血小板活化因子对人肾小球系膜细胞的影响

利用体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）观察了血小板活化因子（ＰＡＦ）对其增殖、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响，发现ＰＡＦ在较低浓度时（１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ），对ＧＭＣ摄取四唑盐（ＭＴＴ）的影响甚微，而较高浓度时（１０－６和１０－５ｍｏｌ／Ｌ）则有明显的抑制作用。经ＰＡＦ刺激１８ｈ的ＧＭＣ上清，对ＴＮＦ敏感的Ｌ９２９细胞株的杀伤能力有所增强，在ＰＡＦ１０－７ｍｏｌ／Ｌ时达高峰。此外，高浓度的ＰＡＦ尚具有促进ＧＭＣ释放ＬＤＨ的作用。这些结果说明：ＰＡＦ可以通过多种机理损伤肾小球系膜细胞，在肾小球的炎症反应中起重要作用     

系膜细胞的功能对肾小球滤过作用的影响

系膜细胞有两种类型即肾小球内系膜细胞和肾小球外系膜细胞，研究表明系膜细胞内有收缩系统存在，肾上球内系膜细胞与收缩功能有密切的关系，肾小球外系膜细胞功能的改变在管－球反馈的信号转导中起关键作用。此外，系膜细胞还有吞噬及产生并分泌多种生物活性物质等功能。其中系膜细胞的收缩在调节肾小球血液动力学如滤过系数和管－球反馈的变化方面可能具有重要的生理意义。     

大鼠肾小球系膜细胞的培养与鉴定

培养及鉴定大鼠肾小球系膜细胞。方法首先提取大鼠肾小球并用Ⅳ型胶原酶消化处理,然后体外培养大鼠肾小球,对生长的细胞定期行光镜及免疫化学色等鉴定。结果培养的肾小球３ｄ后可见细胞生长,１４ｄ时镜下细胞多呈星状或纺锤状们有不规则的突起。     

肾小球系膜细胞的分离和培养

目的 分离、培养和鉴定正常人肾小球系膜细胞。方法 筛网滤过分离正常人肾小球系膜细胞，同时采用免疫荧光技术，利用异硫氰酸荧光素(FITC)间接标记单克隆抗体；抗Ⅷ因子相关抗原抗体、抗结蛋白抗体、抗角蛋白抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体对系膜细胞特有的中间微丝进行鉴定。并采用同期培养的同一来源的肾小球内皮细胞作对照。结果 抗Ⅷ因子相关抗原、抗角蛋白和抗细胞角蛋白抗体表达均为阴性，而抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体为阳性，说明培养的细胞为系膜细胞。结论 该种方法分离培养的细胞经过免疫荧光染色鉴定为肾小球系膜细胞。     

肾小球内皮细胞对系膜细胞表达细胞粘附分子的影响

肾小球内皮细胞对系膜细胞表达细胞粘附分子的影响傅博程庆砾陈香美李文歌肾小球内皮细胞与肾小球基底膜、系膜细胞相毗邻，肾小球内皮细胞的损伤往往可以导致系膜细胞的病变［１］。为了探讨内皮细胞与系膜细胞相互关系在肾小球损伤演变过程中的作用，我们观察了肾小球内...     

PDGF对大鼠肾小球系膜细胞表达PAI-1的影响

目的:探讨血小板源性生长因子(PDGF-BB)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法:以0、5、10 ng/ml终质量浓度的PDGF-BB刺激体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别作用0、12、24、48 h, 以发色底物显色法检测细胞上清液中PAI-1的活性;以0、5、10 ng/ml质量浓度的PDGF-BB刺激系膜细胞24 h和10 ng/ml质量浓度的PDGF-BB刺激细胞0、12、24、48 h, 半定量RT-PCR观察系膜细胞PAI-1 mRNA表达情况.结果:0、5、10 ng/ml的PDGF-BB 作用于系膜细胞24 h,其PAI-1 mRNA/GAPDH mRNA分别为0.296、 0.428、0.542.10 ng/ml的PDGF-BB作用系膜细胞0、12、24、48 h, PAI-1 mRNA/GAPDH mRNA分别为0.156、0.345、0.493、0.597,表现为浓度和时间依赖效应.PDGF-BB也可浓度依赖性地增加PAI-1的活性,24 h内活性逐渐增高,48 h时下降.结论:PDGF-BB可上调体外培养的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1的活性及其mRNA的表达,提示PDGF可能通过抑制细胞外基质的降解导致细胞外基质的积聚,从而参与肾小球硬化的过程.     

芦丁拮抗血小板活化因子与受体结合的作用

目的　观察芦丁对血小板活化因子(PAF)与受体结合的拮抗作用。方法　以放射配基结合试验观察[3H]PAF与家兔血小板受体特异性结合的作用;体外以分光光度法测定PAF介导血小板黏附的强度;以Fura- 2荧光分光光度法测定PAF介导的兔多形核白细胞(PMNs)内钙离子浓度的升高。结果　芦丁可浓度依赖地抑制1、2、4 nm ol/L [3H]PAF与血小板受体的特异性结合,其IC50 分别为7.3、8.7、17.2 mm ol/L ;芦丁可明显抑制PAF介导的血小板黏附,IC50 为1.5 1mm ol/L;芦丁浓度为6 8.2～5 4 6 μm ol/L 时可浓度依赖地抑制PAF介导的PMNs内游离钙浓度的升高。结论　芦丁具有抗PAF作用,为一种新的PAF受体拮抗剂。     

胱抑素C和血小板活化因子在早期糖尿病肾病诊治中的应用价值

目的探讨胱抑素C（CysC）和血小板活化因子（PAF）在早期糖尿病肾病（DN）诊治中的应用价值。方法测定30例糖尿病正常尿蛋白患者和28例糖尿病微量尿蛋白患者及15例正常对照组血清PAF及血清CysC的水平。结果CysC及PAF水平：糖尿病微量尿蛋白患者组[（1.79±0.92）mg/L,（92.38±30.25）μg/L]与糖尿病正常尿蛋白患者组[（1.42±0.41）mg/L,（67.57±19.46）μg/L]均较正常对照组[（0.74±0.21）mg/L,（50.71±15.43）μg/L]明显增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,糖尿病微量尿蛋白组较糖尿病正常尿蛋白组高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论血清CysC和PAF在早期DN患者中显著升高,提示两者在早期DN进程中起着重要作用,其测定可能有助于糖尿病及其并发症的早期诊断和病情监测。     

血小板活化因子在烧伤大鼠早期肠源性内毒素血症发病中的作用

目的探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）对烧伤后肠源性内毒素血症的影响。方法选用健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠９０只制成３０％体表Ⅲ度烫伤模型,随机分为３组,正常对照组,单纯烫伤组,ＰＡＦ拮抗剂治疗组观察ＰＡＦ水平变化与肠源性内毒素血症的关系。结果大鼠烫伤后４８小时内肠粘膜通透性和血浆内毒素水平均显著升高,伤后１２小时为最高,分别为（０５８±０１８）ｍｌ·ｍｉｎ－１·１００ｇ－１、（１２９±２２）ｎｇ／Ｌ,与肠组织和血ＰＡＦ水平升高呈显著相关;ＰＡＦ拮抗剂治疗能显著降低肠粘膜通透性和血浆内毒素水平。健康大鼠静脉注射外源性ＰＡＦ后,肠粘膜通透性和血浆内毒素水平也显著升高,且与ＰＡＦ剂量呈显著依赖关系。结论大鼠烫伤后血浆及肠组织中ＰＡＦ水平升高是导致早期肠源性内毒素血症的一个重要因素。     

葶苈子黄酮对血小板激活因子的拮抗作用

目的研究葶苈子黄酮对血小板激活因子(PAF)诱导的家兔中性粒细胞(PMN)和洗涤家兔血小板(WRP)的聚集及黏附作用的影响。方法比浊法观察PAF诱导的PMN(或WRP)聚集;PAF诱导已着色PMN(或WRP)黏附,比色法测定此PMN(或WRP)破膜后溶液吸光度,表示其黏附活性。结果葶苈子黄酮可明显抑制PAF诱导的PMN和WRP聚集及黏附活性的升高(P<0.05)。结论葶苈子黄酮具有拮抗PAF的作用。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾小球毛细血管基底膜改变的影响

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂伊贝沙坦 (Irb)对链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾小球毛细血管基底膜 (GBM)改变的影响。方法 :将SD大鼠随机分成正常对照 (N)组、糖尿病肾病 (DN)组和DN加Irb治疗 (DNI)组 3组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察治疗后第 4、8、12周的血糖、体重、尿白蛋白排泄、肌酐清除率变化 ,同时观察 12周时肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量、GBM厚度的改变。结果 :DN组尿白蛋白排泄量较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或 <0 .0 1)。DNI组较DN组尿白蛋白排泄量减少 (P <0 .0 1) ,肌酐清除率水平下降 (P <0 .0 1) ,肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量均减少 (P <0 .0 1) ,糖尿病组GBM较正常对照组明显增厚 (P <0 .0 1) ,Irb可显著抑制GBM的增厚 (P <0 .0 1)。结论 :早期应用Irb对糖尿病大鼠有肾保护作用 ,并可能与抑制GBM增厚有关。     

Protective effect of a platelet activating factor antagonist in experimental liver injury

The present study was conducted to observe the effect of platelet activating factor antagonist-WEB 2086 on the galactosamine/endotoxin (GalN/E)-induced rat liver injury. The results showed that the WEB 2086 (1, 20 or 40 mg/kg, ip) diminished significantly GaIN/E induced elevations of ALT.AST and ACP in the serum (P less than 0.01). Histological changes of the liver were also found to be improved significantly by WEB 2086 administration. Additionally, WEB 2086 decreased significantly the GaIN/E-induced increase of Malondialdehyde (MDA) and Myeloperoxidase (MPO) in the liver (P less than 0.05-0.01), and prevented the decreasing of superoxide dismutase (SOD) in the liver (P less than 0.01). The results obtained with WEB 2086 confirm that platelet activating factor (PAF) has an important role in the pathophysiology of liver injury, PAF-antagonists may have protective effects on liver injury.     

甘糖酯对糖尿病大鼠肾小球基底膜阴离子位点的影响

目的 :观察甘糖酯对糖尿病大鼠尿蛋白排泄和肾小球基底膜阴离子位点的影响。方法 :糖尿病大鼠用甘糖酯处理 3周后 ,肾皮质小块浸泡于多聚亚胺溶液 ,用电子显微镜定量研究基底膜阴离子位点。结果 :与对照组大鼠相比 ,糖尿病大鼠尿蛋白排泄量明显增加 ,肾小球基底膜阴离子位点明显减少 ;甘糖酯处理使糖尿病大鼠尿蛋白排泄量显著减少 ,使基底膜阴离子位点明显增加。结论 :甘糖酯能明显改善糖尿病大鼠肾小球电荷屏障功能 ,降低肾小球毛细血管壁的通透性     

Influence of Buyang Huanwu Decoction on activity of blood platelet activating factor receptor in rabbit) on activity of blood platelet activating factor receptor in rabbit

Objective: To observe the influence of Buyang Huanwu Decoction (BYHWD) on the activity of blood platelet activating factor receptor (PAFR).Methods: BYHWD was administered to rabbits in vitro or in vivo and its effect on PAFR was observed by radioligand receptor binding method.Results: BYHWD tended to increase the specific binding amount of washed-platelet-PAFR with radioligand in vivo, which was similar to that of Ginkgo leaf extract. And in vitro, it showed an inhibition on the specific binding of washed-platelet-PAFR.Conclusion: BYHWD has certain effect on PAFR amount in vivo and PAFR activity in vitro     

Effect of heparin on the anionic sites of glomerular basement membrane in adriamycin nephrosis in rats.

The effect of heparin on the anionic sites of glomerular basement membrane (GBM) in adriamycin-induced nephrotic rats was studied by means of calculating the polyethyleneimine (PEI) stained particles under electron microscope. The results showed that treatment with heparin under the anticoagulant effect markedly reduced the loss of anionic sites within lamina rara externa (LRE) of GBM and also the urinary protein excretion in nephrotic rats. The results demonstrated that one of the mechanisms of heparin in preventing the structural damage of glomeruli in kidney diseases was the reduction of the loss of anionic sites within LRE, indicating that changes in biomembrane charge played an important role in the pathogenesis of nephrotic syndrome. The results provided a scientific basis for the use of heparin to treat glomerular diseases.

     

血小板活化因子与肿瘤坏死因子和白介素8在大鼠脓毒血症中的作用

目的 探讨血小板活化因子（PAF）及其拮抗剂与肿瘤坏死因子（TNF）和白介素8（IL－8）在大鼠脓毒血症中的作用。方法 应用大鼠盲肠结扎加穿孔模型,在不同时相点观察大鼠死亡率并检测其血PAF,血清TNF及IL－8的水平。结果 （1）严重腹腔感染后,血PAF、血清TNF及IL－8水平明显升高,且前者与后两者呈显著正相关。（2）应用PAF拮抗剂WEB2170治疗后,血PAF、血清TNF及IL－8水平可显著降低。（3）WEB2170能明显降低严重腹腔感染大鼠的死亡率。结论 脓毒血症早期应用PAF拮抗剂可阻挡PAF与TNF和IL－8的网络联系,对防治多器官功能衰竭具有重要意义。