银杏萜内醌提取与纯化技术

银杏萜内酯的独特药理作用引直敢国内外学者的关注，其取提纯化成为研究的重要内容，对银杏萜内酯的提取与纯化技术包括溶剂萃取法，柱提取法，溶剂萃取－柱提取法，超临界提取法及色谱或柱层析纯化法进行了介绍。     

银杏萜内酯的分离、纯化和结构鉴定

目的 :研究银杏 (GinkgobilobaL .)叶中的萜内酯类成分。方法 :95 %乙醇提取 ,索氏提取分段 ,硅胶柱层析得到总内酯 ,再用制备型RP HPLC方法得到纯化合物 ,用IR、1HNMR、13 CNMR ,尤其是通过 2DNMR光谱技术确定化合物结构。结果 :分得 6个萜内酯类成分 ,分别为白果内酯 (Ⅰ )、银杏内酯A(Ⅱ )、银杏内酯B(Ⅲ )、银杏内酯C(Ⅳ )、银杏内酯J(Ⅴ )和银杏内酯K(Ⅵ )。结论 :其中化合物Ⅵ为新化合物 ,并通过 2DNMR光谱技术对所分得的银杏内酯类化合物的碳氢信号进行了确切归属。银杏内酯K在 10 -6～ 10 -5mol/L的终浓度下 ,可对 2× 10 -7mol/LPAF刺激的中性粒细胞β 葡萄糖酸苷酶的释放有明显的抑制作用。     

银杏根皮中萜内酯提取工艺研究

目的:探索出以乙醇-水为浸提溶剂的银杏根皮中萜内酯的提取工艺,确定最佳提取参数.方法:通过对银杏根皮提取参数中浸提温度、浸提时间、料液比、浸提醇浓度、浸提酸度进行单因素梯度试验,采用HPLC法检测含量,确定银杏根皮中萜内酯浸提最佳参数.结果:银杏根皮中萜内酯最佳浸提条件:浸提时间2 h;料液比1:15;浸提温度50℃;浸提液pH 3;30%乙醇.结论:以乙醇-水为溶剂从银杏根皮中提取萜内酯的方法具可行性和生产应用价值.     

银杏萜内酯的生物合成研究进展

银杏萜内酯是银杏提取物中独有的成分,本文对银杏萜内酯化合物的研究进行综述,主要包括银杏萜内酯的种类和结构、生物合成途径及相关基因的克隆,并对其研究前景进行了展望.     

银杏萜内酯的研究概况

银杏萜内酯是血小板活化因子的强拮抗剂,对心脑血管疾病具有显著的疗效。本文对近10年银杏萜内酯在提取分离、含量测定、药理活性、药代动力学、组织培养以及生物合成等方面的研究概况作了综述。     

银杏叶中银杏萜内酯的GC-MS定性定量分析

目的：建立银杏叶中银杏内酯A，B，C和白果内酯的定性定量分析方法。方法：银杏叶以20％乙醇超声提取，乙酸乙酯萃取，再经酸性氧化铝－活性炭－硅藻土混合柱层析，在100℃以双－三甲基硅烷三氟乙酰胺硅烷化60min后，用HP－5 MS毛细管色谱柱，柱温从180℃程序升温至300℃。采用选择离子监测（SIM）方式，以峰值最高的碎片离子作为监视离子进行定量分析。结果：银杏内酯A，B，C和白果内酯的保留时间分别为13．7，14．3，15．3和6．8min，特征（监视）离子（m/z)分别为537，625，713及455（299）；平均回收率分别为102．0％，99．4％，96．0％和96．3％，RSD分别为0．54％，2．40％，1．98％和2．43％。结论：本方法操作简便、重现性好、专属性强、准确可靠，可作为银杏萜内酯的定性定量分析方法。     

银杏萜内酯的研究概况

银杏萜内酯是血小板活化因子的强拮抗剂，对心脑血管疾病具有显著的疗效。本文对近10年银杏萜内酯在提取分离，含量测定，药理活性，药代动力学，组织培养以及生物合成等方面的研究概况作了综述。     

银杏萜内酯的化学结构及药理作用研究进展

目的：介绍银杏萜内酯的化学结构和药理作用的研究进展。方法：全面查阅有关银杏萜内酯的文献并结合我们自己的工作进行综述。结果：银杏萜内酯化学结构独特，是一类特殊的高效ＰＡＦ受体拮抗剂，具有多方面的生理活性。结论：我国银杏资源丰富，应结合现代药理研究成果，开发更好的产品，为人民群众服务     

银杏萜内酯的化学结构及药理作用研究进展

 目的：介绍银杏萜内酯的化学结构和药理作用的研究进展。方法：全面查阅有关银杏萜内酯的文献并结合我们自己的工作进行综述。结果：银杏萜内酯化学结构独特，是一类特殊的高效PAF受体拮抗剂，具有多方面的生理活性。结论：我国银杏资源丰富，应结合现代药理研究成果，开发更好的产品，为人民群众服务。     

银杏萜内酯对小鼠记忆功能影响的实验研究

目的:探讨银杏萜内酯对小鼠记忆功能的影响。方法:采用跳台、避暗、水迷宫程序自动控制仪,观察银杏萜内酯对小鼠记忆功能的影响。结果:银杏萜内酯能够明显提高正常小鼠的记忆功能,并能显著改善记忆获得障碍、记忆巩固障碍及记忆再现障碍模型小鼠的记忆功能。结论:银杏萜内酯具有广泛改善小鼠记忆功能的作用,并有一定量效关系。     

不同树龄银杏叶在不同季节中总黄酮和总内酯的含量变化

目的：确定银杏叶最适宜采收季节。方法：采用HPLC法（二级管阵列检测器DAD和蒸发光散射检测器ELSD）分别测定银杏叶中总黄酮和总内酯的含量。结果：不同树龄,不同季节的银杏叶总黄酮、总内酯含量不同,结论：银杏叶的总黄酮、总内酯以二、三年生的为高,总黄酮在5月份,总内酯在9月份含量为高。     

基于UPLC-TQ-MS考察不同树龄果用银杏叶萜内酯含量变化规律

目的:建立超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法(UPLC-TQ-MS)同时测定银杏叶中4个萜内酯成分的含量.方法:采用ACQUITYTM UPLC BEH C18(2.1 mm×100mm,1.7μm)色谱柱,以水(A)-甲醇(B)为流动相,等度洗脱(70％A),流速0.4 mL·min-1,柱温30℃;Waters XevoTM TQ质谱仪以多反应离子监测(MRM)方式进行负离子检测.结果:各成分在5.0 min内分离良好,在相应的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均＞0.990 3;加样回收率(n=6)为98.83％～103.9％,RSD均小于3％.不同树龄果用银杏叶中萜内酯的含量差异较大,低树龄银杏叶含总内酯较高,随着树龄的增长,内酯含量逐渐降低.结论:该方法简便、快速、重复性好、专属性强,适用于银杏叶中萜内酯类成分的快速定量分析.     

银杏叶的指纹图谱建立及质量评价研究

目的比较不同产地、树龄、采收期银杏Ginkgo biloba叶的质量,固定欣脉胶囊处方中银杏叶的来源产地。方法建立银杏叶的HPLC指纹图谱测定方法,对不同产地、树龄、采收期银杏叶的指纹图谱进行测定,并测定不同产地、树龄、采收期银杏叶总黄酮醇苷和总萜内酯的量,对各批次银杏叶主要成分的量及指纹图谱进行对比分析。结果不同产地、树龄、采收期的银杏叶总黄酮醇苷、萜类内酯量以及指纹图谱均不同。结论所建立的指纹图谱测定方法为银杏叶的合理采收及质量评价提供了科学依据;江苏邳州、2~3年树龄、6~8月份采集的银杏叶质量较佳,可以作为欣脉胶囊处方中银杏叶的固定来源产地。     

银杏叶中双黄酮成分的提取与测定

目的分离纯化银杏Ginkgo biloba叶中的双黄酮类成分,考察银杏叶变黄前后黄酮类成分质量分数的变化。方法从自然脱落的银杏叶中提取分离双黄酮类成分,对其乙醇提取物的二氯甲烷部位进行了分离,通过硅胶柱色谱和半制备液相方法对目标成分进行制备,采用HPLC法对银杏叶中的双黄酮进行了测定。结果分离的4个化合物分别为去甲银杏双黄酮、银杏双黄酮、异银杏双黄酮和金松双黄酮。对变黄前后银杏叶中4种双黄酮进行测定,结果表明,自然黄叶前3周内,银杏叶中双黄酮量逐渐降低,质量分数差别达30%左右。结论 HPLC法可用作银杏叶中双黄酮的测定,方法简便、可靠,能用于银杏叶的质量控制。同时,制备条件可对快速制备双黄酮对照品提供依据。     

基于转录组测序的银杏类黄酮生物合成关键基因表达分析

目的对银杏进行转录组测序,分析银杏生长发育不同时期类黄酮生物合成关键基因的表达。方法以银杏幼年树和成年树不同时期叶片作为供试材料,利用Illumina HiSeq 2000进行转录组测序,对Unigene进行功能注释,分析银杏类黄酮生物合成关键基因的表达特征。结果转录组测序共获得43 073条Unigene,其中35 179条被注释,基因差异表达(DEG)筛选得到5 117个基因。通过对类黄酮合成相关KEGG途径进行分析,筛选出50条候选基因。分析50条候选基因的表达规律,发现类黄酮合成关键基因均在银杏幼叶中高表达,但在成年树与幼年树同时期叶片之间表达差异不显著。分析与类黄酮合成关系密切的13个基因发现,其中肉桂酸4-羟化酶(C4H)、查耳酮合成酶(CHS)、花青素合成酶(ANS)、花青素还原酶(ANR)和类黄酮O-甲基转移酶(FOMT)基因的表达量较高,类黄酮3′-羟化酶(F3′H)、类黄酮3′,5′-羟化酶(F3′5′H)和黄酮醇合成酶(FLS)基因的表达量则相对较低。结论通过转录组高通量测序,筛选分析了银杏类黄酮生物合成的关键基因及其表达特征,为提高银杏类黄酮产量提供了分子生药学理论基础。     

INDENA SPA公司的银杏叶制剂专利网

意大利INDENA SPA公司是一家专营植物提取物制造与销售的跨国公司,该公司在银杏叶制剂领域依据自身研发优势,并通过在竞争对手专利网的外围构建自身的专利网,有效地保护了产品的市场。该文通过对INDENA公司银杏叶制剂专利网的申请时机、法律状态、技术发展路线、专利网布局等多角度的分析,为我国企业的银杏叶制剂开发提供了参考,建议我国申请人在研究中充分吸收借鉴他人的专利技术和布局经验,提高科研及专利保护的水平。     

银杏中黄酮类化合物生物合成、调控机制及其影响因素的研究进展

银杏叶片提取物对多种疾病具有治疗效果,并已被广泛应用于临床实践。黄酮类化合物是银杏叶片提取物的主要活性成分之一,所以研究银杏黄酮的合成途径具有非常重要的意义。该综述首先回顾了植物黄酮生物合成途径的总体研究概况,并介绍了目前已经发现的银杏黄酮合成相关基因;其次,介绍了高通量测序技术在银杏研究中的几个实际应用。另外,作为银杏的重要研究方向之一,该综述讨论了外界条件对银杏细胞、整株及采摘后叶片的黄酮含量及相关基因表达的影响,并着重介绍了笔者实验室的最新实验结果。最后,该综述对银杏黄酮领域未来的研究方向做了展望。     

银杏叶史话:中药/植物药研究开发的典范

从银杏叶的活性成分、药理作用、毒性与临床应用、各国药典质量标准的比较、药用发展史和我国银杏叶研究开发的现状进行详尽地阐述、分析与讨论。银杏叶的药用历史始于我国宋代,日本、德国的科学家在研究开发方面作出了开创性重要贡献,其发展史充分体现了锐意创新,成为中药/植物药研究开发的典范。我国银杏叶创新药物的研究已取得了长足进展,获得了重大成果,但我国银杏叶提取物及其制剂的质量标准与欧美存在明显差距,产业集中度较低。     

基于代谢组学和转录组学的不同生长年限下银杏萜类生物合成关键基因表达分析

目的 以不同发育阶段不同树龄的银杏叶（银杏幼树叶,多年生银杏树叶）为对象,分析次生代谢物变化规律,测定黄酮及萜内酯含量,分析萜类生物合成的通路和关键基因表达,为提高银杏萜内酯产量提供分子生药学数据。方法 采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术,并进行高通量转录组学测序（RNA-seq）,从差异表达基因中寻找次生代谢物生物合成的关联酶基因。结果 代谢数据表明,不同树龄,不同发育阶段的银杏叶次生代谢物明显不同,黄酮类成分,老树叶片与幼树叶4～7月含量均呈下降趋势;同发育阶段,幼树叶含量高于老树叶片含量;萜内酯类成分,老树叶片4～7月含量略微呈上升趋势,幼树叶略微呈缓降趋势;同发育阶段,幼树叶含量高于老树叶片含量。转录组分析出萌发期,老树叶片与幼树叶片生长状态相似,5～7月老树叶与幼树叶基因表达发生较大变化。筛选出49条与萜类合成有关的候选基因,分析后发现甲羟戊酸途径（mevalonatepathway,MVA）中老树叶表达高于幼树叶;甲基赤藻糖醇磷酸途径（methylerythritol4-phosphate pathway,MEP）中幼树叶表达高于老树叶。结论 幼树叶比老树叶药用活性成...