东莨菪碱对吗啡依赖大鼠脑多巴胺转运蛋白及D2受体的影响

目的探讨东莨菪碱(Sco)对吗啡(Mor)依赖大鼠多巴胺(DA)系统多巴胺转运蛋白(DAT)及D2受体的影响.方法4～5月龄SD大鼠36只,随机分为Mor(按体重20mg/kg)组、Mor(按体重20mg/kg)+Sco组及生理盐水对照组.Mor+Sc0组腹腔注射Mor前15～30 min先腹腔注射Soo(按体重1 mg/kg),共给药8 d;对照组只给予0.3 ml生理盐水.采用两隔室(C1及C2)地点偏爱装置测试大鼠的行为学变化.3组大鼠再各随机均分为2组,分别进行125I-甲基-3β-(4-碘苯基)托烷-2β-羧酸酯(β-CIT)、125I-左旋-3-碘-2-羟基-6-甲氧基-N[(1-乙基-2-比咯烷)甲基]苯酰胺(IBZM)脑内分布研究.结果①Mor组大鼠第2～4天起进入C2室的时间逐渐缩短,由第1天的(1.68±0.57)min降至第8天的(0.38±0.16)min;Mor+Sco组大鼠自C1进入C2室的时间第1天至第8天略有降低趋势,由第1天的(1.72±0.69)min降至第8天的(1.12±0.33)min,第1天3组间差异无显著性(P＞0.05),第8天Mor组及Mor+Sco组均低于对照组[第1天(1.60±0.55)min,第8天(1.88±0.54)min;t=5.682、6.372,P均＜0.05],但Mor+Sco组仍高于Mor组(t=5.171,P＜0.05).②DAT分布研究示Mor组大鼠纹状体(ST)、伏隔核(NAC)的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为4.205±0.410、1.770±0.141,明显高于对照组(2.431±0.104、1.441±0.043,t=5.911、6.130,P＜0.05);Mor+Soo组ST、NAC的%ID/g分别为3.307±0.189、1.577±0.401,明显高于对照组(t=4.151、5.416,P均＜0.05),但低于Mor组(t=4.871、6.922,P＜0.05).③D2受体脑内分布示Mor+Sco组ST、NAC、海马(HIP)及额叶(FC)的125I-IBZM%ID/g分别为0.589±0.081、0.683±0.046、0.175±0.039和0.257±0.034,低于对照组(0.735±0.096、0.709±0.098、0.281±0.038、0.289±0.020,t=7.841、6.170、5.446、4.337,P均＜0.05),高于Mor组(0.540±0.098、0.640±0.061、0.140±0.017、0.232±0.015,t=6.021、3.227、5.113、6.174,P均＜0.05).结论Sco的介入阻止或减缓了Mor引起的地点偏爱倾向,该效应可能通过Sco与DA系统的相互作用实现,Sco可减缓或阻止Mor引起的DAT上调及D2受体的下调反应.     

胍丁胺对吗啡依赖大鼠神经元再生的影响

目的观察吗啡依赖大鼠神经元再生水平的改变及胍丁胺对抗吗啡依赖的可能机理。方法连续递增给药方式建立吗啡依赖大鼠动物模型,应用免疫组化方法检测神经元再生;应用放射免疫结合方法测定大鼠海马中cAMP水平;Westernblot方法观察大鼠海马中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和酪氨酸蛋白激酶基因TrkB水平的变化。结果连续递增给药12d造成吗啡依赖模型,吗啡抑制大鼠神经元前体细胞的增殖,胍丁胺(10mgkg-1)抑制吗啡依赖的同时可以逆转吗啡对BrdU标记的阳性细胞数目的减少,吗啡依赖大鼠BrdU阳性细胞数目下降(28±3)%;吗啡依赖大鼠海马cAMP含量下降,BDNF、TrkB水平呈现明显的下调,胍丁胺可逆转该变化。结论成年大鼠吗啡慢性处理导致依赖后,神经元再生的水平下降,胍丁胺可以减轻吗啡依赖对神经元再生的抑制作用,而吗啡对神经元再生的抑制作用与cAMP以及其介导的BDNF水平的变化密切相关。     

人参四物汤对吗啡依赖小鼠IL-2活性的影响

人参四物汤及其主要成分对增加淋巴细胞转换率、促进细胞免疫功能有良好的作用。以往的研究表明：人参四物汤可增加吗啡依赖动物免疫器官胸腺和脾脏的重量,增强Ｔ淋巴细胞的转化率和Ｔ细胞的数目,对细胞免疫有促进作用,可较好地缓解吗啡对免疫系统的损伤,采用ＥＬＩＳＡ方法,观察人参四物汤对吗啡依赖后免疫功能受损的动物体内ＩＬ－２活性的作用,以期进一步了解人参四物汤的免疫调控机制。１　材料与方法１．１　材料　昆明种小鼠（军事医学科学院实验动物中心）,雄性,７周龄,体重１８～２２ｇ;盐酸吗啡粉（本院药库）;盐酸纳洛…     

给药途径对强啡肽A1—13抑制吗啡依赖大鼠戒断症状的影响

目的研究不同给药途径对强啡肽A1-13(Dyn)抑制吗啡依赖戒断症状的影响.方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;吗啡依赖大鼠戒断症状采用sc 5mg*kg-1纳洛酮激发;Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响采用侧脑室、脊髓及静脉内注射Dyn后,对大鼠经纳洛酮激发后60min内可数和不可数的戒断症状进行评分的方法进行.结果静脉内注射100μg*kg-1 Dyn可短暂抑制戒断症状;髓鞘内注射4μg*kg-1 Dyn可明显抑制绝大部分的戒断症状;侧脑室注射Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状无显著的抑制作用.结论 Dyn抑制阿片类物质戒断症状可能主要是通过脊髓水平起作用的.     

表皮生长因子对肝星状细胞c-fos基因表达的影响

目的了解表皮生长因子（EGF）对肝星状细胞c-fos基因表达的影响。方法在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的EGF（终浓度20ng/ml、100ng/ml、500ng/ml）,于8h、24h、48h、72h四个时间点分别收集细胞,提取肝星状细胞总RNA;用逆转录定量PCR方法测定c-fos基因的表达水平。结果EGF三组HSC-T6细胞c-fos基因表达水平在8h、24h、48h、72h四个时间点均显著高于对照组;随剂量加大,HSC-T6细胞c-fos基因表达水平逐渐升高,三组间也有显著差异。结论表皮生长因子对肝星状细胞c-fos基因表达有明显的上调作用。     

三七皂苷对大鼠吗啡依赖戒断症状的抑制作用及对海马神经元内游离钙的影响

 目的 研究三七叶的三七皂苷(Arasaponins of Panax notoginseng leaves,APnL)对大鼠吗啡依赖及纳络酮催促戒断症状的抑制作用,以及对大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,进一步探讨APnL抑制吗啡戒断症状的作用机制.方法 应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡建立吗啡躯体依赖模型,腹腔注射纳络酮建立催促戒断模型.在使用吗啡的同时,采用(50、100和200 mg/kg)3种剂量的APnL进行灌胃.第6天上午8:00末次注射吗啡50 mg/kg,观察各组催促戒断症状及体重减轻情况;1 h后急性分离海马神经元,并采用流式细胞技术检测了APnL对吗啡依赖大鼠海马神经元[Ca2+]i的浓度.结果 ①剂量递增法慢性吗啡处理5 d后经ip NAL催促戒断后,与吗啡组相比可明显地诱发大鼠体重减轻和跳跃次数的发生(P＜0.01).②3种不同剂量APnL均可抑制大鼠戒断后体重减轻和跳跃的发生.③APnL可以有效地抑制纳络酮催促戒断所引起的大鼠海马神经元[Ca2+]i浓度的降低,200 mg/kg剂量组作用最佳(P＜0.01).结论 APnL可以缓解纳络酮催促戒断诱导的吗啡成瘾大鼠戒断症状的发生,同时可以抑制纳络酮催促戒断所引起的大鼠海马神经元[Ca2+]i浓度的降低.     

核酶阻断per1表达对吗啡成瘾小鼠海马c-fos转录及表达的影响

目的研究用特异性核酶阻断生物节律基因per1的表达对吗啡成瘾小鼠海马c—fos基因转录及表达的影响。方法制备吗啡成瘾小鼠模型，向小鼠脑室内注射脂质体包裹的重组质粒pcDNA3．1-per1RZ DNA，在脑内产生特异性核酶-per1RZ，阻断小鼠脑内生物节律基因per1的表达。作脑组织冰冻切片，用原位杂交和免疫组化法测定小鼠海马c—fos基因转录及表达的变化。结果per1RZ能使吗啡成瘾小鼠海马的c—fos基因转录及表达明显减弱。结论重组质粒表达的per1RZ可以干扰生物节律基因per1的表达，抑制海马c—fos基因的转录和表达，从而控制吗啡成瘾的发生。     

N-硝基-L-精氨酸抑制大鼠吗啡身体依赖的强啡肽机制

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法　采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状并对大鼠 6 0min内可数和不可数的戒断症状评分的方法进行 ;采用放射免疫法分别测定大鼠脑各分区、垂体、脊髓和血浆内免疫活性强啡肽A(ir-Dyn)的含量。结果　NO2 Arg可剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,其中 5mg·kg-1 NO2 Arg可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状 ;NO2 Arg处理可显著升高吗啡依赖大鼠脊髓、纹状体、垂体及血浆内ir-Dyn的水平。该作用可被特异性κ -受体阻滞剂norbinaltorphimine (nor-BNI)所拮抗。结论　NO2 Arg剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,该抑制作用可能与其调节机体内源性强啡肽的水平显著相关     

吗啡类药物依赖的研究近况

世界范围内滥用麻醉药品和精神药物的吸毒现象已成为和平时期威胁人类健康的严峻问题之一。本文对麻醉品依赖的机理、对机体的损害以及戒断药物的研究近况作一介绍,旨在为戒毒提供理论和临床依据。1　吗啡类药物依赖的机理吗啡类药物依赖行为有一个渐近发展的过程,依赖行为的最主要特征是渴求用药,用药后会使人出现欣快感、满足感。吗啡类药物之所以能产生行为效应、机体成瘾后出现戒断反应、脱瘾后易复发就在于吗啡类药物作用于神经系统的特定位置,从而引起一系列改变[1]。人和动物体内存在β内啡肽、脑啡肽和强啡肽三类阿片肽及对应的μ、…     

吗啡依赖状态下大鼠脑组织左旋精氨酸脱羧酶活性的测定

阿片类药物的耐受和躯体依赖不仅与阿片受体本身的代偿性适应有关,而且还涉及到许多非阿片受体和递质系统.一方面当改变这些非阿片受体的功能后会影响阿片类药物的药理作用,例如抑制5-HT重吸收可以增加吗啡镇痛[1];另一方面阿片类药物慢性处理会引起这些受体系统发生代偿性适应性变化,例如吗啡急性处理能抑制5-HT释放,而慢性处理反而导致5-HT释放增多[2].     

大鼠吗啡精神依赖时脑区氨基酸类神经递质的变化

目的建立条件性位置偏爱模型,检测吗啡精神依赖大鼠不同脑区中氨基酸类神经递质含量的变化。方法用4mg·kg-1盐酸吗啡对雄性SD大鼠进行条件性位置偏爱(CPP)训练。CPP形成后将大鼠断头处死,立即取脑,分离杏仁核、额叶皮层、海马、下丘脑、伏隔核、纹状体、丘脑、小脑等8个核团,在高氯酸溶液中做组织匀浆,同时沉淀蛋白,离心后取上清液备测。采用柱前衍生-电化学检测-高效液相色谱法测定谷氨酸(GLU)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果吗啡使大鼠形成CPP时,额叶皮层、下丘脑和伏隔核的GLU和GABA含量均有明显下降(P<0.05),其中以伏隔核变化最明显(P<0.01);而且,伏隔核中的GLU/GABA值显著升高(P<0.05)。结论大鼠对吗啡的精神依赖形成时,中枢GLU和GABA的含量变化集中于额叶皮层、下丘脑和伏隔核等与奖赏作用关系密切的脑区,证明了GLU和GABA系统参与了精神依赖形成时药物在脑内的奖赏作用。伏隔核中的GABA含量显著下降,GLU/GABA值显著升高,表明吗啡精神依赖时伏隔核处于去抑制状态。     

培养大鼠脑皮层神经元损伤后c-fos蛋白表达

目的观察培养的大鼠皮层神经元损伤后ｃ－ｆｏｓ蛋白表达，探讨其在继发性脑损伤中的作用。方法混合培养１０～１２天ＳＤ胎鼠的皮层神经元分别用谷氨酸和机械划痕损伤。采用ＳＰ法进行免疫组化双重标记反应。结果谷氨酸作用后２小时，ｃ－ｆｏｓ蛋白开始表达，４小时后在核中明显浓聚。创伤后２小时仅在创道边缘直接损伤部位有ｃ－ｆｏｓ蛋白表达，远离创道未直接损伤区的神经元在创伤后４小时才出现；少数神经元突起远端有明显ｃ－ｆｏｓ蛋白颗粒；损伤后６小时神经元突起开始崩解，但ｃ－ｆｏｓ蛋白颗粒仍未消失。结论谷氨酸损伤可引起培养的神经元ｃ－ｆｏｓ蛋白的大量表达，损伤后培养皮层神经元和胶质细胞可以释放出神经毒性物质，培养神经元损伤后ｃ－ｆｏｓ蛋白过度表达可能与凋亡有关     

海马区c-fos基因表达在大鼠脑创伤后认知功能障碍中的作用

目的 探讨大鼠脑创伤后海马区c-fos基因表达及对学习记忆功能的影响.方法 建立Marmarou大鼠脑创伤模型,采用分子原位杂交技术和Morris水迷宫分别观察大鼠伤后海马区c-fos基因表达变化及空间学习记忆能力的改变. 结果 伤后30 min海马区神经元即出现c-fos mRNA的表达,1～3 h达高峰,伤后24 h表达基本消失;Morris水迷宫实验,大鼠伤后存在空间学习记忆功能障碍.结论 脑创伤可引起c-fos基因在海马区的表达上调,通过介导延迟性神经元细胞死亡,影响细胞间的信息传递,参与认知功能的损害.     

运动性免疫抑制大鼠肝、脾糖皮质激素受体表达变化探讨

目的:研究运动性免疫抑制时糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白表达变化,探讨GR在运动性免疫抑制发生中的作用。方法:40只SD大鼠随机分为安静对照组(C组,n=10)、中强度运动组(M组,n=10)和过度疲劳运动组(O组,n=20)。后两组分别进行不同强度的8周递增负荷训练,每周训练6天。每周称量大鼠体重。8周训练结束后采血,检测Hb、血睾酮、皮质酮水平,外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、自然杀伤细胞(NK细胞)数量和辅助性T淋巴细胞1、2(Th1、Th2)特异性细胞因子IFN-γ、IL-4水平。之后断头处死动物,采用real time PCR和Western blot方法分别检测大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平。结果:(1)与安静对照组和中强度运动组相比,过度疲劳运动组大鼠体重从第4周起明显下降(维持至实验结束),Hb、血浆睾酮水平、睾酮/皮质酮比值均显著下降,血浆皮质酮水平显著升高,表明过度疲劳训练组大鼠已发生过度疲劳。(2)8周训练后,与安静对照组和中强度运动组相比,过度疲劳运动组大鼠CD3+细胞、NK细胞数量显著减少、IFN-γ/IL-4比值显著下降,Th1/Th2失衡,但CD4+/CD8+比值无显著性差异,表明运动性免疫抑制大鼠模型建立成功。(3)与安静对照组和中强度运动组相比,8周训练后,过度疲劳运动组大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平均显著下降;与安静对照组相比,中强度运动组大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平均无显著变化。(4)相关性分析显示,肝、脾GR mRNA和蛋白水平与血浆GC的相关系数分别为-0.752、-0.613、-0.144和-0.397,均P<0.05。结论:(1)运动性免疫抑制大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白表达水平较安静对照组和中强度运动组显著降低。(2)运动性免疫抑制大鼠肝、脾GR mRNA减少和脾GR蛋白水平下降可能与血浆GC升高有关。     

大鼠肺部严重创伤后早期下丘脑c-fos和CRH1受体的表达

目的 探讨严重创伤后早期下丘脑c-fos与促肾上腺皮质激素释放激素1受体(CRH1R)蛋白含量变化的关系。方法以大鼠右肺中部重度创伤加右股骨中段骨折为模型,采用免疫组织化学染色、Westren印迹方法观察大鼠下丘脑组织内c-fos和CRH1R表达变化。分组对照组,撞击伤后15、30分钟、1、2、6、12小时撞击伤组、撞击伤治疗组,治疗组用CRH1R特异性阻滞剂CP-154526治疗。结果伤后下丘脑c-fos含量30分钟达高峰,以后迅速下降;CRH1R含量的变化明显迟于c-fos的变化,撞击伤后1小时CRH1R含量明显增加,主要分布于室旁核和视上核,在1～6小时时相点表达明显增加,12小时开始回落;用CP-154526治疗的大鼠,撞击伤后下丘脑c-fos和CRH1R含量的增加明显被抑制。结论严重创伤后下丘脑迅速增加的c-fos对CRH1R的上调可能起关键的作用,早期快速表达的c-fos蛋白起激活CRH1R表达的作用。     

大鼠睡眠剥夺后下丘脑一氧化氮合酶mRNA表达的变化

目的观察快动眼睡眠剥夺大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS )及诱导型一氧化氮合酶(iNOS )mRNA表达的时相变化。方法小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4h、48h及 72h后 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR )检测其下丘脑nNOS及iNOSmRNA的表达。结果睡眠剥夺 2 4h组nNOSmRNA表达量显著增加 (P <0 .0 1 ) ,剥夺 48h组与对照组比较无显著差异 ,剥夺 72h组nNOSmRNA的表达量低于对照组水平 (P <0 .0 5 ) ;睡眠剥夺 2 4h和 48h组iNOSmRNA的表达量无显著变化 ,但剥夺 72h组iNOSmRNA的表达量大幅度增加 (P <0 .0 1 )。结论睡眠剥夺后NOS基因表达增加 ,可能是睡眠“反跳”现象的机理之一 ;持续的睡眠剥夺状态下较高水平的NO还可能参与了睡眠剥夺对机体功能的损伤     

大鼠自体神经移植与外周神经挤压再生模型脊髓背角c-fos表达的比较研究

目的建立大鼠外周神经挤压神经再生模型和大鼠外周神经自体神经移植神经再生模型,观察对比各模型神经恢复过程中机械痛觉超敏的变化及脊髓背角c-fos表达的改变,探讨两种神经再生模型中神经再生与神经性疼痛的联系。方法雄性Wistar大鼠60只随机均分成3组,A组为坐骨神经挤压模型组;B组为自体神经移植模型组;C组为假手术组。分别制成模型后,术后18d起检测机械刺激阈值及c-fos表达计数。结果A、B组各项指标与C组比较有显著差异;A组各指标与B组有显著差异。结论两种模型再生神经生长进入去神经支配区域时,均出现支配区域的痛觉超敏和疼痛相关行为,神经性疼痛的发生时间、强度以及恢复均有不同,并和神经再生情况相关,提示神经性疼痛是评估神经功能恢复的一个重要的参数。     

糖皮质激素受体阻断对烫伤大鼠肺,肾功能及其血管壁通透性的影响

目的：进一步阐明烧伤后糖皮质激素受体（ＧＲ）减少的意义．方法：以ＲＵ３８４８６阻断大鼠体内的ＧＲ，通过检测其肺、肾组织匀浆中异硫氰酸荧光素钠（ＦＩＴＣ）标记白蛋白的渗出量测定大鼠肺、肾血管壁通透性．结果：烫伤阻断组大鼠肺、肾功能衰竭的发生率及其组织匀浆中ＦＩＴＣ标记白蛋白渗出量均明显高于单纯烫伤组（Ｐ＜０．０５）．结论：ＧＲ阻断可加重烫伤大鼠肺、肾血管壁通透性的升高，并由此导致肺、肾功能衰竭．