卵泡发育和闭锁与卵巢细胞凋亡的研究进展

近年来对卵巢细胞凋亡的胞内机制研究取得了很大的进展,已知卵巢体细胞和生殖细胞的凋亡参与了卵泡的发育和闭锁,体细胞（主要指颗粒细胞）的凋亡决定于Bcl-2家族,Caspases家族和Apaf-1三大类基因表达产物的相互作用与平衡,其中Bcl-2家族又分为三个亚家族,对凋亡分别有着抑制或促进的作用,它们之间亦保持着平衡,Caspases家族成员又有不同的分工,分别在凋亡的起始和效应阶段发挥作用,Apaf-1则是连接上游调控因子（如Bcl-2家族）和下游效应分子（如Caspases家族）的重要的中间蛋白质,颗粒细胞的凋亡主要在发育晚期的卵泡闭锁中起主导作用,而卵细胞的凋亡主要在发育早期的卵泡闭锁中起主导作用。     

卵泡发育和闭锁与卵巢细胞凋亡的研究进展

近年来对卵巢细胞凋亡的胞内机制研究取得了很大的进展。已知卵巢体细胞和生殖细胞的凋亡参与了卵泡的发育和闭锁,体细胞(主要指颗粒细胞)的凋亡决定于Bcl-2家族、Caspases家族和Apaf-1三大类基因表达产物的相互作用与平衡,其中Bcl-2家族又分为三个亚家族,对凋亡分别有着抑制或促进的作用,它们之间亦保持着平衡。Caspases家族成员又有不同的分工,分别在凋亡的起始和效应阶段发挥作用。APaf-1则是连接上游调控因子(如Bcl-2家族)和下游效应分子(如Caspases家族)的重要的中间蛋白质。颗粒细胞的凋亡主要在发育晚期的卵泡闭销中起主导作用,而卵细胞的凋亡主要在发育早期的卵泡闭锁中起主导作用。     

黄体功能不健的调控机理

主要就引起卵巢黄体功能不健的因素 ,分别从激素调节、细胞因子 (VEGF、TNF α、BFGF、IFN γ、IGF)、C myc、Fas、SGP 2基因调控以及细胞连接、细胞粘附分子、NO等对卵巢功能的调节及对黄体细胞的凋亡影响进行阐述 ,认为卵泡发育不良、颗粒细胞、黄体细胞的凋亡与黄体功能不足有密切的关系。且多种细胞因子、基因表达产物参与此过程的调控。深入的研究这一调控机制 ,对于进一步了解卵巢卵泡生长发育、卵泡闭锁及黄体细胞凋亡的内在机制有重要意义     

黄体功能不健的调控机理

主要就引起卵巢黄体功能不健的因素，分别从激素调节、细胞因子(VEGF、TNF-α、BFGF、IFN-γ、IGF)、C—myc、Fas、SGP-2基因调控以及细胞连接、细胞粘附分子、NO等对卵巢功能的调节及对黄体细胞的凋亡影响进行阐述，认为卵泡发育不良、颗粒细胞、黄体细胞的凋亡与黄体功能不足有密切的关系。且多种细胞因子、基因表达产物参与此过程的调控。深入的研究这一调控机制，对于进一步了解卵巢卵泡生长发育、卵泡闭锁及黄体细胞凋亡的内在机制有重要意义。     

DahlS高血压大鼠卵巢的细胞凋亡研究

目的　通过对DahlS高血压大鼠卵巢颗粒细胞及黄体细胞凋亡的初步研究 ,以期阐明高血压时卵巢的细胞凋亡特征。方法　以日本引进DahlS高血压大鼠为研究对象 ,选用生后 5周的DahlS雌性大鼠随机分为实验组、对照组 ,分别投予 8%食盐饲料、正常饲料 ,于 11、13、15周龄取材。应用光镜 ,电镜 ,原位末端标记试剂盒(TUNELBox) ,流式细胞等技术 ,对凋亡的颗粒细胞及黄体细胞进行定性、定位及定量。结果　随高血压病程延长、病情加重 :⑴光镜下观察实验组生长卵泡中颗粒细胞排列不整齐 ,松散 ,闭锁卵泡数目增多 ,黄体数目减少。⑵TUNEL染色可见凋亡在生长卵泡的颗粒细胞中均有发生 ,闭锁卵泡颗粒细胞凋亡最显著 ,黄体细胞未见TUNEL阳性细胞。⑶电镜下观察颗粒细胞及黄体细胞凋亡的特征为核周间隙增宽 ,核固缩 ,染色质边集 ,凝聚 ,线粒体嵴模糊紊乱 ,腔内出现高电子密度异常颗粒 ,滑面内质网减少 ,类脂呈板层状改变。⑷流式细胞检测显示卵巢细胞凋亡率逐渐上升 ,13、15周龄实验组凋亡率分别为 (6 4 2± 1 0 6 ) %、(6 6 7± 2 11) %均明显高于对照组(t =3 0 2 7、3 0 85 ,P <0 0 1)。⑸卵巢细胞凋亡率与血压升高呈正相关 (γ =0 76 8,P <0 0 1)。结论　高血压能加重卵巢的细胞凋亡并有可能导致生殖功能衰退     

颗粒细胞凋亡机制的研究现状

卵泡发育的命运(成熟或闭锁)取决于卵泡内颗粒的状态:颗粒细胞增殖分化则卵泡成熟,颗粒细胞凋亡则卵泡闭锁[1],因此,探讨颗粒细胞凋亡的调控机制是阐明卵泡闭锁原因的基础.     

缝隙连接和卵巢卵泡发育的关系研究进展

卵巢中的卵泡处于无血管的微环境中,因而缝隙连接介导卵母细胞和其周围体细胞(颗粒细胞和卵泡膜细胞)的代谢交换,传递内分泌和旁分泌的生长因子.卵巢卵泡的整个发育过程离不开细胞间的缝隙连接.连接蛋白Cx32、Cx37、Cx43、Cx45和Cx57参与卵泡的发育,其中Cx43和Cx37对卵巢卵泡的发育起了至关重要的作用.现就卵巢卵泡的发育和缝隙连接的关系进行综述.     

人颗粒黄体细胞凋亡:体外受精结果的一个可能预测指标

卵泡闭锁是细胞程序化死亡即凋亡引起的。有关卵泡和颗粒细胞凋亡的调控机制很复杂,包括多种激素和生长因子,且多数为存活因素,促卵泡成熟激素(FSH)则是最重要的一种。有人用荧光显微镜研究表明体外受精(IVF)治疗有效者其颗粒细胞凋亡小体发生率低。如用流式细胞技术检测颗粒黄体细胞,其准确性将大大高于荧光显微镜。因它能在短时间内检测大量颗粒黄体细胞(>100 000)。本文研究用流式细胞技术测定的行IVF期间凋亡颗粒黄体细胞数与患者对治疗反应间的关系,以阐明凋亡细胞检测的     

缝隙连接和卵巢卵泡发育的关系研究进展

卵巢中的卵泡处于无血管的微环境中,因而缝隙连接介导卵母细胞和其周围体细胞(颗粒细胞和卵泡膜细胞)的代谢交换,传递内分泌和旁分泌的生长因子。卵巢卵泡的整个发育过程离不开细胞间的缝隙连接。连接蛋白Cx32、Cx37、Cx43、Cx45和Cx57参与卵泡的发育,其中Cx43和Cx37对卵巢卵泡的发育起了至关重要的作用。现就卵巢卵泡的发育和缝隙连接的关系进行综述。     

微小RNA在卵巢颗粒细胞中的研究进展

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非编码RNA,可以在转录后水平通过对靶基因的调控,影响蛋白质的表达,其参与调节各个环节的细胞生命活动。特定的miRNAs低表达、过表达或者变异都可能引起细胞功能的异常。卵巢颗粒细胞是卵泡中最重要的体细胞,其围绕在卵母细胞周围,可合成多种激素及生长因子,并表达其受体,通过缝隙连接调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟,进而调控卵泡的发育。MiRNAs在卵泡发育过程中的作用除了miRNAs对卵母细胞的直接作用外,其在颗粒细胞中的调控作用也尤为重要。研究发现,miRNAs在卵巢颗粒细胞的增殖与分化、凋亡、性激素分泌等过程中发挥重要的作用。本文综述近年卵巢颗粒细胞中miRNAs的研究进展。     

米非司酮对卵巢颗粒细胞的影响

米非司酮作为一种高效的孕酮受体拮抗剂,通过阻断孕酮的生理效应而发挥其生育调节作用.卵巢颗粒细胞是成熟卵泡中最大的细胞群,对卵细胞的发育、成熟及胚胎形成有重要影响.米非司酮能通过不同信号传导途径诱导卵巢颗粒细胞发生凋亡,干扰卵泡成熟及排卵.黄体生成激素峰后卵巢颗粒细胞分泌孕酮并表达孕激素受体(PR),米非司酮能抑制颗粒细胞分泌孕酮,改变颗粒细胞PR的表达.另外,米非司酮还可影响颗粒细胞生成雌二醇和松弛素.     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠卵巢颗粒细胞中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响

目的研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)对大鼠卵巢颗粒细胞中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法体外培养25 d雌性SD大鼠卵巢颗粒细胞,分别加入DBP使终浓度分别(0、5、20、80μmol/L),培养24 h。采用放射免疫方法测定雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progestone,P)的水平;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测卵巢颗粒细胞中Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果 DBP染毒后颗粒细胞分泌的E2及P水平下降,各剂量DBP均可降低颗粒细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈反比,同时,DBP可以增加颗粒细胞中Bax mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈正比。结论 DBP可导致大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,且Bcl-2/Bax比例失调可能是导致其凋亡的机制。     

多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞凋亡研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种以内分泌紊乱为主、多种代谢异常导致的异质性临床综合征.PCOS患者双侧卵巢有大量窦卵泡存在,但是不能周期性产生成熟卵泡,其病理机制尚不清楚.目前认为原发性、内在性卵泡生长异常可能是引起PCOS不排卵及临床内分泌改变的病理基础.研究表明,内在性的卵泡发育异常可能与卵巢颗粒细胞的凋亡调控失常有关.通过对PCOS患者卵巢颗粒细胞凋亡的研究,为PCOS病理机制研究提供相关的理论依据,为临床治疗提供新的方向和途径.     

颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁

研究表明颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，ＰＣＤ相关基因Ｐ５３ｂｃｌ－２ＷＴ－１Ｆａｓ卵巢局部自分泌和旁分泌因子与颗粒细胞凋亡有着密切的关联。     

毒死蜱对小鼠卵巢的毒性及其凋亡基因表达水平的影响

目的研究毒死蜱对小鼠卵巢的生殖毒性及对相关凋亡基因表达水平的影响。方法将40只健康6周龄无生育史清洁级ICR雌性小鼠按体重随机分为4组,分别为阴性对照(玉米油)组和7.5、15.0、30.0 mg/kg毒死蜱染毒组(采用灌胃方式染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,每周连续染毒6 d),每组10只。染毒时间为2周。统计各期卵泡构成和颗粒细胞凋亡情况,检测相关凋亡基因的表达水平。结果与阴性对照组比较,15.0、30.0 mg/kg毒死蜱染毒组原始卵泡以及30.0 mg/kg毒死蜱染毒组闭锁卵泡的构成比均较高,15.0、30.0 mg/kg毒死蜱染毒组生长卵泡以及30.0 mg/kg毒死蜱染毒组成熟卵泡的构成比均较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。且随着毒死蜱染毒剂量的升高,原始卵泡的构成比呈上升趋势,成熟卵泡的构成比呈下降趋势,生长卵泡的构成比呈先上升后下降的趋势,而闭锁卵泡的构成比呈先下降后上升的趋势。仅30.0 mg/kg毒死蜱染毒组卵巢颗粒细胞凋亡指数显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着毒死蜱染毒剂量的升高,小鼠卵巢颗粒细胞凋亡指数呈上升趋势。15.0、30.0 mg/kg毒死蜱染毒组小鼠卵巢组织中mch3 mRNA的表达增高,bcl-2 mRNA的表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。且随着毒死蜱染毒剂量的升高,小鼠卵巢组织中mch3 mRNA的表达呈上升趋势,bcl-2 mRNA的表达呈下降趋势。结论毒死蜱具有雌性生殖毒性,通过上调mch3的表达和下调bcl-2基因的表达,促进颗粒细胞凋亡,诱导卵泡闭锁,引起卵巢损伤,造成小鼠生育力降低。     

不同周龄小鼠卵巢中Nrf2蛋白的表达和定位

目的研究Nrf2蛋白随小鼠卵巢增龄性改变后的表达和定位差异,探索Nrf2蛋白与卵巢储备功能的关系。方法采用免疫组织化学方法检测Nrf2蛋白在不同周龄小鼠卵巢组织中的定位情况;采用蛋白免疫印迹方法检测不同周龄小鼠卵巢组织中Nrf2蛋白的表达变化,同时检测凋亡相关蛋白Caspase3、Bcl-2的表达情况。结果 Nrf2蛋白主要表达在次级卵泡和窦卵泡的颗粒细胞和卵母细胞中,其在生育期的表达量显著高于幼龄期和近绝育/绝育期,差异有统计学意义(P0.01)。凋亡蛋白Caspase3在育龄期小鼠卵巢组织中的表达显著高于幼龄期和老龄期,抗凋亡蛋白Bcl-2在幼龄期小鼠卵巢组织中的表达显著高于其他周龄小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。结论 Nrf2蛋白可能参与了卵巢储备功能的调节,其机制可能与细胞凋亡有关。     

骨形态发生蛋白15调控卵泡发育及与生殖内分泌疾病的关系

骨形态发生蛋白15（bone morphogenetic protein 15,BMP15）作为卵母细胞分泌因子,在调控卵泡发育过程中起着重要的作用。BMP15通过协同双调蛋白、上调卵丘扩张基因的表达,促进卵母细胞发育成熟;BMP15能增加颗粒细胞对卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）的敏感性,刺激颗粒细胞中Kit配体的表达从而促进颗粒细胞的增殖分化;BMP15通过调节卵泡凋亡相关因子的表达抑制卵泡闭锁;BMP15还可通过调节FSH受体及下游Smad信号通路介导对类固醇激素的调节。BMP15表达降低或基因突变,可能通过诱导颗粒细胞凋亡,阻碍早期卵泡发育及卵子发生过程,介导多囊卵巢综合征、早发性卵巢功能不全等多种疾病的发生。综述BMP15在卵泡发生过程中的作用及与相关生殖内分泌疾病的最新研究进展。     

卵巢颗粒细胞高尔基体磷酸化蛋白3表达对颗粒细胞凋亡及卵母细胞发育潜能的影响

目的:探讨卵巢颗粒细胞高尔基体磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)表达对颗粒细胞凋亡及卵母细胞发育潜能的影响。方法:收集2016年5月—2017年4月因输卵管性不孕行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的80例患者的卵巢颗粒细胞,根据妊娠结局分为临床妊娠组40例、未妊娠组40例。采用免疫细胞化学、蛋白质印迹(Western blotting)方法检测2组患者颗粒细胞GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)方法检测2组患者GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因表达,并进行相关性分析。结果:GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3在2组颗粒细胞中均有表达,其中临床妊娠组GOLPH3、Bcl-2的表达高于未妊娠组(P0.05),而Bax、Caspase-3的表达低于未妊娠组(P0.05)。相关性分析显示,GOLPH3表达与Bcl-2表达呈显著正相关(P0.001),与Bax、Caspase-3表达呈显著负相关(均P0.001),与优质胚胎数、优质囊胚数、可利用胚胎数呈显著正相关(均P0.001)。结论:卵巢颗粒细胞中GOLPH3表达水平可能通过Bcl-2、Bax、Caspase-3凋亡信号转导通路调控颗粒细胞凋亡作用,并进而对卵母细胞的发育潜能产生影响。     

体外受精-胚胎移植中颗粒细胞凋亡与妊娠率

目的探讨体外受精-胚胎移植中卵泡颗粒细胞凋亡与妊娠率的关系。方法随机选择体外受精-胚胎移植中60例患者,收集其颗粒细胞,采用流式细胞技术检测颗粒细胞亚二倍体的含量和PDCD5的荧光密度;颗粒细胞免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、PDCD5的表达。比较妊娠组和非妊娠组年龄、基础FSH值、促性腺激素的用量、取卵总数、受精率、妊娠率和颗粒细胞亚二倍体细胞的百分率、颗粒细胞PDCD5荧光密度、颗粒细胞Bcl-2、Bax、PDCD5蛋白表达的积分光密度值。结果妊娠组和非妊娠组年龄、基础FSH值、促超排卵FSH的用量、取卵数、受精率及免疫组化Bax积分光密度比较,差异无显著性(P>0.05),颗粒细胞亚二倍体百分率、颗粒细胞PDCD5荧光密度、PDCD5蛋白表达的积分光密度值妊娠组低于非妊娠组,颗粒细胞Bcl-2表达的积分光密值妊娠组高于非妊娠组,差异有显著性(P<0.05)。结论体外受精-胚胎移植中卵泡中颗粒细胞凋亡与妊娠率有关,凋亡率高,妊娠率低。     

黄体防病,从三个绰号说起

黄体乃是少女性成熟后卵巢周期变化的产物,在每次月事中期,卵巢有一个卵泡发育成熟,其中的卵子脱颖而出,卵泡随即塌陷、出血,形成血块,留在卵泡内的颗粒细胞及卵泡膜细胞肥大增生,内含黄色类脂质,医学称为黄体细胞。黄体细胞逐渐积累而形成一个黄豆或花生米大的小体,这就是黄体。