神经节苷脂GM_1和GM_3对兔红细胞膜钠泵活性的影响

我们从人脑和肝组织中分离获得的神经节苷脂单组分GM_1和GM_3对兔红细胞膜钠泵活性影响进行了研究。GM_1的组成中比GM_3多一个半乳糖-N-乙酰半乳糖残基。实验表明:GM_1对兔红细胞膜钠泵有激活作用,而GM_3则为非竞争性抑制作用,V_m发生改变而K_m不变。提示外源性GM_1和GM_3的掺入,对钠泵的激活和抑制作用,可能通过诱导细胞膜微环境的改变,或直接结合于膜上的特殊位点,引起钠泵构象的改变而影响其活性。     

夹竹桃甙对Na~+、K~+-ATP酶抑制的动力学研究

本文对夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶的动力学作了探讨,并与乌本甙的作用进行了比较。结果表明:夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶,在Na~+、K~+浓度改变对均为非竞争性抑制,Na~+/K~+比例6:1时,为混合性抑制,而ATP对夹竹桃甙的作用几无影响。     

神经节苷脂GM_1和GM_3对受体介导的转铁蛋白内吞过程的影响

我们从正常人脑及肝脏中分离得到纯化的神经节苷脂GM_1[Gal-GalNAc-(NeuNAc)Gal-Glc-Cer]和GM_3[NeuNAc-Gal-Glc-Cer],发现外源性GM_1或GM_3的加入能不同程度地抑制SMMC-7721人肝癌细胞的生长,但仅GM_3能抑制转铁蛋白(Tf)促进的细胞生长。进一步的研究发现,GM_3并不影响Tf与细胞膜表面受体的结合,而是抑制了受体介导的Tf内吞过程,内吞囊泡的形成及融合均受到影响。结果提示:GM_3在膜中的嵌入,可能使受体的构象发生变化或影响了膜的流动性,从而抑制Tf的内吞过程。     

单唾液酸神经节苷脂对体外循环后大鼠脑组织Na＋-K＋-ATP酶活性的影响

目的：探讨单唾液酸神经节苷脂（GM1）对大鼠体外循环（CPB）后脑组织的含水量和Na＋-K＋-ATP酶活性的影响。方法：选用雄性SD大鼠,经右颈静脉插管引流,尾动脉插管灌注建立CPB,转流时间1h,建立CPB动物模型。随机分为CPB模型组、CPB模型＋GM。组、输血组和假手术组,每组10只。用干湿法测定脑组织含水量,定磷法测定脑组织的Na＋-K＋-ATP酶活性。结果：CPB24h后,CPB模型组和CPB模型＋GM,组大鼠脑组织含水量均较假手术组明显增加（P〈0．01）,但CPB模型＋GM。组大鼠脑组织含水量较CPB模型组明显减少（P〈0．05）;CPB模型组脑组织中的Na＋-K＋-ATP酶活性由正常的[（17．03±4．17）mol·Pi／g·protein·h^-1]下降到[（12．45±2．64）tool·Pi／g·protein·h。]（Pd0．01）,CPB模型＋GM1组下降到[（14．72±3．29）mol·Pi／g·protein·h-1]（P〈0．05）,与CPB模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：CPB可抑制Na＋-K＋-ATP酶活性,使脑水肿加重;GM1可起到稳定细胞膜Na＋-K＋-ATP酶的作用。     

孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ca~(2+)-ATP酶和Na~+、K~+-ATP酶活性

为探索同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的方法。采用孔雀绿比色法测定磷以反映酶活性。结果显示：Ｃａ２＋浓度以及成骨细胞传代培养的代数是影响酶活性的重要因素。Ｃａ２＋有助于提高ＡＴＰａｓｅ活性。Ｃａ２＋浓度为４０μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＴＰａｓｅ活性较高。细胞传代越多，膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性越低。成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ。结论：孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，方法简便、灵敏、可靠。     

外源性神经节苷脂GM_3对人肝癌细胞生长的抑制作用

为了解神经节苷脂（ＧＭ_３）是通过何种途径来调节细胞生长的。运用ＲＮＡ和蛋白质含量的测定及免疫组化法，结果发现：ＧＭ_３（１０ｍｇ／Ｌ）可明显抑制人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖，抑制率达到２８．８１％；同时能降低细胞内平均ＲＮＡ和蛋白质含量，以ＧＭ_３处理细胞３ｄ时最为明显。ＧＭ_３能使ｃ－ｆｏｓ蛋白量在短时间内剧增，ＧＭ_３处理３０ｍｉｎ时增加了２．８５倍；而ｃ－ｍｙｃ蛋白量在短时间内明显减少，ＧＭ_３处理４５ｍｉｎ时抑制率达到８１．３１％。以上结果提示ＣＭ_３抑制细胞增殖可能与抑制ＲＮＡ、蛋白质合成及影响某些癌蛋白的表达有关。     

流行性出血热患者红细胞膜Na~+、K~+-ATP酶活性及胞内Na~+、K~+含量变化

本文测定30例健康人和76例流行性出血热(EHF)患者红细胞膜Na~+·K~+-ATP酶活性及胞内Na~+、K~+含量。结果表明EHF患者各期红细胞膜Na~+·K~+-ATP酶活性均低于健康对照,低血压少尿期最为明显。同时还发现Na~+·K~+-ATP酶活性降低与病情程度有关,病情越重,其活性越低。与Na~+·K~+-ATP酶活性降低的同时,胞内Na~+含量增高,K~+浓度降低,Na~+·K~+-ATP酶活性与胞内Na~+呈负相关,与胞内K~+呈正相关。研究EHFNa~+·K~+-ATP酶有助于进一步阐明其发病机理并为临床治疗提供参考依据。     

柴胡皂甙抑制Na~+、K~+-ATP酶活性的构效关系

报道在离体条件下各种单体柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性构效关系。结果表明，各种柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性作用强度依次为：ｂ２＞ｄ＞ｂ１＞ｂ４＞ａ＞ｂ３＞ｅ＞ｃ。其中柴胡皂甙结构中的Ｃ２３－ＯＨ，Ｃ１６－ＯＨ以及Ｃ１１和Ｃ１３的共轭双烯可能对其抑制活性起重要作用。证明，柴胡皂甙ｄ对Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶的抑制为非竟争性抑制。     

二至丸对衰老小鼠模型脑细胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性影响的研究

目的 测定与脑神经细胞功能有关的Na+-K+-ATP酶.Ca2+-ATP酶,探讨二至丸改善小鼠亚急性衰老模型的作用.方法 将实验动物分成4组,即:空白对照组、模型对照组.低剂量用药组、高剂量用药组,连续用药6周后,处死小鼠测定脑细胞上的Na+-K+-ATP酶.Ca2+-ATP酶活性.结果 低剂量用药组.高剂量用药组较模型对照组的Na+-K+-ATP晦、Ca2+-ATP酶都有不同程度的升高.结论 二至丸能提高实验小鼠脑细胞膜上的Na+-K+-ATP酶.Ca2+-ATP酶活性的作用,具有抗衰老作用,对二至丸的临床应用具有指导意义.     

氯胺酮对大鼠大脑皮层和丘脑突触体Na^＋K^＋—ATP酶活性的影响

目的动态观察氯胺酮对大鼠大脑皮层和丘脑Na+,K+-ATP酶活性的影响.方法SD大鼠32只,随机分为对照组、麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组.对照组腹腔注射生理盐水10ml·kg-1,其余各组均为腹腔注射氯胺酮1100mg·kg-1.对照组腹腔注射生理盐水后10min断头,麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组分别在大鼠翻正反射消失后10min、翻正反射恢复后和完全清醒后断头,取双侧大脑皮层和丘脑匀浆,离心,制备粗制突触体,用分光光度法测Na+,K+-ATP酶活性.结果大鼠氯胺酮100mg·kg-1腹腔注射能明显降低大脑皮层和丘脑Na+,K+-ATP酶活性,分别较对照组降低了32.8%和31.4%(P＜0.05),而在翻正反射恢复后和动物完全清醒后Na+,K+-ATP酶活性恢复(与对照组相比,P＞0.05).结论Na+,K+-ATP酶活性在氯胺酮全麻机理中可能发挥重要作用.     

自发性高血压大鼠MnPO注射AngⅡ对EDLS释放和近球小管Na+,K+-ATPase活性的影响

目的探讨自发性高血压大鼠（SHR）正中视前核（MnPO）注射AngII对血清内源性洋地黄样物质和肾脏近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性的影响。方法24只雄性SHR随机分为人工脑脊液组、AngⅡ组、Losartan组,同时选用8只雄性WHY大鼠作为正常对照组。用小动物脑立体定位仪在MnPO区定位并中枢微量注射,放射免疫法测定血清内源性洋地黄样物质（EDLS）和血浆AngⅡ水平,立体显微镜下手工微分离近球小管,液体闪烁计数器测定近球小管管周膜上的Na^＋,K^＋-ATPase的活性。结果①MnPO注射AngII后,SHR各组与WHY组比较,血浆AngⅡ水平、血清EDLS水平、近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性有显著性差异（P〈0.05）。②MnPO注射AngII后,SHR-AngⅡ组与SHR-人工脑脊液组比较,血浆AngⅡ水平无显著变化（P〉0.05）,血清EDLS水平显著升高（P〈0.05）,近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性显著下降（P〈0.05）。③在MnPO预先用Losartan处理后,SHR-Losartan组与SHR-AngⅡ组比较,血浆AngⅡ水平无显著性改变（P〉0.05）,血清EDLS水平明显低于SHR-AngⅡ组（P〈0.05）,其近球小管Na^＋,K^＋-ATPase的活性明显高于SHR-AngⅡ组（P〈0.05）。④MnPO注射AngⅡ后,SHR-AngⅡ组血清EDLS水平与其近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性呈显著负相关（r=-0.795,P〈0.01）。结论在SHR中,AngⅡ在MnPO的AT1受体介导下,引起高水平EDLS释放,从而抑制近球小管Na^＋,K^＋-ATPase活性的作用可能与SHR本身调节机制上调有关。     

L－精氨酸对自体移植猪小肠粘膜Na^＋－K^＋－ATP酶活力的影响

目的：探讨L-精氨酸对自体移植小肠粘膜ATP酶的影响。方法：在建立幼猪自体小肠移植模型的基础上，再灌注期间静脉滴注L-精氨酸150mg／kg。观察再灌注24、48及72h时肠粘膜Na^ -K^ -ATP酶活力的变化。结果：实验组、假手术组和对照组术后48h，实验组术后72h肠粘膜Na^ -K^ -ATP酶活性较正常对照值明显增高；假手术组术后72h较24、48h，术后48h较24h的肠粘膜Na^ -K^ -ATP酶活性值显著增高。实验组与假手术组及对照组间各时相比较，无显著性差异。结论：幼猪小肠冷缺血再灌注操作后肠粘膜ATP酶活性有不同程度的增高，但应用L-精氨酸并未明显增加ATP酶的活性。应用L-精氨酸预防移植小肠再灌注损伤粘膜的作用尚待进一步探讨。     

EFFECTS OF ISCHEMIA ON CEREBRAL Na~+, K~+-ATPase ACTIVITY IN THE RABBITS SUBJECTED TO MCAo

Changes in the activity of Na~+, K~+-ATPase and in the water, sodium, and potassium levels in the ischemic brain were investigated in rabbits 2, 4, and 24h following occlusion of middle cerebral artery (MCAo) and in shamoccluded control. An increase in Na~+, K~+-ATPase activity was observed in 2h and 4h groups, with a subsequent decrease in the enzyme activity. The elevation in Na~+, K~+-ATPase activity was accompanied by an increase in the sodium content and a slight decrease in the potassium content. These changes are presumed to occure because of stimilated active transport of sodium from blood to brain across the brain capillaries. We suggest that the elevated activity of Na~+, K~+-A TPase may participate in the pathogenesis of ischemic brain edema.     

2型糖尿病大鼠近球小管Na+,K+-ATPase活性变化

目的 探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)近球小管(proximal tubule, PT)的Na ,K -ATPase活性变化.方法 首先建立T2DM大鼠模型,测定血糖、血清胰岛素和内源性洋地黄样物质(endogenous digitalis-like substance, EDLS)水平;微分离大鼠单根PT,液闪法测单根PT的Na ,K -ATPase活性.结果与正常对照组大鼠比较,模型组血糖、血脂、总胆固醇浓度显著升高,胰岛素敏感指数显著下降(P＜0.05,P＜0.01);胰岛素水平不低,PT的Na ,K -ATPase活性均显著升高(P＜0.01);血清EDLS水平显著下降(P＜0.01).大鼠血清EDLS水平与PT的Na ,K -ATPase活性呈显著负相关(r=-0.900, P＜0.01).结论 T2DM大鼠PT的Na ,K -ATPase活性升高,这种酶活性升高与血液中EDLS水平下降有关.