊膜(E)、衣壳(C)及膜样(M)三种结构蛋白。E蛋白含有大多数涉及免疫反应的抗原决定族。 相似文献
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作者用杂交瘤技术制备出抗人巨细胞病毒(HCMV)极早期抗原的单克隆抗体(McAb),探讨HCMV感染的早期临床诊断。 相似文献
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作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag 14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3~6个片稳定传代,冻存于液氮中.复苏后其分泌抗体的水平末见下降。 相似文献
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肿瘤细胞可表达肿瘤相关抗原(TAA),设抗原能开发用于诊断,也可作为免疫治疗的靶子,几乎每例结肠直肠癌的大部分肿瘤细胞表达有TAAC017-1A。该抗原为非分泌的糖蛋白,MW37KD。曾将鼠抗该抗原的单克隆抗体(McAb,IgG2A)用于治疗。 相似文献
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日本脑炎病毒(JEV)是60种黄病毒属中较重要的成员之一,对人类具有高度的致病性.在东南亚JEV和登革热(DEN)病毒交叉流行已对公众的健康造成严重的危害。这两种病毒均属于黄病毒属中一个不同亚组,这使预防接种和宿主的免疫应答变得更为复杂。黄病毒主要囊膜糖蛋白-E的抗原决定簇不仅为研制新的疫苗,而且为阐明感染机制提供了重要的依据。 相似文献
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应用一组24种抗汉坦病毒囊膜糖蛋白G1和G2的单克隆抗体(McAb)来检测抗原位点的表面分布和功能特性。用竞争结台法证明其中9种抗原位点性质不同,部分位点有重迭,有2个在G1上,7个在G2上。用血凝抑制试验和空斑减少中和试验分析表明,所有抗原位点除G1中的一种外均与病毒血凝活性有关。仅G1中的一个和G2中的2个位点具有病毒中和作用。 相似文献
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本文报道了用小鼠IgG2b单克隆抗体制备和纯化Fab、Fc和Fab/c片段。由于IgG2b抗体具有对蛋白酶敏感的特性,用胃蛋白酶在酶与抗体之比为1:30,pH4.8的条件下消化抗体.可获得的Fab/c片段产量高达30%。消化液经DEAE—纤维素初步层析,可以含有Fc片段的混合液中分离出Fab片段。 相似文献
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目前已广泛应用抗血型A和B单抗试剂进行人红细胞的ABO分型。作者发现,末次抗原追加免疫与进行融合间的间期,不仅可影响分泌抗体的杂交瘤的总数,而且可影响所得单抗的特异性,认为这是融合成功要点之一。为此,作者用人A型红细胞抗原追加免疫后于不同时间进行融合(连续6天,每天融合1次),做了两组实验。 相似文献
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抗入肝细胞癌单克隆抗体的产生及其相应抗原P^60的免疫组化定位研究 总被引:7,自引:0,他引:7
本文用肝癌手未标本,制备细胞悬液,免疫BALB/c小鼠,融合产生杂交瘤,用ABC染色法筛选单克隆抗体,获得特异性较好的杂交瘤-HAb18,抗体亚类为小鼠IgG1,抗原经亲和层析获得,分子量为60KD,过碘酸-Schiffs染色阴性,脂蛋白电泳阴性,PI:8.2。肝癌免疫组化染色阳性率为75%。 相似文献
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巨细胞病毒(CMV)感染人群(如AIDS病人,化疗患者和新生儿等)日益增多.追切需要一种快速敏感检测诊断CMV的方法。目前,检验诊断CMV的方法有:用免疫荧光法检测CMV早期抗原和分离培养病毒,观察CPE的出现等。本文详细地比较了4种检测早期培养细胞CMV诊断方法。这4种方法是(1)直接McAb荧光染色法(DFA);(2)间接McAb荧光染色法(IFA);(3)生物素标记DNA探针的原位杂交及(4)辣根过氧化物酶直接标记DNA(HRP—DNA)探针的原位杂交。 相似文献
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用CMV AD-169株感染自制人胚肺纤维母细胞,制备抗原,锣疲BALB/c小鼠,.取其脾细胞与Sp2/0-Ag14细胞融合,建立了一株稳定分泌抗HCMV特异性McAb的3B0杂交瘤细胞株。3B0McAb经鉴定属于IgG3亚娄。用间接免疫荧光法和间接酶免疫法证实为抗CMV特异性抗体。用微量细胞培养中和试验证实3B0McAb在加有豚鼠血清后可阻止HcMV感染后细胞病变的出现。3B0McAb经间接免疲荧光法检测中,晚期孕妇羊水细胞中HCMV抗原,在68例标本中有一例为阳性,阳性率为1.47%。该法方便,快速可为在胎儿时期诊断先天性HCMV感染提供依据。 相似文献
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用提此的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB/c小鼠,脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法克隆化,阳性率选100%,建立了1D8,5D7,4B1,2B3,1A4五株杂交瘸细胞系。用ELISA检测培养上清及诱生的腹水的效价。培养上清效价为1D8 1:1280^x,5D7 1:640^x,4B1 1:320^x 2B8 1:320^x,1A4 1:640^x,腹水效价寿1D8 10^-7,5D7 10^-7、4B1 10^-7,2B8 10^-5,1A4 10^-4。用免疫双扩散试验结果,五株单抗中有一株属IgG类。四株属IgG类。将单抗提此后用ELISA央心间接法及间接免疫荧光试验(IFA)对6神冠状病毒进行了特异性鉴定,除猪流行腹泻病毒外,不与其它冠状病毒发生交叉反应。取效价高而稳定的1D8,5D7,4B1细胞系单克隆抗体做IFA及直接EISA试验初步证明该McAb具有敏感性高,特异性强的优点,可作为猪流行性腹泻病毒检测的一种新试剂。 相似文献