Ln5γ2对胃癌细胞迁移、侵袭的影响

目的探讨Ln5γ2对胃癌SGC-7901细胞迁移、侵袭的影响及可能机制。方法实验分为对照组、Ln5γ2趋化组、上皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)干扰组、空载体组。以Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,观察穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目。采用ELISA和免疫荧光方法检测细胞缓冲液中MMP-2和MMP-9浓度以及细胞骨架结构改变。结果 Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目明显高于对照组(P<0.01),EGFR干扰后数目与对照组无显著差异(P>0.05)。EGFR干扰组细胞MMP-2和MMP-9浓度下降,细胞骨架结构模糊,伪足形成减少或消失。结论 Ln5γ2可以促进胃癌SGC-7901侵袭迁移,可能机制为通过EGFR改变细胞骨架结构,影响MMPs的分泌。     

红花注射液抑制培养胃癌细胞的增殖和迁移

目的:研究红花注射液对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响.方法:分别用100mL/L、200mL/L、300mL/L、400mL/L、500mL/L的红花注射液处理人胃癌SGC-7901细胞24h,48 h,采用MTT比色法检测红花注射液对SGC-7901细胞的增殖抑制效应;用细胞划痕愈合实验检测细胞迁移;采用Western 印迹检测MMP-1蛋白的表达.结果:红花注射液抑制SGC-7901细胞的增殖和迁移;并且可以下调MMP-1蛋白的表达.结论:红花注射液能够抑制培养胃癌SGC-7901细胞的增殖和迁移,提示红花注射液治疗胃癌可能有临床意义.     

紫草素对人胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移能力影响

目的 观察紫草素对人胃癌细胞SGC-7901增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 MTT法检测细胞增殖抑制作用,Transwell小室侵袭迁移实验检测细胞侵袭、迁移能力.实时荧光定量PCR测定加入不同浓度紫草素24h的SGC-7901细胞的MMP-2、MMP-7 mRNA的表达水平.结果 紫草素可以抑制人胃癌细胞的增殖,在2μg/ml之前其抑制效应呈浓度-时间依赖性;紫草素作用胃癌细胞株SGC-7901细胞48h后SGC-7901细胞的侵袭、迁移能力降低;紫草素作用胃癌细胞株SGC-7901细胞24h后,紫草素组的MMP-2的相对表达量均显著低于阴性对照组的相对表达量.结论经紫草素作用后SGC-7901细胞的侵袭、迁移能力降低,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7 mRNA的表达有关.     

胃癌细胞HGC-27与SGC-7901体外增殖和黏附能力的比较

目的 比较两株胃癌细胞HGC-27与SGC-7901的体外增殖和黏附能力.方法 分别培养胃癌细胞HGC-27、SGC-7901,用噻唑蓝(MTT)比色实验和流式细胞术(FCM)比较两种细胞的体外增殖能力;用同质黏附和异质黏附实验比较两种细胞的体外黏附能力.结果 MTT比色实验绘制,生长曲线显示SGC-7901生长较HCC-27慢;流式细胞术结果表明SGC-7901的增殖活性低于HGC-27(P<0.05);黏附实验中SGC-7901同质黏附强于HGC-27,异质黏附弱于HGC-27(P<0.05).结论 胃癌细胞SGC-7901的体外增殖能力和异质黏附能力低于HGC-27,同质黏附能力高于HGC-27,提示胃癌细胞HGC-27的转移能力可能强于SGC-7901.     

重组质粒pEGFP-N1-EMMPRIN对胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响

目的 构建人细胞外金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）重组质粒,观察其在胃癌SGC-7901细胞中的表达及对细胞侵袭和迁移的影响。方法 从结肠癌细胞株SW-480中提取总RNA,通过RT-PCR获得EMMPRIN基因,连接至载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-N1-EMMPRIN,通过脂质体Lipofectamine 2000转染胃癌SGC-7901细胞;RT-PCR和Western blotting分别检测EMMPRIN mRNA和蛋白在SGC-7901细胞中的表达,Transwell实验检测EMMPRIN对SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响。结果 重组质粒pEGFP-N1-EMMPRIN构建成功,并在SGC-7901细胞中表达,RT-PCR和Western blotting检测示转染后SGC-7901细胞中EMMPRIN mRNA和蛋白表达均增加,Transwell实验检测示转染后SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力均显著增强。结论 EMMPRIN可显著增强肿瘤细胞的侵袭与迁移能力。     

Hedgehog信号通路对人胃癌SGC-7901细胞侵袭迁移作用及机制探讨

目的:探讨Hedgehog(Hh)信号通路对人胃癌SGC-7901细胞侵袭迁移的作用及其机制.方法:环靶明特异性阻断Hh信号通路后,Transwell小室和划痕实验检测SCC-7901细胞侵袭和迁移的能力;RT-PCR检测SGC-7901细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA表达;细胞免疫化学检测SGC-7901细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果:阻断Hh信号通路能显著抑制SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力(P＜0.05).MMP-2和MMP-9的mRNA以及蛋白表达亦显著降低(P＜0.05).结论:Hh信号通路可能是通过调节MMP-2和MMP-9的表达促进SCC-7901细胞侵袭、迁移.     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.     

尿苷三磷酸通过PTEN/Vimentin抑制胃癌细胞的侵袭

目的 研究尿苷三磷酸(uridine triphosphate,UTP)对胃癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 采用细胞划痕实验检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移能力的影响;Transwell检测UTP对正常人胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN-45、SGC-7901侵袭能力的影响;Western blot检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平及Vimentin表达的影响.结果 细胞划痕实验表明UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移(P＜0.05).Transwell实验结果显示UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901侵袭(P＜0.01),但对正常人胃黏膜细胞GES-1无影响(P＞0.05).Western blot实验证实UTP组可增强胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平,同时下调Vimentin的表达.结论 UTP抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,可能是与其上调PTEN磷酸化水平,抑制Vimentin表达有关.     

褪黑素抑制缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化

目的:研究褪黑素对缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并初步揭示其分子机制?方法:在建立缺氧诱导SGC-7901人胃癌细胞发生EMT的基础上,通过免疫印迹方法检测蛋白表达水平?免疫荧光的方法检测蛋白在细胞中的分布和表达,研究褪黑素对EMT过程的作用?结果:缺氧使SGC-7901人胃癌细胞发生EMT,表现为形态发生改变,上皮标志物表达量减少?间充质标志物表达增加,褪黑素可抑制缺氧条件下活性氧簇(ROS)的产生和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及EMT?结论:在缺氧条件下SGC-7901人胃癌细胞可发生EMT,褪黑素可抑制该过程?这些结果揭示了褪黑素在缺氧引起的肿瘤细胞EMT过程中发挥的抑制作用,为褪黑素的临床应用提供了重要的理论依据?     

重楼总皂苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨重楼总皂苷（Rhizoma Paridis total saponin,RPTS)在体外对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响。方法 取对数生长期的SGC-7901细胞,用不同浓度RPTS(2.5、5、10、20、40 μg/mL)处理24 h,四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium, MTT）法观察RPTS对细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验、Matrigel transwell小室侵袭实验检测SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力。结果 MTT法检测表明RPTS（10、20、40 μg/mL）可明显抑制SGC-7901细胞的增殖能力（P＜0.05）;细胞划痕实验、Matrigel transwell小室侵袭实验结果表明RPTS(2.5、5、10 μg/mL)处理过的SGC-7901细胞,迁移能力和侵袭能力降低（P＜0.05）。结论 RPTS具有抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的能力。     

五倍子酸对人胃癌SGC-7901细胞迁移能力的影响

目的：探讨五倍子酸（GA）对人胃癌SGC-7901细胞转移的影响,阐明其作用机制。方法：培养人胃癌SGC-7901细胞,将其分为对照组及3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000 mg·L^-1GA组。MTT法检测各组SGC-7901细胞增殖抑制率,细胞划痕实验检测各组细胞转移能力,免疫细胞化学法检测各组SGC-7901细胞中血管内皮生长因子（VEGF）表达水平。结果：与对照组比较,不同剂量GA组SGC-7901细胞增殖抑制率明显升高,并呈剂量依赖性（F=59.451,P<0.01）。与对照组比较,不同剂量GA组SGC-7901细胞的划痕愈合率明显降低（P<0.01）,12.500和25.000 mg·L^-1 GA组细胞中VEGF蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：GA通过抑制人胃癌SGC-7901细胞中VEGF蛋白的表达来抑制SGC-7901细胞增殖及迁移。     

薯蓣皂苷元对人胃癌BGC-823和SGC-7901细胞生物学行为的影响

目的: 观察薯蓣皂苷元对人胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡过程的影响并探讨其机制。方法: 采用薯蓣皂苷元处理体外培养的BGC-823和SGC-7901细胞,用MTT法、Transwell 实验检测细胞的增殖、迁移、侵袭能力。用免疫印迹法检测BGC-823和SGC-7901细胞中凋亡相关蛋白BAX、凋亡抑制基因Bcl-2和MAPK信号通路的Erk1/2、JNK、p38三个通路中相关蛋白的表达。结果： 经薯蓣皂苷元处理后,BGC-823和SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低,凋亡相关蛋白BAX明显升高,Bcl-2的表达明显降低;p-p38表达水平明显降低,但JNK、p-JNK、Erk1/2、p-Erk1/2和p38的表达无明显变化。结论： 薯蓣皂苷元可能通过MAPK通路中的p-p38通路影响人胃癌BGC-823和SGC-7901细胞的生物学行为。     

苦参碱对胃腺癌细胞SGC7901黏附和移动的影响

目的:探讨不同浓度苦参碱对SGC7901细胞黏附和移动能力的影响。方法:5,50,100,250和500 mg/L苦参碱作用SGC7901细胞24 h后,黏附实验检测细胞黏附率,划痕损伤实验(Wound healing assay)检测迁移速度,在Transwell培养体系中,观察苦参碱对SGC7901细胞的抑制作用,PKA试剂盒检测PKA活性。结果:5,50,100,250和500 mg/L苦参碱处理24 h后,SGC7901细胞黏附率分别为78.56%,44.28%,42.48%,39.75%和31.54%,总体呈下降趋势,50 mg/L组与5 mg/L和500 mg/L组比较差异有显著性(P<0.01);与100 mg/L和250 mg/L组比较差异无显著性(P>0.05)。50 mg/L苦参碱作用24 h后SGC7901细胞迁移速度显著降低(P<0.01),Transwell培养体系中,苦参碱组上层迁移到下层的细胞明显少于不加苦参碱组(P<0.01),且PKA活性明显降低(P<0.01)。结论:苦参碱能抑制SGC7901细胞黏附和运动。     

顺铂耐药人胃癌细胞SGC-7901的耐药特性的研究

目的：研究人胃癌细胞SGC-7901顺铂耐药后的细胞特性的变化。方法用彗星实验( SCGE)观察SGC-7901与胃癌细胞顺铂耐药细胞株( SGC-7901/DDP)的DNA损伤修复的能力,观察SCGE检测图像的尾长评定DNA的修复能力;通过观察胃腺癌 SGC-7901细胞和 SGC-7901/DDP的形态学不同,比较SGC-7901和SGC-7901/DDP自身变化;用细胞划痕的方法检测 SGC-7901/DDP 和 SGC-7901的迁移能力,通过对其迁移能力的观察,初步评价两株肿瘤细胞的侵袭能力;MTT法分别检测临床常用化疗药物5-氟尿嘧啶、依托泊苷、表阿霉素、多西紫杉醇、奥沙利铂对SGC-7901/DDP的敏感性和IC50,观察这些药物对SGC-7901/DDP的敏感性和交叉耐药性。结果人胃腺癌 SGC-7901/DDP 较 SGC-7901的SCGE图像的尾长短,SGC-7901/DDP的DNA损伤修复能力比SGC-7901强,表明顺铂耐药与其DNA损伤修复能力密切相关;SGC-7901/DDP和SGC-7901的形态不同, SGC-7901/DDP SGC-7901体积较小、核分裂较多;通过用细胞划痕的方法观测到SGC-7901/DDP较SGC-7901的迁移能力变差;SGC-7901/DDP对5-氟尿嘧啶、依托泊苷、表阿霉素、多西紫杉醇、奥沙利铂有不同程度的交叉耐药性,其 IC50较SGC-7901明显增加。结论人胃癌细胞 SGC-7901对顺铂耐药可使DNA损伤修复能力增强,并具有多重耐化疗药性,但其细胞的迁移能力减弱。     

八核铜络合物对SGC-7901细胞生长的影响

目的:研究八核铜络合物(N-Cu)对人胃癌SGC-7901细胞生长的影响,探讨N-Cu抗肿瘤活性的相关机制。方法:体外常规培养人SGC-7901细胞,用不同质量浓度的N-Cu(3.125、6.250、12.500、25.000、50.000、100.000mg/L)分别处理24、48和72h后,MTT法检测SGC-7901细胞增殖抑制率,计算IC50。分别用12.5、25.0和50.0mg/LN-Cu处理SGC-7901细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察细胞形态的改变,流式细胞仪测定SGC-7901细胞周期和凋亡,Western-blot法检测Caspase-3蛋白的表达。结果:N-Cu作用24、48和72h对SGC-7901细胞的IC50分别为73.45、33.71和22.78mg/L。随着N-Cu质量浓度的增加和作用时间的延长,扫描电镜下可见细胞微绒毛逐渐消失,胞质收缩,细胞呈球形,早期凋亡细胞形成膜包裹的凋亡小体凸出于细胞表面。N-Cu可剂量依赖性和时间依赖性地抑制SGC-7901细胞的增殖,将其阻滞在G0/G1期(F组间=3586.750,F时间=418.133,F交互=224.383,P均<0.001)。N-Cu可剂量依赖性地促使SGC-7901细胞发生凋亡(F=66.932,P<0.001),增强Caspase-3蛋白的表达(F=55.133,P<0.001)。结论:N-Cu可通过诱导Caspase-3蛋白的表达,参与SGC-7901凋亡的调节,抑制细胞增殖。     

Myosin light-chain kinase contributes to short-term endothelial cell cytoskeletal alteration induced by serum from burned rats.

OBJECTIVES: To investigate the time-dependent effects of serum from burned rats on cytoskeletal filamentous actin (F-actin) reorganization by visualizing their distribution in human umbilical vein endothelial cell line ECV-304 and evaluate the role of myosin light-chain kinase (MLCK) in this process. METHODS: The serum-starved ECV-304 cells were incubated with the serum from burned rats for 30 min, 1, 2, 4, and 6 h, respectively, and 30 min before or after the incubation, the cells were treated with 5 micromol/L ML-7 for 30 min. F-actin was stained with rhodamine-phalloidin and observed under fluorescence microscope. RESULTS: Under normal condition, F-actin was distributed mainly in the cortical area of the endothelial cells. After stimulation with the burn serum, stress fiber formation could be clearly seen in the endothelial cells, exhibiting a time-dependent enhancement in a time course ranging from 30 min to 6 h. Such an effect could be significantly inhibited by a 30-min pretreatment of the cells with MLCK-specific inhibitor ML-7. Inhibition of MLCK also reversed actin reorganization in the endothelial cells pretreated with the burn serum. CONCLUSION: Serum from burned rats induces characteristic morphological changes in the endothelial cell actin cytoskeleton mainly due to the MLCK activation, an effect that can be reversed by the inhibition of MLCK.     

香参壳方对人胃癌细胞上皮间质转化及转移的影响

目的 考察香参壳方调节人胃癌细胞SGC-7901上皮间质转化(EMT)及转移的作用机制。方法 体外培养SGC-7901细胞,随后加入不同浓度的香参壳方含药血清进行干预。划痕实验及Transwell小室法观察SGC-7901细胞的迁移与侵袭能力,MTT法考察SGC-7901细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中N-cadherin、Vimentin、E-cadherin、p-GSK3β/GSK3β、β-Catenin表达水平。结果 香参壳方可有效抑制SGC-7901细胞的迁移及侵袭能力,抑制其增殖,同时下调细胞中N-cadherin、Vimentin、p-GSK3β/GSK3β及β-Catenin的表达,上调E-cadherin的表达。结论 香参壳方主要通过介导GSK3β/β-Catenin信号通路抑制胃癌细胞的EMT,降低弱细胞迁移与侵袭能力,从而发挥其胃癌术后的辅助治疗作用。