威麦宁抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长及其血管生成的实验研究

目的:探讨威麦宁对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长及其血管生成作用的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,用药后取瘤组织称重并计算抑瘤率;瘤组织切片HE染色,光镜下进行形态学观察;免疫组化法检测瘤组织血管内皮细胞CD34的表达情况并计数微血管密度(MVD)。结果:威麦宁浓度在100mg/kg.d、250mg/kg.d时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%和51.56%;对照组癌巢间微血管丰富,用药组瘤组织及其周围微血管均减少;用药组瘤组织内MVD明显低于NS组(P<0.01)。结论:威麦宁能减少肿瘤组织血管生成,从而抑制小鼠移植瘤的体内生长。     

SHG-44细胞体内外实验中KDR mRNA 的表达及意义

目的探讨插入型激酶受体(KDR)mRNA在裸小鼠可移植人脑胶质瘤不同生长阶段与不同组织区域中的表达规律,以及探讨其与肿瘤血管形成的作用关系,以期从肿瘤间质角度为胶质瘤选择治疗靶点提供实验依据.方法利用恶性人脑胶质瘤SHG-44细胞进行裸小鼠体内实验:在30只裸小鼠(10组)皮下建立SHG-44细胞移植瘤动物模型,每5天取一组标本,以KDR mRNA原位分子杂交技术处理移植瘤石蜡标本.同时在体外进行SHG-44细胞原位杂交,所得结果和移植瘤比较分析.结果 KDR mRNA高表达于移植瘤中内皮细胞和部分瘤细胞,且在移植的早期(5-15d)和晚期(35-50d)以及在缺氧瘤组织区域上存在相对高表达.体外SHG-44细胞不表达KDR mRNA.结论 KDR mRNA在移植性人脑胶质瘤细胞中有较高表达,在不同的生长阶段和不同的瘤组织区域上存在差异表达的规律性,对肿瘤血管形成具有重要作用.KDR可作为抗胶质瘤血管形成的治疗靶点.     

川芎嗪对小鼠肺癌血管生长和VEGF表达的抑制

目的　观察川芎嗪对实体肿瘤及其血管生长的抑制作用及作用环节。方法　用C57BL小鼠接种Lewis肺癌细胞造模 ,川芎嗪注射液 5 0、10 0、2 0 0mg·kg-1·d-1腹腔注射2 1d后 ,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶数及微血管密度 ,并用WesternBlot法和免疫组化法分析肿瘤细胞VEGF的表达。结果　川芎嗪能减少小鼠Lewis肺癌肿瘤体积、重量和肺转移灶数 ,并能降低肿瘤微血管密度 ,抑制肿瘤细胞VEGF的表达。结论　川芎嗪能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移 ,其机制可能与抑制VEGF表达 ,降低肿瘤微血管密度有关。     

夏枯草消瘤合剂对Lewis肺癌小鼠的药效作用

目的 探讨夏枯草消瘤合剂对Lewis肺癌小鼠的治疗作用。方法 采用C₅₇BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,将30只小鼠随机分为3组：模型对照组、夏枯草消瘤合剂组（M组）、顺铂组（DDP组）,连续用药14 d。通过对Lewis肺癌小鼠的大体观察,测定肿瘤大小,HE染色方法测定肿瘤病理组织学变化,免疫组化方法测定肿瘤组织的细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和P16的表达情况。结果 模型对照组瘤体质量最重,与其他组比较差异均有统计学意义（P<0.05）;M组可在一定程度上改善小鼠的生存状态及生活质量;各组小鼠的肿瘤生长曲线及HE染色结果显示：M组可抑制肿瘤细胞的生长,且对正常细胞有保护作用;M组、DDP组均可显著降低CyclinD1阳性表达（P<0.01）,但是M组对于提高P16阳性表达的效果不显著。结论 夏枯草消瘤合剂具有较好的抑制肺癌生长的作用。     

川芎嗪能抑制ECV304增殖

川芎为活血化瘀代表中药，临床应用甚广。川芎嗪(TMP)为川芎主要有效成分之一。有研究表明，川芎嗪注射液能抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠移植瘤的生长和肺转移，可降低肿瘤组织微血管密度和抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达。     

灵芪胶囊对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用 及对相关血管生成因子表达的影响

［摘要］目的通过建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型，探讨灵芪胶囊对移植瘤生长、转移及其相关血管生成因子的作用。方法以Lewis肺癌荷瘤小鼠为研究对象，检测灵芪胶囊对转移瘤和肺转移灶的抑制率。应用S P免疫组织化学方法，检测灵芪胶囊对荷瘤小鼠血管生成因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、环氧化酶（COX） 2表达的影响。用分光光度计测量灵芪胶囊对荷瘤小鼠血清中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）含量的影响。结果灵芪胶囊对Lewis肺癌荷瘤小鼠表现出明显抑瘤作用，其高、中、低剂量抑瘤率分别为35.64%，29.23%，21.03%，并与复方环磷酰胺合用有明显的增效减毒作用。同时，灵芪胶囊可有效抑制肺癌转移，能够下调血管生长因子bFGF和COX 2的表达，并降低血清中的iNOS含量而抑制肺癌血管生成，从而发挥抗转移作用。结论灵芪胶囊具有抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长和转移的作用，其作用机制可能与下调COX 2和血管生成因子的表达及降低血清中的iNOS含量有关。     

复方苦参注射液联合环磷酰胺对小鼠Lewis 肺癌抑瘤作用的实验研究

目的探讨复方苦参注射液联合环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长、转移及血管新生的抑制作用及相关机制。方法建立C57BL·6^-1小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、复方苦参组、CTX组和联合治疗组,每组各10只小鼠,分别腹腔注射生理盐水、复方苦参注射液、环磷酰胺、联合复方苦参注射液和环磷酰胺,定期检测皮下肿瘤体积,接种后12d处死小鼠,检测比较两组小鼠瘤体质量和体积、肺转移瘤结节数,同时以免疫组化法检测小鼠肿瘤组织中微血管密度（MVP）以及VEGF水平。结果复方苦参注射液联合环磷酰胺可显著减少瘤体质量和体积,减轻肿瘤转移,下调VEGF表达,抑制血管生成,与对照组、复方苦参组和CTX组比较差异均有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论复方苦参注射液和CTX可协同拮抗肿瘤新生血管生成,抑制肿瘤组织生长与转移,效果优于两者单独使用。     

康莱特注射液在Lewis肺癌中对肿瘤生长及EGFR蛋白表达的影响

目的：探讨康莱特注射液（KLT）对小鼠Lewis肺癌生长及对表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达的影响。方法：建立小鼠Lewis肺癌模型,将40只接种Lewis肺癌细胞的C57BL/6小鼠随机分成4组：模型对照组、KLT低剂量组（6.25mL/kg）、KLT中剂量组（12.5mL/kg）、KLT高剂量组（25mL/kg）,每组10只。小鼠连续腹腔注射KLT注射液14d,于接种后第16天处死小鼠,测量瘤重及体重,计算肿瘤抑制率,提取肿瘤组织总蛋白,通过Westernblot法检测肿瘤组织EGFR的蛋白表达情况。结果：KLT注射液能明显抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长,影响肿瘤组织的形态及组织学改变,并能降低肿瘤组织中EGFR的蛋白表达量。结论：KLT注射液可明显抑制小鼠Lewis肺癌的生长,其机制可能与抑制EGFR的蛋白表达有关。     

麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用及机制研究

目的:研究麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用,并探究其可能的作用机制。方法:通过腋下接种Lewis肺癌细胞复制Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将60只小鼠随机分为模型组(生理盐水,每天灌胃1次)、顺铂组(6mg/kg,每周腹腔注射1次)、麦门冬汤加减方组(20 g/kg,每天灌胃1次)和联合组(每周腹腔注射6 mg/kg顺铂1次+每天灌胃20g/kg麦门冬汤加减方1次),每组15只。所有小鼠均连续给药2周。给药结束后,检测各组小鼠瘤质量和胸腺指数,苏木精-伊红(HE)染色后观察其瘤体组织病理变化,TUNEL法检测其瘤体细胞凋亡指数,Western blot法检测其瘤体组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和促凋亡基因Bax蛋白表达。结果:与模型组比较,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量均显著降低(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量均显著升高(P<0.05);并且联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量明显低于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量明显高于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05)。HE染色结果显示,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠肿瘤细胞密度有所降低,肿瘤组织坏死区域增多,并且联合组小鼠的坏死区面积明显大于麦门冬汤加减方组和顺铂组。结论:麦门冬汤加减方可通过下调瘤组织中Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达,从而抑制Lewis肺癌移植瘤模型小鼠肿瘤的生长。     

川芎嗪联合顺铂对小鼠肿瘤血管生成的研究

目的研究川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌血管内皮生长因子(VEGF)和半乳糖凝集素1(Galectin-1)表达的影响。方法建立小鼠Lewis肺腺癌移植瘤模型。按照体重将小鼠随机分为4组,每组10只:空白组(0.9%NaCl 0.2mL),川芎嗪组(100 mg·kg^-1,0.2 mL),顺铂组(2 mg·kg^-1,0.2 mL),联合组(川芎嗪+顺铂,剂量同上,0.2 mL),腹腔注射,每日1次,给药14 d后,处死小鼠,计算抑瘤率。用免疫组化法检测VEGF、Galectin-1的表达。结果川芎嗪组、顺铂组、联合组的抑瘤率分别为20.42%,34.65%,59.81%。VEGF和Galectin-1的表达:空白组、川芎嗪组、顺铂组、联合组分别为(62.41±8.83)×10~3,(27.84±2.25)×10~3,(28.67±2.33)×10~3,(23.52±2.76)×10~3;(25.96±3.50)×10~3,(20.29±2.85)×10~3,(19.11±2.42)×10~3,(15.15±2.43)×10~3。与空白组比较,3个给药组差异均有统计学意义(均P<0.01);与川芎嗪组和顺铂组比较,联合组差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。VEGF与Galectin-1的表达呈正相关性(r=0.638,P<0.05)。结论川芎嗪能够抑制Lewis肺癌移植瘤生长,与顺铂联用有协同抑制作用,其作用机制可能是通过抑制VEGF与Galectin-1表达来抑制肿瘤血管生成进而抑制肿瘤生长。     

节律化疗对Lewis肺癌血管生成的影响

目的观察环磷酰胺(CTX)节律化疗对Lewis肺癌肿瘤血管生成的影响。方法建立荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠模型,随机分为CTX节律化疗组、CTX最大耐受剂量(MTD)组和对照组,于造模后第6天开始分别给予相应治疗。观察小鼠饮食、活动及一般状况,连续测量肿瘤大小和小鼠体质量。处死小鼠后,称瘤重,免疫组织化学方法测定各组肿瘤组织的微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果①与MTD组和对照组相比,节律化疗组肿瘤生长曲线较平缓,动物体质量无下降;②实验结束时,节律组、MTD组和对照组的平均瘤重分别为(1.68±0.37)g、(1.94±0.56)g、(3.75±0.86)g;③节律组、MTD组和对照组的MVD分别为15.09±3.03、23.51±2.78和26.38±2.56,VEGF高表达率分别为46.2%、73.5%和81.3%。结论CTX节律化疗可显著抑制Lewis肺癌的生长及其血管生成,且毒副作用较MTD化疗小。     

灵芪胶囊治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的：通过建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型，探讨灵芪胶囊（LingQicapsule，LQC）治疗肺癌的机制。方法：以Lewis肺癌荷瘤小鼠为实验研究对象，检测LQC对移植瘤生长的抑制率。同时观察其对荷瘤小鼠免疫器官的影响。应用透射电镜和光镜观察LQC对移植瘤细胞超微结构的影响。结果：LQC对Lewis肺癌荷瘤小鼠表现出明显抑瘤作用，并与复方环磷酰胺合用有明显的增效减毒作用。LQC可增加荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量，提高脏器指数，尤以灵芪胶囊中剂量组增加明显（P〈0．05）。同时亦使肿瘤组织的细胞形态结构发生改变。结论：LQC具有抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的作用，同时还显现出艮好的增效减毒及免疫调节作用。     

海参皂苷Echinoside A和ds-Echinoside A抑制小鼠Lewis肺癌生长和转移作用

目的探讨海参皂苷Echinoside A(EA)和ds-Echinoside A(DSEA)对小鼠肿瘤生长和自发肺转移的抑制作用及机制。方法建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌自发性肺转移模型,连续腹腔注射给药21 d,剥离原位肿瘤和双侧肺,分别称瘤重和计数肺表面转移灶结节数;采用RT-PCR法检测肿瘤组织中半胱氨酸蛋白水解酶3(Cysteine-requiring Aspartate Protease,Caspase 3)、基质金属蛋白酶-2/9(matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1/2(tissue inhibitor of metalloproteinase-1/2,TIMP-1/2)、乙酰肝素酶(heparanase,HPA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达。结果 EA和DSEA均能抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长,并显著抑制减少肺表面转移灶结节数。EA和DSEA可以显著提高荷瘤小鼠肿瘤组织中Caspase 3和TIMP-1/2mRNA的表达,降低MMP-2/9、HPA和VEGF mR-NA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 EA和DSEA能显著抑制小鼠Lewis肺癌生长和自发性肺转移,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,调节细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解相关基因的表达、抑制VEGF的释放,从而抑制肿瘤细胞的转移和血管新生有关。     

杂合肽抗肿瘤血管生成的实验研究

目的 观察杂合肽对肿瘤血管生成的抑制作用，并探讨其可能作用机制。方法 体外药效实验，采用MTT法及血管内皮细胞迁移法，体内采用Lewis肺癌瘤株于腹股沟皮下接种C57BL／6N小鼠，观察皮下移植瘤生长情况。结果 杂合肽对血管内皮细胞增殖及迁移(48小时)具有显著的抑制作用，在体内使Lewis肺癌皮下移植瘤体积明显缩小，毛细血管稀少，并表现具有一定的剂量依赖关系。结论 杂合肽能够明显抑制荷瘤鼠肿瘤的生长，其作用机制可能与抑制肿瘤血管内皮细胞生成有关。     

VGFR噬菌体疫苗的构建及抗肿瘤效果

目的构建重组血管内皮生长因子受体(VGFR)／中心实验激酶功能区受体(KDR)噬菌体疫苗并且观察其抗肿瘤效果。方法将人源VGFR、KDR的膜外部分插入到T7噬菌体的基因组中,作为一种融合蛋白展示在T7噬菌体外壳上,从而构建了一种新型的抗肿瘤疫苗。ELlSA方法检测抗VGFR、KDR 抗体,C57小鼠经过四次免疫,接种Lewis肺癌后记录肿瘤生长情况,评价疫苗效果。结果成功从人 A549细胞中可克隆出VGFR、KDR基因,并且构建了相应的噬菌体疫苗。ELISA方法检测到了免疫小鼠血清中有特异性抗体的产生,滴度可达104,肿瘤生长曲线显示噬菌体疫苗有明显的抑制肿瘤生长的作用。结论提示利用噬菌体展示技术构建的噬菌体疫苗的应用是一种非常有效的抗肿瘤方法。     

博来霉素A_5抑制血管生成和抗肿瘤转移作用的实验研究

目的:证实博来霉素A5抑制血管生成和抗肿瘤转移作用。方法:将含有0.5μg博来霉素A5的载体置于胚龄7d的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,48h后观察抑制血管生成情况。Lewis肺癌皮下接种C57BL6小鼠6d后,在移植瘤周围及其基底部多处局部注射博来霉素A5,每鼠每次0.6mg,每5天1次,共3次,接种后25d处死小鼠,观察皮下移植瘤血管生成抑制情况和对肺转移的抑制作用。结果:博来霉素A5可使载体周围CAM新生血管明显减少甚至消失。Lewis肺癌皮下移植瘤体积小,颜色苍白,毛细血管稀少,很少出血,坏死常见。肺转移抑制率为80%。结论:博来霉素A5能强烈抑制鸡胚CAM和Lewis肺癌皮下移植瘤的血管生成,瘤周局注具有抗转移作用。提示博来霉素A5是一有潜力的血管生长抑制剂。     

小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型的建立和应用

目的探讨肺癌动物模型的建立及其对药物治疗的反应。方法 160只C57BL/6小鼠随机分为胸腔移植组和皮下移植组,每组80只。在小鼠腋后线第6肋间胸腔或小鼠腋部皮下,分别移植鼠源性Lewis肺癌细胞0.2ml(5×106/ml)。采用不同化疗药物治疗后,观察小鼠生存状态,用免疫组化方法检测肿瘤组织内增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果与皮下移植组比较,胸腔移植组小鼠治疗后生活状态好转,VEGF表达和PCNA阳性细胞数明显下降。结论与小鼠皮下移植肺癌模型比较,胸腔移植模型能更好的反映药物的作用。     

Fucoidan对Lewis肺癌荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用

目的研究褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan)对Lewis肺癌小鼠抗肿瘤及免疫调节作用。方法建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,腹腔注射给予不同浓度Fucoidan连续21d,检测Fucoidan对肿瘤生长、免疫器官指数。采用ELISA法检测荷瘤小鼠细胞因子水平。以CD34血管内皮细胞标记物,采用免疫组化法分析肿瘤内微血管生成情况。结果100和200mg.kg-1 Fucoidan显著抑制Lewis肺癌的生长,抑瘤率分别是42.54%,58.63%(P<0.05); 显著增加荷瘤小鼠脾指数(P<0.05); 50和100mg.kg-1组可提高荷瘤小鼠血清中IL-1β水平,100mg.kg-1可提高IL-2、IL-6和FAS-L水平; 200mg.kg-1组血清IFN-γ水平显著提高(P<0.05); 100和200mg.kg-1组肿瘤组织中微血管密度显著降低(P<0.05)。结论Fucoidan对小鼠Lewis肺癌的生长有抑制作用,可能与增强荷瘤小鼠抗肿瘤免疫、抑制肿瘤血管新生有关。     

新的血管生成抑制肽抗肿瘤血管生成的实验研究

目的观察一种新的血管生成抑制肽对肿瘤的抑制作用，并初步探讨作用机制。方法体外药效实验，采用MTT法及血管内皮细胞迁移法，体内采用Lewis肺癌瘤株皮下接种C57BL／6N小鼠，兔眼角膜烧伤模型。观察血管生成情况。结果新的血管生成抑制肽对血管内皮细胞增殖、迁移有明显的抑制作用。体内使Lewis肺癌皮下移植瘤体积明显缩小，并对烧伤诱导的兔眼角膜新生血管也具有明显抑制作用。结论新的血管生成抑制肽能明显抑制Lewis的肿瘤生长，其机制可能与抑制肿瘤血管生成有关。     

塞来昔布联合吉西他滨对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用

目的 研究塞来昔布与吉西他滨(GEM)联用对Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤的联合效应.方法 Lewis肺癌细胞系建立小鼠皮下移植瘤动物模型.将40只小鼠随机分为对照组(A组)、GEM组(B组)、塞来昔布组(C组)和塞来昔布与GEM联用组(D组),每组10只.C、D组自接种后第2天每日给予含塞来昔布1 mg/g的饲料喂养;A、B组给予普通饲料喂养.B、D组于肿瘤长径达0.2 cm时(约接种后第7天),给予GEM 100 mg/kg溶液每只0.2 m1腹腔注射;A、C组给予等量牛理盐水,每周1次,连续3周,4周后处死.实验期间观察小鼠的生存质量及肿瘤生长情况,测量肿瘤长短径并绘制肿瘤牛长曲线,称量瘤重,计算抑瘤率.结果 B、C和D组小鼠移植瘤生长较A组相对缓慢.B、C和D组抑瘤率分别为54.18%、49.52%和88.59%.D组肿瘤重量明显小于A、B和C组;B组小鼠去肿瘤后体重较A、C和D组轻度减轻.结论 塞来昔布和GEM均对Lewis肺癌皮下移植瘤生长具有较好的抑制作用,两者联用具有协同抗肿瘤作用,同时能够改善小鼠的生存质最.