刺五加叶皂甙研究进展

刺五加是一种落叶植物,与人参同属于五加科,具有“补中益精、坚筋骨、强意志”的作用,其医疗价值极高.刺五加叶皂甙（Acantbepanax senticosus saponin,ASS）是刺五加叶中提取的含有16种皂甙成分的总皂甙,共分得16种三萜皂甙,除已知3种外,其余13种新的活性成分均确定了结构.其中刺五加甙A3、A4和D3是首次从天然界中分离得到的Mesombryan-themoidigenic acid型三萜皂甙,近年研究中发现ASS有多种药理作用.     

刺五加叶皂甙的抗实验性心律失常作用

静脉注射刺五加叶皂甙５０、１００ｍｇ／ｋｇ，可使氯化钡诱发的大鼠心律失常韧带转复窦性心律，能明显增加豚鼠对哇巴因的耐量，对大量氯化钙引起大鼠室颤致死具有保护作用，但不能明显对抗乌头碱所致大鼠心律失常的发生，其抗心律失常作用与维拉帕米的作用相类似。     

刺五加叶皂甙对实验性高脂血症大鼠血脂的影响

本文报道了刺五加叶皂甙对正常大鼠及实验性高脂血症大鼠的甘油三酯，总胆固醇及脂蛋白－胆固醇代谢的影响。结果表明：刺五加叶皂甙能提高实验性高脂血症大鼠血清ＨＤＬ及亚组分ＨＤＬ２的含量，降低ＴＧ、ＶＬＤＬ－Ｃ的含量，对血清ＴＣ虽无影响，但降低ＴＣ／ＨＤＬ－Ｃ和ＬＤＬ－Ｃ／ＨＤＬ－Ｃ的值；而对正常大鼠的上述指标均无影响。     

刺五加叶皂甙对实验性高脂血症大鼠血液流变学的影响

本文报道刺五加叶皂甙能明显改善高脂血症大鼠的血流状态，降低全血高切变率及低切变率粘度，血沉和血沉方程常数，尚能明显防止高脂血症大鼠血小板的形态改变，抑制血小板聚集。     

刺五加叶皂甙单体Sb对培养大鼠心肌细胞动作电位的影响

本研究中所用的刺五加叶皂甙单体Ｓｂ（５０，２００μｇ／ｍＬ），使培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞动作电位的波幅，波宽，阈电位，最大舒张电位，超射，最大除极速度及复极（１０％，５０％，９０％）水平的动作电位波宽一致减小。Ｃａ＾２＾＋８０μｇ／ｍＬ能使之反转，Ｓｂ作用与尼莫地平作用相似。上述结果表明Ｓｂ具有钙通道阻滞作用。     

刺五加叶皂甙对实验性高脂血症大鼠血脂的影响

本文报道了刺五加叶皂甙对正常大鼠及实验性高脂血症大鼠的甘油三酯，总胆固醇及脂蛋白－胆固醇代谢的影响。结果表明：刺五加叶皂甙能提高实验性高脂血症大鼠血清ＨＤＬ及亚组分ＨＤＬ２的含量，降低ＴＧ、ＶＬＤＬ－Ｃ的含量，对血清ＴＣ虽无影响，但降低ＴＣ／ＨＤＬ－Ｃ和ＬＤＬ－ｃ／ＨＤＬ－Ｃ的值；而对正常大鼠的上述指标均无影响。     

刺五加叶皂甙对实验性高脂血症大鼠血液流变学的影响

本文报道刺五加叶皂甙能明显改善高脂血症大鼠的血流状态，降低全血高切变率及低切变率粘度，血沉和血沉方程常数，尚能明显防止高脂血症大鼠血小板的形态改变，抑制血小板聚集。     

刺五加叶中皂甙的比色测定

<正> 刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.etMaxim)Harms]系五加科植物,其根及根茎作为中药广泛使用,关于其根及根茎的化学与生物活性研究报道较多。关于刺五加叶中皂甙的含量及含量测定方法尚未见报道。本文根据三萜皂甙与香草醛—浓硫酸反应显色的原理,用比色法测定了刺五加叶中皂甙的含量。     

人参皂甙Rg3诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡的形态学研究

目的：探讨人参皂甙Rg3对卵巢癌细胞株H08910的抑制作用。方法：用人参皂甙Rg3处理H08910细胞，通过倒置显微镜和电子显微镜观察细胞形态学改变。结果：在人参皂甙Rg3作用下，H08910细胞呈凋亡改变，形成凋亡小体。结论：人参皂甙Rg3能诱导卵巢癌细胞凋亡，抑制卵巢癌细胞增殖。     

姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨姜黄素对人肺腺癌细胞（SPC－A1）抗癌作用机理。方法 采用细胞培养、荧光显微镜、原位末端标记、荧光探测等技术，探讨姜黄素抗癌作用及其机理。结果 ①姜黄素作用于癌细胞后，光镜下可见有细胞脱壁；荧光镜下可见细胞核破碎，细胞裂解成大小不等的凋亡小体；原位末端标记法进一步证实20μM姜黄素作用24h细胞凋亡率达42.67%。②姜黄素作用于癌细胞后，使细胞内Ca^2 、cAMP浓度升高。结论 姜黄素可诱导人肺癌细胞凋亡，其作用机制可能与细胞内Ca^2 、cAMP浓度升高有关。     

三氧化二砷诱导肺癌细胞凋亡及对细胞周期的影响

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人肺癌细胞株 (Spc- A1)诱导凋亡的机制 ,为抗肿瘤药物的筛选和用药方式提供理论依据。方法 :体外培养 Spc- A1细胞株与不同浓度的 As2 O3 进行作用 ,应用 MTT比色法、流式细胞仪技术、电子显微镜技术观察细胞增殖率、细胞周期率、细胞凋亡率及亚细胞水平变化。结果 :As2 O3 能够抑制 Spc- A1细胞的增殖 ,且呈时间剂量依赖性 ,Spc- A1细胞凋亡率与药物浓度和时间呈依赖关系。电镜观察细胞线粒体肿胀、空泡 ,染色质浓缩、核碎裂。结论 :As2 O3 可诱导 Spc- A1细胞凋亡 ,细胞周期延长 ,线粒体变性。     

安素泰诱导的小鼠肺癌凋亡细胞对树突状细胞功能的影响

目的探讨体外低剂量安素泰对正常小鼠骨髓源性树突状细胞(DC)功能的影响,及其在恢复受小鼠肺癌抑制的DC功能中的作用。方法筛选小鼠肺癌细胞——3LL细胞30%凋亡的安素泰浓度;培养小鼠骨髓来源的DC(mDC);利用分离小室系统,分别设置mDC组、mDC与低剂量安素泰组、mDC与3LL组以及mDC与经低剂量安素泰诱导的30%凋亡率的3LL细胞组;分析上述4组DC细胞表面标志和对细胞因子MIP 1α、MIP-3β的趋化能力以及刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力。结果50 nmol/L的安素泰引起3LL细胞30%的凋亡率。50 nmol/L的安素泰具有对DC的保护作用,上调DC表面成熟表型标志:CD11cCD80、CD11cCD86、CD11cCD40、CD11cCDIab;对趋化因子MIP-3β的趋化能力增强。此浓度安素泰诱导的3LL的30%凋亡致敏的DC,与肿瘤共培养的DC组相比,上调DC表面CD11cCD40表达,刺激DC对趋化因子MIP1α、MIP-3β的趋化能力,刺激T细胞增殖的能力。结论50 nmol/L的安素泰对DC具有保护和促进成熟的作用;并部分逆转受肿瘤抑制状态的DC表型和功能。     

18氟-脱氧葡萄糖诱导Lewis肺癌细胞凋亡的实验研究

目的：观察不同浓度18氟-脱氧葡萄糖（18F-FDG）对Lewis肺癌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法：指数生长期Lewis肺癌细胞分为18F-FDG实验组（为92.5×104Bq/ml组、185×104Bq/ml组、370×104Bq/ml组和740×104Bq/ml组）和对照组,应用光镜、电镜、流式细胞术（flow cytometry,FCM）和免疫组化技术检测不同浓度18F-FDG作用于体外培养的Lewis肺癌细胞后,诱导脂质氧化、细胞凋亡及bcl-2和bax基因表达情况。结果：18F-FDG能诱导Lewis肺癌细胞产生凋亡形态学变化,随着18F-FDG浓度增加,脂质氧化增强、细胞凋亡率增加、bcl-2表达减弱、bax表达增强（P〈0.01）。结论：18F-FDG能诱导Lewis肺癌细胞凋亡,且凋亡具有剂量依赖性。     

氨基酮戊酸光动力作用诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究

目的:探讨光动力疗法(PDT)对体外培养的人宫颈癌细胞系Hela的杀伤效应。方法:将经不同浓度5-氨基酮戊酸(ALA)处理的Hela细胞照射不同剂量的激光,用MTT法测定OD492值,细胞染色观察形态学改变,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果:ALA10-1mM和激光剂量20J/cm2是PDT对Hela细胞杀伤作用的最佳参数。流式细胞术显示PDT组发生了G0-G1期生长停顿,凋亡率为(22.6±4.56)%,显著高于对照组。结论:ALA-PDT通过诱导凋亡对体外培养的Hela细胞产生杀伤作用。     

肿瘤坏死因子诱导白血病细胞凋亡的方法学研究

目的：观察肿瘤坏死因子(TNF)诱导白血病细胞株(HL—60)的调亡作用。方法：用肿瘤坏死因子诱导白血病细胞株，观察细胞形态变化及进行核酸分析。结果：肿瘤坏死因子作用白血病细胞株后该细胸呈调亡改变，细胞DNA降解琼脂糖凝胶电泳呈阶梯状区带。结论：肿瘤坏死因子能够诱导白血病细胞调亡。     

姜黄素诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制的研究

目的:研究姜黄素在体外诱导宫颈癌H eL a细胞凋亡及其作用机制。方法:3H-脱氧胸苷掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测HPV E 6的mRNA水平表达;W estern b lot检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax、P 53和P 21ras的蛋白水平表达。结果:姜黄素对H eL a细胞生长有抑制作用,并呈剂量依赖性;流式细胞仪和荧光双染法结果提示姜黄素可诱导H eL a细胞凋亡;RT-PCR提示姜黄素作用H eL a细胞后HPV E 6的mRNA水平表达逐渐降低;W estern b lot结果提示姜黄素能上调B ax、P 53和P 21ras的蛋白水平表达,而B cl-2的表达无明显影响。结论:姜黄素通过抑制HPV E 6的表达,恢复P 53的功能,引起细胞凋亡,起到杀伤肿瘤的作用。     

槲皮素对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究槲皮素对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响.方法采用MTT试验、流式细胞仪检测槲皮素对体外培养的人肺腺癌A549细胞的抑制作用和细胞周期的变化,电镜观察超微结构变化,免疫组化技术检测槲皮素对凋亡相关蛋白Bcl-2、p53表达的影响.结果MTT结果显示槲皮素对体外培养的A549具有明显的增殖抑制作用,且具有一定的浓度和时间依赖性;流式细胞仪检测发现,30μg/ml槲皮素作用A549细胞48h后能将细胞阻滞于G0/G1期,且在细胞周期G1峰的左侧出现了凋亡峰;电镜观察发现有凋亡的特征性改变;免疫组化结果显示,槲皮素使Bcl-2表达下调,而上调p53蛋白的表达.结论槲皮素能抑制肺腺癌A549细胞的生长,阻止细胞由G0/G1期向S期和G2/M期移行并诱发细胞凋亡,其诱发A549细胞凋亡的机制可能与上调促凋亡蛋白p53表达和下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达有关.     

Protection of Acanthopanax Senticosus Saponin on Free Radical Injury Induced Aging of Nerve Cell

Ｉｔｉｓｒｅｃｅｎｔｌｙｈｅｌｄｔｈａｔｎｅｒｖｅｃｅｌｌａｇｉｎｇｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌａｎｄａｎｔｉ ｏｘｉｄａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ｔｈｅＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ（ＡＰ）ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｃａｎｅｌｅｖａｔｅ     

吡格列酮对炎性因子所致胰岛细胞凋亡的保护作用

目的：探讨Ppar-γ激动剂吡格列酮（PGZ）对炎性因子所诱导的胰岛细胞凋亡的保护作用，初步研究其作用机制。方法：Western—blotting检测NIT-1细胞的Ppar-γ受体蛋白表达；联合IL-1β及IFN-γ作用于体外培养的胰岛细胞株NIT-1，建立胰岛细胞炎症模型，观察（IL-1β＋IFN-γ）与PGZ预孵育NIT-1细胞的凋亡；MTT法、流式细胞术检测细胞生长抑制率及凋亡率，比色法检测凋亡细胞caspase-3比活性。结果：NIT-1细胞表达Ppat-γ蛋白；（IL—1β＋IFN-γ）组作用24h对NIT-1细胞生长抑制率、凋亡率、caspase-3比活性分别为49．8％、28．0％、3．5，对照组3项指标分别为0％、4．3％、1，两组比较均有十分显著差异（P〈0．01）；PGZ组3项指标分别为2．7％、7．1％、1.3，与对照组比较，均无明显差异（P〉0．05）；（PGZ＋IL-1β＋IFN-γ）组的3项指标分别为18．6％、14．8％、1．5，与（IL-1β＋IFN-γ）组比较均有差异（P〈0．05），与对照组比较分别为P〉0．05，P〈0．05，P〈0．05。结论：NIT-1细胞表达Ppar-γ受体蛋白；联合IL—1β及IFN-γ明显诱导NIT-1细胞凋亡，PGZ显著抑制IL-1β及IFN-γ诱导的NIT-1细胞凋亡，其机制与降低caspase-3活性有关。     

刺五加叶皂苷B对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨刺五加叶皂苷B（C-B）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,阐明其对氧化应激损伤所致的心肌细胞凋亡的抑制作用。方法：乳鼠心肌细胞行原代培养,取自主搏动良好的心肌细胞随机分为正常对照组、H2O2 损伤组(200 μmol•L^-1H2O2诱导心肌细胞凋亡)、100 mg•L^-1C-B 组和200 mg•L^-1 C-B 组,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC 流式细胞术检测凋亡率,分光光度法检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞Caspase-3、PARP、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：与正常对照组比较,200 μmol•L^-1H₂O₂组心肌细胞有损伤性改变,细胞
存活率明显降低（P<0.001）,凋亡率升高（P<0.001）,Caspase-3活性增加（P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达减少,Caspase-3及Bax蛋白表达增多,PARP蛋白降解增多。与H2O2损伤组比较,100及200 mg•L^-1C-B组心肌细胞损伤性改变均减轻,细胞存活率增加（P<0.05或P<0.01）,凋亡率降低（P<0.001）,Caspase-3活性降低（P<0.05或P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达和Caspase-3蛋白表达减少,PARP蛋白降解减少（依据电泳条带的宽窄及明暗度判断蛋白表达程度）,且200 mg•L^-1C-B组的作用更明显。结论：C-B对H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡有一定的抑制作用,可能与其调节细胞内凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达有关。